肖禾，王萌，崔麗潔，開國銀，潘靜嫻

(上海師范大學(xué)生命與環(huán)境學(xué)院植物種質(zhì)資源開發(fā)協(xié)同創(chuàng)新中心，上海200234)

24份普通白菜遺傳多樣性的形態(tài)特征和RAPD分析

肖禾，王萌，崔麗潔，開國銀，潘靜嫻

(上海師范大學(xué)生命與環(huán)境學(xué)院植物種質(zhì)資源開發(fā)協(xié)同創(chuàng)新中心，上海200234)

利用形態(tài)特征與RAPD分析技術(shù)，分析了國內(nèi)不同地區(qū)的24份普通白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis(L.)Makino var.communis Tsee et Lee.)種質(zhì)的遺傳多樣性.結(jié)果表明，13個形態(tài)學(xué)性狀的變異系數(shù)為12.4%～69.9%，其中葉柄變異最大，子葉變異最小.24份普通白菜材料在形態(tài)學(xué)聚類的距離5處聚為4類.利用篩選出的15條RAPD引物從24份普通白菜材料中共擴增出113條帶，其中多態(tài)性條帶83條，多態(tài)率73.4%，平均每條引物條帶7.53條、多態(tài)性條帶5.53條.RAPD數(shù)據(jù)聚類在相似系數(shù)0.77處，分為8類，與形態(tài)聚類間有重疊和細分.以形態(tài)聚類4個類別計算的Nei＇s基因多樣性指標H和Shannon信息指數(shù)I，均為第Ⅳ大類＞第Ⅰ大類＞第Ⅲ大類＞第Ⅱ大類，第Ⅳ類的H和I分別為0.2395和0.3523.而不同地區(qū)則以江淮地區(qū)的Nei＇s基因多樣性H和Shannon信息指數(shù)I最高，分別為0.2076和0.3098.這些結(jié)果與普通白菜種質(zhì)資源多樣性特征以及地區(qū)分布相吻合.

普通白菜；形態(tài)特征；RAPD分析；聚類分析

普通白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis(L.)Makino var.communis Tsee et Lee.)為十字花科蕓薹屬蕓薹種小白菜(不結(jié)球白菜)亞種的一個主要變種［1-2］，屬異花授粉作物.授粉方式多樣，變種內(nèi)、種內(nèi)和種間雜交廣泛，因此，經(jīng)長期選擇，就產(chǎn)生了復(fù)雜變異，形成了豐富的品種資源，表現(xiàn)為形態(tài)、習性、生態(tài)適應(yīng)性上的差異類型［3-4］；此外，不同生態(tài)環(huán)境下栽培，也可形成不同的群體［5］.為此，不結(jié)球白菜分類一直存在著廣泛的爭議，也使得品種繁多的普通白菜種質(zhì)資源的收集和整理存在一定難度，尤其是同種異名和同名異種的種質(zhì)更加難以確定其類別和地位.因此，進行普通白菜種質(zhì)資源的鑒定對種質(zhì)的收集和保存意義重大.

種質(zhì)鑒定方法有形態(tài)學(xué)方法和分子標記技術(shù)兩種類型［6-9］，形態(tài)學(xué)方法易受栽培技術(shù)和季節(jié)變化等影響，準確性不高；分子標記技術(shù)直接以DNA形式表現(xiàn)，有穩(wěn)定、快速、準確的特點［9-10］，已被廣泛用于紫珠［11］、溫郁金［12］、菠蘿［13］、油茶［14］、芹菜［15］、不結(jié)球白菜［16］等不同植物的種質(zhì)鑒定、遺傳多樣性分析和圖譜構(gòu)建.目前在不結(jié)球白菜上進行分子標記取得了一定進展［16-18］，侯喜林［19-21］等對我國南方廣泛種植的普通白菜、塌菜等不少品種進行了親緣關(guān)系分析.宋廷宇［22］等對瀕于滅絕的薹菜進行了RAPD和SSR分析，以保護正在流失的種質(zhì)資源.盡管前人已做了不少工作，但目前市場上品種混雜現(xiàn)象嚴重，尤其是同名異種或異種同名現(xiàn)象非常普遍，因此進行品種鑒定以理清品種間的親緣關(guān)系顯得十分必要.本研究結(jié)合形態(tài)學(xué)性狀和RAPD分子標記，對產(chǎn)自我國不同地區(qū)的不同類型的24份普通白菜種質(zhì)，進行變種內(nèi)親緣關(guān)系的分析，以期為普通白菜種質(zhì)資源收集、保存、利用提供依據(jù)，也為已建成的普通白菜種質(zhì)資源庫［23］的修訂以及正在創(chuàng)建的不結(jié)球白菜種質(zhì)數(shù)據(jù)庫提供正確信息.

