范惠玲，許曉莎，李鑫，羅芳芳，白生文

(河西學院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學院，甘肅 張掖　734099)

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白菜型油菜×白芥屬間遠緣雜交親和性及雜交一代幼苗挽救技術(shù)的研究

范惠玲，許曉莎，李鑫，羅芳芳，白生文

(河西學院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學院，甘肅 張掖734099)

摘要：為了探明白菜型油菜與白芥屬間雜交親和性，建立白菜型油菜與白芥屬間的雜交一代壯苗及生根技術(shù).以白菜型油菜為母本，白芥為父本進行雜交，統(tǒng)計雜交子房脫落率和雜交親和指數(shù)，分析不同比例基本培養(yǎng)基、不同種類及濃度的生長素或細胞分裂素對誘導生根和壯苗培養(yǎng)的影響.結(jié)果表明:白菜型油菜與白芥屬間雜交種，平均雜交親和指數(shù)為0.5，表現(xiàn)為雜交不親和；二者的雜交種子在濾紙床上萌發(fā)，只得到了缺少胚根的無根苗.將無根苗在1/2 MS培養(yǎng)基上進行挽救培養(yǎng)，能生長發(fā)育成完整植株.白菜型油菜與白芥屬間雜交后代試管苗的最佳壯苗培養(yǎng)基為2 MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA，最佳生根培養(yǎng)基為1/2 MS+0.3 mg/L IBA，最佳移栽基質(zhì)為草炭土+蛭石+灌漠土(1∶2∶1).白菜型油菜與白芥間存在雜交不親和性，雜交后代壯苗及生根技術(shù)為：2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培養(yǎng)基上壯苗培養(yǎng)，1/2 MS+0.3 mg/L IBA培養(yǎng)基上生根培養(yǎng)，草炭土+蛭石+灌漠土(1∶2∶1)基質(zhì)中馴化移栽.

關(guān)鍵詞：白菜型油菜；白芥；雜交不親和；壯苗培養(yǎng)；生根培養(yǎng)

第一作者：范惠玲(1981-)，女，碩士，講師，研究方向為油料作物組織培養(yǎng).E-mail：qianjing05@163.com

白芥屬于十字花科白芥屬春性油料作物，其適應性強，對干旱具有優(yōu)異的抵御能力[1]，高抗多種病蟲害，如病毒病、黑脛病和枯萎病等，同時兼有耐瘠薄、耐鹽堿等特性[2].白菜型油菜為十字花科蕓薹屬作物二倍體基本種，栽培歷史悠久，它不僅是重要的蔬菜，也是相當重要的油料作物，具有許多優(yōu)良性狀，如早熟性、耐寒性、黃籽等，但產(chǎn)量低，不抗病[3].遠緣雜交是實現(xiàn)種(屬)間基因轉(zhuǎn)移的一條重要途徑，在植物遺傳育種中應用廣泛.通過白菜型油菜與白芥屬間遠緣雜交可將白芥的優(yōu)良基因?qū)朐耘喟撞诵陀筒酥校a(chǎn)生一些新性狀，豐富白菜型油菜種質(zhì)資源，對研究油菜及其近緣植物高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)育種具有十分重要的意義.

從20世紀70年代末至今，國內(nèi)外學者已對蕓薹屬及其近緣植物的遠緣雜交親和性問題進行了許多研究[4-6]，發(fā)現(xiàn)屬間雜交親和性普遍較低，同時對雜種離體培養(yǎng)也進行了廣泛研究，并獲得了各種屬間或種間雜種材料，如白芥×白菜的雜交種、白芥×甘藍型油菜屬間雜種、芥菜型油菜×白菜型油菜種間雜交種等[7-12].據(jù)報道，國內(nèi)外已相繼培養(yǎng)成功了十字花科近30個屬間和種間雜交組合的授粉子房或胚，并獲得遠緣雜交種.迄今，針對白菜型油菜與白芥屬間雜交種離體繁殖技術(shù)的研究尚未見報道.

