佟 麗

(河北省豐寧縣土城鎮(zhèn)人民政府,河北豐寧 068350)

生物堿提取方法及作用研究進(jìn)展

佟 麗

(河北省豐寧縣土城鎮(zhèn)人民政府,河北豐寧 068350)

1 生物堿的提取方法

1.1 超聲波提取

超聲波提取法一般作為生物堿的輔助提取法，它的3個理論依據(jù)是超聲波熱學(xué)機(jī)理、超聲波機(jī)械機(jī)制和空化作用。在超聲場中，物料吸收聲能，溫度升高，有效成分溶解加速，超聲空化產(chǎn)生的瞬間高壓造成生物細(xì)胞壁及整個生物體破裂，同時，超聲波產(chǎn)生的振動作用加強(qiáng)了胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散及溶解。被浸提的物質(zhì)在被破碎瞬間，生物活性保持不變，同時，能提高破碎速度和提取率。王忠華等分別采用超聲波輔助提取法和搖床振蕩（浸提）法提取浙貝母生物堿，經(jīng)比較盡管超聲波法提取的生物堿獲得率與傳統(tǒng)的搖床浸提法相比差異不顯著，但該方法更快速，且成本低。

1.2 超聲-微波協(xié)同萃取技術(shù)

超聲-微波協(xié)同萃取技術(shù)及裝置是將直接超聲振動與開放式微波兩種作用方式相結(jié)合，充分利用超聲波振動的空穴作用以及微波的高能作用，克服了常規(guī)超聲波和微波萃取之不足。具有速度快、能耗小、溶劑用量小，回收率高等優(yōu)點(diǎn)外，還有利于極性和熱不穩(wěn)定性組分的萃取，避免長時間高溫高壓條件下萃取或合成反應(yīng)引起的分解，從而不破壞所萃取的有機(jī)物分子的結(jié)構(gòu)。

1.3 超臨界流體萃取

超臨界萃取技術(shù)是利用超臨界流體所具有的特殊溶解能力，進(jìn)行天然植物有效成分提取，超臨界流體在具有較高的溶解能力的同時，還具有較高的傳質(zhì)速率、較好的流動性能和很快到達(dá)平衡的能力。其原理是利用壓力和溫度對超臨界流體溶解能力的影響，而實(shí)現(xiàn)對極性大小、沸點(diǎn)高低和分子量大小不同的組分間的選擇性分離。而且，由于溫度和壓力在臨界點(diǎn)附近的微小變化能夠引起溶解能力的顯著變化，這使得超臨界流體具有良好的可調(diào)節(jié)性和選擇性。趙宋亮等利用超臨界CO2流體萃取菊三七中的總生物堿，提取率為索氏提取法的1.5倍，耗時卻僅為常規(guī)法的1/2。

2 生物堿的免疫調(diào)節(jié)作用

2.1 對淋巴細(xì)胞的影響

童鯤等通過巖黃連總生物堿對小鼠免疫功能的影響的研究得出巖黃連總生物堿增強(qiáng)T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2和IFN-的水平。李建國等通過建立DNFB誘發(fā)的小鼠ACD模型，以不同劑量的氧化苦參堿對小鼠腹腔進(jìn)行注射。腹腔注射氧化苦參堿能明顯提高小鼠外周血中CD4+、CD25+T細(xì)胞的數(shù)量，即氧化苦參堿對免疫系統(tǒng)的影響呈雙向作用，氧化苦參堿是一種雙向免疫調(diào)節(jié)劑。伍斌等研究氧化苦參堿（OMT）對淋巴細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tr）數(shù)量的影響，結(jié)果表明，OMT對小鼠淋巴結(jié)T細(xì)胞增殖呈雙向作用；腹腔注射OMT能明顯提高小鼠外周血中CD4+、CD25+T細(xì)胞數(shù)量；提示：OMT是一種雙向免疫調(diào)節(jié)劑。

2.2 對免疫器官的影響

動物的免疫器官主要是脾臟和胸腺，家禽還包括法氏囊。免疫器官的臟器系數(shù)是衡量機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。有研究表明，甘肅棘豆生物堿部位能顯著增強(qiáng)KM小鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)及脾細(xì)胞增值率。

2.3 對細(xì)胞因子的影響

細(xì)胞因子（Cytkoine，CK）是由活化的免疫細(xì)胞和某些基質(zhì)細(xì)胞分泌的，介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫、炎癥反應(yīng)的小分子多肽。細(xì)胞因子具有多種調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答功能，其種類繁多，目前，廣泛研究的細(xì)胞因子達(dá)60多種，包括白細(xì)胞介素（IL）、集落刺激因子（CFS）、干擾素（IFN）、腫瘤壞死因子（TNF）、生長因子、趨化性因子等。通過研究白毛藤生物堿對小鼠脾臟細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響，采用RT-PRC技術(shù)檢測了IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α、mRNA表達(dá)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明白毛藤生物堿能提高IL-2、IL-12、TNF-α及IFN-γmNRA表達(dá)水平。

3 結(jié)語

生物堿的提取方法很多，以上只綜述了其中的幾種。一種好的提取方法不僅要求有較高的回收率，而且要保證該提取物的生物活性不發(fā)生變化。通過以上綜述可知應(yīng)用半仿生提取生物堿的報道還較少，但是，該方法較為符合藥物的在胃腸吸收、代謝，從而使提取的生物堿能發(fā)揮最大的藥效。超聲波提取法通過瞬時超聲波破碎，被浸提的物質(zhì)在被破碎瞬間，生物活性保持不變。還有就是酶提取法，該方法反應(yīng)條件溫和，效率高，也是生物堿提取的首選之一。生物堿的提取必須做到標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化，由此才能為研究其作用機(jī)制及結(jié)構(gòu)與功能之間關(guān)系提供可靠的保障。

生物堿是一種新型的免疫調(diào)節(jié)劑，可作用于T 細(xì)胞、B 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等主要免疫活性細(xì)胞，調(diào)節(jié)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能。從所報道的研究結(jié)果來看，不同的生物堿對免疫調(diào)節(jié)不盡相同，同一生物堿對免疫細(xì)胞的影響也不同，后者說明有些生物堿是雙向免疫調(diào)節(jié)劑。近年來，國內(nèi)外學(xué)者多從免疫增強(qiáng)效應(yīng)方面對中藥提取物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，從而忽視了其免疫抑制效應(yīng)，隨著自身免疫病不斷增多，就要求開發(fā)高效低毒的中藥免疫抑制劑。所以生物堿的雙向免疫調(diào)節(jié)顯示了優(yōu)勢，將為此提供可能。