宮慶濤，趙志模，孫瑞紅，何 林，肖 偉，李素紅

(1.山東省果樹研究所，泰安 271000;2.西南大學植物保護學院，重慶 400716;3.山東天地園藝科技有限公司，泰安 271000)

柑桔大實蠅Bactrocera minax (Enderlein)屬雙翅目、實蠅科、寡鬃實蠅亞科、果實蠅屬(陳世驤和謝蘊貞，1955)，主要為害甜橙、酸橙、柚子、溫州蜜桔、紅桔、碰柑、京桔、葡萄柚、佛手等果實(張小亞，2007)。被害果稱“蛆果”、“蛆柑”，受害率一般在10 %-20 %，嚴重時可達60%-90 % (魯紅學等，1997)，是柑桔類果樹的重要害蟲之一(van Schoubroeck，1999;王小蕾，2009)。

柑桔大實蠅成蟲在寄主果皮下產卵，幼蟲孵化后在果實內取食，老熟幼蟲脫果入土化蛹。卵、幼蟲、蛹均具有隱蔽性特點，因此成蟲階段是防控該蟲的關鍵(宮慶濤等，2013)。目前，防控成蟲的手段有化學藥劑噴殺、引誘劑誘殺(田明華等，2005;張小亞等，2007;趙強等，2008;蘭杰等，2009;王開昌等，2010;朱祚亮等，2011;陳智明等，2012;柯勇等，2013)、釋放不育成蟲干擾交配(李元英等，1992;夏大榮等，1992;王華嵩等，1990，1995，1998)、共振聲波技術仿生干擾等(陳小強等，2013)，但前兩種方法是目前成蟲防控主要的手段。

誘殺成蟲主要是應用食物引誘劑和性引誘劑。柑桔大實蠅性誘劑研究還處于起步階段，性信息素成分及比例尚未鑒定(夏忠英等，1997;魯紅學等，1998;武可明等，2012;肖偉等，2013)。本研究選取食物引誘劑配方中常用的10 種物質，利用觸角電位(Electroantennography，EAG)技術分別測定EAG 值隨濃度變化的規(guī)律，為其后食物引誘劑配方的改進提供依據。本研究還測定了7種常見配方及5 種改進配方的EAG 值，并分別于2010 和2011年在四川省江油市、重慶市武隆縣、云陽縣、巫山縣、萬州區(qū)5個桔園開展田間誘集試驗，對各配方進行綜合評價，為田間誘集配方選擇提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

2010年10月，在四川省江油市果園撿拾大量蛆果，將其置于盛有10 cm 厚沙土的塑料盆(25 cm×40 cm)中，每盆均勻放置蛆果30個左右，于次年4、5月份收集羽化出土的成蟲，放入按羽化日期編號的養(yǎng)蟲籠(40 cm× 30 cm× 30 cm)中，用10%的蜂蜜水飼養(yǎng)。

1.2 供試藥劑

本試驗使用的引誘物質包括紅糖(北京天潤食品廠)、白酒(重慶市江津酒廠，56 度)、食醋(四川恒泰企業(yè)投資有限公司)、蜂蜜(福建新之源生物制品有限公司)、甜橙汁(重慶市頂津食品有限公司)、酵母粉 (Oxoid.Ltd)、水解蛋白(ISCA Technologies.Inc)、3% 水溶性甜橙精油(粵渝單方精油公司)、乙醇、冰乙酸、乙酸乙酯、檸檬酸(分析純，AR，成都科龍化工試劑廠)和桔皮粉(自制)。

1.3 試驗方法

1.3.1 柑桔大實蠅成蟲對不同活性物質及配方的EAG 反應

將配制好的單一活性物質或配方誘劑20μL均勻滴在5 cm×0.5 cm的濾紙條上，放入長10 cm的樣品管內，樣品管末端連接觸角電位儀的氣體刺激控制裝置。對同一活性物質的不同濃度按由低到高的順序進行測定。每種誘劑處理在同一根觸角上重復測試3 次，空白對照測試1 次，連續(xù)測試雌雄成蟲各5 根觸角。測定過程中，注意將柑桔大實蠅的觸角芒與觸角一并連接 (宮慶濤，2012)。

