萬(wàn)卉蕾

（河南省鄭州人民醫(yī)院醫(yī)務(wù)部，河南 鄭州 450003）

消銀解毒飲對(duì)銀屑病血熱證患者皮損組織中細(xì)胞因子及外周血中T細(xì)胞亞群含量影響

萬(wàn)卉蕾

（河南省鄭州人民醫(yī)院醫(yī)務(wù)部，河南 鄭州 450003）

目的分析消銀解毒飲治療對(duì)銀屑病血熱證患者皮損組織中細(xì)胞因子含量及外周血中T細(xì)胞亞群含量的影響。方法選擇在該院接受治療的銀屑病血熱證患者78例作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為對(duì)照組（接受常規(guī)內(nèi)科治療）、觀察組（在內(nèi)科治療基礎(chǔ)上加入消銀解毒飲治療），每組各39例。留取皮損組織標(biāo)本及外周靜脈血，檢測(cè)組織細(xì)胞因子誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶（iNOS）、低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）、熱休克蛋白-60（HSP60）、熱休克蛋白-90（HSP90）、白介素-2（IL-2）及白介素-6（IL-6）蛋白表達(dá)量，外周血T細(xì)胞亞群水平等差異。結(jié)果觀察組患者接受治療后的皮損組織中iNOS與HIF-1α蛋白表達(dá)量明顯低于對(duì)照組患者（P＜0.05）。觀察組患者接受治療后的皮損組織中的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。觀察組患者接受消銀解毒飲治療后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較對(duì)照組上升（P＜0.05）。結(jié)論消銀解毒飲應(yīng)用于銀屑病血熱證患者中，可以有效抑制皮損組織中的相關(guān)細(xì)胞因子蛋白表達(dá)，優(yōu)化T細(xì)胞亞群含量平衡，促進(jìn)病情康復(fù)。

銀屑?。幌y解毒飲；細(xì)胞因子；T細(xì)胞亞群

銀屑病是臨床多見皮膚病，治療難度大且易復(fù)發(fā)，是目前臨床治療的難點(diǎn)，給患者的身心均帶來巨大傷害。銀屑病的發(fā)生發(fā)展與機(jī)體各類細(xì)胞因子水平紊亂、T淋巴細(xì)胞失衡等均關(guān)系密切。目前中醫(yī)治療銀屑病獲得了較大的進(jìn)展，中醫(yī)理論認(rèn)為銀屑病病機(jī)為陽(yáng)盛內(nèi)熱、氣郁化火、氣血流竄且發(fā)于肌膚，治療應(yīng)以消毒散瘀、消風(fēng)止癢為主[1]。消銀解毒飲是目前用于銀屑病治療的一類中成藥物，主要成分為金銀花、水牛角片、牡丹皮及全蝎，可以優(yōu)化患者的全身微量因子水平及免疫水平[2]。本次研究主要分析消銀解毒飲治療對(duì)銀屑病血熱證患者皮損組織中細(xì)胞因子含量及外周血中T細(xì)胞亞群含量的影響，現(xiàn)匯報(bào)如下：

[28][32] 唐世平：《一個(gè)新的國(guó)際關(guān)系歸因理論——不確定性的維度及其認(rèn)知挑戰(zhàn)》，《國(guó)際安全研究》2014年第2期，第3-41、8頁(yè)。

1 資料與方法

1.1一般資料

選擇2012年5月-2014年1月在本院確診并接受治療的銀屑病血熱證患者78例作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①3月內(nèi)無系統(tǒng)性應(yīng)用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素等；②不伴有其他內(nèi)科疾病，各項(xiàng)常規(guī)及肝腎功能檢查指標(biāo)正常；③患者在了解研究過程后簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①關(guān)節(jié)炎型、紅皮病型、膿皰型銀屑?。虎?年內(nèi)妊娠、哺乳患者；③伴嚴(yán)重心肺系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤患者；④神經(jīng)或者精神病患者。根據(jù)接受的治療方式不同隨機(jī)分為觀察組及對(duì)照組，每組各39例。觀察組患者中，男性21例，女性18例；年齡23～58歲，平均（41.82±8.22）歲。對(duì)照組患者中，男性20例，女性19例；年齡22～56歲，平均（40.09±7.58）歲。兩組患者的基線資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，具有可比性。

