周 穎，張 輝，謝永紅，李曉超，沈 彥，尹端端

(秦皇島市第一醫(yī)院 1.病理科；2.科教科；3.腫瘤科， 河北 秦皇島 066000)

研究論文

HPV感染、HIF-1α及VEGF蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌相關(guān)

周 穎1*，張 輝1，謝永紅2，李曉超1，沈 彥1，尹端端3

(秦皇島市第一醫(yī)院 1.病理科；2.科教科；3.腫瘤科， 河北 秦皇島 066000)

目的探討人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)發(fā)生中的病因?qū)W意義，并初步分析HPV感染與低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)蛋白表達(dá)之間的關(guān)系。方法用免疫組化法檢測(cè)60例NSCLC及20例肺良性病變組織中HIF-1α和VEGF蛋白表達(dá)，用PCR法選用HPV16、18型特異性引物檢測(cè)兩組中HPV DNA的表達(dá)。結(jié)果1)NSCLC組HPV DNA積分吸光度比值為0.6046±0.0224，顯著高于肺良性病變組的0.0275±0.1230(P<0.05)。2)NSCLC組HIF-1α和VEGF蛋白的平均吸光度值分別為0.2548±0.0219和0.2051±0.0321，均顯著高于肺良性病變組(0.0826±0.0150和0.0726±0.0227)(P<0.05)。3)NSCLC中HIF-1α的表達(dá)率與VEGF呈正相關(guān)(P<0.05)。4) NSCLC中HPV(+)組VEGF的表達(dá)率為56.0%，顯著高于HPV(-)組的28.6%(P<0.05)。結(jié)論HPV感染可能是NSCLC發(fā)生的病因?qū)W因素之一；HPV感染可能通過(guò)上調(diào)VEGF的表達(dá)，促進(jìn)肺癌的發(fā)生發(fā)展。

非小細(xì)胞肺癌；人乳頭狀瘤病毒；低氧誘導(dǎo)因子-1α；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

人乳頭狀瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是一種DNA病毒，感染人和動(dòng)物的皮膚或黏膜可引起增殖性損傷。近年來(lái)，越來(lái)越多的國(guó)內(nèi)外臨床和實(shí)驗(yàn)室研究檢測(cè)出肺癌患者攜帶HPV[1- 2]，尤其是HPV 16和18型。但HPV感染與肺癌的關(guān)系，目前說(shuō)法不一。低氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxia inducible factor-1，HIF-1)是近年發(fā)現(xiàn)的一種轉(zhuǎn)錄因子，已有研究發(fā)現(xiàn)HIF-1α在肺癌、乳腺癌等多種腫瘤組織中過(guò)度表達(dá)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是血管形成的中心調(diào)控因子，與腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。然而肺癌中HIF-1α、VEGF與HPV感染的關(guān)系尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer， NSCLC)中HPV DNA、HIF-1α和VEGF蛋白的表達(dá)情況，探討HPV感染在NSCLC發(fā)生中的病因?qū)W意義，并初步分析NSCLC中HPV感染與HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本與試劑

收集秦皇島市第一醫(yī)院2012- 01—05 SCLC新鮮標(biāo)本60例， 全部患者均已知情同意，其中男46例，女14例；年齡36～80歲；鱗癌42例，腺癌18例；高分化12例，中分化29例，低分化19例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例；吸煙者43例，不吸煙者17例。20例肺良性病變組織，其中包括肺結(jié)核6例，炎性假瘤5例，硬化性血管瘤4例，肺大皰4例，支氣管擴(kuò)張1例。標(biāo)本取材后，部分置-20 ℃保存，部分中性甲醛固定，石蠟包埋。

PCR引物均由北京奧科生物公司合成。免疫組化HIF-1α抗體和VEGF抗體及通用型SP試劑盒(福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司)。

