（乾元浩生物股份有限公司北京100070）

規(guī)?；B(yǎng)雞場(chǎng)疫苗免疫操作規(guī)程

陳峰

（乾元浩生物股份有限公司北京100070）

免疫是減少特異性疫病感染雞群的最佳方法之一，只有產(chǎn)生足量針對(duì)特異性病原的特異性抗體，才能保證雞群不受病原的侵害。規(guī)?；B(yǎng)雞場(chǎng)一定要根據(jù)本場(chǎng)的疫情和生產(chǎn)實(shí)際，制定適合本場(chǎng)的免疫程序，并嚴(yán)格執(zhí)行。免疫能否成功受多種因素的影響，如疫苗質(zhì)量、免疫時(shí)間和免疫途徑等。而實(shí)際生產(chǎn)過程中更加難以控制、變數(shù)更多的是免疫操作過程。免疫操作過程涉及到技術(shù)問題和人員管理問題。下面就免疫操作技術(shù)細(xì)節(jié)方面與廣大讀者作一交流。

1 免疫前準(zhǔn)備工作與注意事項(xiàng)

1.1人員的要求

免疫接種人員必須經(jīng)過培訓(xùn)且達(dá)到技術(shù)要求。做到操作熟練、規(guī)范、準(zhǔn)確，責(zé)任心強(qiáng)。操作前進(jìn)行人員消毒，并穿戴潔凈的工作服。

1.2免疫前工作

免疫前要了解雞群的健康狀況，凡有異常情況不能進(jìn)行免疫或延緩免疫（緊急免疫除外），緊急免疫時(shí)遵循“先健康后疑似再發(fā)病”原則。充分考慮到分群、斷喙、大風(fēng)降溫等應(yīng)激因素，免疫前后加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，穩(wěn)定飼養(yǎng)環(huán)境。

1.3免疫前對(duì)疫苗進(jìn)行檢查，若有如以下情形之一者應(yīng)棄之不用

疫苗瓶破碎或瓶塞松動(dòng)；瓶?jī)?nèi)有異物或發(fā)霉、沉淀分層；藥品外包裝沒有標(biāo)簽或標(biāo)識(shí)缺失；藥品過期失效；藥品與免疫程序不一致的；藥品未按規(guī)定保存。

1.4操作流程

1）器械消毒：疫苗免疫注射器、針頭、滴瓶等要事先清洗，并用沸水煮15～30 min消毒，切不可用消毒藥消毒，洗衣粉洗滌劑要沖洗干凈。

2）油乳劑滅活苗要放到40℃溫水中預(yù)溫到25℃或提前放到雞舍中4～8 h，切不可日曬回溫。

3）搖勻：將預(yù)溫的疫苗上下?lián)u動(dòng)不少于30 s，免疫中要定時(shí)進(jìn)行搖勻。

4）調(diào)整注射器免疫劑量或滴瓶的免疫劑量，在免疫過程中定時(shí)校正。

5）凍干苗先用2～4 mL注射用水或稀釋液進(jìn)行稀釋，嚴(yán)禁直接打開瓶蓋造成壓力驟增使病原失活，同時(shí)檢測(cè)真空度（失空的疫苗不能使用，個(gè)別進(jìn)口苗除外），飲水免疫時(shí)疫苗需在水面下打開瓶蓋。按照免疫劑量和免疫數(shù)量稀釋疫苗（活苗不超過30 min），油苗連接注射器各部位和換氣針，并排凈管線中所有空氣，保持密閉無漏氣現(xiàn)象。

6）選定免疫部位進(jìn)行免疫:免疫劑量問題，抗體水平隨免疫劑量的增大稍有升高，但差異不顯著（表1），但機(jī)體向外界散毒時(shí)間卻延長(zhǎng)了。

表1 提高免疫劑量對(duì)排毒時(shí)間的影響

1.5做好免疫記錄

完整記錄疫苗品名、接種日期、疫苗批號(hào)、有效期、生產(chǎn)企業(yè)、異常記錄和接種者簽名。如多項(xiàng)免疫同時(shí)操作時(shí)，應(yīng)明確清晰的說明標(biāo)識(shí)。

接種后應(yīng)留意觀察雞群2～3 d，并記錄雞群異常反應(yīng)。

1.6注意事項(xiàng)

