侯衍豹尹翠翠，2高 敏楊 勇，3△容 蓉

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355；2.山東省泰安腫瘤防治院，山東 泰安 271000；3.山東省經(jīng)方研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250355）

·研究報(bào)告·

基于呼吸代謝系統(tǒng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)慢性心衰（心陽(yáng)虛證）大鼠模型的建立及評(píng)價(jià)*

侯衍豹1尹翠翠1，2高 敏1楊 勇1，3△容 蓉1

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355；2.山東省泰安腫瘤防治院，山東 泰安 271000；3.山東省經(jīng)方研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250355）

目的參考心陽(yáng)虛慢性心衰的臨床表現(xiàn)，通過(guò)前期結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支，后期給予一氧化氮合酶抑制劑（左旋硝基精氨酸）建立大鼠慢性心衰（心陽(yáng)虛證）模型并給予評(píng)價(jià)。方法Wistar大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為假手術(shù)組、心陽(yáng)虛慢性心衰模型組。冠脈結(jié)扎術(shù)后4周后，給予左旋硝基精氨酸（LNNA）4周致心衰發(fā)展模型，假手術(shù)組穿線不結(jié)扎。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采用無(wú)創(chuàng)的呼吸代謝系統(tǒng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)大鼠的呼吸代謝、能量代謝變化情況作為模型評(píng)價(jià)的依據(jù)；最后采用血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)大鼠的心功能并及時(shí)記錄造模過(guò)程中大鼠的死亡情況，外觀體征、精神狀況、飲食、排泄及水腫等狀況。結(jié)果心陽(yáng)虛慢性心衰模型組與假手術(shù)組比較，除第2周呼吸代謝及能量代謝較冠脈結(jié)扎初始增強(qiáng)明顯外，第6周到第8周呼吸代謝及能量代謝明顯減弱（P＜0.01）；模型組大鼠心率（HR）、左室舒張末期壓（LVEDP）、左心室舒張所用時(shí)間（Tau）呈上升趨勢(shì)（P＜0.05）；左室內(nèi)壓變化最大速率（±dp/dtmax）均呈降低趨勢(shì)（P＜0.01）。結(jié)論前期結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支，后期給予一氧化氮合酶抑制劑（左旋硝基精氨酸），通過(guò)采用呼吸代謝系統(tǒng)可以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)模型動(dòng)物的狀態(tài)和生理機(jī)能情況，可準(zhǔn)確判斷出模型出現(xiàn)的時(shí)間窗，從而為慢性心衰（心陽(yáng)虛證）模型建立提供一種客觀、無(wú)創(chuàng)的判斷方法。

心陽(yáng)虛 慢性心衰 呼吸代謝 能量代謝 血流動(dòng)力學(xué)

