駱菁怡,張立婷,魯明霞,顏小明(綜述),肖　萍(審校)

(　1.漢中職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)系，陜西 漢中 723000； 2.蘭州大學(xué)第一醫(yī)院東崗分院肝病科，蘭州 730000；

3.蘭州大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，蘭州 730000； 4. 蘭州大學(xué)第一醫(yī)院傳染病研究室，蘭州 730000)

Smurf2對(duì)肝纖維化中TGF-β/Smad通路的影響

駱菁怡1※,張立婷2,魯明霞2,顏小明3△(綜述),肖萍4(審校)

(1.漢中職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)系，陜西 漢中 723000； 2.蘭州大學(xué)第一醫(yī)院東崗分院肝病科，蘭州 730000；

3.蘭州大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，蘭州 730000； 4. 蘭州大學(xué)第一醫(yī)院傳染病研究室，蘭州 730000)

摘要：轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)在肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，它作為TGF-β1/Smad信號(hào)通路的起始因子激活下游信號(hào)，使處于非活性狀態(tài)下的肝星狀細(xì)胞分化為肌成纖維細(xì)胞，促進(jìn)并維持了肝纖維化的發(fā)生。泛素化是體內(nèi)蛋白質(zhì)翻譯后修飾并降解的重要途徑之一，泛素-蛋白酶體途徑中的泛素連接酶Smurf2通過多種途徑抑制TGF-β1/Smad通路表達(dá)。Smurf2作為一種抗肝纖維化發(fā)生的酶受到廣泛關(guān)注，但機(jī)制并未深入系統(tǒng)地被闡述。

關(guān)鍵詞：肝纖維化；轉(zhuǎn)化生長因子β1/Smad；泛素；Smurf2；肝星形細(xì)胞

肝病是我國的高發(fā)病之一，肝纖維化是指各種由慢性疾病引起的肝臟持續(xù)創(chuàng)傷修復(fù)反應(yīng)，從而導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)過度沉積和肝臟功能受損的病變[1]。肝纖維化是各種損傷引發(fā)慢性肝病、肝硬化及肝癌的共同病理基礎(chǔ)和必經(jīng)階段[2]，肝星形細(xì)胞(hepatic stellate cells，HSC)的活化、增殖是其發(fā)生的關(guān)鍵細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)[3]。肝臟可能在持續(xù)的肝細(xì)胞破壞和再生下發(fā)展為廣泛的正常肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常，進(jìn)而發(fā)展為肝纖維化，所以控制肝纖維化產(chǎn)生是防止肝硬化發(fā)生的重要關(guān)口，但現(xiàn)今還沒有有效的抗纖維化治療，所以研究肝纖維化產(chǎn)生的機(jī)制顯得尤為重要。主要導(dǎo)致肝纖維化的細(xì)胞是HSC，在成人的肝臟中，未活化的HSC位于肝細(xì)胞和肝竇內(nèi)皮細(xì)胞之間，當(dāng)肝臟受到損傷，HSC被激活，分化為肌成纖維細(xì)胞，并增殖擴(kuò)散，產(chǎn)生主要成分為膠原的ECM。急性損傷后，活化的HSC可促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和器官修復(fù)，但在慢性損傷中，過多的ECM打亂了正常的肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致肝纖維化和肝硬化[4]?，F(xiàn)就Smurf2對(duì)肝纖維化中轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth factor-beta,TGF-β)1/Smad通路的影響進(jìn)行綜述。

