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極低頻交變磁場(chǎng)對(duì)過(guò)氧化氫酶活性的影響

2014-12-25 02:27:36薛麗萍孟亞萍趙娟娟徐學(xué)明
關(guān)鍵詞:磁場(chǎng)強(qiáng)度過(guò)氧化氫磁場(chǎng)

薛麗萍 , 孟亞萍 , 趙娟娟 , 楊 哪 , 徐學(xué)明 *,2

(1.江南大學(xué) 食品學(xué)院,江蘇 無(wú)錫 214122;2.食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 無(wú)錫 214122)

過(guò)氧化氫酶(Catalase,CAT)可以催化 H2O2分解成H2O和O2,廣泛存在于動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)。該酶結(jié)構(gòu)中特殊的鐵卟啉環(huán)是其主要的活性中心[1]。過(guò)氧化氫酶不僅是生物演化過(guò)程中建立起來(lái)的生物防御系統(tǒng)的關(guān)鍵酶之一,并在食品、醫(yī)藥、紡織、造紙、環(huán)保等行業(yè)具有重要的應(yīng)用[1-2]。對(duì)于許多帶金屬活性中心基團(tuán)的酶,其運(yùn)動(dòng)方向會(huì)在磁場(chǎng)作用下發(fā)生變化,并且洛侖茲力會(huì)使拉默半徑發(fā)生改變,從而導(dǎo)致大分子構(gòu)相發(fā)生扭曲或變形,最終改變酶的活性,細(xì)胞正常的生理活動(dòng)也會(huì)受到影響[3]。Haberditzl W首次報(bào)道了在非勻強(qiáng)磁場(chǎng)的作用下,過(guò)氧化氫酶的酶活發(fā)生可預(yù)估的增加,這可能是一種繼發(fā)效應(yīng),即順磁性氧被加速?gòu)姆磻?yīng)部位移除[4]。Vainer L M等在1978年報(bào)道了靜磁場(chǎng)暴露下對(duì)過(guò)氧化氫酶和[Fe3+(EDTA)]2催化H2O2分解速率的影響,當(dāng)磁場(chǎng)強(qiáng)度達(dá)到0.8 T時(shí),過(guò)氧化氫酶和 [Fe3+(EDTA)]2的催化速率分別提高了(20±5)%和(24±5)%[5]。張軍等研究了強(qiáng)穩(wěn)恒磁場(chǎng)對(duì)離體牛肝CAT構(gòu)象的影響,過(guò)氧化氫酶經(jīng)過(guò)0.23~0.61 T磁場(chǎng)處理,其紫外光譜和熒光光譜都出現(xiàn)了吸收峰的改變,同時(shí)酶活也有一定程度的增加[6]。目前,關(guān)于磁場(chǎng)對(duì)過(guò)氧化氫酶的影響的研究主要集中于脈沖磁場(chǎng)或者靜磁場(chǎng),研究參數(shù)主要是磁場(chǎng)強(qiáng)度和脈沖數(shù),而關(guān)于極低頻交變磁場(chǎng)對(duì)過(guò)氧化氫酶影響的研究較少。磁場(chǎng)是在一定空間區(qū)域內(nèi)連續(xù)分布的矢量場(chǎng),N、S極不斷的交替變化的磁場(chǎng)稱為交變磁場(chǎng)。極低頻磁場(chǎng)通常是指頻率在0~300 Hz之間的磁場(chǎng)[7]。而世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)則將頻率在0~100 kHz之間的磁場(chǎng)統(tǒng)稱為極低頻磁場(chǎng)[8]。

作者所在課題組采用通電螺線管產(chǎn)生的交變磁場(chǎng)對(duì)過(guò)氧化氫酶進(jìn)行處理,考察了不同溫度、頻率、pH、磁場(chǎng)強(qiáng)度及時(shí)間對(duì)過(guò)氧化氫酶的活性和二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響,初步探討極低頻交變磁場(chǎng)對(duì)過(guò)氧化氫酶的作用機(jī)理。

