張 靜， 楊曉利， 張 競(jìng)， 王春民， 郭金甲， 秦 婷， 王志文*

（1.河北聯(lián)合大學(xué)，河北唐山063000；2.遵化市人民醫(yī)院，河北唐山064200；3.頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司，河北承德067000）

［醫(yī)院藥房］

腰痛寧膠囊對(duì)腰椎骨性關(guān)節(jié)炎患者血清IL-1β、TGF-β1的影響

張 靜1， 楊曉利2， 張 競(jìng)1， 王春民3， 郭金甲3， 秦 婷3， 王志文1*

（1.河北聯(lián)合大學(xué)，河北唐山063000；2.遵化市人民醫(yī)院，河北唐山064200；3.頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司，河北承德067000）

目的觀察腰痛寧膠囊對(duì)腰椎骨性關(guān)節(jié)炎患者血清中白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）水平的影響，從細(xì)胞因子角度探究該藥的作用機(jī)理。方法采用隨機(jī)、雙盲、對(duì)照研究方法，將108例患者，分為治療A組 （腰痛寧膠囊4粒組），治療B組 （腰痛寧膠囊6粒組）以及對(duì)照組 （痹痛寧膠囊組），每組36例；收集治療前后患者血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)IL-1β、TGF-β1水平變化。結(jié)果三組治療后以改良日本整形外科學(xué)會(huì)（JOA）評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)均較治療前均升高；治療后，三組患者的IL-1β水平降低，TGF-β1水平升高，且治療B組作用較治療A組和對(duì)照組明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01）。而治療A組與對(duì)照組的變化幅度接近，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論腰痛寧膠囊可以通過(guò)抑制患者IL-1β的表達(dá)，升高TGF-β1的水平，達(dá)到減輕炎性反應(yīng)，這可能是該藥治療腰椎骨性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制之一。

腰椎骨性關(guān)節(jié)炎；腰痛寧膠囊；白細(xì)胞介素-1β；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1

腰痛寧膠囊是頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)的純中藥制劑，主要由馬錢子粉、土鱉蟲、川牛膝、甘草、麻黃、乳香、沒藥、全蝎、僵蠶、麩炒蒼術(shù)組成，是臨床治療腰痛的常用藥。利用中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)，以 “腰痛寧膠囊”為檢索詞進(jìn)行檢索，收集1991—2014年公開發(fā)表的有關(guān)腰痛寧膠囊的報(bào)告文獻(xiàn)，共有360條。在這些文獻(xiàn)中多是關(guān)于該藥臨床觀察與藥效學(xué)方面的報(bào)道，臨床療效確切，且相關(guān)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)已證明該藥具有抗炎鎮(zhèn)痛的作用，如腰痛寧組方對(duì)IL-1β誘導(dǎo)的大鼠軟骨細(xì)胞具有顯著促增殖作用［1］，還能抑制小鼠的疼痛反應(yīng)，提高痛閾。但該藥作用機(jī)制研究較少。因此，基于對(duì)腰椎骨性關(guān)節(jié)炎 （Lumbar Osteoarthritis，LOA）發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識(shí)，著重觀察腰痛寧膠囊治療LOA患者前后血清IL-1β及TGF-β1的水平變化，探討該藥治療腰椎骨性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 108例患者均為河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科就診病人，入選病例均符合 《臨床骨傷科學(xué)》［2］診斷標(biāo)準(zhǔn)。中醫(yī)辨證符合 《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》［3］及 《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)·中醫(yī)臨床診療術(shù)語(yǔ)》［4］擬定寒濕瘀阻證診斷標(biāo)準(zhǔn)。將其分為3組，每組36例。治療A組，男17例，女19例，平均年齡 （52.0± 7.0）歲，平均病程 （6.6±2.1）年。治療B組，男16例，女20例，平均年齡 （52.2±7.8）歲，平均病程 （7.2± 4.0）年。對(duì)照組，男14例，女22例，平均年齡 （54.2± 10.3）歲，平均病程 （6.8±1.6）年。3組病人性別、年齡、病程均接近 （P＞0.05）。本研究經(jīng)過(guò)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 分組方法 用SAS軟件模擬產(chǎn)生隨機(jī)碼，按患者的就診順序進(jìn)行隨機(jī)，由不參加研究的專職人員按隨機(jī)碼順序進(jìn)行藥品的包裝及編盲工作，研究期間，研究者和患者均不知道接受治療的藥品種類，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析時(shí)開盲。