1）免疫前后2～3 d時(shí)間可用抗生素或多維，以減少應(yīng)激反應(yīng)（尤其雞傳染性喉氣管炎前后，應(yīng)使用呼吸道藥）。

2）免疫應(yīng)在傍晚或晚上進(jìn)行，減輕應(yīng)激，飲水宜選擇早上進(jìn)行。

3）免疫注射時(shí)，（一要搖勻，二要預(yù)溫）如頸部皮下注射，要注射在頸后方1/3處皮下，切不可注射到頸部肌肉內(nèi)，如注射肌肉則會(huì)引起雞縮頸、精神不振、采食下降，消瘦等，如注射靠頭部，則引起腫頭。胸肌注射時(shí)采用7～9號(hào)短針頭（1.27 cm），（8周齡前活苗選7號(hào)，8周齡前油苗和8周齡后選9號(hào)）將針頭與注射部位形成15～30°角，朝背部方向刺入胸肌，切忌垂直射入，以免刺破胸腔損傷內(nèi)臟。腿部外側(cè)淺層肌肉易傷血管、神經(jīng)，慎用。

4）凍干苗現(xiàn)用現(xiàn)配，苗不離冰，30 min內(nèi)用完。

5）免疫時(shí)每欄更換一次針頭，檢查一次劑量是否準(zhǔn)確。

6）用過的疫苗瓶及時(shí)進(jìn)行消毒，焚燒處理。

2 免疫方法與注意事項(xiàng)

2.1注射

1）注射方法：①腿肌注射：小腿外側(cè)肌肉；②淺層胸肌注射；③頸部皮下注射；④腹股溝皮下注射：（也可選翅內(nèi)肌肉、尾部代替）；⑤頸部皮下：右手握注射器，左手拇指和食指將頸部下1/3處皮膚捏起、右手持注射器向頸后部平行扎入左手拇指和食指提起的皮膚中間，注射正確會(huì)感到疫苗充盈，如發(fā)現(xiàn)頸部羽毛變濕，說明打漏了應(yīng)重新補(bǔ)一針；⑥腹股溝皮下：一人保定雞只，雞頭向下，腹部向上，另一人自然地把大腿和腹部皮膚捏起，注射在左手拇指和食指提起的皮膚中間；⑦淺層胸?。菏紫日莆諟?zhǔn)確的注射部位，左手由后向前逆向撥開羽毛按在龍骨兩端，龍骨兩側(cè)上1/3處，即肌肉豐滿的地方，針頭應(yīng)與胸骨呈15～30°角或平行刺入（視肌肉豐滿程度而定）。

2）注意事項(xiàng)：①經(jīng)常核對(duì)注射器刻度和實(shí)際容量的誤差；②經(jīng)常晃動(dòng)疫苗瓶力求疫苗均勻，同時(shí)防止有空氣進(jìn)入管道；③注射時(shí)將針頭推到位打出疫苗后緩緩拔出，以免疫苗漏出；④注射過程要準(zhǔn)確，不宜過深，動(dòng)作不要粗暴，速度要慢。

2.2刺種（適用于腦炎雞痘、雞痘、傳貧等）

1）刺種方法：將接種針充分插入疫苗溶液中（通常采用10 mL專用稀釋液和配套刺種針），待針槽充滿液體后，將接種針輕靠?jī)?nèi)壁，除去附在針上多余液體。輕展雞翅，將針插入雞翅翼膜內(nèi)側(cè)，避開血管。需注意刺種針勿接觸雞的羽毛（擦掉疫苗），也勿在刺種針上帶一些絨毛（浪費(fèi)疫苗），每接種一瓶疫苗更換一枚刺種針，不要使用不合適的針接種疫苗，針槽勿向下，免后7 d觀察接種部位是否出現(xiàn)結(jié)痂。

2）注意事項(xiàng)：①疫苗稀釋后在30 min內(nèi)用完，使用中讓疫苗處于冰浴水中，避免手握；②保證刺種部位無羽毛，防止藥液蘸在羽毛上，造成劑量不足，防止手柄進(jìn)入疫苗造成污染；③刺種后及時(shí)檢查接種部位有無結(jié)痂情況，無結(jié)痂或結(jié)痂較差時(shí)及時(shí)補(bǔ)免；④混合好疫苗分裝于小瓶中液面不少于1 cm以浸過刺種針細(xì)溝，每刺種一次，都將刺種針在瓶中蘸一下，并經(jīng)常檢查瓶中疫苗液面深度，隨時(shí)添加疫苗。