1.2 HPV PCR檢測(cè)

1.2.1 引物：選用分別用來(lái)擴(kuò)增HPV16、18型的特異性引物2對(duì)及內(nèi)參GAPDH。引物序列如表1。

1.2.2 組織DNA的提?。喝∵m量?jī)龃娼M織，加提取緩沖液制成單細(xì)胞懸液后，沸水浴10 min，冷卻至室溫加蛋白酶K消化，酚-氯仿-異戊醇反復(fù)抽提3次，再經(jīng)100%冰冷無(wú)水乙醇沉淀、70%冰冷無(wú)水乙醇洗滌后，加TE(10 mmol/L Tris-HCl，1 mmol/L EDTA，pH 8.0)緩沖液溶解所得DNA，4 ℃保存。

表1 引物序列和產(chǎn)物長(zhǎng)度

1.2.3 PCR擴(kuò)增反應(yīng)：PCR反應(yīng)體系：每25 μL反應(yīng)體系中包含 10×緩沖液 2.5 μL，20 pmol/μL引物各0.5 μL，Taq酶1 μL(1 U/μL)，Mg2+1.5 μL，dNTPs 0.5 μL，去離子水16.5 μL及DNA模板2 μL。擴(kuò)增條件：94 ℃預(yù)變性5 min，循環(huán)特征為94 ℃ 45 s，55 ℃ 45 s，72 ℃ 45 s，共30個(gè)循環(huán)，72 ℃延伸8 min。每次實(shí)驗(yàn)以不加模板為陰性對(duì)照，HPV16、18型分別用Siha和HeLa細(xì)胞系DNA作陽(yáng)性對(duì)照。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，GoldView染色，于紫外透射儀上觀察結(jié)果，繼用SQ9636 型掃描系統(tǒng)掃描。HPIAS-1000型圖像分析系統(tǒng)檢測(cè)各組目的基因及內(nèi)參的積分吸光度值(A),并以兩者比值作為各組HPV DNA的相對(duì)表達(dá)量。

1.3 免疫組化檢測(cè)HIF-1α和VEGF

1.3.1 方法：免疫組化染色步驟嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。一抗稀釋濃度為1/100。陰性對(duì)照用PBS代替一抗。

1.3.2 判斷標(biāo)準(zhǔn)：HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)為細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃或棕褐色顆粒，VEGF陽(yáng)性表達(dá)為胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃或棕褐色顆粒，顯色結(jié)果由兩位病理醫(yī)生采用半定量評(píng)分系統(tǒng)獨(dú)立判定。每例均高倍鏡下(×400)隨機(jī)選擇5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，取平均值，用半定量積分法判斷結(jié)果：0分陰性；1分<25%；2分25%～75%；3分>75%。陽(yáng)性強(qiáng)度：1分弱表達(dá)(淺黃色)；2分中等強(qiáng)度表達(dá)(棕黃色)；3分強(qiáng)表達(dá)(棕褐色)。兩者積分相乘，0～1分為陰性(-)，2～3分為弱陽(yáng)性(±)，4～6分為中等陽(yáng)性(+)，7～9分為強(qiáng)陽(yáng)性(++)。就其結(jié)果進(jìn)行分析，將-、±合并為“-”，+、++合并為“+”，以簡(jiǎn)化數(shù)據(jù)處理。同時(shí)用HPIAS-1000高清晰度圖像處理系統(tǒng),分析各組切片的免疫組化結(jié)果，用棕黃或棕褐色陽(yáng)性顆粒的平均吸光度值(A)表示其HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1HPVDNA的PCR檢測(cè)結(jié)果及與臨床病理特征的關(guān)系

M.marker；1,2.HPV16 positive,negative control；3,4.HPV16；5,6.HPV18 positive、negative control；7,8.HPV18圖1 PCR檢測(cè)HPV16、HPV18型DNA擴(kuò)增結(jié)果電泳圖Fig 1 Electrophoresis of HPV16/18 DNA detected by PCR

NSCLC組HPV DNA積分吸光度比值為0.6046±0.0224，顯著高于肺良性病變組的0.0275±0.1230(P<0.05)(圖1)；NSCLC組HPV感染與性別、年齡、吸煙、組織學(xué)分型無(wú)關(guān)，而與組織分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。高分化型 HPV DNA積分吸光度比值顯著低于中和低分化型(P<0.05)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組HPV DNA積分吸光度比值顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P<0.05)(表2)。

表2 NSCLC中HPV感染與臨床病理特征的關(guān)系

*P<0.05 compared with well differentiation group;#P<0.05 compared with lymph node positive group.

