何海健 周彩琴 蔣春燕 姜正前

1.浙江省金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江金華 321007；2.浙江省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，杭州 310020

高致病性豬藍(lán)耳病病毒抗體檢測(cè)與免疫程序的制定

何海健1周彩琴2蔣春燕1姜正前1

1.浙江省金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江金華 321007；2.浙江省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，杭州 310020

為了研究仔豬21 d免疫高致病性藍(lán)耳疫苗的免疫效果及對(duì)其他疫苗免疫的影響，筆者對(duì)金華某豬場(chǎng)進(jìn)行了抗體水平的長(zhǎng)期跟蹤。分別在2013年6月、9月和2014年1月、4月進(jìn)行4次采血，利用IDEXX的檢測(cè)試劑盒進(jìn)行藍(lán)耳病抗體檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在21日齡進(jìn)行藍(lán)耳疫苗免疫的仔豬，抗體陽(yáng)性率分別達(dá)到89.13%、90.24%、89%、97%，且S/P值也較為理想，離散度控制在一定范圍之內(nèi)，結(jié)果表明，在21 d進(jìn)行高致病毒株的免疫，能夠取得較好的免疫效果，并對(duì)其他疫苗的免疫無(wú)明顯影響。

藍(lán)耳??；抗體檢測(cè)；免疫程序

豬繁殖與呼吸障礙綜合征，俗稱藍(lán)耳病，是由豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒引起豬的一種以繁殖障礙、體溫升高或表現(xiàn)呼吸道癥狀的急性接觸性傳染性病，現(xiàn)已廣泛分布于世界各地，并在我國(guó)大部分省區(qū)內(nèi)流行，是目前危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的主要疾病之一[1]。該病在我國(guó)豬群感染率很高，而且流行范圍日趨廣泛。近年來(lái)該病的臨床表現(xiàn)趨于復(fù)雜，發(fā)病程度日漸加重而且亞臨床感染增多，有些豬群不表現(xiàn)臨床癥狀，但攜帶病原，在引進(jìn)新的易感豬只后，極易造成嚴(yán)重的繁殖障礙和仔豬較高的死亡率[2]。而且，越來(lái)越多研究表明，PRRSV感染可引起豬免疫功能下降，特別是在感染早期對(duì)免疫功能的抑制十分明顯[3]。目前對(duì)該病尚無(wú)有效的治療方法，一般認(rèn)為，疫苗免疫是預(yù)防和控制PRRS的主要方法之一，然而，當(dāng)設(shè)計(jì)免疫程序時(shí)為獲得成功要考慮諸多因素：疫苗病毒能持續(xù)存活數(shù)周或數(shù)月，并且這種持續(xù)性可能與強(qiáng)毒病毒相似；疫苗誘導(dǎo)的保護(hù)性免疫形成慢；疫苗潛伏感染階段可能引起一過(guò)性的免疫抑制，從而導(dǎo)致其他疾病的感染和易發(fā)[3-5]。所以為了控制疫苗的這些缺點(diǎn)對(duì)仔豬可能產(chǎn)生的威脅，一個(gè)安全有效的免疫程序是非常關(guān)鍵的。

1 材料與方法

1.1 材 料

豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒抗體檢測(cè)試劑盒；購(gòu)自北京愛(ài)德士元亨生物有限公司。批號(hào)：20130525。

1.2 采血方法

分別于2013年6月、9月和2014年1月、4月利用前腔靜脈采血的方法對(duì)金華某豬場(chǎng)的商品豬群進(jìn)行采血，該豬群的日齡分布及采血數(shù)量如表1。

1.3 檢測(cè)方法

詳細(xì)步驟參照IDEXX試劑盒檢測(cè)說(shuō)明書(shū)。

結(jié)果計(jì)算參照IDEXX試劑盒檢測(cè)說(shuō)明書(shū)并根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行結(jié)果判定。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同日齡仔豬抗體檢測(cè)結(jié)果