1肝纖維化發(fā)生的機(jī)制

1.1TGF-β1/Smad信號(hào)通路

1.1.1TGF-βTGF-β是一類由結(jié)構(gòu)、功能相關(guān)的多肽生長因子亞家族組成，具有旁分泌、自分泌作用的超家族，包括至少25種相關(guān)蛋白，其中TGF-β1占主要部分。TGF-β1在多種細(xì)胞反應(yīng)中扮演主要角色，起著細(xì)胞增殖、凋亡、分化、遷移、附著、血管形成、刺激ECM產(chǎn)生和促使ECM降解等廣泛的生物學(xué)作用[5]。目前認(rèn)為，TGF-β1在促進(jìn)HSC分泌膠原中發(fā)揮重要作用，是致纖維化最主要的細(xì)胞因子[6]。TGF-β1以無活性的形式被分泌，但在應(yīng)激狀態(tài)下，潛在的TGF-β1復(fù)合物被組織-傷害特定機(jī)制激活而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。在肝臟中，TGF-β1可由多種細(xì)胞分泌產(chǎn)生，包括實(shí)質(zhì)細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞，如庫普弗細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、HSC等。在肝纖維化的發(fā)展過程中，TGF-β可激活纖維化細(xì)胞因子和促使肝星狀細(xì)胞分化為肌纖維細(xì)胞，持久的TGF-β刺激可導(dǎo)致ECM堆積和金屬蛋白酶組織抑制劑的合成，激發(fā)肝纖維化產(chǎn)生[5，7]。

1.1.2TGF-β受體(TGF-beta receptors,TβR)TGF-β1和TβR在活體組織中廣泛表達(dá)，TGF-β1與靶細(xì)胞表面相應(yīng)的TβR結(jié)合后激發(fā)下游信號(hào)產(chǎn)生。TβR有3種(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)，其結(jié)構(gòu)相似，分為膜外區(qū)、跨膜區(qū)、膜內(nèi)區(qū)，其中Ⅰ型和Ⅱ型為信號(hào)傳遞受體，跨膜區(qū)內(nèi)的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶結(jié)構(gòu)域具有細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)所必需的絲氨酸/蘇氨酸蛋白酶活性，與受體后細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)[8]；Ⅰ型受體的胞質(zhì)近膜區(qū)含有高度保守的絲氨酸和甘氨酸結(jié)構(gòu)域，是受體激酶活性的作用區(qū)域；3種類型的TβR膜外區(qū)均富含半胱氨酸。

1.1.3Smad的分類及功能Smad為TGF-β超家族特異性受體后信使蛋白分子，通過介導(dǎo)TGF-β信號(hào)從細(xì)胞膜傳入細(xì)胞核而發(fā)揮中介功能。目前發(fā)現(xiàn)有8種Smads蛋白，根據(jù)各自在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的功能不同將其分為3類：①受體Smad(R-Smad)，包括Smad1、Smad2、Smad3、Smad5、Smad8，這一類Smad是TGF-β受體復(fù)合物下游作用的靶分子，可被活化的TβRⅠ識(shí)別，其中Smad2和Smad3與TβRⅠ結(jié)合，形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合體，與靶基因的特定部位結(jié)合，參與TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，R-Smad 的磷酸化狀態(tài)決定Smad復(fù)合體的入核與出核、結(jié)合與分離，因此在TGF-β信號(hào)通路中是最關(guān)鍵的因子[9]。②協(xié)同Smad(Co-Smad)，主要是Smad 4。R-Smad與Smad4結(jié)合后形成異源復(fù)合物，能進(jìn)入細(xì)胞核調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄，所以Smad4是TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)必需的中間分子。③抑制型Smad(I-Smad)，包括Smad6和Smad7。Smad7與TβRⅠ的緊密結(jié)合產(chǎn)生競(jìng)爭性拮抗占據(jù)作用，占據(jù)了Smad2、Smad3與活化型TβRⅠ的結(jié)合位點(diǎn)從而阻斷依賴TGF-β1的Smad2/Smad4復(fù)合物的形成，從而對(duì)TGF-β1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路起負(fù)調(diào)控作用[7，10]。

TGF-β/Smad信號(hào)通路表達(dá)的基本過程為：刺激因子作用于HSC后，處于自動(dòng)磷酸化狀態(tài)的TβRⅡ在TβRⅢ的輔助作用下與TGF-β配體結(jié)合后激活跨膜TβR，Smads蛋白被跨膜受體磷酸化，該Smad再與協(xié)同Smad即Smad4結(jié)合，形成復(fù)合物后轉(zhuǎn)入細(xì)胞核內(nèi)，激活的復(fù)合物和兩類DNA結(jié)合輔助因子結(jié)合，決定靶基因的轉(zhuǎn)錄活性[11]。Smad復(fù)合體進(jìn)入細(xì)胞核后與靶基因啟動(dòng)子的特異序列結(jié)合形成穩(wěn)定的復(fù)合物，間接地對(duì)靶基因進(jìn)行調(diào)節(jié)。同時(shí)，Smad復(fù)合體直接與細(xì)胞核內(nèi)DNA結(jié)合進(jìn)而直接激活目的基因的轉(zhuǎn)錄。HSC活化后分泌大量ECM沉積在肝細(xì)胞間，同時(shí)活化后的HSC可自分泌TGF-β1而形成級(jí)聯(lián)環(huán)狀放大反應(yīng)促使纖維化發(fā)生。