圖2 NSCLC中HIF-1α的陽(yáng)性表達(dá)Fig 2 Positive expression of HIF-1α in NSCLC(×400)

2.2 HIF-1α、VEGF的檢測(cè)結(jié)果及兩者的相關(guān)性

NSCLC中HIF-1α的陽(yáng)性表達(dá)位于細(xì)胞核(圖2)，平均吸光度值為0.2548±0.0219，顯著高于肺良性病變組的0.0826±0.0150(P<0.05)。VEGF的陽(yáng)性表達(dá)位于胞質(zhì)(圖3)，平均吸光度值為0.2051±0.0321，顯著高于肺良性病變組的0.0726±0.0227(P<0.05)。NSCLC中HIF-1α(+)組VEGF的表達(dá)率為65.5%(19/29例)，明顯高于HIF-1α(-)組的16.1%(5/31例)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩者呈正相關(guān)(r=0.504,P<0.05)(表3)。

圖3 NSCLC中VEGF的陽(yáng)性表達(dá)Fig 3 Positive expression of VEGF in NSCLC(×400)

HIF?1αnVEGFpositivenegativepositive2919(655%)10(345%)negative315(161%)?26(839%)?

*P<0.05 compared with positive group.

2.3NSCLC中HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

HIF-1α表達(dá)與性別、年齡、吸煙和組織學(xué)分型無(wú)關(guān)，與組織分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。高分化型HIF-1α蛋白平均吸光度值顯著低于中和低分化型(P<0.05)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組HIF-1α蛋白平均吸光度值顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P<0.05)(表4)。VEGF表達(dá)與性別、年齡、吸煙和組織學(xué)分型無(wú)關(guān)，與組織分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。高分化型VEGF蛋白平均吸光度值顯著低于中和低分化型(P<0.05)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組VEGF蛋白平均吸光度值顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P<0.05)(表5)。

2.4NSCLC中HPV感染與HIF-1α、VEGF表達(dá)的關(guān)系

NSCLC中HPV(+)組VEGF的表達(dá)率為56.0%(14/25例)，顯著高于HPV(-)組的28.6%(10/35例)(P<0.05)。 HPV(+)組與HPV(-)組間HIF-1α的陽(yáng)性表達(dá)率分別為52.0%(13/25例)和45.7%(16/35例)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表6)。HPV(+)、HIF-1α(+)組VEGF的表達(dá)率為69.2%(9/13例)，HPV(+)、HIF-1α(-)組VEGF的表達(dá)率為41.7% (5/12例)，兩組間無(wú)顯著性差異(χ2=1.924,P>0.05)。

表4 NSCLC中HIF-1α表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

*P<0.05 compared with well differentiation group;#P<0.05 compared with lymph node positive group.

表5 NSCLC中VEGF表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

*P<0.05 compared with well differentiation group;#P<0.05 compared with lymph node positive group.

表6 NSCLC中HPV感染與HIF-1α、VEGF表達(dá)的關(guān)系

*P<0.05 compared with positive group.

