杜 洋

（江蘇省徐州醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 徐州 221003）

侵襲性真菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷

杜 洋

（江蘇省徐州醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 徐州 221003）

目的探討醫(yī)院侵襲性真菌感染的菌株分布特點(diǎn)。方法收集2012年1月至2013年12月，我院住院及門診送檢標(biāo)本共計(jì)1000份，測(cè)定侵襲性真菌感染情況，并統(tǒng)計(jì)菌株種類分布、來(lái)源以及科室分布。結(jié)果 本組1000份標(biāo)本，共檢出真菌249株（24.9%），其中，假絲酵母菌屬占93.6%，絲狀真菌占6.4%；檢出真菌主要分離自痰液（77.5%）、尿液（6.4%）和糞便（5.2%）標(biāo)本；科室主要分布在呼吸科、心血管內(nèi)科、ICU等。結(jié)論醫(yī)院侵襲性真菌感染主要是假絲酵母菌感染，感染流行病學(xué)呈現(xiàn)變性趨勢(shì)，曲霉菌屬以及非白色假絲酵母菌感染率呈上升趨勢(shì)。

侵襲性真菌感染；醫(yī)院感染；病原菌

醫(yī)院感染是影響臨床治療方法選擇以及治療效果的主要因素，目前，醫(yī)院感染控制已成為臨床工作的重點(diǎn)內(nèi)容之一。近年來(lái)，隨著各類免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素以及廣譜抗菌藥物在臨床中的廣泛應(yīng)用，侵襲性真菌感染的發(fā)生率呈現(xiàn)逐漸上升趨勢(shì)，增加了臨床治療的難度［1］。本研究檢測(cè)分析了2012至2013年我院侵襲性真菌感染情況，并分析了其病原菌分布以及菌株來(lái)源，旨在為醫(yī)院感染控制以及臨床診療工作提供參考，報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源：收集2012年1月至2013年12月，我院住院及門診送檢標(biāo)本共計(jì)1000份，其中，611份來(lái)自男性，389份來(lái)自女性，年齡在2～86歲，平均為（48.5±4.2）歲，其中，603例（60.3%）≥60歲。主要標(biāo)本為痰液、尿液、糞便、血液、分泌物、咽拭子、引流液、胸腹水、膽汁、腦脊液，對(duì)于同一患者的同一標(biāo)本經(jīng)多次分離出相同菌株者，記錄為1株。

1.2儀器與試劑：檢測(cè)儀器均應(yīng)用恒星科技血培養(yǎng)檢測(cè)儀，科瑪嘉假絲酵母菌屬顯色培養(yǎng)基以及薩布羅培養(yǎng)基均選自法國(guó)生物梅里埃公司。

1.3方法

1.3.1涂片鏡檢：標(biāo)本均勻涂布在玻片上，滴加1滴10%的氫氧化鉀（KOH）溶液，然后蓋上蓋玻片，將其置于酒精燈火焰上進(jìn)行微加熱，觀察到標(biāo)本充分溶解以后，蓋上玻片，確保標(biāo)本透明。然后鏡檢觀察是否存在菌絲以及孢子等。如果標(biāo)本為陰道分泌物、痰液或者糞便時(shí)，應(yīng)觀察是否存在菌絲，如有菌絲時(shí)方可判定為真菌增殖而誘發(fā)疾病的狀態(tài)。

1.3.2細(xì)菌培養(yǎng)與分離鑒定：標(biāo)本接種在薩布羅培養(yǎng)基之上，并置于室溫或者37 ℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為24～48 h。如果待測(cè)菌株為假絲酵母菌屬，予以劃線接種在科瑪嘉假絲酵母菌屬顯色培養(yǎng)基之上，放置在35 ℃下進(jìn)行培養(yǎng)48 h。然后每隔24～48 h觀察菌落的染色情況。參照試劑說(shuō)明書提供的菌種鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行鑒定。

2　結(jié)　果

2.1真菌檢出結(jié)果：本組1000份標(biāo)本，共檢出真菌249株，檢出率為24.9%。其中，白色假絲酵母菌166株（66.7%），光滑假絲酵母菌24株（9.6%），葡萄牙假絲酵母菌4株（1.6%），克柔假絲酵母菌25株（10.0%），熱帶假絲酵母菌8株（3.2%），近平假絲酵母菌2株（0.8%），其他假絲酵母菌4株（1.6%），毛霉菌屬13株（5.2%），曲霉菌屬3株（1.2%）。假絲酵母菌屬占93.6%，絲狀真菌占6.4%。

2.2檢出真菌標(biāo)本來(lái)源：本組檢出真菌249株，其中，193株（77.5%）源自痰液，16株（6.4%）源自尿液，13株（5.2%）糞便，10株（4.0%）分泌物，9株（3.6%）咽拭子，3株（1.2%）血液，3株（1.2%）引流液，1株（0.4%）胸腹水，1株（0.42%）膽汁。