1.2非TGF-β1/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑促分裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/Akt及核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路等可直接由TGF-β介導(dǎo)，也可間接參與調(diào)節(jié)TGF-β1/Smad通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與非Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)間存在廣泛聯(lián)系，并對(duì)Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路進(jìn)行調(diào)節(jié)。在一些細(xì)胞中非Smad信號(hào)通路尤為重要，但TGF-β/Smad信號(hào)通路是目前公認(rèn)的致纖維化的主要通路。

2以TGF-β/Smad通路為靶點(diǎn)的抗纖維化治療

研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β通路在肝纖維化產(chǎn)生與發(fā)展中起重要作用，因此干擾其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)成為抗纖維化研究的重要方向。研究主要集中在如何抑制TGF-β本身、干擾受體與配體結(jié)合及抑制其活性、對(duì)TGF-β下游信號(hào)的負(fù)性調(diào)節(jié)[12]。

2.1針對(duì)TGF-β抑制肝纖維化產(chǎn)生通過抑制TGF-β的產(chǎn)生可在理論上降低肝纖維化的發(fā)生。有研究證實(shí)，腎素-血管緊張素系統(tǒng)可促進(jìn)TGF-β的分泌合成，應(yīng)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑及血管緊張素受體阻斷劑后，實(shí)驗(yàn)大鼠纖維化肝臟中TGF-β mRNA表達(dá)下降，TGF-β蛋白明顯減少[12]。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)重組肝細(xì)胞生長因子也可阻斷TGF-β mRNA表達(dá)。另外，TGF-β產(chǎn)生后阻斷其激活也具有抗纖維化的重要意義，肝細(xì)胞中存在多種TGF-β前肽復(fù)合物激活因子，通過干擾激活因子與相關(guān)肽的作用可以阻止肝臟損傷及肝纖維化形成。

2.2作用于TGF-β受體TGF-β的生物信號(hào)通過TβRⅠ和TβRⅡ傳遞，通過阻斷TGF-β與其受體的結(jié)合是防治肝纖維化的有效途徑之一，或通過競(jìng)爭性結(jié)合活性受體阻斷信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。Ueno等[13]構(gòu)建了融合人IgG的TβRⅡ外功能區(qū)的腺病毒載體，在纖維化大鼠中應(yīng)用可溶性TβRⅡ，使其與胞膜TβRⅡ 競(jìng)爭性結(jié)合，可降低HSC的激活和增殖，抑制了TGF-β通路信號(hào)的傳遞。

2.3針對(duì)TGF-β下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)Smads蛋白分子是TGF-β唯一的受體后蛋白，通過抑制Smads蛋白分子的生成、磷酸化和核轉(zhuǎn)位可抑制肝纖維化的發(fā)生[14]。Dooley等[15]向大鼠注射攜帶有Smad7 cDNA的腺病毒載體后發(fā)現(xiàn)，Smad7高表達(dá)的大鼠膠原含量降低從而HSC激活受到抑制。也有體外報(bào)道Smad7通過抑制Smad2/3磷酸化及活化的Smad復(fù)合物核轉(zhuǎn)位，對(duì)已經(jīng)形成的肝纖維化也有影響。降低組織中Smad3、Smad4的含量或使其活性降低，也能抑制肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展。