3 討論

HPV感染是宮頸癌的主要病因，然而近年來(lái)HPV感染與肺癌的關(guān)系已經(jīng)引起人們的重視[3]。本研究證實(shí)，NSCLC組HPV DNA表達(dá)顯著高于肺良性病變組，提示HPV感染與NSCLC的發(fā)生有關(guān)，HPV感染可能是NSCLC發(fā)生的病因?qū)W因素之一。

HIF-1是由α、β亞單位構(gòu)成的異二聚體，其中HIF-1α受缺氧的調(diào)節(jié)。缺氧是實(shí)體腫瘤微環(huán)境特征之一。細(xì)胞缺氧時(shí)，細(xì)胞核中HIF-1α顯著增加。HIF-1α不僅調(diào)節(jié)眾多的下游基因以維持或促進(jìn)腫瘤的血管形成和腫瘤的發(fā)展，而且可反饋接受腫瘤生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的因子或缺氧環(huán)境上調(diào)表達(dá)，如此形成惡性循環(huán)促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移[4- 6]。本研究中， NSCLC組HIF-1α蛋白表達(dá)顯著高于肺良性病變組，提示HIF-1α與NSCLC的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。

VEGF是目前已知的作用最強(qiáng)的促血管生成因子，能刺激腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)微小靜脈通透性的增加，誘導(dǎo)血管形成。豐富的腫瘤新生血管必然會(huì)加速實(shí)體瘤的生長(zhǎng)、侵襲及轉(zhuǎn)移。近年來(lái)，肺癌中VEGF表達(dá)的研究報(bào)道較多，這些研究表明，VEGF在肺癌中高表達(dá)，其在肺癌中的表達(dá)與肺癌惡性程度、易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后不良有關(guān)[7]。本研究中， NSCLC組VEGF蛋白表達(dá)顯著高于肺良性病變組，提示VEGF參與了NSCLC的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。VEGF是HIF-1α最重要的靶基因之一。組織缺氧時(shí)，HIF-1α不僅可以促進(jìn)VEGF轉(zhuǎn)錄，還能增加VEGFmRNA穩(wěn)定性，從而上調(diào)VEGF表達(dá)[8]。大量文獻(xiàn)報(bào)道，VEGF和HIF-1α在許多腫瘤中被檢出，并發(fā)現(xiàn)HIF-1α升高的同時(shí)VEGF表達(dá)也上升。本研究顯示NSCLC中HIF-1α(+)組VEGF的表達(dá)率顯著高于HIF-1α(-)組，兩者呈正相關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)NSCLC中，HPV(+)組VEGF的表達(dá)率顯著高于HPV(-)組，提示NSCLC中HPV感染可能上調(diào)VEGF表達(dá)。HPV(+)組與HPV(-)組間HIF-1α的陽(yáng)性表達(dá)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示NSCLC中HIF-1α與HPV感染無(wú)相關(guān)性。本研究還顯示，NSCLC中HPV(+)、HIF-1α(+)組VEGF的表達(dá)率與HPV(+)、HIF-1α(-)組VEGF的表達(dá)率無(wú)顯著性差異。提示HPV感染的NSCLC中，其HIF-1α與VEGF的表達(dá)不存在相關(guān)性。說(shuō)明NSCLC中HPV感染上調(diào)VEGF表達(dá)的這種作用不是通過(guò)HIF-1α來(lái)調(diào)節(jié)的，推測(cè)可能直接通過(guò)HPV16、18 E6蛋白發(fā)揮作用，HPV E6可能如一些原癌基因一樣能夠上調(diào)VEGF啟動(dòng)子的活性[9]，促使VEGF表達(dá)增強(qiáng)，促進(jìn)NSCLC發(fā)生發(fā)展。其具體機(jī)制有待進(jìn)一步在體外細(xì)胞培養(yǎng)體系中進(jìn)行驗(yàn)證和分析。