2.3點(diǎn)眼或滴鼻（適用于新城疫、傳支、傳喉等活苗）

1）點(diǎn)眼或滴鼻方法：將疫苗用專用稀釋液（蒸餾水或生理鹽水）稀釋分開，通常稀釋液中加著色劑（通常1 000份疫苗使用30 mL稀釋液），用事先測(cè)定好的滴嘴，每滴約25～30 μL。自1～2 cm的高度滴入雞的眼睛或鼻孔內(nèi)，免疫時(shí)滴嘴不得接觸眼球，以免損傷眼睛，不得接觸手、雞等，以免污染疫苗。滴鼻免疫時(shí)，用指頭封住一側(cè)鼻孔，以確保疫苗能更好地從另一側(cè)鼻孔吸入。

2）注意事項(xiàng)：①疫苗現(xiàn)配現(xiàn)用，在使用過程中保持冰浴，要求1 h內(nèi)用完（含傳支最好控制在30 min內(nèi)），稀釋液要保存在低溫室或冰箱中與疫苗基本無溫差，避免高溫（育雛）、全手緊握疫苗瓶或陽(yáng)光直射疫苗；②滴入時(shí)，把雞頭頸提起，呈水平位置，用手堵住另一側(cè)鼻孔，然后將疫苗滴到眼和鼻內(nèi)，稍等片刻，使疫苗完全吸入鼻或眼內(nèi)，如疫苗液外溢，否則應(yīng)補(bǔ)滴，滴種過程中，要始終保持滴嘴絕對(duì)垂直向下，確保每滴疫苗的接種劑量保持恒定(注意疫苗瓶的角度)；③對(duì)反應(yīng)較重的疫苗，如雞傳喉苗，使用時(shí)可在稀釋液中加入1 000～2 000 PC或SM/mL，或飲水用抗生素可明顯緩解副反應(yīng)；④免疫后廢棄物應(yīng)焚燒處理，器具等接觸物要消毒，注意疫苗排毒期的衛(wèi)生消毒工作；⑤為減小應(yīng)激，建議在晚上或光線較弱的環(huán)境下進(jìn)行。

2.4噴霧免疫（適用于新城疫、傳支等弱毒苗）

1）噴霧免疫方法（表2）：噴霧時(shí)將門窗關(guān)閉停止使用風(fēng)機(jī)，噴霧20～30 min后，方可開窗通風(fēng)，雞體有略濕的感覺，1日齡霧滴要大80～120 μm，噴頭距雞頭高度20～30 cm。1 000只雞疫苗液體量200～300 mL。7日齡以上霧滴要小30～50 μm，噴頭距雞頭高80～100 cm，1 000羽疫苗液體量300～500 mL。（用水量取決于噴霧器類型和型號(hào)）

表2 噴霧免疫與氣霧免疫條件的比較

2）注意事項(xiàng)：①噴霧免疫時(shí)，應(yīng)在空氣不流動(dòng)的條件下進(jìn)行，要關(guān)閉通風(fēng)換氣設(shè)備一段時(shí)間后再免疫。開放雞舍要防風(fēng)窗簾密閉；②噴霧時(shí)，雞舍內(nèi)光線應(yīng)該暗些，雞群對(duì)應(yīng)激小、活動(dòng)弱。使雞群相對(duì)集中，最好選擇3～5點(diǎn)（腎上腺素低、歸肺經(jīng)）；③操作人員要保護(hù)好自己口鼻眼，以防造成傷害，免疫后，要徹底清洗噴霧設(shè)備，內(nèi)外最好用熱水清洗；④噴霧免疫的稀釋液應(yīng)用蒸餾水，禁止使用生理鹽水，加入6.2 mL/L的甘油，霧滴黏附性會(huì)更好；⑤注意雞舍內(nèi)環(huán)境：氣霧免疫時(shí)較合適溫度是15～25℃，一般不要在低于4℃情況下進(jìn)行，如果溫度高于25℃，霧滴會(huì)迅速蒸發(fā)而不能進(jìn)入雞的呼吸道。在高于25℃環(huán)境下，可以先在雞舍內(nèi)噴水加濕。天氣炎熱時(shí)氣霧免疫應(yīng)在早晚涼爽時(shí)進(jìn)行，而且舍內(nèi)相對(duì)濕度值在70%；⑥氣霧免疫使用劑量應(yīng)加2～3倍，霧滴選擇根據(jù)雞日齡選擇。背負(fù)式噴霧器選直徑0.5～0.6 mm的噴頭片，霧滴約50 μm（表3）。⑦霧滴行為學(xué)：沉降、蒸發(fā)、漂流（表4）。