鑒于此，本研究以白菜型油菜為母本，白芥為父本進行雜交，統(tǒng)計分析雜交子房脫落率和雜交親和指數(shù)，分析不同比例基本培養(yǎng)基、添加不同種類及濃度的生長素或細胞分裂素對誘導生根和壯苗培養(yǎng)的影響，以探明白菜型油菜與白芥屬間雜交親和性，建立白菜型油菜與白芥屬間雜交后代壯苗及生根技術(shù)，為兩屬間有益基因轉(zhuǎn)移提供理論依據(jù)和實際應用技術(shù)，同時為油菜及近緣植物高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)育種提供優(yōu)良的種質(zhì)資源.

1材料與方法

1.1供試材料

試驗所用的母本分別為白菜型油菜(Brassicarapa)3個品系‘白菜型油菜17’‘白菜型油菜20’和‘白菜型油菜21’，父本為白芥(Sinapisalba)3個品系‘白芥14’‘白芥15’和‘白芥16’.上述材料均由河西學院農(nóng)業(yè)與生物學院農(nóng)學教研室育成.

1.2試驗方法

1.2.1白菜型油菜與白芥屬間雜交及親和性判斷方法試驗于2013年在河西學院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學院實習實訓中心進行，按順序排列的方式播種，每份材料種1行，行長1.5 m，行距40 cm.采用穴播技術(shù)，每穴2粒.開花期分別從每行白芥中選3株作父本，同時從每行白菜型油菜中選3株作母本，組配遠緣雜交組合，每組合重復3次.雜交前2 d，將父本套袋隔離，母本于蕾期嚴格去雄授粉，雜交7 d后取下硫酸紙袋，分別于第7天、第14天和第21天記錄子房脫落數(shù)，并計算子房脫落率，待成熟期收獲角果，統(tǒng)計雜種種子數(shù)，并計算雜交親和指數(shù)，以親和指數(shù)小于1作為雜交不親和的標準.

雜交親和指數(shù)= 雜交種子數(shù)/ 雜交花蕾數(shù)

1.2.2白菜型油菜與白芥屬間雜交后代無胚根幼苗挽救方法采用濾紙床法對白菜型油菜與白芥遠緣雜交種子進行萌發(fā)，第7天觀察并統(tǒng)計萌發(fā)情況.將遠緣雜交種子萌發(fā)后的無根苗接種在MS、1/2MS培養(yǎng)基上進行挽救培養(yǎng)，培養(yǎng)2周后觀察成活情況.

1.2.3屬間雜交試管苗壯苗培養(yǎng)基篩選在已有研究的基礎(chǔ)上[13-15]，對基本培養(yǎng)基、細胞分裂素種類和細胞分裂素濃度，進行L9(34)正交試驗(表1)，共設9個處理水平，每一處理水平15瓶，優(yōu)化最佳培養(yǎng)基成分.以雜交種子為外植體，接種于不同的壯苗培養(yǎng)基上，培養(yǎng)30 d后，每個處理隨機抽取3瓶試管苗測定莖粗，以判斷不同培養(yǎng)基對壯苗培養(yǎng)的影響效果.

1.2.4屬間雜交試管苗生根培養(yǎng)基篩選在已有研究的基礎(chǔ)上[13-15]，以基本培養(yǎng)基、生長素種類、生長素濃度為因素對雜交后代健壯試管苗誘導生根效果進行正交試驗(表2)，共設9個處理，每一處理水平15瓶.以屬間雜交后代的健壯試管苗為外植體，接種在不同的生根培養(yǎng)基上，接種20 d后，每個處理隨機抽取3瓶試管苗分別統(tǒng)計生根數(shù)和根長，以判斷不同培養(yǎng)基對生根誘導的影響效果.

表1　壯苗培養(yǎng)正交試驗因素和水平

表2　生根誘導正交試驗因素水平

1.2.5屬間雜交后代試管苗的馴化與移栽方法待試管苗根長為2 cm左右時，將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去粘附的培養(yǎng)基，浸入1.2 g/L的多菌靈溶液中15 min，然后分別移栽到兩種不同的基質(zhì)中，澆透水后，扣塑料杯保濕，放在單層遮陽網(wǎng)下生長.第1周空氣相對濕度為80%～90%，第2周為70%～80%，第3周為60%～70%.在移栽初期每周噴1次1.2 g/L多菌靈溶液.移栽4周后，組培苗開始長出新葉和新根，這時可以在自然條件下正常管理.