1 材料與方法

1.1 植物材料

參試的普通白菜材料共計24份(表1)，分別標記為1～24，全部為市場購買.品種選擇考慮了產(chǎn)地、形態(tài)特征、播期等因素，盡量在適宜播期內(nèi)，品種的分布范圍盡可能代表普通白菜在國內(nèi)的分布區(qū)域，形態(tài)上要將各種特征包含在內(nèi)，如株型、葉色等.種子產(chǎn)地包括華東、華北、西北、華中、華南等地區(qū)的13個省份；株高有矮箕、中梗和高梗之分；葉色有墨綠、綠、淺綠類型；葉面有光滑、皺縮和帶毛類型.試驗分2012年和2013年2個年度進行，其中2012年為預(yù)備實驗.播種時間分別為2012年10月8日、2013年10月11日，露地穴播，穴距20 cm×15 cm，二葉一心期定植.小區(qū)面積9 m2，重復(fù)2次.正常田間管理.

表1 用于RAPD分析的普通白菜名稱及產(chǎn)地

1.2 試驗方法

1.2.1 形態(tài)特征調(diào)查

在正常收獲期(2013年為1月10日，2014年為1月14日)，調(diào)查24個品種的葉長、葉柄長、葉寬、葉柄寬、葉厚、葉柄厚、冠幅、株高、蓮座葉數(shù)等數(shù)量性狀和株型、葉形、葉緣、葉面、葉色、葉柄色等質(zhì)量性狀.每個小區(qū)取5株代表性的植株調(diào)查，重復(fù)2次.調(diào)查標準參照［3］進行.數(shù)量性狀數(shù)據(jù)按2年平均，質(zhì)量性狀取2年相同的表現(xiàn).

1.2.2 RAPD分子標記操作

1.2.2 .1DNA提取

采用CTAB法提取.所用嫩葉取自2013年的田間植株，完成品種田間形態(tài)調(diào)查后，每份材料選取1～2 g嫩葉，放入冰盒中，迅速帶回實驗室，置冰箱中保存，備用.

取適量(比指甲蓋稍大)葉片放入EP管，加適量石英砂，再加300 μL PVP+CTAB的混合液，研磨到看不見組織后，又加300 μL上述混合液研磨.在通風櫥中加入6 μL巰基乙醇后，65℃水浴1 h (每隔15～20 min搖1次).水浴后，加600 μL苯酚-氯仿(1∶1)混合液，4℃12000 r/min離心20 min，分層.取上清液于EP管，輕搖，相同條件下離心.上清液移入約1 mL無水乙醇的EP管中，混勻，-20℃冰箱處理30～60 min，取出，4℃離心.倒去上清液，加600 μL 75%乙醇，4℃12000 r/min離心10 min.去掉上清液，殘液留到紙上，45～50℃烘干，10～15 min，無乙醇味道止.殘渣加40 μL無菌水溶解，再加0.8 μL的RNAse，37℃水浴30 min，獲得DNA提取液，-20℃冰箱保存.電泳和紫外分光光度計檢測DNA的純度和濃度.

