王存吉　肖茂良

[摘要] 目的 探討冰己抑瘤丸對膠質(zhì)瘤患者化療敏感性及P21、VEGF表達(dá)的影響。 方法 將90例確診為神經(jīng)腦膠質(zhì)瘤的患者隨機(jī)分為A組（冰己抑瘤丸+替莫唑胺）30例、B組（漢防己+替莫唑胺）30例、C組（安慰劑+替莫唑胺）30例。對比3組總有效率、化療敏感率及毒副反應(yīng)發(fā)生率。分析治療前后3組P21、VEGF表達(dá)水平的變化。 結(jié)果 A組總有效率、化療敏感率高于B、C組（P<0.05），毒副反應(yīng)發(fā)生率低于B、C組（P<0.05）。A組治療后P21、VEGF表達(dá)水平顯著低于B、C組（P<0.05）。 結(jié)論 冰己抑瘤丸可提高膠質(zhì)瘤患者化療敏感性及治療效果，抑制P21、VEGF表達(dá)水平，促進(jìn)患者預(yù)后。

[關(guān)鍵詞] 冰己抑瘤丸；腦膠質(zhì)瘤；化療敏感性；P21蛋白；血管內(nèi)皮生長因子

[中圖分類號(hào)] R979.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）12（c）-0086-03

腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)常見的原發(fā)腫瘤，化療是治療腦膠質(zhì)瘤常用的治療方法，替莫唑胺（TMZ）由于毒副作用小，已成為治療膠質(zhì)瘤的有效藥物之一[1]。TMZ不直接發(fā)揮作用，在生理pH下，經(jīng)非酶途徑自發(fā)快速轉(zhuǎn)化為活性化合物，從而起抑制腫瘤生長及增殖的作用，但患者容易對TMZ產(chǎn)生耐藥性，影響其在腦膠質(zhì)瘤中的應(yīng)用效果[2]。有研究表明，膠質(zhì)瘤的多藥耐藥性與P21蛋白及血管內(nèi)皮細(xì)胞因子過度表達(dá)有關(guān)[3]。相應(yīng)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑可以阻斷多藥耐藥機(jī)制，對腫瘤耐藥有一定的逆轉(zhuǎn)作用[4]。中藥漢防己的提取物漢防己堿（TET）可逆轉(zhuǎn)多種實(shí)體瘤的耐藥，同時(shí)能有效抑制腫瘤生長，通過應(yīng)用冰片開放血-腦脊液屏障增加漢防己在瘤體內(nèi)濃度[5]。本研究探討冰己抑瘤丸對膠質(zhì)瘤患者化療敏感性及P21、VEGF表達(dá)的影響，旨在為腦膠質(zhì)瘤患者臨床治療提供指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年5月～2014年5月在本院腫瘤科收治的90例神經(jīng)膠質(zhì)瘤為研究對象，納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理組織確診為神經(jīng)膠質(zhì)瘤；②ECOG評分≤2分；③6個(gè)月內(nèi)未接受過烷化劑化療；④簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有化療禁忌證者；②已知對本研究用藥存在過敏者；③合并其他疾病預(yù)計(jì)不能進(jìn)行本研究者；④精神疾病或不能配合治療者。根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表分為冰己抑瘤丸+TMZ組（A組）、漢防己+TMZ組（B組）、安慰劑+TMZ組（C組），各30例。A組：男16例，女14例；年齡18～75歲，平均（42.9±3.4）歲；KAP評分52～75分，平均（65.3±4.3）分；臨床分期：Ⅲ級(jí)15例，Ⅳ級(jí)15例；腫瘤直徑3～10 cm，平均（5.3±0.8） cm。B組：男15例，女15例；年齡18～74歲，平均（43.2±3.6）歲；KAP評分54～75分，平均（66.3±4.8）分；臨床分期：Ⅲ級(jí)16例，Ⅳ級(jí)14例；腫瘤直徑3～10 cm，平均（5.4±1.1） cm。C組：男16例，女14例；年齡18～74歲，平均（42.9±2.2）歲；KAP評分54～75分，平均（65.2±4.3）分；臨床分期：Ⅲ級(jí)14例，Ⅳ級(jí)16例；腫瘤直徑3～11 cm，平均（4.9±0.8） cm。3組臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