慢性心衰是一種嚴(yán)重的臨床綜合病，是心血管疾病最大的死因，其危害性已引起社會(huì)各界的廣泛關(guān)注。臨床上心衰后期以心腎陽(yáng)虛、陽(yáng)氣虛脫、血瘀痰凝水泛為主，嚴(yán)重威脅人類生命。近年來(lái)，中醫(yī)對(duì)心衰的病癥、病機(jī)及實(shí)驗(yàn)與臨床的研究越來(lái)越重視，醫(yī)學(xué)界對(duì)慢性心衰的治療也取得較大進(jìn)展。但是慢性心衰的發(fā)病仍呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)，慢性心衰的防治意義重大?，F(xiàn)有的慢性心衰（心陽(yáng)虛證）動(dòng)物模型造模方法雖然有多種方法［1］、但因?yàn)樵撃Ｐ蛷?fù)制的周期長(zhǎng)、死亡率高、多因素造模，造成不同研究者之間模型復(fù)制差別很大；而且作為模型建立的重要因素--造模周期，常常是根據(jù)研究者的主觀判斷，或采用盲殺部分動(dòng)物的方法來(lái)斷定。這就會(huì)造成模型復(fù)制重現(xiàn)性低，難以確定合適的造模時(shí)間窗口，并且也很難較好地體現(xiàn)陽(yáng)虛的特點(diǎn)。因此，采用一種無(wú)創(chuàng)的監(jiān)測(cè)手段來(lái)建立與臨床病癥相符的動(dòng)物模型，對(duì)于探索慢性心衰（心陽(yáng)虛證）的發(fā)病機(jī)制、病理改變及開(kāi)發(fā)新的治療藥物及治療手段均具有重大意義。本研究根據(jù)慢性心衰（心陽(yáng)虛證）的臨床表現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采用無(wú)創(chuàng)的呼吸代謝系統(tǒng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)大鼠的呼吸代謝、能量代謝變化情況，通過(guò)前期結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支，后期給予一氧化氮合酶抑制劑（左旋硝基精氨酸）的復(fù)合方法建立慢性心衰（心陽(yáng)虛證）大鼠模型并給予評(píng)價(jià)。先報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠，SPF級(jí)，雄性，22只，體質(zhì)量200～250 g，由山東魯抗動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物可證編號(hào)：SCXK（魯）20080002。飼養(yǎng)環(huán)境：室溫22～26℃，相對(duì)濕度40%～70%RH。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 BL-420E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) （型號(hào)BL-420E，成都泰盟科技有限公司）；小動(dòng)物人工呼吸機(jī) （DW3000-B，淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司）；TSE LabMaster System（LabMaster-CaloSys德國(guó)TSE公司）；MPVS UltraTM壓力-容積分析系統(tǒng) （澳大利亞powerlab公司）；Millar壓力容積導(dǎo)管SPR-838（美國(guó)Millar公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑 左旋硝基精氨酸 （購(gòu)自Sigma公司，批號(hào)：101278121）；4%水合氯醛；注射用青霉素鈉（批號(hào)：B130316，山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司）；0.9%氯化鈉注射液。