NSCLC組中，HPV感染、VEGF表達(dá)均與性別、年齡、吸煙、組織學(xué)分型無(wú)關(guān)，而與組織分化程度相關(guān)?？赡苁怯捎诜只墒斓募?xì)胞退出了細(xì)胞周期，細(xì)胞不再具有分裂能力，細(xì)胞內(nèi)僅有少量病毒復(fù)制所需的復(fù)制酶。因此，高分化型HPV DNA表達(dá)低于中和低分化型，其上調(diào)VEGF的作用減弱，使VEGF蛋白的表達(dá)也低于中和低分化型。同時(shí)發(fā)現(xiàn)HPV感染和VEGF表達(dá)均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。推測(cè)HPV感染上調(diào)VEGF表達(dá)，而VEGF是腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的一個(gè)重要指標(biāo)，不僅誘導(dǎo)血管生成，還可誘導(dǎo)腫瘤外周形成新的淋巴管，促進(jìn)癌細(xì)胞通過(guò)淋巴管轉(zhuǎn)移到淋巴結(jié)。提示HPV感染和VEGF表達(dá)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中可能起著協(xié)同作用。

綜上所述，HPV感染可能是NSCLC發(fā)生的病因?qū)W因素之一；HPV感染可能通過(guò)上調(diào)VEGF的表達(dá)，促進(jìn)肺癌發(fā)生發(fā)展，并參與其浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移。 因此選用HPV疫苗預(yù)防高危HPV感染及針對(duì)VEGF的抗血管治療將為NSCLC的預(yù)防和治療開(kāi)辟新的途徑。

[1] Syrjanen KJ. HPV infection and lung cancer [J]. J Clin Pathol, 2002, 5: 885- 891.

[2] Wang Y, Wang A, Jiang R,etal. Human papillomavirus type 16 and 18 infection is associated with lung cancer patients from the central part of China [J]. Oncol Res, 2008, 20: 333- 339.

[3] Zafer E, Ergun M, Alver G,etal. Detection and typing of human papillomavirus in non-small cell cancer[J]. Respiration, 2004, 71: 88- 90.

[4] 江麗麗, 張建斌, 謝平, 等. LPS預(yù)處理增加CoCl2誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞表達(dá)HIF-1α[J]. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床, 2013, 33: 1297- 1301.

[5] 李能蓮, 李光明, 駱亞莉, 等.HIF-1α和HIF-2α在胃癌中的表達(dá)及意義[J]. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床, 2010, 30: 619- 622.

[6]王路喬, 黃波, 黃茶花, 等. 自噬抑制劑促進(jìn)缺氧誘導(dǎo)的大鼠乳鼠心肌細(xì)胞凋亡[J]. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床, 2014, 34: 185- 189.

[7] 楊東霞, 項(xiàng)鋒鋼. 肺癌患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)與缺氧及腫瘤生物學(xué)行為和預(yù)后的關(guān)系[J]. 中國(guó)臨床康復(fù), 2005, 9: 115- 118.

[8] 楊清平, 周知, 呂波, 等. 小劑量VCR聯(lián)合Endostar抑制PLA-802細(xì)胞系VEGF表達(dá)[J]基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床, 2011, 31: 32- 36.

[9] Lopez-ocejo O, Viloria-petit A, Bequet-romero M,etal. Oncogenes and tumor angiogenesis:the HPV-16 E6 oncoprotein activates the vascular endothelial growth factor(VEGF) gene promoter in a p53 independent manner[J]. Oncogene, 2000, 19: 4611- 4620.

Infection of HPV and its relationship withthe expression of HIF-1α and VEGF protein in non-small cell lung cancer

ZHOU Ying1*, ZHANG Hui1, XIE Yong-hong2, LI Xiao-chao1, SHEN Yan1, YIN Duan-duan3

(1.Dept. of Pathology; 2.Dept. of Science and Education;3.Dept. of Oncology, the First Hospital of Qinhuangdao, Qinhuangdao 066000, China)