1.2.2 .2PCR擴增

本試驗所用120條引物和生化試劑全部購自上海生物工程有限公司，引物按［18］的方法篩選，PCR體系和程序采用史公軍等［19］的方法.PCR反應(yīng)體系25 μL，10×buffer 2.5 μL，25 mmol/L MgCl22.0 μL，2.5 mmol/L dNTP 1.9 μL，60 ng DNA模板1 μL，不足用ddH2O補足.PCR循環(huán)程序為：94℃變性2 min，37℃復(fù)性30 s，72℃延伸50 s，2個循環(huán)；94℃變性45 s，37℃復(fù)性30 s，72℃延伸50 s，18個循環(huán)；72℃延伸5 min，94℃變性45 s，37℃復(fù)性30 s，72℃延伸50 s，25個循環(huán)；72℃延伸5 min，4℃保存.擴增結(jié)束后，取產(chǎn)物10 μL，加溴酚藍指示劑，混勻后上樣電泳，1xTBE電泳緩沖液，1.6%瓊脂糖凝膠，EB1 μg/ mL，在凝膠60℃左右加入.電壓100 V，時間2 h.電泳結(jié)束后，取出膠，在FR-200紫外可見圖像分析儀中觀察、拍照和記錄.

1.3 數(shù)據(jù)處理

1.3.1 形態(tài)數(shù)據(jù)

將田間采集的15項形態(tài)性狀數(shù)據(jù)分成2種，其中數(shù)量性狀計算實測值的平均值，質(zhì)量性狀按［6］進行賦值處理和數(shù)量化，并用SPSS 19.0軟件對數(shù)量化的性狀進行多樣性分析和Q型聚類分析.

1.3.2 RAPD數(shù)據(jù)

統(tǒng)計分子量在200～3000 bp DNA的條帶，電泳圖譜上選擇清晰、穩(wěn)定、重復(fù)性好的條帶記為1，相同位置缺失的記為“0”，將數(shù)據(jù)輸入計算機，形成0/1矩陣.利用軟件NTSYSpc2.1e版分析0/1矩陣，SIMQUAL程序計算相似系數(shù)，UPGMA法聚類分析，生成樹狀圖［10］.

2 結(jié)果分析

2.1 形態(tài)特征分析

24份普通白菜品種的13份數(shù)量性狀多樣性分析顯示(表2)，數(shù)量性狀的變異系數(shù)為12.4%～69.9%，性狀多樣性表現(xiàn)較為豐富.變異由高到低的排列為葉柄長、單株重、葉長、子葉凹槽深、葉寬、葉柄寬、株幅、腰粗、菜頭粗、蓮座葉數(shù)、子葉寬、子葉長.其中葉柄長的變異系數(shù)最大，達69.9%，說明該性狀變化較大，田間表現(xiàn)也支持了這一結(jié)果.性狀變異最小的為子葉長和寬，說明各子葉期品種差異最小.

圖1 24份普通白菜種質(zhì)資源形態(tài)性狀的聚類分析樹狀圖

利用表2數(shù)據(jù)生成的Q型聚類分析樹狀圖(圖1)表明，在距離5處，24個品種分為4類，第一類10個品種，為5，17，9，18，6，24，1，2，21，15號，其中5，17，9，18號可歸為一小類，6，24，1，2，21，15號歸為另一小類.這類植株較矮，葉卵圓或近圓，株型開展或半直立.第二類僅7，22號2個品種.該類植株較高，葉窄細長，葉披針形，株型開展.第三類為8，23，3，4，11號5個品種，其中8，23號；3，4號；11號有屬不同小類.這類株高冠幅適中，葉長葉寬適中，半直立或直立株型.第四類為10，20，16，19，13，14，12號7個品種，其中10，20號與后5個品種歸為不同小類.這類冠幅大，葉闊長，株型開展或半塌地.從采集地區(qū)來看，不同的類別與地域關(guān)系不大.上述聚類結(jié)果與24個品種的田間長勢較為吻合.