1 材料與方法

1.1 主要材料與儀器

過(guò)氧化氫酶 2 000~5 000 U/mg Protein,Sigma進(jìn)口分裝;磷酸二氫鉀、氫氧化鈉、過(guò)氧化氫(質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%)、去離子水,國(guó)產(chǎn)。

1.2 儀器與設(shè)備

螺線管極低頻交變磁場(chǎng)處理裝置,作者自行研制;TU-1900型雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、MOS-450型AF-CD圓二色光譜儀,法國(guó)Biologic公司制造;AL204型電子天平、特斯拉計(jì),國(guó)產(chǎn)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 極低頻交變磁場(chǎng)試驗(yàn)環(huán)境 極低頻交變磁場(chǎng)采用變頻電源生成35~400 Hz、最大功率2 000 W的正弦波,信號(hào)電流經(jīng)限流電阻并激勵(lì)螺線管,生成低頻交變磁場(chǎng)。樣品置于雙螺線管中心,且溫度由恒溫循環(huán)水浴控制,裝置如圖1所示。交變磁場(chǎng)強(qiáng)度由HT108型特斯拉計(jì)的縱向傳感器檢測(cè),交變磁場(chǎng)頻率分別為 50、100、200、400 Hz; 磁場(chǎng)強(qiáng)度分別為 200、300、400、500 mT。

圖1 極低頻交變磁場(chǎng)裝置示意圖Fig.1 Extremely low frequency alternating magnetic field devices

1.3.2 酶活測(cè)定 將過(guò)氧化氫酶液放入極低頻磁場(chǎng)中處理一定時(shí)間后測(cè)定酶活,以相同溫度、相同時(shí)間且未經(jīng)過(guò)磁場(chǎng)處理的酶液作為對(duì)照。酶活測(cè)定方法參考Beers and Sizers方法并進(jìn)行改進(jìn)[9]。反應(yīng)池:1 cm石英比色皿,1 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.18%過(guò)氧化氫 (溶于0.05 mol/L pH 7.0磷酸鹽緩沖液),0.1 mL酶液(溶于0.05 mol/L pH 7.0磷酸鹽緩沖液),1 mL去離子水,以去離子水為參比?;旌锨胺謩e在25℃水浴中保溫5 min。底物與酶液混合后立即在240 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度變化,每10 s記錄一次吸光度A,根據(jù)酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線最初直線段的斜率(△A/t)計(jì)算酶活力。在1 min內(nèi)引起吸光度增加0.001所需的酶量為一個(gè)酶活單位(以U/min表示)。相對(duì)酶活的計(jì)算如式(1)。

1.3.3 不同磁場(chǎng)條件對(duì)過(guò)氧化氫酶酶活的影響

1)不同磁場(chǎng)暴露時(shí)間:固定溫度為25℃,酶液pH 7.0,磁場(chǎng)強(qiáng)度 200 mT,磁場(chǎng)頻率 50 Hz,磁化時(shí)間分別為 0.5、1、2、4、6、8 h。

2)不同磁場(chǎng)強(qiáng)度:固定溫度為25℃,酶液pH 7.0,磁化時(shí)間8 h,磁場(chǎng)頻率50 Hz,磁場(chǎng)強(qiáng)度分別為200、300、400、500 mT。

3)不同交變頻率:固定溫度為25℃,酶液pH 7.0,磁場(chǎng)強(qiáng)度200 mT,磁化時(shí)間8 h,磁場(chǎng)頻率分別為50、100、200、400 Hz。

4)不同溫度:固定酶液pH 7.0,磁場(chǎng)強(qiáng)度200 mT,磁化時(shí)間8 h,磁場(chǎng)頻率50 Hz,溫度分別為25、35、45、55 ℃。

5)不同酶液 pH:固定溫度為 25℃,時(shí)間 8 h,磁場(chǎng)強(qiáng)度200 mT,磁場(chǎng)頻率50 Hz,酶液pH分別為5.0、6.0、7.0、8.0。