測定的觸角取自羽化2 日齡的柑桔大實蠅成蟲。其方法是:在解剖鏡下用鋒利的刀片將觸角從基部切下，并將觸角鞭節(jié)尖端切去一小段，然后用導電膠將其橫搭在電極上，放入氣味混合管，以空氣為對照。選定觸角電位儀的Y-Ampl 值為0.5 mV，Time base 值為2 s，刺激氣流為40 mL/min，連續(xù)氣流為50 mL/min，每次測定的時間間隔為1 min。測定時按動送氣泵開關，濾紙條上的揮發(fā)性物質被吹入氣味混合管與電極上的觸角接觸，刺激觸角產生神經脈沖，經信號放大，由Syntech軟件記錄EAG 值。由于觸角生理活性不斷降低，所獲得的EAG 值會不斷減小。為消除觸角適應導致的偏差，測試前后均用空氣作為空白對照，獲得每次EAG 反應的相對值。計算EAG 相對值(以下簡稱EAG 值)的公式如下:

式中V 表示EAG 反應相對值，R為氣味物質的EAG 值，C1，C2 分別為刺激前后2個對照的EAG 值(趙新成等，2004)

1.3.2 柑桔大實蠅誘劑配方田間引誘效果評價

分別于2010 和2011年在四川省江油市、重慶市武隆縣、云陽縣、巫山縣和萬州區(qū)的5個柑桔園，采用嵌入海綿圈的McPhail 誘集罐誘集成蟲。參試誘劑中除果瑞特1 號(果瑞特1 號制劑∶水=50 ∶100)，桔豐(85%水劑∶水=8.3 ∶100)，常規(guī)糖醋酒液(紅糖∶食醋∶白酒∶水=5 ∶1 ∶1 ∶100)，改進型糖醋酒液(紅糖∶乙酸∶乙醇∶水=5∶0.62 ∶0.02 ∶100)外，其余誘劑按表1 和表2 中標定的濃度配制。每處理每果園設置8個誘集罐，每罐加入100 mL 誘劑，另加90%萬靈可溶性粉劑0.1 g，每間隔1-2 株樹掛罐1個。各處理按隨機區(qū)組排列。

從5月上旬開始掛罐，8月底結束，每7 d 觀察1 次，分罐記載雌、雄成蟲數，取出成蟲后，更換或添加誘劑100 mL。

1.4 數據統計及分析

本文圖形、標準差等利用Excel 軟件完成。多重比較采用Duncan's 方法由SPSS 18.0 統計軟件完成。

2 結果與分析

2.1 柑桔大實蠅對10 種引誘物質的EAG 反應

柑桔大實蠅對10 種引誘物質的EAG 見圖1，不同濃度下的EAG 值見圖2。

圖1 柑桔大實蠅對10 種誘集物質的EAG 平均值Fig.1 EAG value of Chinese citrus fly to different materials

圖2 柑桔大實蠅對不同濃度活性物質的EAG 反應Fig.2 The relative EAG value of Chinese citrus fly to different concentration of substances

從圖1 看出，柑桔大實蠅成蟲對水解蛋白、乙酸的EAG 值顯著高于其它8 種物質，而紅糖、乙醇、甜橙汁、甜橙精油、乙酸乙酯、桔皮粉、檸檬酸和蜂蜜等其他8 種物質間無顯著差異。從圖2 看出，雌雄成蟲的EAG 值隨濃度增大而增大的有乙酸和水解蛋白;僅雌蟲的EAG 值隨濃度增大而增大的有乙醇;紅糖、甜橙汁、甜橙精油、乙酸乙酯、桔皮粉、檸檬酸和蜂蜜等7 種物質的濃度變化對雌雄成蟲的EAG 值影響較小。柑桔大實蠅對乙酸、水解蛋白、甜橙汁和桔皮粉的EAG值，雌雄間無明顯差異;而對紅糖、乙醇、甜橙精油、乙酸乙酯、檸檬酸和蜂蜜的EAG 值，雌雄之間存在較大差異，其中對紅糖、甜橙精油、檸檬酸和蜂蜜，雌性的EAG 值高于雄性;而對乙酸乙酯則雄性高于雌性。乙醇濃度小于7.5%時，雄性EAG 值高于雌性，大于7.5 時則相反;乙酸濃度小于15% 時，雌性高于雄性，大于15% 時則相反。