1.2.2 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合腰椎骨性關(guān)節(jié)炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②符合寒濕瘀阻證的辨證標(biāo)準(zhǔn)；③年齡18周歲以上65周歲以下者；④受試者同意，并簽署知情同意書者。

1.2.3 排除標(biāo)準(zhǔn) ①妊娠或準(zhǔn)備妊娠、哺乳期婦女；②過(guò)敏體質(zhì)者或?qū)Ρ舅幗M成成分過(guò)敏者；③具有心、肝、腎等器官嚴(yán)重疾病、血液學(xué)病變、代謝性疾病及傳染性疾病等。

1.3 治療方法 治療A組給予腰痛寧膠囊 （頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào)Z13020898），1次4粒，1日1次，睡前半小時(shí)服，黃酒兌少量溫開水送服；治療B組給予腰痛寧膠囊，1次6粒，1日1次，服藥方法同上；對(duì)照組給予痹痛寧膠囊 （吉林省東北亞藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào)Z20043520），1次2粒，1日2次，溫開水送服。療程為4周。

1.4 觀察指標(biāo)與方法

1.4.1 改良JOA評(píng)分 采用改良日本整形外科學(xué)會(huì)（JOA）腰痛疾患療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)［5］。根據(jù)患者自覺癥狀 （腰痛）、體征、日常生活動(dòng)作 （睡覺翻身、起立動(dòng)作等）及腰椎活動(dòng)功能等進(jìn)行評(píng)分，滿分35分。

1.4.2 血清IL-1β、TGF-β1的采集與檢測(cè) 收集治療前后患者清晨空腹血清，留存于無(wú)菌非抗凝試管中，在采集后2 h內(nèi)，3 000 r/min條件下離心10min，留取上清液分裝于Eppendorf管中，快速冷凍，置-80℃深低溫冰箱保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）進(jìn)行IL-1β和TGF-β1檢測(cè)，試劑盒由北京百奧萊博科技有限公司提供。

1.5 療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)JOA評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定：改善率=［（治療后評(píng)分-治療前評(píng)分）/（35-治療前評(píng)分）］ × 100%。臨床控制：改良JOA評(píng)分改善率≥75%；顯效：改良JOA評(píng)分改善率50%～74%；有效：改良JOA評(píng)分改善率25%～49%；無(wú)效：改良JOA評(píng)分改善率≤24%。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入，采用SPSS 13.0進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和分析。定量資料采用單因素方差分析，LSD法做組間兩兩比較，不呈現(xiàn)正態(tài)分布的數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后使其正態(tài)后進(jìn)行方差分析。定性資料采用χ2檢驗(yàn)；等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)。均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組患者治療前一般資料比較 見表1。

表1 3組患者一般資料比較

2.2 3組治療前后改良JOA評(píng)分比較 三組經(jīng)治療后改良JOA評(píng)分均提高，治療B組較治療A組與對(duì)照組更顯著，經(jīng)檢驗(yàn)P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表2 3組治療前后改良JOA積分比較（）

表2 3組治療前后改良JOA積分比較（）

注：與對(duì)照組治療后比較*P＜0.01；與治療A組治療后比較△P＜0.01

組別 病例數(shù) 治療前 治療后對(duì)照組0.951 0.002 36 16.69±2.99 25.08±3.34治療A組 36 16.58±3.00 25.25±3.09治療B組 36 16.47±2.94 27.72±3.671*△F 0.050 6.887 P

2.3 3組療效比較 3組患者經(jīng)治療后，治療A組、治療B組及對(duì)照組總有效率分別為 83.33%、88.89%、80.56%，經(jīng)檢驗(yàn)，治療B組較治療A組與對(duì)照組比較，P＜0.05。見表3。

表3 3組療效比較

2.4 3組患者治療前后血清IL-1β及TGF-β1的變化情況3組患者治療前IL-1β及TGF-β1水平接近，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，3組患者IL-1β水平均降低，TGF-β1水平均升高，治療B組較治療A組和對(duì)照組明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；而A組與對(duì)照組的幅度接近，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表4。

表4 3組患者治療前后血清IL-1β及TGF-β1的變化（）

表4 3組患者治療前后血清IL-1β及TGF-β1的變化（）

注：與對(duì)照組治療后比較，*P＜0.01；與治療A組治療后比較，△P＜0.01

組別 病例數(shù) IL-1β/（ng·L-1）TGF-β1/（ng·L-1）36 24.41±3.77 16.23±1.44 676.04±82.78 876.52±47.78治療A組 36 23.53±3.23 15.64±1.85 695.03±98.40 890.28±69.46治療B組 36 24.02±3.29 13.94±1.67*△ 682.49±92.00 935.86±51.13*△F 0.579 18.404 0.403 10.695 P治療前 治療后對(duì)照組治療前 治療后0.562 0.000 0.858 0.000