1.3.4 二級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定 將過(guò)氧化氫酶溶液在不同的磁場(chǎng)環(huán)境中暴露2 h,以未進(jìn)行磁化處理的酶液作為對(duì)照樣,通過(guò)圓二色譜儀測(cè)定,石英樣品池的光程為0.1 cm,掃描速度1 nm/s,過(guò)氧化氫酶質(zhì)量濃度為 0.1 mg/mL,測(cè)定波長(zhǎng)范圍為 190~250 nm,圓二色譜數(shù)據(jù)為3次掃描平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 磁場(chǎng)暴露時(shí)間對(duì)過(guò)氧化氫酶的影響

從圖2可以看出,不論是否經(jīng)過(guò)磁場(chǎng)暴露,實(shí)驗(yàn)體系下過(guò)氧化氫酶的酶活都隨著時(shí)間的增加逐漸下降,并且呈現(xiàn)一定的波動(dòng)。在磁場(chǎng)強(qiáng)度200 mT,磁場(chǎng)頻率50 Hz的條件下,酶活在前2 h下降速度較快,而4 h處小幅上升,之后又緩慢下降。而對(duì)照組的酶活下降趨勢(shì)則較為平緩。從相對(duì)酶活的變化趨勢(shì)可以看出,前1 h的相對(duì)酶活都在100%以上,說(shuō)明在此磁場(chǎng)條件下可以造成酶活提高。此后相對(duì)酶活的下降速度較快,同時(shí)在4 h處出現(xiàn)了波動(dòng)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與劉勇等[10]報(bào)道的研究結(jié)果有相似之處,即0.15、0.30、0.45 T磁場(chǎng)處理后酶活性降低比較緩慢,并在開(kāi)始一段時(shí)間內(nèi)酶活性明顯增大。本研究中酶活降低的速率大于對(duì)照樣品且波動(dòng)較大,這可能是由于本實(shí)驗(yàn)中采用了極低頻交變磁場(chǎng),在環(huán)境體系中會(huì)造成帶電蛋白質(zhì)表面形成不同方向的感應(yīng)電流,產(chǎn)生安培力而造成蛋白質(zhì)空間構(gòu)象變化[11]。而已有的文獻(xiàn)報(bào)道,采用穩(wěn)恒磁場(chǎng)和靜態(tài)磁化法,對(duì)酶的作用力較小。

圖2 過(guò)氧化氫酶在磁場(chǎng)處理不同時(shí)間的酶活和相對(duì)酶活變化Fig.2 Effect of time on the specific and relative enzyme activity of catalase under magnetic field

2.2 磁場(chǎng)強(qiáng)度對(duì)過(guò)氧化氫酶的影響

從圖3可以看出,不同磁場(chǎng)強(qiáng)度下,酶活都呈現(xiàn)下降趨勢(shì),但變化趨勢(shì)不一??傮w上,隨著磁場(chǎng)強(qiáng)度的增加,酶活下降速率增加??梢钥闯?,在前1 h,500 mT磁場(chǎng)下酶活和相對(duì)酶活的下降速率最大,但同時(shí)此磁場(chǎng)條件下相對(duì)酶活出現(xiàn)了較大波動(dòng),從2 h處的47.26%增加到4 h處的73.06%,可能是因?yàn)檫^(guò)氧化氫酶在較強(qiáng)的磁場(chǎng)強(qiáng)度下,側(cè)鏈形狀發(fā)生了變化,從而產(chǎn)生了不同的變化趨勢(shì)。

同時(shí),相對(duì)酶活的變化趨勢(shì)波動(dòng)性更大,說(shuō)明磁場(chǎng)強(qiáng)度可以更大程度地改變酶的結(jié)構(gòu)。酶活性隨磁場(chǎng)改變的無(wú)規(guī)律性是磁場(chǎng)改變酶活性效應(yīng)的一個(gè)特征,反映了磁場(chǎng)對(duì)酶的作用是高度非線性的生物學(xué)過(guò)程。酶的磁效應(yīng)極其復(fù)雜,影響因素眾多,“非線性”的表象正是其非線性作用本質(zhì)規(guī)律的反映[12]。

圖3 過(guò)氧化氫酶在不同磁場(chǎng)強(qiáng)度下的酶活和相對(duì)變化Fig.3 Effect of the magnetic field intensity on the specific and relative enzyme activity of catalase