1.2治療方法

對(duì)照組患者接受銀屑病常規(guī)治療，于患處外擦青鵬膏劑，每日2次。觀察組患者在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用消銀解毒飲（水牛角、金銀花、苦參及丹皮等），每日1劑，分早晚2次服用，以6周為1療程。

熱休克蛋白（heat-shock protein，HSP）是高度保守的“分子伴侶”，在細(xì)胞內(nèi)參與了多個(gè)復(fù)雜的功能活動(dòng)，HSP本身還可與受體結(jié)合發(fā)揮活化巨噬細(xì)胞、增強(qiáng)共刺激因子表達(dá)、促進(jìn)多種細(xì)胞因子釋放的作用[6]。HPSs正常情況下不表達(dá)于血液及細(xì)胞表面，當(dāng)病毒感染或者機(jī)械損傷發(fā)生是，其表達(dá)迅速上調(diào)并釋放到細(xì)胞外。銀屑病的疾病病理變化是角質(zhì)形成細(xì)胞的過度增殖，而角質(zhì)形成細(xì)胞的生長(zhǎng)動(dòng)力是皮損區(qū)具有生長(zhǎng)分化調(diào)控作用的細(xì)胞因子異常表達(dá)[7]。銀屑病發(fā)病過程中免疫細(xì)胞協(xié)同發(fā)揮作用，分泌IL-2、IL-6等多種細(xì)胞因子，其作用于不同細(xì)胞并相互誘生，形成自我維持的惡性炎性循環(huán)。上述研究檢測(cè)了患者病損組織中的HSPs、IL-2、IL-6表達(dá)情況，結(jié)果顯示：治療前兩組患者的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受治療后的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達(dá)水平低于對(duì)照組（P＜0.05），可能與消銀解毒飲的有效成分切斷了HSP及炎癥因子級(jí)聯(lián)遞呈的過程，減少T細(xì)胞進(jìn)一步活化產(chǎn)生的特異性細(xì)胞免疫相關(guān)。

病損活檢標(biāo)本采用全蛋白提取試劑盒進(jìn)行蛋白抽提，蛋白定量采用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒，12%聚丙烯酰胺凝膠電泳后等量樣品上樣，隨后轉(zhuǎn)膜至硝酸纖維膜。采用磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffered solution，PBS）洗膜后，5%脫脂牛奶中封閉孵育iNOS、HIF-1α、HIF-1α、HSP60、HSP90、IL-2及IL-6第一抗體。PBS洗膜后二抗稀釋并孵育1 h；洗膜后檢測(cè)采用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光試劑盒。以β-actin蛋白作為內(nèi)參，設(shè)置治療前對(duì)照組蛋白含量100，計(jì)算觀察組相應(yīng)指標(biāo)的蛋白表達(dá)含量相對(duì)值。

免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制是銀屑病的研究熱點(diǎn)，目前已經(jīng)有較多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)：銀屑病模型皮膚病損中，存在T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，直接提示銀屑病是一個(gè)由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病。關(guān)于T淋巴細(xì)胞在銀屑病發(fā)病中具體發(fā)揮的作用，有學(xué)者認(rèn)為是活化的T淋巴細(xì)胞遷移至病變部位，釋放大量細(xì)胞因子進(jìn)而引發(fā)角質(zhì)形成細(xì)胞的過度表達(dá)及異常分化[8]。上述研究對(duì)銀屑病患者接受治療前后的外周血T細(xì)胞亞群水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示治療前所有患者的外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平降低，而兩組患者組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示銀屑病患者Th細(xì)胞變少。在對(duì)患者進(jìn)行不同治療后再次檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞水平發(fā)現(xiàn)：觀察組患者的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平較對(duì)照組上升（P＜0.05），提示經(jīng)消銀解毒飲治療后患者的細(xì)胞免疫平衡得到一定程度恢復(fù)，是患者病情恢復(fù)的內(nèi)在原因之一。

抽取所有入組患者外周靜脈血5 ml，置于肝素抗凝管中2 h內(nèi)送檢，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其中T細(xì)胞亞群水平。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

[1]田海剛,胡帥,尤立平,等.涼血解毒湯對(duì)尋常型銀屑病血熱證患者外周血Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的影響[J].中日友好醫(yī)院學(xué)報(bào), 2014,28(4):212-215.