表3 霧滴直徑及其可見形狀

簡(jiǎn)單評(píng)鑒：2米外手臂汗毛上有1～2滴水滴為合理。涂有油脂的玻璃板在30 cm處上下移動(dòng)2次，看霧滴大小均勻情況。

表4 不同霧滴、不同濕度下蒸發(fā)時(shí)間

2.5飲水免疫（適用于新城疫、法氏囊等弱毒苗）

1）影響飲水免疫效果主要有三大因素：①雞群因素，包括雞只的免疫能力、耗水量、母源抗體水平、飲水位、所處環(huán)境溫度和社會(huì)等級(jí)等；②疫苗因素，包括病毒在水中穩(wěn)定性、病毒的側(cè)向擴(kuò)散、疫苗免疫原性、疫苗對(duì)消化道親嗜性、病毒濃度和免疫接種時(shí)間等；③人為操作因素，包括注射疫苗劑量、斷水時(shí)間、水質(zhì)、飲水器類型及衛(wèi)生、投放疫苗的方法以及供水供料時(shí)間等。

2）飲水免疫方法：免疫前進(jìn)行控水，應(yīng)根據(jù)季節(jié)不同調(diào)整控水時(shí)間，天氣較熱時(shí)停水1～1.5 h，其他季節(jié)2～3 h，將凍干苗用稀釋液稀釋，免疫時(shí)水中加入0.2%脫脂粉以消除影響免疫因素。夏天飲水免疫最好在早晨進(jìn)行，這樣疫苗不受高溫的影響，其他季節(jié)可選中午，飲水器必須充足，應(yīng)保證雞群同時(shí)能飲到疫苗（表5）。雞只的飲水量取決于雞的日齡，重型雞和天氣炎熱季節(jié)，飲水量取上限標(biāo)準(zhǔn)。

表5 不同日齡雞的飲水量

3）注意事項(xiàng)：①飲水免疫前必須將飲水器清洗干凈，水線進(jìn)行沖洗；②免疫前后24 h內(nèi)禁用一切消毒劑或抗病毒藥；③水器具應(yīng)放陰涼處，避開陽(yáng)光和熱源；④夏天選清早進(jìn)行免疫，飲水溫度在18～22℃為宜；⑤免疫視天氣情況控水，待70%～80%雞只開始尋水時(shí)，現(xiàn)配疫苗供水，免疫后30 min再喂料和正常供水；⑥確保免疫雞只在2 h內(nèi)所有雞飲下足夠的疫苗劑量；⑦在水中加入0.2%～0.5%脫脂奶粉或2%～5%脫脂純牛奶20～30 min后再加入疫苗，用清潔的棒攪拌均勻，應(yīng)使用清潔且不含氯和鐵的自來水或雨水；⑧用乳頭飲水水線時(shí)要選擇嗜腸道型毒株；⑨將疫苗分2/3、1/3分兩次供水，防止過多雞只漏免；⑩飲水器具不能使用金屬器具，已選擇塑料或搪瓷材料且必須潔凈，充足飲水位置和2～3 cm的水位深度。

2.6點(diǎn)口、噴料免疫（適用于法氏囊、球蟲等免疫）

1）原理：疫苗通過經(jīng)口免疫方法將疫苗食入，在消化道內(nèi)繁殖，起到免疫效果。球蟲在消化道內(nèi)繁殖，隨糞便排出體外，再被小雞采食，如此3～4個(gè)循環(huán)，就建立起堅(jiān)強(qiáng)的免疫抵抗力。

2）方法：點(diǎn)口如點(diǎn)眼滴鼻一樣，將疫苗滴入口中，待小雞有吞咽動(dòng)作后，將雞放回原位。噴料時(shí)，按每瓶疫苗用1 200 mL蒸餾水或涼開水比例稀釋，每瓶稀釋后1 200 mL疫苗液噴料8 kg，將飼料平鋪在地面上，把球蟲疫苗均勻的噴灑在飼料上，來回多噴幾次，攪拌均勻，讓雞在6～8 h內(nèi)采食干凈。

（1）滴口法：將球蟲疫苗用涼水稀釋后倒入滴瓶中，并計(jì)算好每一滴中所含球蟲疫苗恰好是1羽份。在滴口過程中要不斷搖動(dòng)滴瓶以使疫苗均勻，且應(yīng)在較短時(shí)間內(nèi)滴完。