1.2.6培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件不同基本培養(yǎng)基中加蔗糖30 g/L，瓊脂6 g/L，pH為6.0，配制好的培養(yǎng)基在121 ℃下滅菌18 min.雜交種子先用75%的酒精消毒30 s，棄去酒精，換用15%的NaClO溶液消毒5 min，最后用無菌水沖洗3次，分別供萌發(fā)和接種使用.培養(yǎng)瓶放入光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，溫度25～26 ℃，光照時間8 h，光照強度1 500 Lx.

2結(jié)果與分析

2.1白菜型油菜與白芥屬間的雜交親和性

由表3可知，雜交后的第1～7天，子房沒有脫落，第7～14天，子房開始大量脫落.在所有雜交組合中，白菜型油菜ב白芥14’中，子房脫落率最低，僅6.85%，比平均數(shù)(12.43%)低5.58%；白菜型油菜ב白芥16’中，雜交子房脫落率為12.41%，而白菜型油菜ב白芥15’中，雜交子房脫落率最高(18.04 %)，比平均數(shù)(12.43 %)高5.61%.由此說明，屬間雜交組合不同，子房脫落率亦不同.

就雜交結(jié)籽數(shù)而言，白菜型油菜ב白芥15’的組合中結(jié)籽數(shù)最多，平均為7.3粒/角，比平均值(5粒/角)多了2.3粒/角；白菜型油菜ב白芥16’組合中，結(jié)籽數(shù)適中，為4.7粒/角，而白菜型油菜ב白芥14’組合中，結(jié)籽數(shù)最低，僅3粒/角，比平均結(jié)籽數(shù)少了2粒/角.由此可知，在白菜型油菜×白芥的屬間雜交中，不同父本對雜交親和性的高低會產(chǎn)生一定的影響作用.

表3　白菜型油菜與白芥遠緣雜交組合及其雜交結(jié)果

在所有雜交組合中，只有‘白菜型油菜21’ב白芥15’組合中，雜交親和指數(shù)大于1，其他組合的雜交親和指數(shù)均小于1.‘白菜型油菜21’與白芥不同品系構(gòu)成的不同組合中，結(jié)籽數(shù)都較高.由此說明，不同母本對雜交親和性的高低也會產(chǎn)生明顯的影響.綜上，白菜型油菜與白芥屬間雜交存在不親和性，且受父母本基因型影響.

2.2白菜型油菜與白芥屬間雜交后代無胚根幼苗挽救結(jié)果

結(jié)果表明，大部分雜交種子在濾紙床上萌發(fā)，能長出子葉和胚軸，胚軸長度在3～5 mm的種胚苗約占76%(圖1-A)，13～15 mm的約占10%，其余14%僅有子葉(圖1-B).可見，屬間雜交種子發(fā)芽不正常，只能得到缺少胚根的種胚苗.

屬間雜交種子萌發(fā)得到的無根苗在1/2MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)時，無根苗基部很快形成愈傷組織，培養(yǎng)1周后陸續(xù)長出胚根，即愈傷組織生根型(圖1-C)，繼續(xù)培養(yǎng)時無根苗逐漸生長發(fā)育成完整的小植株，但是長勢較弱(圖1-D).