表2 普通白菜數(shù)量性狀統(tǒng)計分析結(jié)果

2.2 不同類型普通白菜的RAPD分析

2.2.1 不同類型普通白菜RAPD引物擴增多態(tài)性

篩選出的15個RAPD隨機引物在24份普通白菜間共擴增出113條帶，其中多態(tài)性帶83條，多態(tài)性比率為73.4%，平均每條引物擴增出7.53條和5.53個多態(tài)性條帶.產(chǎn)生條帶最少的是引物S306和s1041，只有50%，最多的是引物S2001，比例為100%(表3，圖2).

表3 普通白菜RAPD引物PCR擴增多態(tài)性

圖2 引物S2001(A圖)和S041(B圖)擴增結(jié)果圖

2.2.2不同類型普通白菜的遺傳多樣性

遺傳多樣性是衡量種群變異和分布范圍的重要指標，通常用Nei＇s基因多樣性指標H和Shannon信息指數(shù)I來表示.按照普通白菜形態(tài)性狀聚類分成的Ⅰ～Ⅳ個普通白菜類型來計算15個引物擴增后的Nei＇s和Shannon指數(shù)，其結(jié)果表明，H和I兩個指數(shù)均呈現(xiàn)相同特點，都是第Ⅳ大類＞第Ⅰ大類＞第Ⅲ大類＞第Ⅱ大類(表4).這就說明普通白菜形態(tài)性狀的主要類型，即第Ⅳ大類和第Ⅰ大類包含的17個品種，其等位基因的離散程度大，某一擴增產(chǎn)物的存在頻率大，遺傳多樣性復(fù)雜.同時，該結(jié)果也與市場上這兩類普通白菜品種變異多，數(shù)量龐大高度吻合.

表4 不同類型普通白菜的遺傳多樣性

2.2.3 不同地區(qū)普通白菜的遺傳多樣性

普通白菜原產(chǎn)于中國，但在中國卻存在著明顯的地域性特點.以24份試驗品種的產(chǎn)地來源進行的遺傳多樣性分析表明，15個引物擴增后計算的Nei＇s和Shannon指數(shù)，江淮地區(qū)的普通白菜最大，其次為華中地區(qū)，最小為新疆(表5).這一結(jié)果與普通白菜的區(qū)域分布一致.從收集到的分布于全國各區(qū)域的313份(數(shù)據(jù)未全給出，本研究的24份是其中一部分)普通白菜種質(zhì)資源來看，江淮流域(主要統(tǒng)計江蘇、浙江、上海和安徽四省市)占45%，華中三省占11.2%，東北0.6%，新疆占0.9%，西北也只占4.7%.因此，普通白菜的遺傳多樣性在江淮地區(qū)最高，西北東北地區(qū)最低.

表5 不同地區(qū)普通白菜的遺傳多樣性

2.2.4 不同類型普通白菜的聚類分析

由RAPD數(shù)據(jù)矩陣，經(jīng)軟件分析獲得的UPMGA聚類樹狀圖(圖3)，圖3中可以看出，供試的24個普通白菜品種的遺傳相似性系數(shù)在0.69～0.89間，表明普通白菜的遺傳相似性較高.在相似系數(shù)為0.77處，24份普通白菜材料分為8個大類.第一類包括19號，第二類16號，第三類10號，第四類為13號、14號，第五類12號，第六類3號，第七類包括10個品種，分別為4、5、24、7、21、22、9、18、15、17號，而該大類在相似系數(shù)0.785處，又分成2個亞類，第一亞類為4、5和24號，第二亞類為7、21、22、9、18、15和17號.第八類1、2、11、20、6、8和23號，該大類在相似系數(shù)0.815處，分為8、23號和1、2、11、20號2個亞類，且1和2的相似性很大.顯然，與24個品種的形態(tài)性狀聚類分析結(jié)果相比，RAPD數(shù)據(jù)的聚類結(jié)果更詳細，其中一致性比較好的是形態(tài)聚類的第Ⅰ類和RAPD的第七類，2個類中有7個品種是相同的，分別是5，17、9、18、24、24、15，而形態(tài)聚類的第Ⅱ類的7、22，在RAPD聚類中聚到了第七類中.第Ⅲ類與第八類有3個是相同的，分別是8、11和23.可見形態(tài)聚類與遺傳分析聚類間有較大的一致性，但后者更為詳細和準確.