3 討論

腰椎骨性關(guān)節(jié)炎又被稱為腰椎退行性關(guān)節(jié)病，以腰痛及活動(dòng)受限為主要表現(xiàn)的疾病。其病理特征為關(guān)節(jié)軟骨變性、破壞、軟骨下骨硬化，關(guān)節(jié)邊緣和軟骨下骨反應(yīng)性增生、骨贅形成［6］。近年來(lái)發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，一般好發(fā)于中老年人［7］。我們知道某些因子在關(guān)節(jié)炎的病理過(guò)程中對(duì)關(guān)節(jié)軟骨和滑膜具有破壞作用，其中非常重要的是IL-1β，它可抑制透明軟骨膠原的合成，改變和破壞軟骨細(xì)胞周圍環(huán)境使軟骨的結(jié)構(gòu)蛋白發(fā)生質(zhì)的改變，這在腰椎骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生中具有顯著破壞性。一些實(shí)驗(yàn)證明，腰椎骨性關(guān)節(jié)炎患者的滑膜及軟骨中均有較高水平的IL-1β存在，與正常有顯著差別，提示骨關(guān)節(jié)炎軟骨損傷與IL-1β異常高表達(dá)有關(guān)。TGF-β1廣泛參與機(jī)體的細(xì)胞分化、創(chuàng)傷修復(fù)、自身免疫等病理生理活動(dòng)。它是腰椎骨性關(guān)節(jié)炎過(guò)程中介導(dǎo)軟骨合成、抑制膠原和蛋白聚糖分解的主要細(xì)胞因子［8］。細(xì)胞因子分為致炎因子和抑炎因子，IL-1β屬致炎因子，TGF-β1是目前公認(rèn)的抑炎因子，可降低 IL-1β水平［9］。另外，TGF-β1能夠上調(diào)金屬基質(zhì)蛋白酶抑制物的表達(dá)，減少IL-1β受體在細(xì)胞膜上的數(shù)量，從而逆轉(zhuǎn)TGF-β1介導(dǎo)的破壞作用。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，治療后患者血清TGF-β1表達(dá)明顯增加，IL-1β水平顯著下降，提示腰痛寧膠囊可能通過(guò)調(diào)節(jié)兩者水平，促進(jìn)軟骨修復(fù)，保護(hù)關(guān)節(jié)。

中醫(yī)學(xué)理論將腰椎骨性關(guān)節(jié)炎歸納為 “骨痹”范疇［10］，以寒濕瘀阻證多見，臨床以腰部冷痛，血行瘀滯為辨證要點(diǎn)。腰痛寧膠囊由十味藥物組成，方中馬錢子為傷科療傷止痛之佳品，配伍全蝎更增止痛之效，共為君藥。乳香辛香走竄；沒藥活血化瘀，共為臣藥。土鱉蟲、僵蠶消腫散結(jié)；川牛膝補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨；蒼術(shù)祛風(fēng)除濕；麻黃散寒通滯，以為佐藥。甘草調(diào)和諸藥，以為使藥。諸藥配伍，共奏消腫止痛，疏散寒邪，溫經(jīng)通絡(luò)之功。

腰痛寧膠囊可以調(diào)節(jié)患者血清IL-1β及TGF-β1水平，這可能與組方中選用的馬錢子、全蝎、乳香、麻黃等中藥有關(guān)。如馬錢子堿具有顯著抗炎止痛作用，抑制軟骨細(xì)胞凋亡［11］；全蝎可使TGF-β1的表達(dá)趨于正常［12］；乳香具有抑制炎癥因子TNF-α和IL-1β釋放的作用［13］；麻黃堿對(duì)細(xì)胞免疫有抑制作用［14］。綜上所述，腰痛寧膠囊可能通過(guò)增強(qiáng)TGF-β1表達(dá)，抑制IL-1β的水平，使兩者平衡而達(dá)到其治療作用。

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R287

B

1001-1528（2015）04-0916-03

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.04.053

2014-07-01

張 靜 （1988—），女，碩士生，研究方向?yàn)橹嗅t(yī)內(nèi)科學(xué)。Tel：15933253583，E-mail：15933253583@163.com

*通信作者：王志文 （1955—），男，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹形麽t(yī)結(jié)合防治風(fēng)濕免疫疾病。Tel：15383055698，E-mail：wangzhiwen_1955@163.com