王 震，羅 芳

皮膚鱗狀細胞癌（skin squamous cell carcinoma，SSCC）是起源于表皮或附屬器角質(zhì)形成細胞的一種惡性腫瘤，常發(fā)生于某些皮膚病或癌前疾病的基礎(chǔ)上，或者由各種癌前疾病發(fā)展而來，少數(shù)為原發(fā)性[1]。發(fā)病率在非黑素瘤皮膚癌（non melanoma skin cancer，NMSC）中僅次于基底細胞癌（basal cell carcinoma，BCC）。近年來SSCC的發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢[2]。SSCC由于容易出現(xiàn)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，它的危險性比BCC高的多[3]。SSCC原因不明，隨著人乳頭瘤病毒(HPV)在SSCC中不斷被檢出，HPV與SSCC發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性越來越受到重視。筆者對300例SSCC患者皮損組織中HPV型別進行檢測，初步分析SSCC組織HPV的感染狀況和型別分布規(guī)律，探討SSCC的病因和發(fā)病機制。

1 資料與方法

1.1 病例資料

2001年1月～2011年1月在湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院門診和住院的300例患者，其病灶經(jīng)臨床和組織病理學(xué)檢查均診斷為SSCC，收集其組織標(biāo)本共300份。所有患者均未接受過放療和化療。SSCC按統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)進行診斷，由臨床醫(yī)師使用統(tǒng)一的登記表格進行填寫、匯總、統(tǒng)計和分析。

1.2 研究方法和儀器

統(tǒng)計分析入選患者的SSCC確診例數(shù)、性別、職業(yè)、皮損部位和確診年齡分布、組織病理診斷和組織病理分級分布特征，以及實驗室HPV-DNA檢測結(jié)果。采用多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)進行型別分析，主要檢測型別為低危型HPV6、11和高危型HPV16、18、31、33。應(yīng)用PCT-200型基因擴增儀進行檢測。引物設(shè)計見表1。

表1 HPV引物設(shè)計

1.3 SSCC診斷標(biāo)準(zhǔn)

SSCC診斷主要根據(jù)其病史、臨床癥狀與體征，以及實驗室檢查。實驗室檢查包括PCR檢測HPV-DNA以及型別和皮膚組織病理檢查等。SCC按Broders分級，Ⅰ級：分化良好的鱗狀細胞＞75%；Ⅱ級：分化良好的鱗狀細胞＞50%；Ⅲ級：分化良好的鱗狀細胞＞25%；Ⅳ級：分化良好的鱗狀細胞＜25%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行分析，樣本之間差異性比較用χ2檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料

300例SSCC患者中男196例，女104例，男女之比為1.88:1。發(fā)病年齡：平均年齡 (51.82±16.12)歲（15～87歲），其中＞50歲170例（56.67%），51～70歲SSCC的發(fā)病率最高（118例，占39.33%），31～50歲100例（33.33%）。發(fā)病部位：頭面部131例（43.67%），頸部76例（25.33%），四肢30例（10.00%），軀干25例（8.33%），生殖器和腹股溝部位38例（12.67%）。組織病理分級：Ⅰ級165例（55.00%），Ⅱ級59例（19.67%），Ⅲ級58例（19.33%），Ⅳ級18例（6.00%）。

2.2 HPV感染及分布

300例SSCC患者中，HPV檢出188例，HPV感染率為62.67%，有122例未檢出HPV，占40.67%。男性HPV檢出130例，HPV感染率為66.33%(130/196) ；女性HPV檢出58例，HPV感染率為55.78%(58/104)，其中Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級和Ⅳ級HPV感染率分別為72.12%、55.93%、44.83%和55.56%。300例SSCC患者中高分化（Ⅰ～Ⅱ級）224例（74.67%），低分化（Ⅲ～Ⅳ級）76例（25.33%）。SSCC HPV感染率無性別差異（P＞0.05），見表2。頭面部、頸部、四肢、軀干以及生殖器和腹股溝部HPV感染率分別為70.23%、65.79%、43.33%、28.00%和68.42%。不同發(fā)病部位HPV感染率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表3。

表2 SSCC不同組織病理分級患者HPV感染比較[例(%)]

表3 188例HPV陽性患者不同發(fā)病部位HPV型別分布情況（例）

2.3 SSCC不同組織病理分級患者HPV感染率及型別分布

188例HPV陽性患者中共檢出高危型（HPV16、33）感染51例，低危型（HPV6）感染49例，均為單一型別感染。高分化（Ⅰ～Ⅱ級）組HPV感染率為67.86%，低分化（Ⅲ～ Ⅳ級）組HPV感染率為47.37%，兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表1。高危型HPV在高分化組（Ⅰ～Ⅱ級）感染率為12.50%(28/224)，與低分化組（Ⅲ～ Ⅳ級）感染率30.26%(23/76)相比差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；低危型HPV在高分化組（Ⅰ～ Ⅱ級）感染率為12.50%，與低分化（Ⅲ～ Ⅳ級）感染率28.95%(22/76)相比, 兩組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表4。