2.3 交變頻率對(duì)過(guò)氧化氫酶酶活的影響

從圖4可以看出,在不同交變頻率下酶活和相對(duì)酶活都呈現(xiàn)下降趨勢(shì)且不同頻率下酶活減小的速率不同。隨著頻率的增加,酶活減小的程度放緩。50 Hz頻率下的酶活始終大于其他3種轉(zhuǎn)速下的酶活。100 Hz下前2 h,酶活較高,相對(duì)酶活為102.84%,暴露4 h后則急劇減小到28.24%。200 Hz和400 Hz下酶活變化大體相同,都維持在較低的數(shù)值。說(shuō)明頻率升高會(huì)影響酶的活性,尤其是較高的頻率會(huì)抑制酶活。頻率越高在蛋白質(zhì)表面感應(yīng)的環(huán)形分子電流頻率就越高,相鄰蛋白質(zhì)之間或蛋白質(zhì)內(nèi)部產(chǎn)生的交變安培力可能對(duì)其酶活有較大的影響。

圖4 過(guò)氧化氫酶在不同磁場(chǎng)頻率下的酶活和相對(duì)酶活變化Fig.4 Effect of the magnetic field frequency on the specific and relative enzyme activity of catalase

2.4 磁場(chǎng)暴露下溫度對(duì)過(guò)氧化氫酶酶活的影響

從圖5中可以發(fā)現(xiàn),在實(shí)驗(yàn)的4個(gè)不同溫度下,酶活的變化趨勢(shì)基本相同,酶活隨著時(shí)間的增加逐漸減小,同時(shí)在2~4 h之間出現(xiàn)了波動(dòng),與前面所述時(shí)間變化趨勢(shì)大體相似。25℃條件下酶活始終高于其他條件下的,35℃和45℃條件下酶活大小交替增加,55℃下酶活始終處于較低的狀態(tài)。張軍[13]等對(duì)4℃和25℃、0.23 T磁場(chǎng)處理下離體過(guò)氧化氫酶研究發(fā)現(xiàn),相同磁場(chǎng)在處理溫度不同的條件下,引起的磁效應(yīng)是不相同的,并且影響效應(yīng)隨溫度的增加趨于顯著。

與此同時(shí),可以發(fā)現(xiàn)25、35、45℃的相對(duì)酶活變化趨勢(shì)相差不大,只是減少的程度不同,這可能是過(guò)氧化氫酶的最適溫度不同造成的。而55℃的變化趨勢(shì)卻和前三者差異巨大,55℃條件下相對(duì)酶活急劇增加,最高點(diǎn)為相同時(shí)間、溫度下對(duì)照酶活的2 142.86%,由于過(guò)氧化氫酶在55℃放置8 h已經(jīng)完全失活酶活值為0,故8 h處相對(duì)酶活無(wú)法計(jì)算。究其原因,可能是因?yàn)闃O低頻磁場(chǎng)和高溫共同作用下較大程度地改變了過(guò)氧化氫酶的結(jié)構(gòu),使其更加趨于穩(wěn)定,獲得較好的相對(duì)耐高溫特性。這個(gè)推論將在后面的實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步驗(yàn)證。

圖5 過(guò)氧化氫酶在不同溫度下的酶活和相對(duì)酶活變化Fig.5 Effect of temperature on the specific and relative enzyme activity of catalase

2.5 酶液pH對(duì)過(guò)氧化氫酶酶活的影響

從圖6看出,pH影響酶活變化的趨勢(shì)較為明朗,且與之前所述變化趨勢(shì)大體一致。由于過(guò)氧化氫酶的最適pH是7.0,故最適pH周圍酶活較高,而在pH 5情況下酶活受到抑制,故酶活較低。相對(duì)酶活的變化趨勢(shì)與酶活變化相似,說(shuō)明在磁場(chǎng)條件相同時(shí),對(duì)酶的影響因素主要是pH,而這也是酶活和相對(duì)酶活變化較為規(guī)律的原因。pH不同則酶表面所帶電荷量有差異,在交變磁場(chǎng)下于酶表面產(chǎn)生的感應(yīng)電流大小有異則是對(duì)酶活造成影響的主要原因。