因此，TGF-β家族對(duì)肝纖維化既有正調(diào)控作用，又有負(fù)調(diào)控作用，所以在阻斷TGF-β通路從而抑制肝纖維化發(fā)生時(shí)，不能將所有的TGF-β作用都阻斷。因此從理論上推測(cè)，針對(duì)TGF-β下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的阻斷將更具有特異性。由于Smads是TGF-β信號(hào)通路中關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，因此改變Smads蛋白水平可影響信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)物形成。Smad泛素化調(diào)節(jié)因子2(Smurf2)可通過多種途徑抑制TGF-β下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)而引起廣泛關(guān)注。

3泛素-蛋白水解酶復(fù)合體通路及Smurf2對(duì)肝纖維化的影響

泛素-蛋白水解酶復(fù)合體通路(ubiquition-proteasomepathway,UPP)是真核細(xì)胞內(nèi)高度保守且具有高度選擇性，依賴三磷酸腺苷的重要蛋白質(zhì)降解途徑。細(xì)胞內(nèi)80%～90%的蛋白質(zhì)通過UPP降解，其在抗原呈遞、細(xì)胞分化、凋亡、蛋白質(zhì)的翻譯和轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮著非常重要的作用[16]。多項(xiàng)研究表明，其異常表達(dá)與器官囊性纖維化、腫瘤、神經(jīng)性病變及肝臟疾病等關(guān)系密切。2004年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了在“泛素介導(dǎo)的蛋白質(zhì)降解過程研究”中做出貢獻(xiàn)的三位來自以色列和美國的科學(xué)家，以表彰他們發(fā)現(xiàn)了UPP。

UPP是由泛素活化酶(ubiquitin-activating enzyme,E1)、泛素-蛋白結(jié)合酶(ubiquitin-conjugating enzymes,E2)、泛素-蛋白連接酶(ubiquitin-protein ligases,E3)、泛素(ubiquitin,Ub)及26S蛋白酶體和泛素解離酶(deubiquitinating enzymes,DUBs)組成，通過兩個(gè)相對(duì)獨(dú)立的過程對(duì)靶蛋白進(jìn)行降解：靶蛋白泛素化修飾；多聚泛素化修飾的靶蛋白被26S蛋白水解酶復(fù)合體識(shí)別，降解。E1的半胱氨酸殘基泛素與C端甘氨酸殘基間形成高能硫酯鍵而獲得活性，泛素在ATP的作用下被E1催化；E1-泛素結(jié)合體再將有活性的泛素轉(zhuǎn)移給E2，形成E2-泛素結(jié)合體；E3直接或間接與底物結(jié)合后，促使泛素從E2轉(zhuǎn)移到靶蛋白的賴氨酸殘基上，形成異肽鍵[17]。當(dāng)一個(gè)泛素分子與靶蛋白形成異肽鍵后，其他一些泛素分子通過E3的催化，與底物相連的泛素分子第48位賴氨酸殘基相連，形成一條多聚泛素鏈而完成泛素化，后被蛋白酶體降解。人體中蛋白酶體在細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)內(nèi)發(fā)揮生物效應(yīng)，主要是26S蛋白酶體。26S蛋白酶體由20S和19S復(fù)合體組成，26S蛋白酶體將被泛素化標(biāo)記的蛋白包裹，20S催化中心將其分解成多個(gè)氨基酸殘基的小肽，同時(shí)，泛素分子從底物上水解下來，進(jìn)入下一輪泛素化重復(fù)利用。

E3為具有特異性識(shí)別功能的泛素蛋白連接酶，在泛素化過程中決定了降解蛋白的特異性。Smurf2是泛素連接酶E3的一種，是C2-WW-人類乳頭狀瘤病毒E6相關(guān)性蛋白同源C端(C2-WW-HECT)的同系物[18]，在TGF-β1/Smad信號(hào)通路中通過多種途徑介導(dǎo)信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)，參與肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展。