1.4 分組及造模 Wistar大鼠22只，按體質(zhì)量隨機(jī)分為假手術(shù)組10只、心陽(yáng)虛慢性心衰模型組12只。用4%水合氯醛按照大鼠體質(zhì)量0.8 mL/100 g腹腔麻醉后，仰位固定，心電圖機(jī)以標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)監(jiān)測(cè)動(dòng)物心電圖。氣管插管，行人工呼吸（呼吸頻率70次/min，潮氣量7 mL，呼吸比設(shè)為1∶2）。于大鼠左前胸去毛，消毒，沿左鎖骨中線縱行切開(kāi)皮膚1～2 cm，在第4或5肋間鈍性分離肌層，打開(kāi)胸腔，剪開(kāi)心包，暴露心肌，用棉簽撥起左心耳，在左心耳下緣與肺動(dòng)脈圓錐間以左冠狀靜脈主干為標(biāo)志，用圓形無(wú)創(chuàng)縫合針6/0絲線置于左冠狀動(dòng)脈前降支起始部下2 mm處結(jié)扎，進(jìn)針深度約為1.5 mm，寬度約為2～3 mm。記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖，以ST段弓背向上抬高0.1 mv作為結(jié)扎成功的標(biāo)志（無(wú)ST段及T波改變者淘汰）。假手術(shù)組穿線不結(jié)扎，清除胸腔內(nèi)積血并用去針頭注射器抽吸氣體后逐層縫合、關(guān)閉胸腔縫合胸壁，待動(dòng)物蘇醒后拔除氣管插管恢復(fù)自主呼吸。青霉素40萬(wàn)單位加0.9%氯化鈉注射液0.9 mL（共1 mL）腹腔注射，連續(xù)3 d，預(yù)防感染。結(jié)扎成功后大鼠正常喂養(yǎng)4周后，于術(shù)后第5周開(kāi)始模型組大鼠以按體質(zhì)量0.5 mL/100 g灌胃20 mg/mL的左旋硝基精氨酸（L-NNA）4周。假手術(shù)組大鼠灌胃同等體積的0.9%氯化鈉注射液。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)及方法 1）各實(shí)驗(yàn)組大鼠死亡情況及外觀表現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中及時(shí)記錄各實(shí)驗(yàn)組造模過(guò)程中死亡情況，外觀體征（諸如神疲、乏力、四肢欠溫、畏寒肢冷等一系列虛寒的外在表現(xiàn)）、精神狀況（諸如行為、運(yùn)動(dòng)、呼吸等表現(xiàn)）、飲食、排泄及水腫等癥狀等狀況。2）心陽(yáng)虛慢性心衰大鼠呼吸代謝轉(zhuǎn)換率及產(chǎn)熱率［2］。冠狀動(dòng)脈結(jié)扎手術(shù)后，隨機(jī)選取假手術(shù)組、模型組大鼠各6只分別于冠脈結(jié)扎初始的第1日、以后每隔2周進(jìn)行呼吸代謝的檢測(cè)。首先應(yīng)對(duì)TSE-System參照籠進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)氣體的校正，冠脈結(jié)扎后大鼠放在TSE-System呼吸代謝系統(tǒng)的檢測(cè)籠內(nèi)，每個(gè)檢測(cè)籠每次放1只，每次測(cè)試前及測(cè)試后應(yīng)打開(kāi)門(mén)窗以保證室內(nèi)空氣的新鮮，相對(duì)濕度應(yīng)控制在70%以內(nèi)，室溫控制在20～25℃，測(cè)試前需先準(zhǔn)確記錄大鼠體質(zhì)量，流速持續(xù)控制在1.20 L/min，根據(jù)測(cè)試籠內(nèi)氣體交換達(dá)到平衡穩(wěn)定的時(shí)間設(shè)定數(shù)據(jù)每10 min采集1次，每組連續(xù)監(jiān)測(cè)20 h，設(shè)定好參數(shù)后即可進(jìn)行檢測(cè)。每次需測(cè)試的大鼠均應(yīng)提前30 min放入代謝籠中，以讓大鼠充分適應(yīng)檢測(cè)環(huán)境并達(dá)到檢測(cè)系統(tǒng)最佳循環(huán)及平衡狀態(tài)。測(cè)定兩組的呼吸轉(zhuǎn)換率 （RER）（RER=VCO2/VO2，其中VCO2、VO2分別是指單位時(shí)間內(nèi)以參比籠作參照，測(cè)試籠產(chǎn)生的二氧化碳的量及消耗氧氣的量）以及產(chǎn)生的熱量H1［kcal/（h·kg）］和H2［kcal/（h·kg）］，H1、H2根據(jù)LBM方程H=（CVO2×VO2+CVCO2×VCO2）/1000計(jì)算［3］。H1是根據(jù)動(dòng)物的實(shí)際體質(zhì)量進(jìn)行計(jì)算；H2是根據(jù)動(dòng)物的瘦體質(zhì)量 （即按動(dòng)物脂肪占體質(zhì)量比例除去動(dòng)物脂肪以外的體質(zhì)量）進(jìn)行計(jì)算，兩者均是反映機(jī)體產(chǎn)熱量的指標(biāo)。3）MPVS UltraTM壓力-容積系統(tǒng)檢測(cè)各組大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。將壓力容積導(dǎo)管浸泡在37℃0.9%氯化鈉注射液中30 min，MPVS UltraTM壓力-容積測(cè)定儀與Millar壓力容積導(dǎo)管SPR-838正確連接后，對(duì)壓力、容積信號(hào)進(jìn)行定標(biāo)和信號(hào)的轉(zhuǎn)換。大鼠麻醉后背位固定，切開(kāi)頸部皮膚，鈍性分離皮下組織及肌肉，玻璃探針?lè)蛛x右側(cè)頸動(dòng)脈，在動(dòng)脈上穿線兩條，一條結(jié)扎遠(yuǎn)心端，動(dòng)脈夾夾住近心端，1 mL注射器針頭針尖處彎成鉤狀，在動(dòng)脈壁上穿洞并勾起動(dòng)脈壁，以輔助壓力容積導(dǎo)管沿頸總動(dòng)脈逆行插入左心室，當(dāng)導(dǎo)管的尖端（電極部分）完全插入頸動(dòng)脈時(shí)，應(yīng)快速結(jié)扎開(kāi)口下端，避免大鼠失血過(guò)多影響監(jiān)測(cè)結(jié)果，插管過(guò)程中隨時(shí)關(guān)注P-V Loop環(huán)，當(dāng)出現(xiàn)規(guī)則的P-V Loop環(huán)時(shí)，表明導(dǎo)管已進(jìn)入左心室，固定插管，對(duì)心臟功能進(jìn)行檢測(cè)。血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)：左室收縮壓（LVSP）、左室舒張末期壓（LVEDP）、左室等容收縮期壓力上升最速率（+dp/dtmax）及反映左室舒張功能的指標(biāo)：左心室舒張所用時(shí)間（Tau）、左室舒張期壓力下降最大速率（-dp/dtmax）。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示，采用Fisher確切概率法進(jìn)行組間差異分析，t檢驗(yàn)用于兩組間差異分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組大鼠死亡率比較 假手術(shù)組自實(shí)驗(yàn)初始至結(jié)束均無(wú)死亡，模型組死亡6只，死亡率為50.00%，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