2.3白菜型油菜與白芥屬間雜交后代壯苗培養(yǎng)結(jié)果

研究發(fā)現(xiàn)，試管苗在2MS培養(yǎng)基上生長時表現(xiàn)較好，幼苗粗壯(圖1-E，1-F)，3MS培養(yǎng)基上生長的幼苗表現(xiàn)次之，而MS培養(yǎng)基上的幼苗長勢很弱，葉色淡綠，說明培養(yǎng)基中大量元素含量對雜交幼苗健壯生長有促進作用，但當其含量超過一定量時，則對幼苗的生長產(chǎn)生抑制作用.由表4可見，細胞分裂素、6-BA和KT誘導幼苗變粗的效果都比PBA好，但3種細胞分裂素對誘導幼苗莖段變粗的效果未達到顯著差異水平(F=1.84)，因此批量培養(yǎng)組培苗時，從成本上考慮，建議采用6-BA.3種細胞分裂素濃度對壯苗培養(yǎng)的影響效果明顯不同，培養(yǎng)基中添加1.5 mg/L的細胞分裂素，幼苗長勢最佳，莖最粗，其次為1 mg/L細胞分裂素，而添加2 mg/L細胞分裂素時，幼苗長勢較差.這說明，只有在一定范圍內(nèi)增加細胞分裂素的質(zhì)量濃度，才有利于試管苗莖粗的增加.

通過比較極差，得到B>A>C，即3種考察因素對壯苗培養(yǎng)的影響順序為：基本培養(yǎng)基種類> 激素種類>激素濃度.直觀分析表明，壯苗培養(yǎng)的最佳條件為A2B2C2，即細胞分裂素為6-BA，基本培養(yǎng)基為2MS，細胞分裂素質(zhì)量濃度為1.5 mg/L，在此基礎(chǔ)上再附加0.5 mg/L NAA，即2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA是白菜型油菜與白芥屬間雜交后代試管苗壯苗培養(yǎng)的最適宜培養(yǎng)基.

表4　壯苗培養(yǎng)正交試驗設計及結(jié)果

k代表平均數(shù)，R代表極差.

2.4白菜型油菜與白芥屬間雜交后代生根培養(yǎng)結(jié)果

對生根數(shù)和根長兩個指標來說，基本培養(yǎng)基的極差都不是最大的，也就是說基本培養(yǎng)基不是影響最大的因素，而僅是次要因素.對生根數(shù)來講，基本培養(yǎng)基取D2最好，D3次之；對根長來講，基本培養(yǎng)基取D1最好，D3次之；兩個指標綜合考慮，基本培養(yǎng)基取D3水平為好(表5).對生根量來講，生長素種類取E1最好，E2次之；對根長來講，生長素種類取E3最好，E1次之；兩個指標綜合考慮，生長素種類取E1水平為好.對生根數(shù)和根長來講，生長素濃度的極差都是最大的，即生長素濃度是影響最大的因素.若僅考慮生根數(shù)，生長素種類取F2最好，F(xiàn)3次之.僅對根長來講，生長素種類取F3最好，F(xiàn)1次之.兩個指標綜合考慮，生長素種類取F3水平為好.

通過各因素對不同指標影響的綜合分析，得出最優(yōu)組合是：D3E1F3，即培養(yǎng)基為1/2MS，生長素為k代表平均數(shù)，R代表極差.IBA，生長素質(zhì)量濃度為0.5 mg/L.在優(yōu)化培養(yǎng)基中進行了白菜型油菜與白芥遠緣雜交試管苗誘導生根培養(yǎng).結(jié)果發(fā)現(xiàn)，根誘導效果好，平均生根數(shù)達16.8條，根長介于1.03 ～4.67 cm之間，幼苗生長旺盛.可見，1/2MS+0.3 mg/L IBA是白菜型油菜與白芥遠緣雜交后代試管苗生根培養(yǎng)的最適宜培養(yǎng)基.

A、B：無胚根幼苗；C：無根苗長出胚根；D：1/2MS培養(yǎng)基上的弱苗,E、F： 2MS+1.5mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA上的健壯苗； G：培養(yǎng)基 1/2 MS + 0.3 mg/L IBA上的健壯根；H：移栽到盆缽的雜交植株.圖1　雜交后代無胚根幼苗挽救及壯苗培養(yǎng)結(jié)果Fig.1　Result of no radicle seedling rescue techniques and vigorous culture to hybrid offspring