3.1Smurf2作用于SmadsSmurf2可選擇性作用于R-Smads蛋白，其中Smad 2、Smad 3含有PPXY序列，因此Smurf2可以通過WW結(jié)構(gòu)域與之結(jié)合，Smad4因不含脯氨酸-酪氨酸PPXY序列，Smurf2無法直接與Smad4相連，只能通過間接途徑進(jìn)行調(diào)控[19]。研究表明，細(xì)胞單獨(dú)轉(zhuǎn)染Smad7基因時(shí)不能改變細(xì)胞內(nèi)Smad4水平，單獨(dú)轉(zhuǎn)染Smurf2時(shí)只能輕微下調(diào)Smad4的表達(dá)水平，但如果同時(shí)轉(zhuǎn)染Smad7和Smurf2，Smad4表達(dá)明顯下調(diào)，Smad7作為中間介質(zhì)可促使Smurf2泛素化Smad4[20]。此外，Smad 7能夠通過幫助Smurf2募集E2激活連接酶活性，在Smurf2調(diào)節(jié)TGF-β通路中發(fā)揮多重作用。

Smurf2能靶定被激活的Smad 1、Smad2使之降解，促進(jìn)Smad2降解過程通過Smurf2的E6-AP羧基末端同源結(jié)構(gòu)域催化激活及蛋白水解酶途徑完成。因此，Smurf2的異位表達(dá)降低了Smad1、Smad2蛋白表達(dá)，但不能減少Smad3的表達(dá)。Smurf2的水平在纖維化大鼠肝臟中增高，但在肝硬化大鼠和人類中下降，過度表達(dá)的Smurf2使HSC膠原產(chǎn)生減少[21]。

3.2Smurf2作用于TβR人HSC細(xì)胞中Smurf2過表達(dá)降低了TβRⅠ和Smad7的水平，同時(shí)ECM和層粘連蛋白水平下降。在TGF-β的刺激下，Smurf2募集Smad7在細(xì)胞核內(nèi)形成復(fù)合物，在TGF-β的刺激下，復(fù)合物轉(zhuǎn)移至細(xì)胞質(zhì)，接下來這一復(fù)合物與TβRⅠ相互作用，通過UPP使TβRⅠ表達(dá)水平下調(diào)，因此阻斷了TGF-β通路的信號(hào)傳遞[17]。

Bizet等[22]利用反義RNA下調(diào)Smurf2后發(fā)現(xiàn)TβRⅠ蛋白水平增高，但在單側(cè)輸尿管閉塞模型中發(fā)現(xiàn)，Smurf2同時(shí)可降解Smad7，最終導(dǎo)致小管間質(zhì)性纖維病變。

3.3Smurf2與轉(zhuǎn)錄共抑制因子在肝纖維化中的關(guān)系Ski和SnoN是轉(zhuǎn)錄共抑制因子的核內(nèi)蛋白，在細(xì)胞核內(nèi)它們通過與TGF-β信號(hào)通路中磷酸化的Smad2、Smad3、Smad4復(fù)合體結(jié)合來抑制其活性，也通過募集轉(zhuǎn)錄抑制物及阻止轉(zhuǎn)錄共激活物與Smad2、Smad3、Smad4復(fù)合體結(jié)合等途徑阻礙TGF-β/Smad通路中靶基因的轉(zhuǎn)錄[23]。而Ski/SnoN蛋白可被Smurf2泛素化降解，從而間接調(diào)節(jié)TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。研究表明，Smad2可介導(dǎo)Smurf2進(jìn)入細(xì)胞核降解SnoN[23-24]。

Smurf2的表達(dá)水平與Ski/SnoN蛋白降解水平同步，即Smurf2表達(dá)增強(qiáng)時(shí)相應(yīng)Ski/SnoN蛋白泛素化降解水平增強(qiáng)，相反，當(dāng)Smurf2表達(dá)下降時(shí)相應(yīng)Ski/SnoN蛋白泛素化降解水平減弱[24]。

4小結(jié)