圖3 24份普通白菜RAPD數(shù)據(jù)聚類圖

3 討論

利用各種分子標記，并結(jié)合形態(tài)學(xué)特征分析來鑒定種間或變種間的親緣關(guān)系和遺傳多樣性，已在不少植物種質(zhì)上得到了廣泛應(yīng)用［24-26］，尤其是變種繁多的不結(jié)球白菜上［3，5-6，10］.雖然在同種或變種的不同品種間的分子鑒定不多，但也取得了一定成功，陳素娟等利用SRAP、RAPD和SSP鑒定了12個普通白菜的親緣關(guān)系，得到了遺傳距離很近的結(jié)論［27］；杜黎明等利用ISSR技術(shù)鑒定了65個白菜品種的遺傳多樣性，相似系數(shù)為0.40～0.65［28］.此外，在其他作物如小麥［29］、石榴［30］、菠蘿［13］、荸薺［31］也得到了應(yīng)用.這些成果較好地支持了本研究的結(jié)論.普通白菜是不結(jié)球白菜5個變種的最大變種，品種繁多，自然變異造成的種質(zhì)關(guān)系非常復(fù)雜；此外，制種單位又多，信息溝通不夠暢通，同名異種、異名同種的現(xiàn)象普遍存在.這些情況不僅使種子真實性受到質(zhì)疑，也給種質(zhì)收集和保存、種質(zhì)利用和創(chuàng)新，以及種質(zhì)資源數(shù)據(jù)庫的建設(shè)帶來困難.

本研究對24份不同地區(qū)的普通白菜種質(zhì)，在形態(tài)鑒定基礎(chǔ)上，利用RAPD分子標記技術(shù)，研究了種質(zhì)間的親緣關(guān)系，雖然樣本群體有限，但其結(jié)果顯示了形態(tài)與分子鑒定在大多數(shù)情況下，鑒定結(jié)果一致，可相互印證提高真實性；但也存在不一致性，表現(xiàn)為有些種質(zhì)在表型性上相似，形態(tài)學(xué)方法聚為一類，但RAPD分子標記發(fā)現(xiàn)關(guān)系較遠，如20號與10、16和19號在形態(tài)聚類中距離較近，而在RAPD聚類中相似系數(shù)則較小，顯示出分子水平上的較大遺傳差異.而有些種質(zhì)在形態(tài)學(xué)上距離較遠，分屬兩個大類，但RAPD分子標記發(fā)現(xiàn)遺傳背景相近，屬一類，如21、7、22號種質(zhì).可見，由于RAPD標記的是穩(wěn)定的DNA，較之形態(tài)鑒定的結(jié)果更為可靠.前人研究成果也較好地支持了親緣關(guān)系鑒定可采用形態(tài)與分子鑒定相結(jié)合的手段，而分子鑒定更為準確的結(jié)論［5-6，24-26］.

參考文獻：

［1］TAN J J.A study on the origin and classification of Brassica vegetables［J］.Journal of Agricultural University of Hebei，1980，4(1)：104-114.

［2］LIN W S.A study on the classification of Chinese cabbages［J］.Acta Horticulturae Sinica，1980，7(2)：21-28.

［3］HAN J M.Genetic diversity and model analysis of germplasm and cloning of bcDREB2 gene fragement in non-hending Chinese cabbage［D］.Nanjing：Nanjing Agricultural University，2007.

［4］HOU X L，SONG X M.Research and utilization of Brassica campestris ssp.chinensis Makino(non-heading Chinese cabbage)［J］.Journal of Nanjing Agricultural University，2012，35(5)：35-42.

