葉又青，羅宇慧，沈明勤，彭蘊(yùn)茹，丁永芳

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院藥劑科，南京210017;2.江蘇省中醫(yī)藥研究院藥理室，南京210028)

舒糖康膠囊對(duì)糖尿病性周圍神經(jīng)病變大鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度的影響

葉又青1，羅宇慧2，沈明勤2，彭蘊(yùn)茹2，丁永芳2

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院藥劑科，南京210017;2.江蘇省中醫(yī)藥研究院藥理室，南京210028)

目的 觀察舒糖康膠囊對(duì)糖尿病性周圍神經(jīng)病變(DPN)大鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度的影響及痛覺傳導(dǎo)時(shí)間的影響。方法 采用鏈脲菌素(STZ)造成大鼠糖尿病模型，給糖尿病大鼠連續(xù)25 d灌胃給予舒糖康膠囊8.0，2.0 g生藥/kg，觀察舒糖康膠囊對(duì)糖尿病性周圍神經(jīng)病變大鼠坐骨神經(jīng)及尾神經(jīng)感覺電生理的影響。結(jié)果 舒糖康膠囊口服給藥4周對(duì)糖尿病模型大鼠周圍神經(jīng)病變有明顯的恢復(fù)作用，對(duì)痛覺的傳導(dǎo)速度也有一定程度的恢復(fù)作用。結(jié)論 舒糖康膠囊對(duì)糖尿病性周圍神經(jīng)病變大鼠有一定的治療作用，對(duì)周圍神經(jīng)病變有明顯的恢復(fù)作用，對(duì)痛覺的傳導(dǎo)速度也有一定程度的恢復(fù)作用。

舒糖康膠囊;糖尿病;周圍神經(jīng)病變;大鼠

糖尿病性周圍神經(jīng)病變(DPN)是糖尿病常見的慢性并發(fā)癥之一，占糖尿病的70% ～90%，以持續(xù)性對(duì)稱性肢體疼痛麻木，感覺異常，運(yùn)動(dòng)障礙及自主神經(jīng)功能障礙為主要臨床表現(xiàn)。其早期可出現(xiàn)明顯的周圍神經(jīng)功能障礙，這種損傷可隨著病程延長(zhǎng)而進(jìn)展，神經(jīng)傳導(dǎo)速度不斷下降，甚至出現(xiàn)神經(jīng)萎縮，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量［1］。舒糖康膠囊是由江蘇省中醫(yī)藥研究院研制的新的中藥制劑，該方由生地黃、黃連、葛根、凌霄花組成，在臨床上以治療DPN為主，取得了良好的療效。本實(shí)驗(yàn)通過研究分析DPN大鼠模型坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度及痛覺傳導(dǎo)速度，探討其藥效作用，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料

1.1 動(dòng)物 清潔級(jí)SD種大鼠，體質(zhì)量150～170 g，雌雄各半，購于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司(原中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，合格號(hào):SCXK(滬):2002-0010;動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境:江蘇省中醫(yī)藥研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，SPF級(jí)，合格證號(hào):SYXK(蘇)2002-007。

1.2 供試品 舒糖康膠囊(干浸膏粉)，含生藥材4.93 g/g干粉。批號(hào):050425，江蘇省中醫(yī)藥研究院中藥制劑室提供。

1.3 陽性藥 彌可保(甲鈷胺片)，含甲鈷胺0.5 mg/片，批號(hào):040906A，衛(wèi)材(中國)藥業(yè)有限公司生產(chǎn);鹽酸二甲雙胍片，500 mg/片，批號(hào)0503030，昆山培力藥品有限公司生產(chǎn)。