抗體檢測(cè)結(jié)束后，對(duì)仔豬的抗體檢測(cè)結(jié)果予以統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算平均S/P值、陽(yáng)性率和離散度，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2及圖1。

表1 豬群日齡分布及采血數(shù)量

表2 不同日齡仔豬抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)

圖1 不同日齡仔豬抗體檢測(cè)結(jié)果

從4次采血結(jié)果看出，7 d仔豬母源抗體陽(yáng)性率較高，都在90%以上。21 d免疫后，25 d仔豬相較7 d的檢測(cè)結(jié)果，S/P值略有降低，但降低幅度不是很大，可能跟母源抗體的衰減有關(guān)，但抗體陽(yáng)性率仍較高。50 d時(shí)，仔豬抗體陽(yáng)性率仍舊較高，但S/P值相對(duì)較低，且離散度較小。69 d后，抗體陽(yáng)性率仍舊較高，而S/P值仍舊較低。

2.2 不同階段母豬抗體檢測(cè)結(jié)果

從母豬的抗體檢測(cè)結(jié)果（表3）中可以看出，后備母豬、妊娠母豬和哺乳期母豬抗體陽(yáng)性率均較高，說(shuō)明免疫較為合格。在夏季，母豬的抗體S/P值仍舊最低，而冬季仍舊很高。

表3 不同階段母豬抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)

3 討 論

3.1 疫苗是控制藍(lán)耳病最重要的手段之一

藍(lán)耳病是目前危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的主要疾病之一，目前對(duì)該病尚無(wú)有效的治療方法，主要靠綜合防治措施來(lái)防控該病的發(fā)生，因此疫苗是控制藍(lán)耳病最重要的手段之一[6]。

3.2 合理的免疫程序?qū)λ{(lán)耳病的防控具有重要的意義

藍(lán)耳病疫苗很難達(dá)到100%的保護(hù)效果，同時(shí)，藍(lán)耳病因其自身的特點(diǎn)，導(dǎo)致藍(lán)耳病疫苗感染后，需要較長(zhǎng)的時(shí)間才會(huì)產(chǎn)生保護(hù)性效果，因此選擇一種合適的免疫程序，在保證母源抗體不被中和的前提下，能夠盡快發(fā)揮疫苗的保護(hù)性作用，對(duì)藍(lán)耳病的防控具有重要的意義[7-8]。

3.3 仔豬免疫程序的分析

我們通過(guò)比較金華某豬場(chǎng)不同階段的豬，在不同時(shí)間中藍(lán)耳病抗體的陽(yáng)性率和抗體水平的變化，觀察在21 d時(shí)對(duì)仔豬的免疫高致病性豬藍(lán)耳疫苗是否合理與保護(hù)效果。

從表1和表2中可以看出，豬場(chǎng)不同日齡階段的豬，藍(lán)耳病抗體陽(yáng)性率和抗體水平一直保持著較高的水平，離散度也控制在一定的范圍之內(nèi)，暗示豬場(chǎng)的藍(lán)耳病相對(duì)穩(wěn)定，這與我們對(duì)豬場(chǎng)考察后得出的結(jié)論一致。

從圖1中可以看出，7 d仔豬，也就是在未免疫前，抗體陽(yáng)性率和抗體水平較高，說(shuō)明母豬具有較好的免疫效果，從而保證了仔豬的母源抗體水平。而在免疫后14 d，也就是21 d左右，藍(lán)耳病疫苗的抗體未產(chǎn)生，而抗體水平仍舊維持在較高的水平，說(shuō)明21 d免疫高致病性疫苗，對(duì)母源抗體的干擾不明顯，提示此時(shí)免疫，對(duì)仔豬母源抗體的保護(hù)力無(wú)明顯降低。50 d時(shí)，仔豬抗體S/P值較低，且離散度小，而陽(yáng)性率較高，說(shuō)明此時(shí)仔豬的野毒感染的可能性較小，豬群相對(duì)穩(wěn)定，而69 d時(shí)，仔豬藍(lán)耳病抗體的S/P值仍舊較低，說(shuō)明在仔豬在整個(gè)保育期間，藍(lán)耳病均較穩(wěn)定，這與豬場(chǎng)給我們的反饋信息相一致。在第2次采血時(shí)，整體抗體S/P值較低，說(shuō)明夏季時(shí)，藍(lán)耳病的威脅要小于春季和冬季。