2 結(jié)果

2.1iNOS與HIF-1α蛋白表達(dá)

根據(jù)《重慶市河道管理范圍內(nèi)建設(shè)項(xiàng)目管理辦法（修訂）》的要求，市水行政主管部門負(fù)責(zé)4類項(xiàng)目的審查，其他涉河建設(shè)項(xiàng)目由各區(qū)縣水行政主管部門審批。各區(qū)縣水行政主管部門在進(jìn)行涉河建設(shè)項(xiàng)目相關(guān)審查時(shí)，應(yīng)當(dāng)按照程序?qū)徟?，不能越?jí)越權(quán)審批。

治療前兩組患者的皮損組織中iNOS與HIF-1α蛋白表達(dá)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受消銀解毒飲治療后的皮損組織中iNOS與HIF-1α蛋白表達(dá)量明顯低于對(duì)照組患者（P＜0.05），見圖1。

船舶設(shè)備不同于陸上應(yīng)用的相關(guān)車輛設(shè)備，其在設(shè)備安裝中如設(shè)備安裝質(zhì)量不合格，其在實(shí)際應(yīng)用中存在修復(fù)難度高，危險(xiǎn)性高，且造成的經(jīng)濟(jì)損失高的現(xiàn)象。其中具體分析安裝振動(dòng)，造成的安裝質(zhì)量不合格也為常見的一類故障原因。因此從設(shè)備的安裝效果方面分析，船舶設(shè)備在組件安裝中應(yīng)用減振措施，對(duì)于設(shè)備組件安裝質(zhì)量合格性的保障，發(fā)揮了重要的作用。規(guī)避了設(shè)備在安裝中因振動(dòng)等不良現(xiàn)象，造成的設(shè)備組件內(nèi)部損壞，安裝誤差等不良現(xiàn)象。

針對(duì)南通鵬越紡織有限公司從2004年成立的背景，歷來的發(fā)展軌跡和現(xiàn)狀，發(fā)展中所存在的問題等方面，筆者分批次對(duì)南通鵬越紡織有限公司進(jìn)行了客觀全面的調(diào)研和總結(jié)。其營(yíng)銷現(xiàn)狀主要表現(xiàn)如下：

2.2HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達(dá)

治療前兩組患者的皮損組織中HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受消銀解毒飲治療后的皮損組織中的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者的皮損組織中HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達(dá)水平比較（±s）

組別HSP60HSP90IL-2IL-6治療前治療前治療前治療前治療后觀察組99.28±0.3263.18±7.05101.72±4.1159.11±3.8698.64±1.7772.53±5.09103.28±4.0955.17±5.37對(duì)照組10091.27±6.2310090.87±5.7310092.53±3.0510091.61±4.93 t值0.177.290.267.180.366.390.259.83 P值0.3720.0130.2970.0150.4650.0190.3360.011治療后治療后治療后

2.3T細(xì)胞亞群水平

治療前兩組患者的血清T細(xì)胞亞群水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受消銀解毒飲治療后的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平較對(duì)照組上升（P＜0.05），見表2。

“對(duì)！因?yàn)槟阕叩较乱粭l路，下個(gè)路口，只有下個(gè)山頭，你才知道它下面的選擇是怎么樣，這里的風(fēng)景跟前面不一樣。有些機(jī)會(huì)是你以前想象不到的，但時(shí)間沒有變，工作還是沒有變?！本o湊的語(yǔ)速和敏捷的思維背后，我能感受到他的一絲疲憊。