2.2 大鼠外觀表現(xiàn) 假手術(shù)組大鼠眼睛紅潤(rùn)、呼吸均勻、毛發(fā)較光澤順貼多；精神正常、活潑好動(dòng)；體溫穩(wěn)定、體質(zhì)量逐漸增加；飲食、排泄正常；抓取時(shí)反抗劇烈。模型組大鼠面部、耳部及四肢浮腫、唇舌紫暗；眼周及鼻腔充血；心悸氣短、呼吸短促、氣喘痰鳴；毛發(fā)疏松倒豎，無(wú)光澤，枯黃或微紅精神萎靡；眼瞇不欲睜開(kāi)、縮肩拱背、喜扎堆蜷縮；行動(dòng)遲緩肢冷、體寒尾涼；體質(zhì)量減輕飲食、進(jìn)水量減少；部分出現(xiàn)大便稀溏；抓取時(shí)反抗較輕。

2.3 兩組大鼠RER及產(chǎn)熱量（H1、H2）的動(dòng)態(tài)比較見(jiàn)表1～表3，圖1～圖3。假手術(shù)組RER隨著時(shí)間延長(zhǎng)表現(xiàn)出逐漸增強(qiáng)趨勢(shì)，H1、H2除第6周時(shí)略有減弱外，其趨勢(shì)同RER值表現(xiàn)一致。與假手術(shù)組比較，模型組在第2周時(shí)RER、H1、H2較冠脈結(jié)扎初始增強(qiáng)明顯，隨著時(shí)間的增長(zhǎng)RER值第8周顯著性降低，H1、H2值第6周開(kāi)始直到第8周都顯著降低（P＜0.01）。

圖1 心陽(yáng)虛慢性心衰大鼠RER值隨時(shí)間變化

表1 兩組RER值隨時(shí)間變化的對(duì)比分析（±s）

表1 兩組RER值隨時(shí)間變化的對(duì)比分析（±s）

與模型組比較，**P＜0.01。

組別n 第4周 第6周 第8周假手術(shù)組 1 0 0 . 9 2 5 ± 0 . 0 2 4 0 . 9 4 2 ± 0 . 0 2 1 0 . 9 4 7 ± 0 . 0 2 7**模型組 1 2 0 . 8 7 1 ± 0 . 0 9 2 0 . 8 9 4 ± 0 . 0 2 7 0 . 7 3 5 ± 0 . 0 3 3第0周 第2周0 . 7 8 3 ± 0 . 1 0 7 0 . 8 4 7 ± 0 . 0 4 2 0 . 7 6 1 ± 0 . 0 8 7 0 . 8 9 3 ± 0 . 1 1 4

表2 兩組隨時(shí)間變化H1的對(duì)比分析［kcal/（h·kg），±s］

表2 兩組隨時(shí)間變化H1的對(duì)比分析［kcal/（h·kg），±s］

組別n 第4周 第6周 第8周假手術(shù)組 1 0 1 1 8 4 . 6 ± 1 9 2 . 7 1 0 2 7 . 9 ± 4 5 . 9**1 0 9 2 . 3 ± 2 1 8 . 6**模型組 1 2 9 7 9 . 6 ± 2 2 0 . 2 8 2 3 . 3 ± 6 3 . 9 6 8 1 . 8 ± 1 1 6 . 1第0周 第2周9 6 0 . 1 ± 1 7 1 . 6 1 0 8 9 . 5 ± 1 8 9 . 6 8 1 6 . 7 ± 1 0 0 . 6 1 3 7 3 . 6 ± 3 2 0 . 7