3組均行標(biāo)準(zhǔn)TMZ化療方案6個(gè)周期，研究中所用冰己抑瘤丸、漢防己及安慰劑均由本院藥劑科制備，服用方法均為2次/d，服TMZ開始連服21 d停7 d。①TMZ治療方案：治療28 d為1個(gè)周期，最初劑量為按體表面積口服一次150 mg/m2，1次/d，在28 d為1個(gè)治療周期內(nèi)連續(xù)服用5 d；如果治療周期內(nèi)，第22天與第29天（下一個(gè)周期的第1天）測得的絕對中性粒細(xì)胞數(shù)（ANC）≥1.5×109/L，血小板數(shù)為≥100×109/L時(shí)，下一個(gè)周期劑量為按體表面積口服一次200 mg/m2， 1次/d，在28 d的治療周期內(nèi)連續(xù)服用5 d；在治療期間，第22天（首次給藥后的21 d）或其后48 h內(nèi)檢測患者的全血數(shù)，之后每星期測定一次，直到測得的ANC≥1.5×109/L，血小板數(shù)≥100×109/L時(shí)，再進(jìn)行下一個(gè)周期的治療；在任意治療周期內(nèi)，如果測得的ANC<1.0×109/L或者血小板數(shù)<50×109/L時(shí)，下一個(gè)周期的劑量將減少50 mg/m2，但不得低于最低推薦劑量100 mg/m2。②冰己抑瘤丸制備：以漢防己超微顆粒4.5 g及冰片0.15 g制成膠囊，為單次用量。③漢防己：以漢防己超微顆粒4.5 g制成膠囊，為單次用量。④安慰劑：以面粉4.5 g制成膠囊，為單次用量。

1.3 療效評價(jià)

治療結(jié)束后采用RECIST 1.1標(biāo)準(zhǔn)對患者近期療效進(jìn)行評價(jià)，完全緩解（CR）：病灶疾病消失或腫瘤直徑<10 mm；部分緩解（PR）：病灶較治療前縮小體積>30%；疾病穩(wěn)定（SD）：患者病灶既無增長又不見消失；疾病進(jìn)展（PD）：病灶較治療前體積增長>20%。總有效（RR）率=（CR+PR）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4 評價(jià)方法

①化療敏感性：采用影像學(xué)方法根據(jù)患者治療前后腫瘤大小、病灶密度、瘤體血供情況進(jìn)行評定。腫瘤直徑較之前顯著下降>50%，病灶密度顯著減少，瘤體血供水平下降則為敏感。②P21蛋白、VEGF水平：采用ELISA法測定兩組患者血清P21蛋白、VEGF水平。P21蛋白試劑盒由上海基免生物技術(shù)有限公司提供，VEGF試劑盒由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供。③毒副反應(yīng)：包括惡心嘔吐、骨髓抑制、腹瀉、口腔黏膜炎等。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t法，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組臨床總有效率的對比

A、B組總有效率顯著高于C組，A組總有效率高于B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

2.2 3組化療敏感率及毒副反應(yīng)發(fā)生率的對比

A組化療敏感率高于B、C組（P<0.05），毒副反應(yīng)發(fā)生率低于B、C組（P<0.05）（表2）。

2.3 3組治療前后P21、VEGF表達(dá)水平的對比

A組治療后P21、VEGF表達(dá)水平顯著低于B、C組（P<0.05）（表3）。

3 討論

腦膠質(zhì)瘤常使用烷化劑進(jìn)行治療，傳統(tǒng)烷化劑副作用大，新型烷化劑TMZ毒副作用小，已成為治療膠質(zhì)瘤的有效藥物之一[6-7]。TMZ不直接作用于腫瘤組織，在生理pH下，經(jīng)非酶途徑自發(fā)快速轉(zhuǎn)化為活性化合物。TMZ細(xì)胞毒性作用主要是通過對DNA鳥嘌呤的甲基化作用[8]。臨床實(shí)踐表明膠質(zhì)瘤術(shù)后化療的臨床效果仍難以遏制腫瘤生長，其原因與膠質(zhì)瘤常發(fā)生耐藥機(jī)制有關(guān)[9]。增加腦膠質(zhì)瘤化療敏感性對提高患者治療效果，促進(jìn)患者預(yù)后具有重要意義。

近年研究發(fā)現(xiàn)，很多有效的逆轉(zhuǎn)劑都存在作用靶點(diǎn)單一、有較多不良反應(yīng)等缺點(diǎn)，大大限制了臨床應(yīng)用[10]。血-腦脊液屏障阻止了大多藥物進(jìn)入膠質(zhì)瘤，使藥物的選擇譜更為狹窄是導(dǎo)致腫瘤耐藥的重要機(jī)制[11]。近年研究發(fā)現(xiàn)中醫(yī)冰片能有效開放血-腦脊液屏障，口服冰片后可經(jīng)胃腸迅速吸收，5 min后即可透過血-腦脊液屏障進(jìn)入腦組織[12]。另有研究表明，冰片能明顯抑制細(xì)胞膜上P-gp的活性，從而使進(jìn)入化療的藥物被排除的概率降低[13]。本研究結(jié)果顯示，A組總有效率、化療敏感率高于B、C組（P<0.05），毒副反應(yīng)發(fā)生率低于B、C組（P<0.05），從而提示以冰片開放血-腦脊液屏障可有效增加漢防己在瘤體內(nèi)濃度，提高漢防己抑瘤效果，同時(shí)能增加化療藥物的敏感性，使機(jī)體抗腫瘤能力大大提高?？赡茉蛉缦拢罕阂至鐾枘苡行Ц纳蒲?腦脊液屏障結(jié)構(gòu)，增加吞飲小泡數(shù)量，促使基膜局部增厚、分層，減少血管壁外周膠質(zhì)膜數(shù)量生成，使腦組織間有完整的緊密連接[14]。