銀屑病是臨床多見慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚病，角質(zhì)形成細(xì)胞過度增殖及血管生成是該病最主要的病理生理學(xué)特征。銀屑病頑固性強(qiáng)、治療難度大、極易復(fù)發(fā)，給患者的身心均帶來巨大困擾。中醫(yī)學(xué)中銀屑病的發(fā)病機(jī)制主要為患者體內(nèi)陰盛內(nèi)熱、復(fù)感邪氣，導(dǎo)致氣郁化火、熱盛生風(fēng)發(fā)于肌膚，治療應(yīng)以消毒散瘀、清血清熱及消風(fēng)止癢為主。消銀解毒飲主要成分為金銀花、重樓、牡丹皮、全蝎及赤芍等，在清熱解毒、涼血化瘀方面效果較好，可以用于銀屑病血熱證患者的治療[3]。

3 討論

目前各國(guó)學(xué)者研究或論證的能夠改變小行星軌道的技術(shù)手段包括動(dòng)能撞擊、質(zhì)量驅(qū)動(dòng)、拖船、太陽(yáng)光壓、引力牽引、激光燒蝕等[40-41]，這些技術(shù)手段通常需要幾年甚至幾十年的預(yù)警時(shí)間，僅適用于防御尺寸小、預(yù)警時(shí)間長(zhǎng)的PHAs。各種可能的近地小行星防御技術(shù)，如圖13所示。

3.做鮮文化節(jié)目。以文化為根，挖掘具有地方元素的文化特色，是節(jié)目樣式的立足基礎(chǔ)。依托地方豐富的文化資源，融入時(shí)代的元素，做出鮮活的文化節(jié)目，不僅可以擴(kuò)大文化的認(rèn)同度，還可以提升節(jié)目品味，給受眾以視覺和精神的雙重享受。如鄂州綜藝頻道開辦的《鄂州文化長(zhǎng)廊》欄目立足鄂州，全面展示鄂州歷史文化，有利于拓展市民的視野，豐富知識(shí)，增強(qiáng)歷史厚重感。

銀屑病患者角質(zhì)形成細(xì)胞過度增殖、表皮肥厚加上細(xì)胞數(shù)目增多，導(dǎo)致其對(duì)氧的需求進(jìn)一步增加，形成與局部氧供受損的矛盾。一氧化氮（nitrogen monoxidum，NO）是生物體內(nèi)的重要信使分子及效應(yīng)分子，由一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase，NOS）催化生成。其中誘導(dǎo)型NOS（iNOS）正常情況下在組織內(nèi)表達(dá)量最少，當(dāng)細(xì)胞受到免疫或者炎癥感染時(shí)，iNOS表達(dá)量顯著增多并促使NO生成[4]。已經(jīng)有研究證實(shí)NO在銀屑病的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，故iNOS的水平可以間接且敏感的反映疾病嚴(yán)重程度。低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）廣泛參與低氧誘導(dǎo)性應(yīng)答，在低氧條件下可以參與眾多基因的表達(dá)，iNOS就是HIF-1α誘導(dǎo)的靶基因之一[5]。本次研究檢測(cè)了病損標(biāo)本中的iNOS及HIF-1α表達(dá)情況，結(jié)果顯示：治療前兩組患者的皮損組織中iNOS與HIF-1α表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受消銀解毒飲治療后，皮損組織中iNOS與HIF-1α蛋白表達(dá)水平大幅低于對(duì)照組患者（P＜0.05），提示消銀解毒飲可以抑制病損皮膚組織中的NO產(chǎn)生，遏制皮膚血管中血流量增加導(dǎo)致的氧供增加，阻斷銀屑病進(jìn)一步進(jìn)展的途徑。

1.3皮損組織中細(xì)胞因子含量

1.4外周血T細(xì)胞亞群含量

綜上所述，消銀解毒飲應(yīng)用于銀屑病血熱證患者中，可以有效抑制皮損組織中的相關(guān)細(xì)胞因子蛋白表達(dá)，優(yōu)化T細(xì)胞亞群含量平衡，值得在日后臨床實(shí)踐中推廣應(yīng)用。

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 20.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

[2]夏夢(mèng),段行武,瞿幸,等.消銀解毒飲對(duì)銀屑病血熱證外周血淋巴細(xì)胞中IL-4、IFN-γ[J].背景中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2010,33(12):837-841.