序號基本培養(yǎng)基種類生長素種類生長素濃/(mg·L-1)根數(shù)/條根長/cm11114.4(2.5～5.8)0.61(0.35～0.79)21229.0(8.7～9.6)4.02(3.50～4.06)31332.0(1.8～2.2)9.13(8.22～9.25)421215.4(10.3～18.2)4.67(3.20～6.13)522310.2(9.5～10.5)2.44(2.06～2.94)62314.9(4.5～5.7)1.03(0.84～2.10)73133.9(3.1～5.2)7.06(6.45～7.50)83215.1(4.8～5.4)1.84(0.95～2.24)933211.0(9.4～12.1)3.91(3.56～4.11)根數(shù)k15.138.574.80k210.838.1012.46k36.675.965.37R5.72.617.66優(yōu)方案D2E1F2根長k14.594.114.2k22.712.771.16k34.274.696.21R1.681.925.05優(yōu)方案D1E3F3

2.5白菜型油菜與白芥屬間雜交后代試管苗的馴化與移栽

結(jié)果表明，在兩種基質(zhì)中，以草炭土∶蛭石∶灌漠土為1∶2∶1成活率較高(90%)，腐殖質(zhì)∶蛭石為1∶2成活率較低(65%).

3討論

3.1白菜型油菜與白芥屬間雜交的不親和性分析

宋小玲等[16]在白菜型油菜×野芥菜的遠緣雜交中發(fā)現(xiàn)，雜交親和指數(shù)為0.16，雜交后代表現(xiàn)出了較弱的親和性；何麗等[4]關(guān)于白菜型油菜×芥菜型油菜種間雜交結(jié)果表明，雜交親和指數(shù)僅為0.037，雜交后代表現(xiàn)出了極弱的親和性.本研究結(jié)果表明，白菜型油菜×白芥雜交時，雜交親和指數(shù)為0.5，雜交后代也表現(xiàn)不親和性.這些結(jié)果表明，以白菜型油菜為母本，以不同類型的其他油菜或油菜的近緣植物為父本進行的遠緣雜交中，后代的都表現(xiàn)雜交不親和.

油菜遠緣雜交親和性受到環(huán)境因素的影響[17]，長日照、高溫等對受精有促進作用，故本雜交試驗授粉一般選在有陽光且溫度較高的時段進行.親本的基因型也影響著雜交親和性，如本試驗中遠緣雜交選擇母本不同時雜交所得結(jié)果不同.因此，今后在育種實踐中選擇恰當親本，將會獲得更多的白菜型油菜與白芥的雜種種質(zhì)，為油菜的良種繁育提供更豐富的育種材料.

有研究認為，雜交不親和與自交不親和在生理上可能有相似之處，將自交不親和的研究成果引入雜交育種工作中，有可能對油菜遠緣雜交育種工作起一定指導作用，如本研究中‘白菜型油菜21’屬于高度自交不親和材料.

3.2利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可挽救白菜型油菜與白芥遠緣雜交無胚根幼苗

本研究中，白菜型油菜與白芥遠緣雜交籽在濾紙床上萌發(fā)時都未能長出胚根，只得到了不健全的無根苗.這是由于對遠緣雜交種而言，雖然通過一些措施克服不親和性而產(chǎn)生受精卵，但由于這種受精卵與胚乳的生理機能不協(xié)調(diào)，不能發(fā)育成健全的種子，有時種子雖然健全但發(fā)芽后不能長成正常植株.

白菜型油菜與白芥屬間雜交后代的無根苗在1/2 MS培養(yǎng)基上進行挽救培養(yǎng)時，最終能發(fā)育生長成完整的小植株.就其原因可能有兩個方面：一是由于培養(yǎng)基中富含不同種類的金屬元素和不同種類的有機化合物，它們有助于提高淀粉酶和過氧化物酶等酶的活性，使種子中的不溶或難溶性大分子物質(zhì)轉(zhuǎn)化成可溶性小分子物質(zhì)，不僅提高了線粒體的呼吸速率和氧化磷酸化效率，也提高了呼吸強度，這為發(fā)芽提供了充足的能量[16]；二是由于1/2MS培養(yǎng)基可以向種胚提供所缺少的糖類、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，從而促進胚根的形態(tài)建成[18].