［5］YU S H，LI L F，YU X Y，et al.Cluster analysis of local varieties of Chinese cabbage in coastal area of Zhenjiang province based on morphological and agronomical traits［J］.Acta agriculturae Zhengjiangensis，2013，25(2)：241-247.

［6］HAN J M，HOU X L，XU H M，et al.Morphological diversity of non-heading cabbage(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)［J］.Journal of Biomathematics，2010，(1)：137-146.

［7］XU Y D，PEI D，MA D G，et al.The application of genetic markers in the study of malnut genetic diversity［J］.Chinese Agricultural Science Bulletin，2014，30(13)：1-5.

［8］GAO W J，XIAO L H，LU L T，et al.Analysis of sex-related isozyme marker in dioecious spinacia oleracea［J］.Journal of Henan normal University(Natural Science)，2006，34(4)：147-150.

［9］WILLIAMS J G K，KUBELIK A R.DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers［J］.Nucleic Acids Res，1990，18：6531-6535.

［10］LIN J L，ZHU Z G，WANG J C，et al.Relatives analysis of cabbage germplasm resources by RAPD［J］.Acta agriculture Boreau-Sinica，2008，23(Suppl.)：183-189.

［11］YANG X G，GU Z X，LU J，et al.Polymorphisim of four kinds of medicinal plants callicarpa Linn by RAPD［J］.Asia-Pacific Traditional Medicine，2015，11(7)：28-31.

［12］TAO Y L，WANG Z Y，DING W Y，et al.The genetic diversity of the populations of Culcuma wenyujin by RAPD analysis［J］.Journal of Shaoxing University，2013，33(9)：53-57，94.

［13］WANG J S，HE J H，CHEN H R，et al.Genetic diversity analysis of forty seven pineapple［Ananas comosus(L.)Merr］germplasm with RAPD marker［J］.Chinese Journal of Tropical Crops，2015，36(8)：1392-1397.

［14］KAO A D，WANG S G，WANG Y Q，et al.Analyses of genetic diversity among 65 wild Camellia oleifera based on ISSR and RAPD［J］.Guihaia，2014，34(3)：419-425.

［15］WU Q S，MA J H，WU J X，et al.Genetic diversity analysis of celery by RAPD marker［J］.Journal of Shanxi agricultural Sciences，2013，41(8)：774-777.

［16］CHENG Y，GENG J F，ZHANG J Y，et al.The construction of a genetic linkage map of non-heading Chinese cabbage (Brassica campestris ssp.chinensis Makino)［J］.J Genet Genomics，2009，36：501-508.

［17］GENG J F，ZHU C S，ZHANG X W，et al.A genetic linkage map of non-heading Chinese cabbage［J］.J Am Soc Hort Sci，132：816-823.

［18］HAN J M，HOU X L，XU H M，et al.RAPD analysis of genetic diversity of non-heading cabbage(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)germplasm［J］.Journal of Nanjing Agricultural University，2008，31(3)：31-36.

［19］DENG X H，ZHANG S N，HOU X L.et al.Analysis and identification of RAPD molecular markers linked to Pol CMS line and its maintainer line of non-heading Chinese cabbage［J］.Journal of Nanjing Agricultural University，2007，30(1)：19 -22.

［20］SHAN X Z，LI Y，GAO S Y，et al.Molecular genetic map of Brassica campestris ssp.chinensis［J］.Acta Bot Boreal.-occident sin.，2009，29(6)：1116-112.

［21］ZHENG Z C，HOU X L.Indentication of AFLP fingerprint of dwarf resistant No.6 of non-heading Chinese cabbage［J］.Jiangsu Agricultural Science，2004(1)：63-64.

［22］SONG T Y，WU C Y，HOU X L，et al.Studies on germplasm resources of Tai-tsai using RAPD and ISSR markers［J］.Journal of Northwest A＆F University(Nat.Sci.ED)，2012，40(6)：161-174.

