鄭風(fēng)敏 李 彬

河南省鶴壁市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 鶴壁 458030

HPLC法測(cè)定注射用頭孢曲松鈉中頭孢曲松的含量

鄭風(fēng)敏 李 彬

河南省鶴壁市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 鶴壁 458030

目的：建立注射用頭孢曲松鈉中頭孢曲松的含量測(cè)定方法。方法：HPLC法；C18柱（4.6×150mm，5μm）；流動(dòng)相：0.02mol／l正辛胺溶液－乙腈（73∶27）；流速：1.0 ml／min；檢測(cè)波長：254nm；柱溫：20℃；進(jìn)樣量：20μl。結(jié)果：頭孢曲松在濃度91.9～459.6μg／ml與峰面積有良好的線性關(guān)系（r＝0.9996）。結(jié)論：該法簡單，專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，可用于對(duì)注射用頭孢曲松鈉的質(zhì)量控制。

HPLC；頭孢曲松；含量測(cè)定

頭孢曲松為第三代頭孢菌素，對(duì)革蘭陰性菌包括腸桿菌類、銅綠假單胞菌及厭氧菌有較強(qiáng)的作用，用于敏感致病菌所致的下呼吸道感染、尿路、膽道感染，以及腹腔感染、皮膚軟組織感染、骨和關(guān)節(jié)感染、敗血癥、腦膜炎等感染預(yù)防。單劑可治療單純性淋?。?］。本文采用HPLC法測(cè)定注射用頭孢曲松鈉中頭孢曲松的含量，準(zhǔn)確可靠，簡便。同時(shí)通過HPLC色譜圖，可以判斷注射用頭孢曲松鈉的質(zhì)量控制水平，為臨床用藥提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters高效液相色譜儀（Waters 2695 HPLC PumPWaters；2998二級(jí)管陣列檢測(cè)器；Epower化學(xué)工作站）；賽多利斯CPA225D電子分析天平。

1.2 試藥 頭孢曲松對(duì)照品（批號(hào)：130480－200903，中國藥品生物制品檢定所）。注射用頭孢曲松鈉 （批號(hào)：1212061、1301182，輔仁藥業(yè)集團(tuán)有限公司）。水為純化水；乙腈為色譜純；正辛胺為化學(xué)純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件［2］色譜柱：Waters Sunfire C18柱（4.6× 150mm，5μm）；流動(dòng)相：0.02mol／l正辛胺溶液－乙腈（73：27），并用磷酸調(diào)節(jié)pH值6.5；流速：1.0 ml／min；檢測(cè)波長：254nm；柱溫20℃；進(jìn)樣量20μl。

2.2 溶液的制備［2］

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱定頭孢曲松對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成0.22mg／ml的對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密稱取供試品約22mg，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成0.22mg／m l的供試品溶液。

2.3 線性關(guān)系的考察 精密稱取對(duì)照品26.32mg，置100m l容量瓶中，加流動(dòng)相定量稀釋至刻度，搖勻，作為儲(chǔ)備液。分別精密吸取儲(chǔ)備液2.0、3.0、5.0、10.0m l，分別置10、10、10、25m l量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。分別吸取配置好的四種溶液及儲(chǔ)備液在上述色譜條件下準(zhǔn)確進(jìn)樣20μl測(cè)定，以各溶液的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸，其回歸方程為Y＝56941X+263729，r＝0.9996，頭孢曲松在濃度91.9μg／m l～459.6μg／m l與峰面積有良好的線性關(guān)系。

2.4 精密度試驗(yàn) 精密稱取對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1m l中約含0.22mg的對(duì)照品溶液，準(zhǔn)確進(jìn)樣20μl，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄色譜圖，計(jì)算頭孢曲松峰面積的RSD為0.4%。結(jié)果表明：本實(shí)驗(yàn)進(jìn)樣精密度良好。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取“2.2.2項(xiàng)”下供試品溶液，按上述色譜條件，準(zhǔn)確進(jìn)樣20μl，依法平行測(cè)定6次，以峰面積計(jì)算，RSD＝0.2%。結(jié)果表明：該方法重現(xiàn)性好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取同一供試品溶液，于0、2、4、6h分別準(zhǔn)確進(jìn)樣20μl，在上述色譜條件下，記錄色譜圖，計(jì)算頭孢唑林峰面積的RSD為0.1%。結(jié)果表明：注射用頭孢曲松鈉在6h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱定已知含量的供試品約11mg，精密稱定一定量的頭孢曲松對(duì)照品，按“2.2.2項(xiàng)”下的方法制成供試品溶液，測(cè)定其峰面積，計(jì)算供試品的平均回收率為99.8%，RSD為1.2%。結(jié)果見表1。

2.8 含量測(cè)定 取兩批供試品，精密稱定，按“2.2.2項(xiàng)”下的方法配置成供試品溶液，在上述色譜條件下進(jìn)行含量測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。結(jié)果見表2。

3 討論

頭孢曲松鈉易溶于水，對(duì)其檢測(cè)選擇以水相為主的流動(dòng)相，但在其中加入微量的掃尾劑 （正辛胺），可防止樣品在測(cè)定過程中產(chǎn)生拖尾現(xiàn)象。加入磷酸可以形成磷酸鹽緩沖液，使流動(dòng)相緩沖能力更強(qiáng)，在測(cè)定過程中可以使頭孢曲松鈉達(dá)到更好的分離純化效果，使測(cè)定結(jié)果更準(zhǔn)確，因此選用磷酸調(diào)節(jié)流動(dòng)相pH值。

本實(shí)驗(yàn)建立的HPLC法測(cè)定頭孢曲松含量的方法，該方法準(zhǔn)確，快速，重現(xiàn)性良好，從而為實(shí)際工作中對(duì)藥品質(zhì)量的控制提供科學(xué)的依據(jù)。

［1］劉俊田.藥理學(xué)［M］.鄭州：鄭州大學(xué)出版社，2004：382－383.

［2］國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典 （二部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：181－183.

Determ ination of ceftriaxone sodium for injection by HPLC

ZHENG Feng-min LI-Bin
Hebi Institute for Food and Drug Control，Hebi458030，China

To estabilish amethod for the determination of ceftriaxone sodium for injection.M ethod HPLCC18（4.6×150mm，5μm）column was used with n－octylamine（0.02mol／l）and acetonitrile（73：27）.The flow rate was 1.0 ml／min.The detection wave length was254nm.The column temperaturewas at20℃，and the inject volumewas20μl.Results The linearities of cefazolin sodium were obtained separately over the rang of were 91.9μg／ml～459.6μg／ml（r＝0.9996）。Conclusion This Method is simple，accurate，and could be adopted for the quality control of this durg.

ceftriaxone sodium；determination

R284.1

A

1007－8517（2015）11－0010－02

2015.03.12）