表4 188例不同組織病理分級HPV陽性患者型別分布(例 )

2.4 不同發(fā)病部位HPV型別分布差異

低危型HPV在頭面部、頸部、四肢、軀干以及生殖器和腹股溝部的感染率分別為21.37%、13.16%、6.67%、4.00%和21.05%，低危型HPV感染率在不同發(fā)病部位間，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。高危型HPV在頭面部、頸部、四肢、軀干以及生殖器和腹股溝部的感染率分別為19.08%、19.74%、3.33%、4.00%和23.68%，高危型HPV感染率在不同發(fā)病部位間，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

病毒的致癌作用在惡性腫瘤研究中日益受到重視，HPV與宮頸癌的關(guān)系已經(jīng)日益明確，同時HPV與SSCC的關(guān)系也受到學(xué)者專家們的關(guān)注。根據(jù)致癌性大小，HPV感染分為低危型和高危型，低危型有HPV6、11、40、42、43等，與表皮瘤樣增生性疾病相關(guān)；高危型包括HPV16、18、31、33、35等，與上皮惡性腫瘤密切相關(guān)[5]。

本次研究結(jié)果顯示HPV在SSCC的感染率為62.67%，明顯高于健康女性宮頸感染率（13.7%）[6]，略低于尖銳濕疣患者（64.18%）[7]。男性HPV感染率為66.33%，女性HPV感染率為55.78%，無性別差異。國外一些研究者通過大樣本觀察研究顯示HPV感染患者SSCC的發(fā)病率明顯升高[8,9]。有作者報道HPV感染者發(fā)生SSCC的趨勢可能會隨著HPV感染率的增加而增加[10]。HPV感染很可能是誘發(fā)SSCC的一個重要原因，因此重視HPV檢測可能有利于該疾病的預(yù)防和治療。

高分化型（Ⅰ～Ⅱ級）共224例更為常見，分化程度越低患者越少。SSCC的惡性程度與HPV的感染率關(guān)系不大，高分化SSCC HPV的感染率反而高于低分化。惡性程度主要與感染HPV型別有關(guān)。高危型HPV在低分化(Ⅲ～Ⅳ級)的SSCC患者中檢出率顯著高于高分化組，其主要型別是HPV16、33。有研究結(jié)果顯示高危型HPV- 16 或18 的E6、E7 蛋白協(xié)同作用可使細胞發(fā)生永生化和轉(zhuǎn)化[11,12]。鄧曼鈴等[13]研究結(jié)果顯示HPV16在宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN )Ⅱ～Ⅲ級及宮頸癌組織中的陽性率最高。李穎等[14]研究發(fā)現(xiàn)HPVl6 E7是SSCC發(fā)生的一個獨立性因素，其存在具有增強SSCC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險性。Iftner等[15]研究顯示SSCC患者高危型HPV16陽性率顯著高于對照組。所以HPV16在宮頸癌和SSCC的惡性發(fā)展過程中可能發(fā)揮著重要的作用，應(yīng)重視對此型別的檢測。惡性程度較低的SSCC患者主要感染低危型HPV6，提示預(yù)后較好。因此，HPV-DNA分型檢測對SSCC高危人群的篩查、臨床診斷、預(yù)后判斷及疫苗的研制提供了重要的理論依據(jù)。

HPV感染率在不同發(fā)病部位存在顯著性差異，頭頸部與生殖器和腹股溝部位的感染率顯著高于軀干與四肢，與孫瑩等[16]研究結(jié)果一致。高危型和低危型HPV感染在不同部位差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但不同型別在不同部位是否存在特異性感染還有待今后進一步的研究。Gregoire等[17]檢測117例陰莖SSCC患者皮損HPV感染型別，其中88.5%為HPV16。本次研究結(jié)果顯示高危型HPV感染在生殖器和腹股溝部位主要型別亦為HPV16。由于HPV型別多，任何一種方法均無法檢測出所有類型，目前的研究主要集中在HPV- DNA及其抗體水平的檢測。然而由于選擇的檢測方法不同，其敏感性及檢測結(jié)果均存在很大的差異[2]。SSCC的病因包括紫外線、電離輻射、化學(xué)制劑、器官移植、皮膚慢性病和HPV感染[18]，而HPV不同型別感染與這些因素是否存在協(xié)同或者相加作用，還有待進一步的研究。

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