3.3白菜型油菜與白芥遠緣雜交一代試管苗生根和壯苗技術(shù)

金順福等[19]的結(jié)果表明，MS培養(yǎng)基中大量元素加倍可使試管苗生長茁壯，呈濃綠色.同時黃萍等[20]認為，MS與1/2MS 培養(yǎng)基培養(yǎng)的試管苗生長差異并不顯著.因此本試驗選擇大量元素作為其中的一個影響因素進行研究，以便闡明在試管苗壯苗培養(yǎng)中大量元素的最適用量.本試驗結(jié)果表明，基本培養(yǎng)基種類是影響試管苗壯苗培養(yǎng)效果的最主要因素，這與趙光磊等[21]的研究結(jié)果一致.

6-BA是組織培養(yǎng)中常見的細胞分裂素，可促進細胞分裂和擴大，同時能使莖增粗[22].本研究發(fā)現(xiàn)，6-BA能使屬間雜交試管苗的莖明顯變粗.在基本培養(yǎng)基中添加IBA能促發(fā)試管苗的生根發(fā)育.饒雪梅等[23]研究發(fā)現(xiàn)1/2 MS培養(yǎng)基中添加0.1 mg/L IBA對鐵皮石斛試管苗的生根效果良好.而本研究確定出白菜型油菜與白芥遠緣雜交一代試管苗的最佳生根培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基中添加0.3mg/L IBA，這可能與植物種類不同有關(guān).

4結(jié)論

結(jié)果表明，白菜型油菜與白芥間存在雜交不親和性，雜交種子萌發(fā)不正常，只能得到無胚根的不健全幼苗.屬間雜交后代的無胚根幼苗可在1/2MS培養(yǎng)基上挽救成活.白菜型油菜與白芥遠緣雜交后代試管苗的最佳壯苗培養(yǎng)基為2 MS+ 1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA，最佳生根培養(yǎng)基為1/2 MS+0.3 mg/L IBA，最佳移栽基質(zhì)為草炭土+蛭石+灌漠土(1∶2∶1).這一技術(shù)的應用對提高屬間雜種后代的利用率，擴大油菜的種質(zhì)資源具有一定的實用意義.

參考文獻

[1]唐道城,張禮,王艷萍,等.白芥及油菜產(chǎn)量性狀抗旱性及抗旱性鑒定指標研究初探[J].干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究,1999,17(3):62-64

[2]范惠玲,孫萬倉,武軍艷,等.白芥自交親和性分析[J].西北植物學報,2007,27(5):938-942

[3]何余堂,陳寶元,傅廷棟,等.白菜型油菜在中國的起源與進化[J].遺傳學報,2003,30(11):1003-1012

[4]何麗,孫萬倉,劉自剛,等.白菜型冬油菜與芥菜型油菜遠緣雜交親和性分析[J].西 北 農(nóng) 業(yè) 學 報,2013,22(3):64-69

[5]牛妍,趙志剛,余青蘭.芥菜型油菜和白菜型油菜雜種后代自交親和性研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學,2013,42(9):36-42

[6]湯天澤,稅紅霞,牛應澤.白菜型油菜與海甘藍屬間雜交時花粉與柱頭相互作用[J].四川農(nóng)業(yè)大學學報,2010,28(4):459-462

[7]鞏振輝,王鳴,何玉科.白芥抗黑腐病基因?qū)氚撞说难芯縖J].西北農(nóng)林學報,1996,5(3):59-64

[8]Wang Y P,Sonntag K,Rudloff E.Intergeneric somatic hybridzation betweenBrassicanapusandSinapisalba[J].J Integr Plant Biol,2005,47:84-91

[9]韋存虛,李愛民,張永泰,等.白芥和甘藍型油菜屬間雜種后代種子結(jié)構(gòu)比較[J].作物學報,2009,35(6):1139-1145

[10]牛妍,趙志剛,余青蘭.芥菜型油菜與白菜型油菜種間雜交創(chuàng)建黃籽資源[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學,2013,41(11):92-95

