王吉成 劉軒 唐勁天等

【摘要】目的：比較桑葉70%乙醇提取物液體發(fā)酵前后的抗氧化活性，并考察發(fā)酵前后總黃酮、總酚酸含量的變化。方法：利用冠突散囊菌在桑葉70%乙醇提取物的液體培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)，將得到的發(fā)酵液和未發(fā)酵的桑葉70%乙醇提取物以抗壞血酸和EDTA為陽性對(duì)照，針對(duì)指定指標(biāo)（DPPH、ABTS、FRAP、OH·、螯合能力）進(jìn)行體外抗氧化活性試驗(yàn)；并對(duì)發(fā)酵前后總黃酮、總酚酸含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：未發(fā)酵桑葉70%乙醇提取物的抗氧化活性整體優(yōu)于液體發(fā)酵后的抗氧化活性。其中未發(fā)酵桑葉70%乙醇提取物對(duì)DPPH、ABTS、螯合能力的IC50值分別為：4.69mg·ml-1、2.03mg·ml-1、20.89mg·ml-1，而液體發(fā)酵后的桑葉70%乙醇提取物三者的IC50值分別為：12.42mg·ml-1、2.65mg·ml-1、14.81mg·ml-1；同時(shí)含量測(cè)定結(jié)果顯示，發(fā)酵后桑葉中總多酚含量較發(fā)酵前明顯下降，而發(fā)酵后桑葉中總黃酮含量卻明顯高于發(fā)酵前總黃酮含量。其中發(fā)酵前桑葉中總黃酮、總酚酸含量分別為4.39mg·ml-1、3.95mg·ml-1，而發(fā)酵后桑葉中總黃酮含量高達(dá)8.53mg·g-1，總酚酸卻下降為1.24mg·g-1。結(jié)論：桑葉70%乙醇提取物液體發(fā)酵前后體外均具有一定的抗氧化活性，但發(fā)酵前抗氧化作用較明顯。此外通過微生物轉(zhuǎn)化，顯著性提高桑葉中總黃酮含量的同時(shí)，卻降低了桑葉中總酚酸含量，因此可以推測(cè)，桑葉中起到抗氧化作用的主要成分并非是黃酮類化合物，而是非黃酮類的多酚類成分。

【關(guān)鍵詞】桑葉；冠突散囊菌；液體發(fā)酵；抗氧化；總黃酮；總多酚

【中圖分類號(hào)】R284.1【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2014）23-0015-04

冠突散囊菌，又稱“金花”菌，是茯磚茶的優(yōu)勢(shì)菌種。它可以降低茶葉原料的澀味，同時(shí)自身帶來的菌花香及發(fā)酵過程中產(chǎn)生的色素都增強(qiáng)了茶湯的品質(zhì)[1]。在生產(chǎn)、儲(chǔ)存和治療評(píng)價(jià)中，將冠突散囊菌的質(zhì)量和數(shù)量作為判斷茯磚茶品質(zhì)優(yōu)劣的標(biāo)志。

桑葉為?？浦参颩orus alba L.的干燥葉。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品，歷代本草均有收載。其性寒，味甘、苦，具有疏散風(fēng)熱、清肺潤(rùn)燥、清肝明目之功效，是常用中藥之一[2]。桑葉中含有很多活性物質(zhì)，如多酚類、黃酮類、生物堿類、多糖類、苯丙素類及甾醇類化合物[3]。近年來，有關(guān)桑葉的抗氧化活性的研究報(bào)道較多，但利用真菌液體發(fā)酵桑葉，并對(duì)其某一類活性物質(zhì)含量以及抗氧化能力的研究未見報(bào)道。本試驗(yàn)利用從茯磚茶中分離得到的冠突散囊菌，對(duì)桑葉進(jìn)行單一菌種的液體發(fā)酵，意在考察液體發(fā)酵對(duì)桑葉中抗氧化成分含量及能力的影響。

6討論

自由基是生物體新陳代謝過程中產(chǎn)生的一類可以單獨(dú)存在的具有高度氧化活性的物質(zhì)，其化學(xué)性質(zhì)相當(dāng)活躍[12]。過量的自由基誘發(fā)機(jī)體氧化反應(yīng)，可損害機(jī)體的組織和細(xì)胞，進(jìn)而導(dǎo)致衰老[13-14]。植物中多酚、黃酮等活性物質(zhì)能夠清除過剩的自由基，具有一定的抗氧化活性。

本次研究發(fā)現(xiàn)，利用冠突散囊菌對(duì)桑葉進(jìn)行液體發(fā)酵，能夠明顯增加其總黃酮含量，但同時(shí)也顯著性降低了桑葉中總多酚含量。同時(shí)結(jié)合體外抗氧化活性試驗(yàn)，可知發(fā)酵前后桑葉70%乙醇提取物對(duì)DPPH、ABTS+自由基具有一定的清除能力，對(duì)鐵離子也具有一定的還原能力，而對(duì)OH自由基的清除能力較差，且發(fā)酵后的桑葉70%乙醇提取物對(duì)自由基清除能力及鐵還原能力均較發(fā)酵前有所降低，暗示桑葉中發(fā)揮主要抗氧化作用的活性物質(zhì)是酚類物質(zhì)多非黃酮類的。但對(duì)于與Fe2+的螯合能力而言，發(fā)酵后桑葉70%乙醇提取物活性要略高于發(fā)酵前，也許是由于其抗氧化機(jī)制的不同，具體原因有待后續(xù)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)一步研究。

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（收稿日期：2014.09.02）