翌日，小蟲陪姑媽把款交了，玉敏將那款鉆戒小心翼翼地包好?；ㄅ_玩笑說，玉敏這回真的做了個(gè)大單，提成厚厚的。玉敏說這次是特價(jià)，沒有提成哦。一店美女嘆息，說喝不上酒了。玉敏將鉆戒盒放進(jìn)一個(gè)漂亮的手提袋里，回家讓小蟲送給姑媽。小蟲送去時(shí)，姑媽在搓麻將，一邊抓牌一邊對(duì)小蟲說，你直接給你姑父送去吧，不然他要把我吃了。

[3]CZARNOWICKIT,MALAJIAND,SHEMERA,et al.Skin-homing and systemic T-cell subsets show higher activation in atopic dermatitis versuspsoriasis[J].J Allergy Clin Immunol,2015,136 (1):208-211.

[4]張凱輝,段行武.“消銀解毒飲”對(duì)銀屑病血熱證外周血淋巴細(xì)胞調(diào)控作用研究[J].世界中醫(yī)藥,2015,10(6):863-866.

[5]CAMPANATIA,ORCIANIM,CONSALESV,et al.Characterization and profiling of immunomodulatory genes in resident mesenchymal stem cells reflect the Th1-Th17/Th2 imbalance of psoriasis[J]. Arch Dermatol Res,2014,306(10):915-920.

[6]李勇堅(jiān),張桂英,肖嶸,等.HIF-1α與iNOS在銀屑病皮損中的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系[J].中南大學(xué)學(xué)報(bào),2010,35(9):952-956.

[7]JACKS SM,TAYLORBR,ROGERS RP 3RD,et al.Rapid deterioration in a patient with primary aggressive cutaneous epidermotropic CD8+cytotoxic T-cell('Berti')lymphoma after administration of adalimumab[J].J Am Acad Dermatol,2014,71(3): e86-e87.

[8]VOLPE E,PATTARINIL,MARTINEZ-CINGOLANIC,etal. Thymic stromal lymphopoietin links keratinocytes and dendritic cell-derived IL-23 in patients with psoriasis[J].J Allergy Clin Immunol,2014,134(2):373-381.

Assessment of Cytokinesin skin lesions and T cell subsets content in peripheral blood after Xiaoyinjiedu Drink on patients with blood-heat syndrome of Psoriasis

Hui-lei WAN
(Department of Medical Services,Zhengzhou People's Hospital,Zhengzhou, Henan 450003,P.R.China)

【Objective】To assess Cytokinesin skin lesions and T cell subsets content in peripheral blood after Xiaoyinjiedu Drink on patients with blood-heat syndrome of Psoriasis.【Methods】78 cases of Patients with bloodheat Syndrome of Psoriasis In our hospital were chose as subjects and randomly divided into control group(received conventional medical treatment),observation group(combined with Xiaoyinjiedu Drink treatment),with 39 cases in each group.Specimens from skin lesions and peripheral blood samples to detect tissue factor inducible nitric oxide synthase(iNOS),hypoxia-inducible factor 1α(HIF-1α),heat shock protein-60(HSP60),heat shockprotein-90 (HSP90),interleukin-2(IL-2),interleukin-6(IL-6)protein expression,peripheral blood T cell subsets level.【Results】Observation group patients'iNOS and HIF-1α protein expression after treatment were significantly lower than control group patients(P＜0.05).Observation group patients'HSP60,HSP90,IL-2 and IL-6 protein expression levels were significantly lower than control group(P＜0.05).Observation group patients'CD3+,CD4+,CD4+/CD8+levels after treatment were higher than control group patients(P＜0.05).【Conclusion】Psoriasis patients with Xiaoyinjiedu Drink treatment,can effectively suppress the expression of cytokines in skin lesions,optimize T cell subsets content balance,promote disease recovery

Psoriasis;Xiaoyinjiedu Drink;Cytokines;T cell subsets

R758.63

B

1005-8982（2015）28-0062-04

2015-02-21