［23］SONG Y Q，WU J H，PAN J X.Application of packchoi variety resource database system［J］.China Vegetables，2013 (22)：81-87.

［24］WU Y.The study of agronomic traits and genome RAPD on Medicago Falcata L.germplasm［D］.Beijing：Chinese Acaademy of Agricultural Science，2005.

［25］ZHU Y F，ZHU S J，LI Y P，et al.Application of ISSR molecular marker in plant germplasm［J］.Seed，2010，29(2)：55 -59.

［26］SAI L.The application of DNA molecular marker technique of Lycoris ornamental plants［J］.Seed，2012，31(3)：55-59.

［27］CHEN S J，SONG C H，ZHI X，et al.Molecular fingerprint of major Brassica campestris ssp.chinensis cultivars［J］.Guizhou Agriculture Science，2014，12(11)：5-9.

［28］DU L M，HU T H，BAO C L，et al.Genetic diversity and relatives analysis of pakchoi germplasm based on inter-simple sequence［J］.Chinese Agricultural Science Bulletin，2009，25(11)：20-24.

［29］LIU Y H，ZHAO X Y，YAN W X，et al.Agronomic traits and wheat leaf rust resistance of ten Turkey wheat accessions［J］.Acta Agriculturae Boreali-sinic，2012，27(1)：193-200.

［30］MA L，MA Y H，HAO Z X，et al.Genetic relationship analysis of 38 punica garanatu L.cultivars based on RAPD markers［J］.Northern Horticulture，2014(09)：101-105.

［31］JIANG W，CAI B H，CHEN L J，et al.Genetic diversity analysis of 24 water chestnut(Eleocharis tuberrosa schulut)cultivars using RAPD markers［J］.J of Sourthern Agriculture，2012，43(7)：859-900.

Morphological character and RAPD analysis of genetic diversity of different types of Brassica campestris L.ssp.chinensis(L.) Makino var.communis Tsee et Lee.pakchoi

XIAO He，WANG Meng，CUI Lijie，KAI Guoyin，PAN Jingxian
(Development Center of Plant Germplasm Resources，College of Life and Environmental Sciences，Shanghai Normal University，Shanghai 200234，China)

The genetic diversity of 24 accessions of pakchoi(Brassica campestris L.ssp.chinensis(L.)Makino var.communis Tsee et Lee.)from different districts of China was identified by morphological characters and RAPD analysis.The results showed that the coefficient of variation of 13 morphological characters of materials was from 12.4%to 69.9%，the most was petiole length，and the least cotyledon.24 accessions were clustered into 4 groups at the distance of 5 in morphological cluster.113 bands were detecteded by15 RAPD primers，and 83 were polymorphic.The percentage of polymorphic bands was 73.4%，and the number of average and polymorphic bands each primer were 7.53 and 5.53 respectively.In RAPD analysis，8 groups at the genetic distance of 0.77 were obtained based on RAPD data.There were the overlaps and segmentation between the results of RAPD and morphological cluster.Nei＇s diversity(H)and Shannon information index(I)based on 4 types of morphological analysis were both the order ofⅣ＞Ⅰ＞Ⅲ＞Ⅱ，and H and I ofⅣwere 0.2395 and 0.3523 respectively.H and I of Jianghui area were the highest in China，being 0.2076 and 0.3098 respectively.These data were in accordance with the diversity characteristics and rejoin distribution of pakchoi germplasms.

Brassica campestris L.ssp.chinensis(L.)Makino var.communis Tsee et Lee.；Morphological characters；RAPD analysis；Clustering analysis

S 634.3

A

1000-5137(2015)06-0585-08

10.3969/J.ISSN.1000-5137.2015.06.002

(責任編輯：顧浩然，包震宇)

2015-12-01

潘靜嫻，中國上海市徐匯區(qū)桂林路100號，上海師范大學(xué)生命與環(huán)境學(xué)院，郵編：200234，E-mail：panjingx @shnu.edu.cn