（2）噴料法：讓雞只自由采食2 h。該法操作簡(jiǎn)單，易掌握。自養(yǎng)場(chǎng)目前使用此法，但應(yīng)注意噴霧及拌料均勻，如不均易造成副反應(yīng)。具體操作方法：①每瓶疫苗(1 000頭份/瓶)用1 200 mL的涼開水稀釋；②稀釋后的疫苗懸液倒入干凈的農(nóng)用噴霧器中或加壓式噴霧器中；③每1 200 mL疫苗溶液噴料8 kg，把球蟲疫苗均勻地噴在飼料上，來回拌料，噴完后仍需來回拌料，最后用手?jǐn)嚢栾暳?，使之均勻；④將拌有疫苗的料平均分配到每個(gè)料盤，讓雞采食，全部吃干凈約4～5 h。注意加拌有疫苗料之前不要刻意斷料，加料前只把料盤中的剩料倒干凈即可，以免因“搶食”造成每只雞免疫劑量不均勻。

（3）飲水法：讓雞自由采食飲水2 h后實(shí)行控水2 h。將球蟲疫苗稀釋在夠雞1～2 h飲完的涼開水中，加入懸浮劑。將疫苗定量分裝飲水器中供雞只自由飲用。

（4）噴霧法：該法常用于孵化室進(jìn)行1日齡苗雞噴霧免疫。

此外還有浸頭、刷肛、涂毛囊等方法。

球蟲活疫苗的免疫程序，應(yīng)根據(jù)不同的疫苗廠家、不同的墊料及雞群健康的不同而定。平養(yǎng)雞舍首次免疫應(yīng)在1～10日齡，1羽份/只雞；若需轉(zhuǎn)群則可根據(jù)雞群狀態(tài)在轉(zhuǎn)群前作第二次免疫，劑量為首免的1/5羽份，并密切注意雞群，防止免疫失敗或免疫過度。

所用疫苗選擇要合適，病毒毒株的親嗜性和自然感染途徑?jīng)Q定了免疫途徑。毒力先弱后強(qiáng)，與周齡、季節(jié)有關(guān)，血清型、亞型選擇要有針對(duì)性。免疫方法與劑量要符合免疫學(xué)原理。

免疫前后藥物使用要注意不能使用影響免疫力產(chǎn)生的藥物。

3 免疫操作輔助動(dòng)作

免疫效果除了免疫方法外，正確保定雞只是免疫成功的前提條件。保定雞只為了穩(wěn)定雞只，減少應(yīng)激，保證注射部位準(zhǔn)確。

4周齡前的雞，可以采用單人操作，左手保定，右手操作。頸部皮下注射時(shí)，左手拇指和食指將雛雞頸后中部皮膚捏起，使皮膚和肌肉之間形成空窩，右手持注射器向尾部方向刺入皮膚，然后推入疫苗后拔出針頭，手指會(huì)感到有疫苗注入的充實(shí)感。點(diǎn)眼滴鼻時(shí)，用左手將雛雞握于手掌中，用拇指和食指固定雞頭平放，使一側(cè)眼鼻向上，中指堵住下側(cè)鼻孔，右手持點(diǎn)眼瓶將小拇指置于雞頭部定位。點(diǎn)口則雞腹部向上用食指在雞頭后部固定，用拇指置于喙下咽喉部輕壓結(jié)合處使口張開操作。

4周齡后的雞，建議專人保定專人操作。保定人要求一手抓住雙翅根部，一手抓住雞兩條腿跗關(guān)節(jié)以上部位，將雞胸部展開朝向注射人員，注射人員左手從后向前推開羽毛裸露肌肉，并感知肌肉豐滿度，將左手下拇指固定于鎖骨處，右手持針注入胸肌最豐滿處胸肌前1/3的淺層肌肉中。腿肌注射時(shí)，保定人員同樣保定雞只將雞腿部朝向免疫人員，操作者左手握住注射腿部，稍向內(nèi)部扭轉(zhuǎn)病打開羽毛，然后注射小腿上部后外側(cè)肌肉內(nèi)?；\養(yǎng)雞的操作就簡(jiǎn)單一些，注射人員可以左手握住雙腿跗關(guān)節(jié)處固定，右手持針注射。

免疫現(xiàn)場(chǎng)要求根據(jù)實(shí)際情況避免混亂和漏免現(xiàn)象發(fā)生?；\養(yǎng)雞群每籠超過4只情況下必須轉(zhuǎn)籠，不允許原籠內(nèi)操作，否則極易漏免和重免?！觯ň庉嫞撼５希?/p>