圖6 過(guò)氧化氫酶在不同pH下的酶活和相對(duì)酶活變化Fig.6 Effect of pH value on the specific and relative enzyme activity of catalase

2.6 磁場(chǎng)處理對(duì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響

圓二色譜法(CD)是最常用的分析蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的方法,通過(guò)CD圖譜能分析計(jì)算α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角、無(wú)規(guī)卷曲等各組分的含量。典型α-螺旋結(jié)構(gòu)在 208、222 nm處有兩個(gè)負(fù)峰,典型β-折疊結(jié)構(gòu)在216 nm處有一個(gè)負(fù)峰[14]。由于溫度和磁場(chǎng)強(qiáng)度對(duì)酶活影響較大,故選擇了25℃、200 mT,25℃、500 mT,55℃、200 mT 3個(gè)磁場(chǎng)條件進(jìn)行CD遠(yuǎn)紫外圖譜掃描,并且做了對(duì)照組的掃描。

從圖7可以看到,在25℃下不同的磁場(chǎng)條件對(duì)過(guò)氧化氫酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)有一定的影響,但是CD圖譜的形狀相差不大,可見(jiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)差異不大。對(duì)照組的圓二色光譜圖中在209、215 nm處有兩個(gè)明顯負(fù)峰,表明過(guò)氧化氫酶的二級(jí)構(gòu)象中同時(shí)存在α-螺旋和β-折疊結(jié)構(gòu),經(jīng)過(guò)200、500 mT磁場(chǎng)處理后,過(guò)氧化氫酶的CD圖譜發(fā)生了一些變化,209和215nm處的負(fù)峰值略有上升,并且隨著磁場(chǎng)強(qiáng)度的增強(qiáng),負(fù)峰值逐漸上升。

圖7 25℃下不同處理方式過(guò)氧化氫酶的圓二色譜Fig.7 CD spectra of catalase treated under 25℃at different conditions

從表1的數(shù)據(jù)可以看出,經(jīng)過(guò)磁場(chǎng)處理,過(guò)氧化氫酶的α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角、無(wú)規(guī)卷曲的含量都有不同程度的變化。磁場(chǎng)條件25℃、200 mT處理的酶液與對(duì)照相比,α-螺旋含量急劇減少,β-折疊含量略有增加,β-轉(zhuǎn)角含量增加,無(wú)規(guī)卷曲含量減少。磁場(chǎng)條件25℃、500 mT處理的酶液與對(duì)照相比,α-螺旋含量急劇減少,β-折疊略有增加,β-轉(zhuǎn)角含量減少,無(wú)規(guī)卷曲含量增加。

表1 25℃不同處理?xiàng)l件下過(guò)氧化氫酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)組成Table 1 Composition of catalase secondary structure on 25℃under different treatment conditions

在蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)中,α-螺旋和β-折疊均為有序結(jié)構(gòu),α-螺旋和β-折疊結(jié)構(gòu)的增加將會(huì)增加酶的活性,反之減小則會(huì)減小酶的活性,因此又選擇了將α-螺旋和β-折疊總量作為一個(gè)參數(shù)來(lái)衡量酶二級(jí)結(jié)構(gòu)變化。從表1中數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn),經(jīng)過(guò)磁場(chǎng)處理后α-螺旋和β-折疊的總量小于對(duì)照組,且磁場(chǎng)強(qiáng)度越大,含量越少,這與之前的酶活結(jié)果一致。

同樣,如圖8所示,55℃對(duì)照的CD光譜圖中也存在兩個(gè)負(fù)峰,分別在210、222 nm附近,表明二級(jí)構(gòu)象中同時(shí)含有α-螺旋和β-折疊兩種結(jié)構(gòu)。55℃磁場(chǎng)處理的過(guò)氧化氫酶CD光譜圖中210、224 nm的負(fù)峰值明顯上升,且圖譜形狀發(fā)生較大變化。

圖8 55℃下不同處理方式過(guò)氧化氫酶的圓二色譜Fig.8 CD spectra of catalase treated under 25℃at different conditions