圖2 慢性心衰大鼠H1值隨時(shí)間變化

表3 兩組隨時(shí)間變化H2的對(duì)比分析［kcal/（h·kg），±s］

表3 兩組隨時(shí)間變化H2的對(duì)比分析［kcal/（h·kg），±s］

組別n 第4周 第6周 第8周假手術(shù)組 1 0 9 2 3 . 9 ± 1 4 7 . 5 8 2 6 . 2 ± 4 2 . 3**8 7 3 . 3 ± 1 9 5 . 6**模型組 1 2 7 6 8 . 1 ± 1 8 7 . 8 6 3 1 . 1 ± 6 0 . 9 5 1 1 . 2 ± 8 1 . 3第0周 第2周6 5 8 . 4 ± 1 2 9 . 7 7 6 6 . 4 ± 1 3 8 . 8 5 6 8 . 4 ± 8 6 . 8 1 0 0 0 . 1 ± 2 3 8 . 9

圖3 慢性心衰大鼠H2值隨時(shí)間變化

2.3 兩組心陽(yáng)虛慢性心衰大鼠血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)比較見(jiàn)表4。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠心率（HR）、LVEDP、Tau呈上升趨勢(shì)，差異具有顯著性（P＜0.05）；左室內(nèi)壓上升、下降最大速率均呈降低趨勢(shì)（P＜0.05）

表4 兩組慢性心衰大鼠心功能的影響比較（±s）

表4 兩組慢性心衰大鼠心功能的影響比較（±s）

與假手術(shù)組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

+ d p / d t（m m H g / s）假手術(shù)組 1 0 8 9 . 8 ± 2 3 . 9 6 0 1 5 . 8 8 ± 1 8 9 3 . 3模型組 1 2 7 6 . 2 ± 1 8 . 9 2 8 9 5 . 8 3 ± 8 5 0 . 6 5**組別n L V S P（m m H g）L V E D P（m m H g）3 3 6 . 8 ± 3 1 . 7 -0 . 1 ± 3 . 7 3 9 7 . 3 ± 3 4 . 0*8 . 3 ± 4 . 8**H R（m i n-1）T a u（m s）5 7 5 3 . 5 ± 1 4 4 9 . 7 8 1 0 . 0 4 ± 2 . 4 9 3 0 1 1 . 8 ± 9 9 3 . 6 7**1 9 . 2 2 ± 4 . 4 8**-d p / d t（m m H g / s）

3 討 論

近年來(lái)中醫(yī)病證結(jié)合動(dòng)物模型的研究進(jìn)展顯示，目前就慢性心衰（心陽(yáng)虛證）動(dòng)物的造模文獻(xiàn)數(shù)量及規(guī)范化程度的整體水平偏低，歸納總結(jié)主要的制備方法有腹主動(dòng)脈結(jié)扎結(jié)合寒冷刺激、冠脈結(jié)扎結(jié)合一氧化氮合酶抑制劑、及腹腔注射阿霉素［4-6］，研究表明這些方法基本符合中醫(yī)學(xué)陽(yáng)虛心衰的病證，但是存在動(dòng)物造模周期長(zhǎng)、模型損傷比較大、模型出現(xiàn)時(shí)間節(jié)點(diǎn)不好判斷等問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)心陽(yáng)虛證的制備是在左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎制備心力衰竭心氣虛模型的基礎(chǔ)上，給予模型大鼠一氧化氮合酶抑制劑（LNNA），使大鼠血壓升高，心臟后負(fù)荷增加，心功能惡化致心衰的進(jìn)一步發(fā)展，心氣虛證加劇，在癥狀、體征逐漸表現(xiàn)出心陽(yáng)虛特點(diǎn)，采用這種方法制備的心陽(yáng)虛慢性心衰模型，將更加符合臨床病證特點(diǎn)。