Smurf2 mRNA的表達(dá)水平隨著TGF-β1的表達(dá)增高而增高，因此在肝纖維化發(fā)生、發(fā)展的早期，用各種方法誘導(dǎo)和提高Smurf2的表達(dá)可在一定程度上阻止肝纖維化的進(jìn)展和肝硬化的發(fā)生[25]，但Smurf2也能通過降解轉(zhuǎn)錄共抑制因子上調(diào)TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。雖然Smurf2作用于TGF-β通路的各個(gè)環(huán)節(jié)已經(jīng)被人們的研究揭示，但現(xiàn)今的研究結(jié)果仍不能明確究竟是什么原因?qū)е铝薙murf2對(duì)TGF-β通路的雙向調(diào)節(jié)、什么情況下Smurf2對(duì)TGF-β通路的凈作用是抑制的、在Smurf2調(diào)節(jié)肝纖維化發(fā)生的同時(shí)會(huì)不會(huì)對(duì)肝臟產(chǎn)生不良反應(yīng)，由于并非所有的TGF-β作用都應(yīng)被阻斷，那么Smurf2在哪個(gè)環(huán)節(jié)調(diào)節(jié)TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)能夠在不影響正常生理功能的同時(shí)阻止肝纖維化的發(fā)生。Smurf2為預(yù)防和控制肝纖維化及肝硬化的發(fā)生、發(fā)展提供了新思路。

參考文獻(xiàn)

[1]Thompson KJ,Lakner AM,Cross BW,etal.S-adenosyl-L-methionine inhibits collagen secretion in hepatic stellate cells via increased ubiquitination[J].Liver Int,2011,31(6):891-901.

[2]Seki N,Toh U,Kawaguchi K,etal.Tricin inhibits proliferation of human hepatic stellate cells in vitro by blocking tyrosine phosphorylation of PDGF receptor and its signaling pathways[J].J Cell Biochem,2012,113(7):2346-2355.

[3]Arauz J,Zarco N,Seqovia J,etal.Caffeine prevents experimental liver fibrosis by blocking the expression of TGF-beta[J].Eur J Gastroenterol Hepatol,2014,26(2):164-173.

[4]Hasegawa D,Fujii R,Yagishita N,etal.E3 ubiquitin ligase synoviolin is involved in liver fibrogenesis[J].PLoS One,2010,5(10):e13590.

[5]Hayashi H,Sakai T.Biological significance of local TGF-beta activation in liver diseases[J].Front Physiol,2012,3:12.

[6]Atorrasagasti C,Aquino JB,Hofman L,etal.SPARC downregulation attenuates the profibrogenic response of hepatic stellate cells induced by TGF-beta1 and PDGF[J].Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol,2011,300(5):G739-748.

[7]Bizet AA,Tran-Khanh N,Saksena A,etal.CD109-mediated degradation of TGF-beta receptors and inhibition of TGF-beta responses involve regulation of SMAD7 and Smurf2 localization and function[J].J Cell Biochem,2012,113(1):238-246.

[8]Wang Y,Huang Y,Guan F,etal.Hypoxia-inducible factor-1alpha and MAPK co-regulate activation of hepatic stellate cells upon hypoxia stimulation[J].PLoS One,2013，8(9):e74051.

[9]Reetz J,Genz B,Meier C,etal.Development of adenoviral delivery systems to target hepatic stellate cells in vivo[J].PLoS One,2013，8(6):e67091.

[10]Zhang S,Fei T,Zhang L,etal.Smad7 antagonizes transforming growth factor beta signaling in the nucleus by interfering with functional Smad-DNA complex formation[J].Mol Cell Biol,2007,27(12):4488-4499.

[11]Hagler MA,Hadley TM,Zhang H,etal.TGF-beta signalling and reactive oxygen species drive fibrosis and matrix remodelling in myxomatous mitral valves[J].Cardiovasc Res,2013,99(1):175-

184.

[12]Baldassarre M,Giannone FA,Napoli L,etal.The endocannabinoid system in advanced liver cirrhosis:pathophysiological implication and future perspectives[J].Liver Int,2013，33(9):1298-1308.

[13]Ueno H,Sakamoto T,Nakamura T,etal.A soluble transforming growth factor beta receptor expressed in muscle prevents liver fibrogenesis and dysfunction in rats[J].Hum Gene Ther,2000,11(1):33-42.

[14]Noguchi H,Yamada S,Nabeshima A,etal.Depletion of apoptosis signal-regulating kinase 1 prevents bile duct ligation-induced necroinflammation and subsequent peribiliary fibrosis[J].Am J Pathol,2014,184(3):644-661.

