王曉玲，張 萍，陳 燕

(咸陽師范學院化學與化工學院，陜西咸陽 712000)

琥乙紅霉素商品名利君沙，屬大環(huán)內酯類抗生素，水溶性小，無味，在胃酸中穩(wěn)定，在體內水解釋放出紅霉素(EES)而起抗菌的作用，臨床廣泛應用于扁桃體炎、上呼吸道感染、支原體肺炎、咽喉部炎癥、中外耳炎、猩紅熱、皮膚軟組織感染的治療。目前報道的分析方法有荷移光度法［1-2］、HPLC［3-4］、分光光度法［5-6］、流動注射化學發(fā)光法［7］、毛細管電泳法［8］等，褪色光度分析法還未見報道。實驗發(fā)現，在常溫下，在水-乙醇介質中，琥乙紅霉素能使甲基紅顯著褪色，據此建立了快速、靈敏、簡便的測定藥物中琥乙紅霉素的分析方法。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

珀乙紅霉素，對照品;甲基紅、無水乙醇均為分析純。

722型分光光度計。

1.2 溶劑配制

1.2.1 2 mg/mL琥乙紅霉素標準液 在分析天平上準確稱取化學對照品琥乙紅霉素0.200 4 g，用無水乙醇溶解并定容到100 mL容量瓶內。

1.2.2 2.0 ×10－3mol/L 甲基紅溶液 準確稱取甲基紅0.053 86 g于燒杯中，用無水乙醇使之完全溶解并用無水乙醇定容至100 mL。

1.3 實驗方法

取2支刻度一致的25 mL具塞比色管，分別加入甲基紅溶液0.4 mL，無水乙醇0.5 mL，向其中一支加入一定量的琥乙紅霉素標準溶液，另一支不加，用蒸餾水稀釋至10 mL，搖勻。以水為參比，用1 cm比色皿在分光光度計上，于520 nm處，測定吸光度值A。

2 結果與討論

2.1 吸收光譜

測定不同波長下的吸光度A0和A，繪制吸收光譜圖，見圖1。

圖1 吸收光譜圖Fig.1 Absorption spectra

由圖1可知，試劑空白曲線和褪色體系曲線的最大吸收波長均為520 nm，褪色體系曲線表明，琥乙紅霉素的加入能使甲基紅顯著褪色。

2.2 試劑用量的選擇

2.2.1 最佳介質條件 按實驗方法，試驗了 HCl、H2SO4、H3PO4、氨基乙酸-濃 HCl、KCl-HCl、鄰苯-HCl、KH2PO4-NaOH(pH=7.2)、硼砂-NaOH(pH=9.94)、無水乙醇等不同介質溶液對反應體系的影響。結果表明在無水乙醇介質中褪色效果最好、最穩(wěn)定。

2.2.2 無水乙醇的用量 隨著無水乙醇的用量的改變，見圖2，當無水乙醇用量在0.5 mL時，ΔA最大。故實驗選用無水乙醇的用量為0.5 mL。

圖2 無水乙醇的用量Fig.2 The amount of anhydrous ethanol

2.2.3 甲基紅的用量 改變甲基紅的用量，見圖3。隨著甲基紅用量的增加，ΔA逐漸增大，當甲基紅用量在0.4 mL時，ΔA值達到最大，此后，隨著甲基紅用量的增加，ΔA迅速降低，實驗選擇甲基紅的最佳用量為0.4 mL。

圖3 甲基紅的用量Fig.3 The amount of methyl red

2.2.4 反應時間、溫度和穩(wěn)定性 實驗發(fā)現，褪色反應瞬間完成，分別試驗了不同溫度下ΔA值的變化，發(fā)現在常溫下ΔA最大且穩(wěn)定，在20 min后ΔA發(fā)生變化。

2.2.5 工作曲線 分別取不同量的琥乙紅霉素標準液，按照實驗方法測定吸光度ΔA值，繪制工作曲線，見圖4。其線性回歸方程為 y=4.362 7x－0.189 5，相關系數為0.999 9，表觀摩爾吸光系數為1.53 ×104L/(mol·cm)，琥乙紅霉素的量在 150～600μg/10 mL范圍內與ΔA呈良好的線性關系。

圖4 工作曲線Fig.4 Working curve

2.2.6 干擾離子的影響 按實驗方法對0.2 mg/mL鹽酸氯丙嗪進行測定，當相對誤差控制±5%時，考察了常見離子和藥物賦形劑的干擾情況。結果表明，常見的物質:葡萄糖、乳糖、果糖、糊精和淀粉均不干擾測定。

2.3 樣品分析

2.3.1 樣品1 取琥乙紅霉素片(125 mg/片)一片于50 mL的小燒杯中，用無水乙醇溶解，過濾，用無水乙醇定容至50 mL容量瓶中。每次取0.1 mL樣品進行測定。

2.3.2 樣品2 取琥乙紅霉素膠囊(250 mg/粒)1粒，傾出內容物，加適量乙醇，使其溶解完全，過濾，濾液用乙醇定容至100 mL容量瓶中。每次取0.1 mL琥乙紅霉素樣品液進行測定。

表1 樣品中琥乙紅霉素的測定結果Table1 Analytical results enoxacin in samples

3 結論

本實驗研究了在無水乙醇介質中，琥乙紅霉素能使甲基紅顯著褪色，且褪色的程度和琥乙紅霉素的量呈正比例關系，據此建立了琥乙紅霉素光度分析法。實驗最大吸收波長為520 nm，表觀摩爾吸光系數為1.53 ×104L/(mol·cm)，琥乙紅霉素的量在150～600μg/10 mL范圍內服從朗伯-比爾定律，和同類方法相比較，該方法簡便、快速、可靠、選擇性高、重現性好，用于測定藥物中琥乙紅霉素的含量，結果滿意。

［1］ 李華侃，呂欣，王玉華.琥乙紅霉素與氯冉酸的荷移反應及其測定［J］.數理醫(yī)藥學雜志，2004，17(6):534-535.

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