研究表明［7-8］，輕度缺血時(shí)，心肌的能量并沒(méi)有明顯變化或稍有增強(qiáng)，這是因?yàn)樾乃ピ缙?，心臟會(huì)有一種有效的代償性反應(yīng)，可增加心臟的收縮力，使心臟得以維持正常的血液循環(huán)，但在心衰后期，這種代償性反應(yīng)將構(gòu)成心肌肥厚，肥厚的心肌使心肌耗氧增加，而動(dòng)脈供血不足使肥大的心肌出現(xiàn)心肌缺血、缺氧，最終構(gòu)成心肌細(xì)胞凋亡，心肌組織纖維化。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)TSE呼吸代謝系統(tǒng)按照一定的時(shí)間間隔即從冠脈結(jié)扎初期，經(jīng)過(guò)心衰早期發(fā)展至心衰后期，檢測(cè)假手術(shù)組與模型組大鼠22 h內(nèi)呼吸代謝轉(zhuǎn)化率RER及能量代謝的動(dòng)態(tài)變化H1、H2，通過(guò)對(duì)比假手術(shù)與模型組大鼠在相同時(shí)間間期下，其呼吸代謝及產(chǎn)熱量的對(duì)比分析，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)心陽(yáng)虛慢性心衰的發(fā)展，其結(jié)果顯示，假手術(shù)組隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，體質(zhì)量呈現(xiàn)均勻增長(zhǎng)趨勢(shì)，其呼吸代謝轉(zhuǎn)化率及產(chǎn)熱量呈平穩(wěn)增長(zhǎng)趨勢(shì)。模型組大鼠在冠脈結(jié)扎2周時(shí)，RER值、H1、H2均較假手術(shù)組高，隨著時(shí)間延長(zhǎng)至第4周，模型組大鼠RER值、H1值、H2值呈平穩(wěn)下降趨勢(shì)。結(jié)合造模過(guò)程中動(dòng)物外觀表現(xiàn)、死亡率等指標(biāo)，可以較好的判斷研究的干預(yù)點(diǎn)。

實(shí)驗(yàn)后期通過(guò)壓力容積檢測(cè)系統(tǒng)評(píng)價(jià)各組大鼠心功能。心衰的早期主要是心臟負(fù)荷的過(guò)重，心臟為滿足機(jī)體的需要表現(xiàn)為心室或心房代償性的擴(kuò)張或心室壁的肥厚，隨著病情的加重導(dǎo)致心室重塑，出現(xiàn)心臟病理結(jié)構(gòu)的改變及心臟功能的下降。由于心臟收縮之前回心血量的增加，使心臟在收縮時(shí)需要較大的張力，當(dāng)心肌纖維拉長(zhǎng)到一定范圍時(shí)，心臟的收縮力下降?！纃p/dtmax和LVSP均是反映左心室心肌的收縮能力的指標(biāo)，因此心衰發(fā)生時(shí)，會(huì)出現(xiàn)±dp/dtmax、LVSP的下降，此時(shí)，心臟為滿足機(jī)體需要主要通過(guò)增加心臟舒張末期左心室容量代償完成，導(dǎo)致左心室舒張末期壓力的增大，LVEDP、Tau是反映左心室舒張功能的指標(biāo)，因此心衰時(shí)會(huì)出現(xiàn)LVEDP的升高，Tau時(shí)間的延長(zhǎng)。本研究數(shù)據(jù)結(jié)果顯示與假手術(shù)組比較心陽(yáng)虛慢性心衰模型組大鼠HR、LVEDP及Tau顯著性升高；±dp/dtmax及LVSP下降符合心陽(yáng)虛慢性心衰心功能變化特點(diǎn)。

本研究通過(guò)前期結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支，后期給予一氧化氮合酶抑制劑（左旋硝基精氨酸），采用無(wú)創(chuàng)的呼吸代謝系統(tǒng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)大鼠的呼吸代謝、能量代謝變化情況來(lái)判斷模型狀態(tài)，建立大鼠心陽(yáng)虛慢性心衰模型并通過(guò)全面檢測(cè)大鼠的呼吸代謝能量代謝及血流動(dòng)力學(xué)等指標(biāo)從宏觀上對(duì)各組大鼠機(jī)體表現(xiàn)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)做為心陽(yáng)虛慢性心衰模型的重要評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)心衰模型建立實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，對(duì)模型成功及造模周期難以把握的不足，為更客觀有效地評(píng)價(jià)動(dòng)物模型提供了一種新的手段和方法。

（作者聲明：侯衍豹與尹翠翠并列第一作者）

［1］ 陳新宇，蔡虎志，余洪，等.慢性心衰心陽(yáng)虛型病證動(dòng)物模型的研究進(jìn)展與評(píng)析［J］．中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，11（8）：108-109.