近年研究發(fā)現(xiàn)，P21癌蛋白與腫瘤的發(fā)生及進(jìn)展具有密切的關(guān)系，它是Ras基因突變后形成的蛋白，其高表達(dá)水平可作為細(xì)胞癌前病變的標(biāo)志[15]。VEGF可調(diào)節(jié)血管的生成及生長，并通過與受體結(jié)合促使血管及淋巴管生成。癌細(xì)胞的生長、轉(zhuǎn)移依賴新生血管的形成，而VEGF是最有效的促血管生長因子，因此通過增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，抑制P21癌蛋白及VEGF表達(dá)水平，對抑制腫瘤生長及遷移具有重要作用。本研究結(jié)果顯示，3組治療后P21、VEGF水平均低于治療前（P<0.05），A組療后P21、VEGF水平均低于B、C組，且B組低于C組（P<0.05），這提示冰己抑瘤丸治療腦膠質(zhì)瘤的作用機(jī)制主要通過抑制P21、VEGF水平，阻斷腫瘤血管生成，從而抑制腫瘤增生、黏附、侵襲及轉(zhuǎn)移等一系列生理過程抑制腫瘤的生長及轉(zhuǎn)移，因此能有效改善患者病情，提高患者生存質(zhì)量。

綜上所述，冰己抑瘤丸可增加膠質(zhì)瘤患者化療敏感性及治療效果，抑制P21、VEGF表達(dá)水平，促進(jìn)患者預(yù)后。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 王天曉，雷凱健.異漢防己堿增強(qiáng)多藥耐藥腫瘤細(xì)胞對阿霉素的敏感性及其機(jī)制[J].腫瘤防治研究，2009，36（1）：1-4.

[2] 徐萌，周蓓.漢防己甲素逆轉(zhuǎn)肺癌化療耐藥和凋亡抗性的實(shí)驗(yàn)研究[J].新中醫(yī)，2006，38（6）：90-91.

[3] Yu B，Ruan M，Dong X，et al.The mechanism of the opening of the blood-brain barrier by borneol：a pharmacodynamics and pharmacokinetics combination study[J].J Ethnopharmacol，2013，150（3）：1096-1108.

[4] McCarthy RC，Kosman DJ.Activation of C6 glioblastoma cell ceruloplasmin expression by neighboring human brain endothelia-derived interleukins in an in vitro blood-brain barrier model system[J].Cell Commun Signal，2014，12（1）：65-66.

[5] 陳寶安，王為，林國為，等.漢防己甲素抗腫瘤作用的研究進(jìn)展[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2001，17（2）：128-130.

[6] 顧建華，郭仁德，張志斌，等.漢防己甲素對人胰腺癌耐藥細(xì)胞株SW1990-GEM多藥耐藥性的逆轉(zhuǎn)機(jī)制[J].天津醫(yī)藥，2013，41（1）：48-51.

[7] 殷華芳，錢曉萍，劉寶瑞，等.漢防己甲素抗腫瘤機(jī)制研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2011，19（3）：582-584.

[8] Park MJ，Kim JY，Lee JS，et al.Emodin suppresses maintenance of stemness by augmenting proteosomal degradation of EGFR/EGFRv Ⅲ in glioma stem cells[J].Stem Cells Dev，2014，17（5）：96-98.

[9] 閆婧，王婷婷，錢曉萍，等.漢防己甲素抑制惡性腹腔積液中原代腫瘤細(xì)胞作用的觀察[J].中華腫瘤防治雜志，2008，15（24）：1868-1871.

[10] Hu J，Zhang Y，Ding S，et al.Dynamic observation on opening of the blood-brain barrier in the primary stage of severely scalded rabbits，a multimodal study[J].J Burn Care Res，2014，7（2）：78-79.

[11] 王振華，劉云會(huì)，馬騰，等.大鼠局灶性腦缺血再灌注早期血腦屏障通透性變化的研究[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，41（12）：1073-1076.

[12] 呂旭瀟，孫明江，孫鳳志，等.冰片促進(jìn)藥物透過血腦屏障的研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志，2012，37（7）：878-881.

[13] 倪彩霞，曾南，許福會(huì)，等.芳香開竅藥對腦缺血再灌注損傷大鼠血腦屏障影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中藥雜志，2011，36（18）：2562-2566.

[14] 王淑蘭，鄒艷萍.復(fù)方漢防己顆粒治療肝硬化160例[J].中國藥業(yè)，2014，23（16）：102-103.

[15] Banerjee S，Lu J，Cai Q，et al.EBNA3C augments Pim-1 mediated phosphorylation and degradation of p21 to promote B-cell proliferation[J].PLoS Pathog，2014，10（8）：78-79.

（收稿日期：2014-11-07 本文編輯：李亞聰）