ObjectiveTo investigate the etiological role of human papillomavirus(HPV) infection in the carcinogenesis of non-small cell lung cancer(NSCLC) and to discuss the possible relationship between HPV infection and HIF-1α,VEGF expression.MethodsBy using immunohistochemistry, the expressions of HIF-1α and VEGF protein were detected in 60 cases of NSCLC tissues and 20 cases of lung benign diseases tissues. PCR was employed to detect the expression of HPV16/18 DNA.Results1)The HPV DNA expression was 0.6046±0.0224 in NSCLC group which significantly higher than 0.0275±0.1230 in the benign diseases group (P<0.05). 2)The HIF-1α protein and VEGF protein expressions were 0.2548±0.0219 and 0.2051±0.0321 respectively in NSCLC, significantly higher than that in the benign diseases group (0.0826±0.0150 and 0.0726±0.0227) (P<0.05). 3)The expression rate of HIF-1α was significantly correlated with VEGF in NSCLC(P<0.05).4)The positive expression rate of VEGF was significantly higher in HPV DNA positive group (56.0%) than that in HPV DNA negative group(28.6%,P<0.05) in NSCLC.ConclusionsHPV infection may be one of the etiological factors in the carcinogenesis of NSCLC. HPV infection increases VEGF expression, promotes the occurrence and development of NSCLC.

non-small cell lung cancer; human papillomavirus; hypoxia inducible factor-1α; vascular endothelial growth factor

2014- 01- 09

2014- 03- 24

秦皇島市科技支撐計(jì)劃(2012023A135)

*通信作者(correspondingauthor)：zhouying8042254@sina.com

1001-6325(2014)08-1065-06

R 734.2

A

新聞點(diǎn)擊

聽(tīng)力受損與老年人智力衰退有關(guān)

據(jù)美國(guó)WebMD醫(yī)學(xué)新聞網(wǎng)2013-02-04報(bào)道，聽(tīng)力受損和智力衰退是兩種常見(jiàn)的老化癥狀，現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，兩者之間可能有關(guān)聯(lián)。

70歲以上的老年人中，約有2/3有一定程度的聽(tīng)力受損。在未來(lái)20年，患老年癡呆癥的人數(shù)預(yù)計(jì)將增加1倍，所以研究人員希望了解助聽(tīng)器是否可以減緩老年人智力衰退。

領(lǐng)導(dǎo)這項(xiàng)研究的耳科醫(yī)生、流行病學(xué)家Frank R. Lin博士認(rèn)為，在研究過(guò)程中，聽(tīng)力衰退的年長(zhǎng)者比聽(tīng)力正常者更容易有記憶和思考問(wèn)題。平均來(lái)說(shuō)，有聽(tīng)力問(wèn)題的參與者智力明顯受損的時(shí)間，比那些沒(méi)有聽(tīng)力問(wèn)題的人提前3年。

這項(xiàng)針對(duì)近2 000名參加老化與健康研究的70～80歲年長(zhǎng)者，在第5年做了聽(tīng)力測(cè)試，并在接下來(lái)6年里進(jìn)行了一系列的測(cè)試，評(píng)估記憶和思考能力的衰退情況。結(jié)果顯示，聽(tīng)力受損的男、女衰退速度比聽(tīng)力正常者快30%～40%；聽(tīng)力受損的程度越大，心智功能衰退幅度越大。

雖然研究并未提出與老化有關(guān)的聽(tīng)力受損是如何惡化記憶或思考問(wèn)題，但Lin博士認(rèn)為，有幾種說(shuō)法：一種理論是未治療聽(tīng)力受損的人，常與社會(huì)隔離，導(dǎo)致智力下降。之前的研究已鑒定出，孤獨(dú)是這些能力衰退的風(fēng)險(xiǎn)因子。另一個(gè)理論是，工作記憶受限于它可以容納和操作的信息量。內(nèi)耳的工作是接收聲音，并在傳到大腦譯碼之前準(zhǔn)確的編碼，但這對(duì)于有聽(tīng)力受損的人很難。如果大腦必須不斷消耗更多的資源來(lái)解碼聲音，可能為認(rèn)知付出更多。

研究結(jié)果發(fā)表在美國(guó)醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)(JAMA)內(nèi)科期刊(JAMA Internal Medicine)網(wǎng)絡(luò)版。