［2］ 李靜，楊勇，尹翠翠，等.腎陽(yáng)虛小鼠模型呼吸代謝轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)熱量指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)研究［J］．山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，37（2）：148-150.

［3］ Vrang N，Madsen AN，Tang-Christensen M，et al.PYY（3-36）reduces food intake and body weight and improves insulin sensitivity in rodent models of diet-induced obesity［J］.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol，2006，291（2）：R367-375.

［4］ 王大偉，楊喆，嚴(yán)夏．溫陽(yáng)救心方對(duì)陽(yáng)虛型慢性心衰大鼠心功能的影響［J］．中藥新藥與臨床藥理，2011，22（4）：410-413.

［5］ 王碩仁，趙明鏡，王振濤，等．建立心肌梗死心氣虛血瘀證和心陽(yáng)虛血瘀證病證動(dòng)物模型的研究［J］．中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2008，28（3）：245-248.

［6］ 張友計(jì)，雷蕾，李華，等．心力衰竭心陽(yáng)虛證大鼠與心鈉素的相關(guān)性研究［J］．瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，31（5）：508-511.

［7］ Catalucci，D.M.V.Latronico，O.Ellingsen，et al.Physiological myocardial hypertrophy：how and why［J］.Front Biosci，2008，13（6）：312-24.

［8］ 吳俊標(biāo)．環(huán)維黃楊星D對(duì)心肌肥厚的影響及其作用機(jī)制［D］．廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2012.

The Dynamic Monitoring on the Establishment and Evaluation of Rat Model of Chronic Heart Failure with Heart Yang Deficiency Based on Respiratory Metabolism System

HOU Yanbao，YIN Cuicui，YANG Yong，et al.Shandong University of TCM，Shandong，Jinan 250355，China

Objective：To establish and evaluate rat model of chronic heart failure with heart yang deficiency，according to the clinical manifestations of chronic heart failure，with the early ligation of the left anterior descending coronary artery，and the latter nitric oxide synthase inhibitor（L-NNA）.Methods：Wistar rats were randomly divided into two groups：the sham group and the model group of chronic heart failure with heart yang deficiency. Chronic heart failure was caused by coronary artery ligation in model group，the sham group threading without ligation.LNNA was given for 4 weeks to cause heart failure.Respiratory metabolism system was used to monitor the changes of respiratory metabolism and energy metabolism in rats during the experiment.The hemodynamics was used to evaluate the cardiac function of rats in each experimental group.At the end of the experiment，these data were recorded-Timely records of the deaths，the appearance of signs，Mental status（such as behavior，movement，breathing）diet，excretion and edema etc.Results：Different from the sham group，in the second week，respiratory metabolism and energy metabolism were significantly enhanced，compared with the initial coronary artery ligation，while in the Sixth to eighth week，the respiratory metabolism and energy metabolism of time showed a gradual weakening trend（P＜0.01）.Conclusion：Early ligation of the left anterior descending coronary artery，and the later nitric oxide synthase inhibitor（L-NNA）to establish and evaluate rat model of chronic heart failure with heart yang deficiency，with respiratory metabolism system can dynamically monitor the status and physiological function of animal，and accurately determine the time window of the model，providing an objective，noninvasive method to judge the rat model of chronic heart failure with heart yang deficiency.

Heart yang deficiency；Chronic heart failure；Respiratory metabolism；Energy metabolism；Hemo

R285.5

A

1004-745X（2015）08-1335-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.08.008

2015-04-07）

山東省高等學(xué)?？萍加?jì)劃項(xiàng)目（Z09LF31）

△通信作者（電子郵箱：yy7204＠163.com）