2.2 柑桔大實蠅對誘劑配方的EAG 值與田間誘集效果

本試驗中的EAG 測定均在2010年進行，桔園誘集試驗分別于2010年和2012年進行。柑桔大實蠅對各誘劑的EAG 值和田間引誘效果見分別見表1 和表2。結果表明，各誘劑EAG 值的高低與田間引誘效果的好壞密切相關。20%水解蛋白的EAG值最高，其兩年的田間誘集效果也最好;從2010年的試驗結果看，常規(guī)糖酒醋液和桔豐的EAG 值最低，其誘集效果也最差，改進型糖醋酒液與常規(guī)糖酒醋液的EAG 值和誘集效果雖然差異不顯著，但前者的誘集效果還是有所提高。2011年的田間誘集試驗主要是在改進型糖醋酒液的基礎上添加不同的引誘物質，結果表明，添加5%的水解蛋白和添加0.2%的乙酸乙酯誘集效果最好，而添加2.5%桔皮粉誘集效果反而有所減低。

表1 柑桔大實蠅對8 種配方EAG 反應相對值及2010年田間引誘效果Table 1 The relative EAG value of Chinese citrus fly to eight formulas and trapping effect in 2010

表2 柑桔大實蠅對6 種配方EAG 反應相對值及2011年田間引誘效果Table 2 The relative EAG responses of the Chinese citrus fly to six formulas and trapping effect in 2011

3 結論與討論

柑桔大實蠅對10 種誘集物質的EAG 反應表明，以水解蛋白的EAG 值最高，其次是乙酸，而紅糖、乙醇、甜橙汁、甜橙精油、乙酸乙酯、桔皮粉、檸檬酸、蜂蜜等其余8 種物質的EAG 值顯著低于水解蛋白和乙酸，但這8 種物質間差異不顯著。Buttery et al.(1983)采用毛細管氣相-液相色譜分析，證明乙酸是水解蛋白的主要成分之一，這正好說明乙酸的引誘活性高于其它8 種物質的原因。改變水解蛋白、乙酸和乙醇的濃度對EAG 值的影響較大，而改變其余7 種物質的濃度對EAG 值的影響較小。因此，在確定誘劑配方時，可適當調節(jié)乙酸和乙醇濃度，以提高配方的誘集活性。對于水解蛋白，由于價格昂貴，為了降低誘劑的成本，一般應減少其用量。

糖醋酒液是目前用于誘集柑桔大實蠅成蟲的最主要的食物誘劑(張小亞等，2007，柯勇等，2013)。但由于常規(guī)糖醋酒液中使用的食醋和白酒在各地規(guī)格不同，誘集效果極不穩(wěn)定。為此本研究用化學純的乙酸和乙醇替代常規(guī)糖醋酒液中食醋和白酒(改進型糖醋酒液)。結果表明，柑桔大實蠅對改進型糖醋酒液的EAG 值和田間誘集效果均高于常規(guī)糖醋酒液。

已有研究表明，在常規(guī)糖醋酒液中添加甜橙汁(Dorji et al.，2006;張小亞等，2007)、乙酸乙酯(趙強等，2008)等具有誘集活性的物質，可以提高田間誘集效果。因此本研究在在改進型糖醋酒液的基礎上，分別添加5%的水解蛋白、1%的甜橙精油、2.5%的桔皮粉和0.2%的乙酸乙酯進行田間誘集試驗。結果表明，添加5%的水解蛋白誘集效果最好，其次是添加0.2%的乙酸乙酯。本研究發(fā)現，EAG 值和田間誘集效果具有一致性，說明室內利用觸角電位反應篩選誘集物質或配方是可行的。利用觸角電位技術初篩引誘物質及配方，可以增加引誘物質及配方篩選的廣度，減少田間配方篩選中人力和物力的耗費。

目前，柑桔大實蠅成蟲階段的防治方法主要是食物引誘劑誘殺和噴施農藥。由于性信息素至今還處于開發(fā)階段，應用食物誘餌誘殺在防治上顯得尤為重要。利用食物誘餌誘殺柑桔大實蠅，具有污染小，防效高，安全性好，持效時間長、防治費用相對較低等優(yōu)點。因此，篩選活性較高的食物引誘劑對防治柑桔大實蠅具有重要意義。

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