2.3檢出真菌標(biāo)本科室分布：本組檢出249株真菌，其中，105株（42.2%）來(lái)自呼吸科，31株（12.4%）心血管內(nèi)科，27株（10.8%）泌尿外科，12株（4.8%）ICU，11株（4.4%）內(nèi)分泌科，9株（3.67%）普外科，8株（3.2%）婦科，7株（2.8%）骨科，6株（2.4%）神經(jīng)內(nèi)科，6株（2.4%）腎內(nèi)科，5株（2.0%）消化內(nèi)科，5株（2.0%）神經(jīng)外科，4株（1.6%）胸外科，3株（1.2%）血液科，3株（1.2%）兒科，7株（2.8%）其他科室。

3　討　論

侵襲性真菌感染主要是指致病性真菌侵犯機(jī)體皮下組織、黏膜以及內(nèi)臟所致真菌感染。近年來(lái)，侵襲性真菌感染率呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)，且隨著經(jīng)驗(yàn)性抗白色假絲酵母菌用藥的增加，侵襲性真菌感染出現(xiàn)了流行病學(xué)性狀變化，這給醫(yī)院感染控制以及臨床治療帶來(lái)了較大的困難。

從本研究結(jié)果顯示，1000份標(biāo)本中，侵襲性真菌檢出率達(dá)24.9%。真菌分離情況顯示，菌株主要為假絲酵母菌屬，占93.6%，位于前3位的菌株為白色假絲酵母菌（66.7%）、光滑假絲酵母菌（9.6%）以及克柔假絲酵母菌（10.0%），以白色假絲酵母菌占主要地位，這與國(guó)內(nèi)外大部分研究報(bào)道一致。其中，光滑假絲酵母菌是近年來(lái)新興的一種條件致病菌。駱雪萍等［2］研究資料顯示，由光滑假絲酵母菌所引起的假絲酵母菌菌血癥的發(fā)生率呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)。由此可見，醫(yī)院侵襲性真菌感染仍然以假絲酵母菌，尤其是白色假絲酵母菌為主，而其他假絲酵母菌，例如光滑假絲酵母菌以及克柔假絲酵母菌等表現(xiàn)出上升趨勢(shì)。這與臨床預(yù)防性地應(yīng)用唑類抗真菌藥物，例如氟康唑等，導(dǎo)致白色假絲酵母菌以及熱帶假絲酵母菌的感染率降低，進(jìn)而引起光滑假絲酵母菌以及克柔假絲酵母菌感染率升高。此外，毛霉菌屬（5.2%）以及曲霉菌屬（1.2%）的檢出率相比既往報(bào)道有所增加，而由毛霉菌屬所致肺部感染具有病情危重、發(fā)展迅速、臨床預(yù)后差以及病死率高等特點(diǎn)，應(yīng)引起高度重視。

從菌株標(biāo)本來(lái)源統(tǒng)計(jì)顯示看，痰液標(biāo)本中真菌的檢出率占77.5%，占首要地位，但仍較既往報(bào)道有降低趨勢(shì)。而尿液、糞便、分泌物以及咽拭子等的檢出率則有所增加。由此可見，侵襲性真菌感染部位也發(fā)生了多元化變化。同時(shí)，血液標(biāo)本的侵襲性真菌感染率占1.2%，相比于王鎮(zhèn)山等［3］報(bào)道有所升高，提示真菌血癥發(fā)生率有增高趨勢(shì)。但腦脊液標(biāo)本中并未分離出侵襲性真菌，可能是由于腦脊液中的真菌含量比較少，加之培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)等所致。從菌株分布科室發(fā)現(xiàn)，侵襲性真菌多分布在呼吸科、心血管內(nèi)科、ICU等科室。主要是由于這些科室的患者多存在嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病，或者大量應(yīng)用抗菌藥物、合并低蛋白血癥、應(yīng)用激素治療、化療以及侵襲性操作等，導(dǎo)致體內(nèi)正常菌群失調(diào)以及屏障功能被破壞等，從而引起真菌移位、定植以及感染等。此外，因真菌感染多具有多樣性、復(fù)雜性的臨床表現(xiàn)，極易被原發(fā)基礎(chǔ)疾病的表現(xiàn)所掩蓋，往往導(dǎo)致誤診、漏診等，延誤臨床治療。故在臨床病原菌檢測(cè)中，應(yīng)多次進(jìn)行真菌培養(yǎng)，全面加強(qiáng)院內(nèi)真菌感染監(jiān)測(cè)，合理地予以預(yù)防性抗菌藥物治療，及早根據(jù)菌株培養(yǎng)鑒定結(jié)果以及藥敏結(jié)果合理選擇藥物控制感染。

綜上所述，侵襲性真菌感染的菌株構(gòu)成具有多樣化，科室分布廣泛，早期積極開展病原學(xué)檢測(cè)，及早診斷和治療對(duì)于控制侵襲性真菌感染具有重要意義。

［1］孫獻(xiàn)梅，任香娣.NICU早產(chǎn)兒侵襲性真菌感染情況調(diào)查與防控對(duì)策［J］.護(hù)士進(jìn)修雜志，2013，28（9）：820-822.

［2］駱雪萍.重癥監(jiān)護(hù)病房侵襲性真菌感染特點(diǎn)及診斷［J］.重慶醫(yī)學(xué)，2010，39（17）：2389-2391.

［3］王鎮(zhèn)山.侵襲性肺真菌病的病原學(xué)及其流行趨勢(shì)［J］.臨床內(nèi)科雜志，2008，25（4）：224-229.

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1671-8194（2015）11-0062-02