見(jiàn)表 2,55℃、200 mT條件下與對(duì)照相比,α-螺旋含量增加,β-折疊含量減少,β-轉(zhuǎn)角含量減少,無(wú)規(guī)卷曲含量也減少。由表2數(shù)據(jù)可知,55℃磁場(chǎng)處理后α-螺旋和β-折疊的總量大于對(duì)照組,且酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)整體上有向α-螺旋轉(zhuǎn)化的趨勢(shì),因而提高了酶的活性。

表2 55℃不同處理?xiàng)l件下過(guò)氧化氫酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)組成Table 2 Composition of catalase secondary structure on 55℃under different treatment conditions

綜合以上結(jié)果說(shuō)明,在55℃、200 mT的磁場(chǎng)條件下,過(guò)氧化氫酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生了較大變化,這也與之前酶活變化的結(jié)果吻合。故而推測(cè)過(guò)氧化氫酶在此極端條件下形成了具有相對(duì)耐高溫的結(jié)構(gòu)。

同時(shí)可以看到,經(jīng)過(guò)磁場(chǎng)暴露處理后,無(wú)論是25℃還是55℃,過(guò)氧化氫酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)各組分含量差別不大,但是跟對(duì)照樣品相比,各組分含量都有一定的變化,尤其是55℃條件下。這說(shuō)明可能55℃、200 mT磁場(chǎng)會(huì)促使過(guò)氧化氫酶形成某種穩(wěn)定結(jié)構(gòu)來(lái)抵抗外界條件的變化。

另外,由于過(guò)氧化氫酶的活性中心鐵卟啉環(huán)存在高自旋的Fe3+,25℃、200 mT,25℃、500 mT和55℃、200 mT 3種磁場(chǎng)對(duì)其的擾動(dòng)會(huì)影響酶的活性。由于蛋白質(zhì)分子的主鏈較為穩(wěn)固,而側(cè)鏈具有較大的柔性,有自由運(yùn)動(dòng)的能力。由此推測(cè)可能在25℃、200mT,25℃、500 mT和55℃、200 mT 3種磁場(chǎng)的作用下側(cè)鏈發(fā)生了一定程度的扭轉(zhuǎn),形成了新的分布取向,從而改變了二級(jí)結(jié)構(gòu)各組分的數(shù)量。溫度升高,酶的構(gòu)象逐漸從鈍化態(tài)轉(zhuǎn)為活化態(tài),其側(cè)鏈的運(yùn)動(dòng)自由度也增加[6]。溫度越高,磁場(chǎng)對(duì)側(cè)鏈分布的影響就越大,這也可能是55℃磁場(chǎng)處理后過(guò)氧化氫酶二級(jí)結(jié)構(gòu)與對(duì)照樣品相差較大的原因。同時(shí),猜測(cè)高自旋的Fe3+很可能是一個(gè)主要的推動(dòng)力。由此推測(cè)磁場(chǎng)處理后過(guò)氧化氫酶的三級(jí)結(jié)構(gòu)可能也有較大變化,而文獻(xiàn)也有類似報(bào)道[3],具體的情況還有待進(jìn)一步研究。

3 結(jié)語(yǔ)

1) 過(guò)氧化氫酶在 25~55 ℃、200~500 mT、50~400 Hz磁場(chǎng)處理下酶活隨著時(shí)間延長(zhǎng)而出現(xiàn)不同程度的降低,并且伴有波動(dòng)。

2)不同磁場(chǎng)處理?xiàng)l件對(duì)過(guò)氧化氫酶的相對(duì)酶活影響程度不同,其中頻率、pH對(duì)相對(duì)酶活的影響較為平緩且有規(guī)律性,溫度和磁場(chǎng)強(qiáng)度對(duì)相對(duì)酶活的影響比較復(fù)雜,并且在55℃、200 mT條件下,形成了具有相對(duì)耐高溫的結(jié)構(gòu)。過(guò)氧化氫酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)CD圖譜顯示,55℃磁場(chǎng)處理后過(guò)氧化氫酶的α-螺旋和β-折疊的總量大于對(duì)照組,這與相對(duì)酶活變化的結(jié)果吻合。

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