3.4 母豬免疫程序的分析

整個(gè)母豬豬群藍(lán)耳病抗體陽(yáng)性率和S/P值均較理想，哺乳母豬的抗體水平和陽(yáng)性率均較高，提示哺乳期仔豬的母源抗體水平較高，與圖1得出的結(jié)論一致。免疫的母豬可使哺乳仔豬通過(guò)被動(dòng)性獲得抗體而被保護(hù)，在哺乳期間可進(jìn)行安全的加強(qiáng)免疫。這一程序的目的是要為抵抗各種野毒而產(chǎn)生的保護(hù)性免疫提供最長(zhǎng)的時(shí)間，盡可能地減少免疫對(duì)懷孕和妊娠的干擾，并保持高水平的母源抗體。

3.5 免疫程序的推廣

本研究所選取的豬場(chǎng)，藍(lán)耳病長(zhǎng)期處于穩(wěn)定中，其他疾病也未有大面積的流行和暴發(fā)，盡管這與豬場(chǎng)的飼養(yǎng)管理息息相關(guān)，但藍(lán)耳病疫苗免疫的成功也有著不可或缺的作用。在本研究中，該豬場(chǎng)采用的免疫程序、效果無(wú)疑是明顯的，可以作為其他豬場(chǎng)的參考在實(shí)際生產(chǎn)中予以推廣使用。

4 免疫程序的制定

通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該豬場(chǎng)的藍(lán)耳病抗體陽(yáng)性率很高，且S/P值也較為理想，離散度控制在一定范圍之內(nèi)，因此在仔豬21 d免疫高致病性藍(lán)耳病疫苗1頭份、母豬妊娠35 d和56 d各免疫2頭份的免疫程序?qū)τ诟咧虏⌒载i藍(lán)耳病的防控具有重要意義。

[1] 陳偉杰，張城.豬藍(lán)耳病滅活苗應(yīng)用對(duì)相關(guān)疫病免疫控制的影響[J].畜牧與獸醫(yī)，2011，43（5）：71-77.

[2] 曹斌，王海燕.不同類型豬藍(lán)耳病疫苗體液免疫效果比較[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2010，27（8）：51-52.

[3] 李儒曙，冷和平.高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗與滅活疫苗體液免疫效果對(duì)比研究[J].廣州農(nóng)業(yè)科技，2012（12）：127-129.

[4] 曹晉蓉，占鶴松.不同類型的豬藍(lán)耳病疫苗的免疫探討[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2009，26（9）：56.

[5] 楚常歡.豬瘟、口蹄疫、豬藍(lán)耳病免疫程序優(yōu)化試驗(yàn)[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2011，27（2）：102-103.

[6] 包新奇，陳昌海.高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（TJM～92株）免疫效果與安全性試驗(yàn)報(bào)告 [J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2012（2）：71-72.

[7] 劉金彪.豬藍(lán)耳病的綜合防控[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2008，25（1）：33-34.

[8] 吳錦艷.高致病性豬藍(lán)耳病病毒GS_LZh_07株的分離、鑒定及其非結(jié)構(gòu)蛋白Nsp2基因特性分析 [J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2009，40 （3）：438-443.

2014-12-16

浙江省科技廳公益技術(shù)研究農(nóng)業(yè)項(xiàng)目（編號(hào)：2012C22051），金華市科技計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目（編號(hào)：2012-2-012）何海健，男，1966年生，碩士生，副教授。