[11]趙志.甘白種間雜交選育新型白菜型油菜的研究[J].青海大學學報：自然科學版,2012,30(4):1-6

[12]王愛云,李栒,胡大有.白菜型油菜和諸葛菜遠緣雜交的子房培養(yǎng)及雜種鑒定[J].中國油料作物學報,2009,31(2):143-148

[13]裴冬麗.白菜型油菜高效離體再生體系的建立[J].北方園藝,2011(1):127-129

[14]楊雅萍,白生文,肖占文,等.白芥離體快繁體系建立[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學學報，2012,47(3)：67-71

[15]程廣有,唐曉杰.苦參組培快繁技術(shù)體系的初步研究[J].西北植物學報,2007,27(5):1026-1029

[16]宋小玲,強勝.三種類型油菜和野芥菜雜交親和性及F1的適合度—潛在基因轉(zhuǎn)移的研究[J].應用與環(huán)境生物學報,2003,9(4):357-361

[17]孟金陵.吳江生,韓繼祥.母本基因型對油菜屬間雜交親和性影響[J].作物研究,1992,6(2):28-32

[18]Dale P J.Spread of engineered genes to wild relatives[J].Plant Physiol,1992,100:13-15

[19]金順福,姜成模,崔哲官,等.培育健壯馬鈴薯試管苗試驗[J].馬鈴薯雜志,1995,9(3):139-143

[20]黃萍,顏謙,何慶才,等.培養(yǎng)基成分改變對馬鈴薯試管苗生長的影響[J].種子,2005,14(4):58-59

[21]趙光磊,吳凌娟,張雅奎.馬鈴薯脫毒試管苗壯苗培養(yǎng)體系的優(yōu)化[J].中國馬鈴薯,2012,26(4):200-205

[22]Acram T,Prakash K，Prakash L.InvitroPlant Breeding[M].US:Haworth Pr InC,2001:129-131

[23]饒雪梅,趙仁發(fā),劉暢慶,等.鐵皮石解試管苗壯苗生根培養(yǎng)探究[J].北京農(nóng)業(yè),2013(6):37-38

(責任編輯胡文忠)

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Intergeneric crosses compatibility and rescue techniques for

hybrid offspring betweenBrassicarapaandSinapisalba

FAN Hui-ling,XU Xiao-sha,LI Xin,LUO Fang-fang,BAI Sheng-wen

(College of Agriculture and Biotechnology,Hexi University,Zhangye 734099)

Abstract：In order to prove intergeneric crosses compatibility and establish rescue techniques for hybrid offspring betweenB.rapaandS.alba.Wide crosses were made byB.rapaas female parent andSinapisalbaas male parent,crosses compatibility was estimated and effects of medium with different macroelements,auxin or cytokinin were analyzed on roots induction and strong seedlings culture.The results indicated that mean crosses compatibility index was 0.5,hybrid offspring were cross-incompatible.Only young seedlings without radicles were obtained after germinated on the filter paper,the rootless seedlings produced roots on 1/2 MS and grow up plant.For test-tube plantlet betweenB.rapaandS.alba,the optimal medium for vigorous seedlings was 2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,for roots induction was 1/2 MS+0.3 mg/L IBA.The optimal matrixe of seedling transplantation was turfy soil + vermiculite + irrigation desert (1∶2∶1).There exist Cross-incompatible betweenB.rapaandS.alba.Tthe rescue techniques for hybrid offspring are vigorous seedlings culture in 2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA medium,roots induction in 1/2 MS+0.3 mg/L IBA,transplanting in turfy soil+vermiculite+irrigation desert.

Key words：Sinapisalba;B.rapa;cross incompatibility;vigorous seedling culture;root induction

收稿日期：2014-09-04；修回日期：2015-11-12

基金項目：河西學院青年教師科研基金項目(QN2011-17)；河西學院大學生科技創(chuàng)新項目(2014 -102).

通信作者：白生文，男，講師，研究方向為植物生理學.E-mail：BSW4588384@163.com

中圖分類號：S 565

文獻標志碼：A

文章編號：1003-4315(2015)06-0067-07