[15]Dooley S,Delvoux B,Streckert M,etal.Transforming growth factor beta signal transduction in hepatic stellate cells via Smad2/3 phosphorylation,a pathway that is abrogated during in vitro progression to myofibroblasts.TGFbeta signal transduction during transdifferentiation of hepatic stellate cells[J].FEBS Lett,2001,502(1/2):4-10.

[16]David D，Nair SA，Pillai MR.Smurf E3 ubiquitin ligases at the cross roads of oncogenesis and tumor suppression[J].Biochim Biophys Acta,2013,1835(1):119-128.

[17]陽韜，陸小蒟，陳永平，等.SHP和Smurf2在大鼠肝纖維化中的動(dòng)態(tài)表達(dá)及意義[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2011,40(12):36-41.

[18]蔡瑜，徐奕，沈錫中.Smad泛素化調(diào)節(jié)因子2在肝纖維化過程中對(duì)結(jié)締組織生長因子的作用研究[J].內(nèi)科理論與實(shí)踐,2012,7(4):305-309.

[19]Saeki I,Terai S,Fujisawa K,etal.Bortezomib induces tumor-specific cell death and growth inhibition in hepatocellular carcinoma and improves liver fibrosis[J].J Gastroenterol,2013,48(6):738-750.

[20]Hagler MA,Hadley TM,Zhang H,etal.TGF-beta signalling and reactive oxygen species drive fibrosis and matrix remodelling in myxomatous mitral valves[J].Cardiovasc Res,2013,99(1):175-184.

[21]Cai Y,Zhou CH,Fu D,etal.Overexpression of Smad ubiquitin regulatory factor 2 suppresses transforming growth factor-beta mediated liver fibrosis[J].J Dig Dis,2012,13(6):327-334.

[22]Bizet AA,Tran N,Saksena A,etal.CD109-mediated degradation of TGF-beta receptors and inhibition of TGF-beta responses involve regulation of SMAD7 and Smurf2 localization and function[J].J Cell Biochem,2012,113(1):238-246.

[23]Hayashi H,Sakai T.Biological Significance of Local TGF-beta Activation in Liver Diseases[J].Front Physiol,2012,3:12.

[24]Wegner K,Bachmann A,Schad JU,etal.Dynamics and feedback loops in the transforming growth factor beta signaling pathway[J].Biophys Chem,2012,162:22-34.

[25]Lee YS,Park JS,Kim JH,etal.Smad6-specific recruitment of Smurf E3 ligases mediates TGF-beta1-induced degradation of MyD88 in TLR4 signalling[J].Nat Commun,2011,2:460.

Smurf 2 Impact on TGF-β/Smad Pathway in Liver FibrosisLUOJing-yi1,ZHANGLi-ting2,LUMing-xia2,YANXiao-ming3,XIAOPing4.(1.DepartmentofMedicine,HanzhongVocationalandTechnicalCollege,Hanzhong723000,China; 2.DepartmentofHepatology,theFirstHospitalofLanzhouUniversity,DonggangBranch,Lanzhou730000,China; 3.TheFirstClinicalMedicineCollegeofLanzhouUniversity,Lanzhou730000,China; 4.InstituteofInfection,theFirstHospitalofLanzhouUniversity,Lanzhou730000,China)

Abstract:Transforming growth factor β1(TGF-β1) plays an important role in the development of liver fibrosis,as an initiative factor of TGF-β1/Smad pathway,it could activate downstream signals,which makes the inactive hepatic stellate cells to differentiate into myofibroblasts,promoting and maintaining the state of fibrosis.Ubiquitination is one of the important in vivo ways of translational modifications and protein degradation,and Smurf 2 ubiquitin ligase in ubiquition-proteasome pathway suppresses the expression of TGF-β1/Smad pathway through a variety of ways.Smurf 2 as an anti-hepatic fibrosis enzyme has attracted wide attention,but the mechanisms have not been systematically elaborated.

Key words:Liver fibrosis; Transforming growth factor-β1/Smad; Ubiquitin; Smurf2; Hepatic stellate cells

收稿日期：2014-07-28修回日期：2015-04-02編輯：樓立理

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.17.016

中圖分類號(hào)：R575; R329.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-2084(2015)17-3113-04