1.4 試劑與儀器 鏈脲霉素(Streptozotocin，STZ)，德國Merck KgaA產(chǎn)品。MP-100A多導(dǎo)生理信號(hào)分析系統(tǒng):美國產(chǎn);京都血糖儀:日本產(chǎn);Tail-flick型大鼠痛閾測(cè)定儀:美國產(chǎn)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 大鼠糖尿病模型制作［2-4］取健康SD種大鼠，體質(zhì)量150～170 g，禁食，自然飲水12 h后，用 pH 4.5的0.1 mmol/L檸檬酸鈉緩沖液稀釋鏈脲霉素(STZ)，按70 mg/kg體質(zhì)量的劑量腹腔注射給藥，1次/d。3 d后由尾靜脈取血測(cè)血糖，凡血糖≥16.0 mmol/L者視作糖尿病大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

2.2 動(dòng)物分組與給藥 將入選的模型動(dòng)物隨機(jī)分為7組，每組10只，雌雄各半，分別為糖尿病模型組(生理鹽水10 mL/kg)，陽性藥彌可保組(0.275 mg/kg)，陽性藥二甲雙胍組(2.75 g/kg)，舒糖康膠囊大劑量加二甲雙胍組(8.0 g生藥/kg加2.75 g/kg)，舒糖康膠囊小劑量加二甲雙胍組(2.0 g生藥/kg加2.75 g/kg)，舒糖康膠囊大(8.0 g生藥/kg)、小(2.0 g生藥/kg)劑量組。另取10只正常大鼠作為正常對(duì)照組(生理鹽水10 mL/kg)。藥物由雙蒸水配制成一定濃度后，均按10 mL/(kg·d)灌胃給藥，連續(xù)給藥4周，每周測(cè)定大鼠體質(zhì)量，并作檢測(cè)。

2.3 檢測(cè)指標(biāo) 1)痛覺傳導(dǎo)時(shí)間的測(cè)定:將清醒大鼠(給藥后1 h)置于大鼠固定器內(nèi)，使其不能自由活動(dòng)，而鼠尾任其自然放置于Tail-flick型大鼠痛閾測(cè)定儀的凹槽內(nèi)，使儀器的熱光聚焦點(diǎn)置于大鼠尾尖約1/4處的固定點(diǎn)，保持鼠尾不動(dòng)，由儀器自動(dòng)記下大鼠痛覺傳導(dǎo)時(shí)間即從照射開始至出現(xiàn)甩尾的時(shí)間。2)坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度測(cè)定:大鼠腹腔注射3.5%戊巴比妥鈉1 mL/kg，待大鼠完全麻醉后俯臥固定，保持被檢測(cè)肢體溫度在37℃，暴露并游離右側(cè)坐骨神經(jīng)，電極間隔約20～30 mm，刺激電極放置在近腹股溝端，信號(hào)接收電極放置于坐骨神經(jīng)的末端，由MP-100A多導(dǎo)生理信號(hào)分析系統(tǒng)中的STM-100型電刺激器發(fā)出2 V的單次方波電刺激信號(hào)，由該系統(tǒng)精確測(cè)量?jī)呻姌O間的距離并記錄潛伏期(即電刺激信號(hào)發(fā)出后自刺激電極至接收電極的傳導(dǎo)時(shí)間)，由此計(jì)算感覺神經(jīng)傳導(dǎo)速度(SNCV，m/s)。比較藥物治療組與模型組的坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度差異，并與正常對(duì)照組比較，觀察周圍神經(jīng)病變的恢復(fù)情況。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1 坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度測(cè)定結(jié)果 模型組大鼠的坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度比正常對(duì)照組有明顯減慢(P＜0.001)，表明造模后因周圍神經(jīng)病變而影響了坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度。經(jīng)藥物治療后，除彌可保組外，其他各組的坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度比模型組均明顯增加(P＜0.05～0.001)，但仍低于正常對(duì)照組。表明各給藥組大鼠的周圍神經(jīng)病變有明顯的恢復(fù)。彌可保組的坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度比模型組也有一定程度的增加，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表1。

3.2 痛覺傳導(dǎo)時(shí)間測(cè)定結(jié)果 給藥4周時(shí)，模型組大鼠對(duì)痛覺的反應(yīng)明顯降低，其痛覺的傳導(dǎo)時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P＜0.001)，表明造模后大鼠的周圍神經(jīng)發(fā)生了病變，影響了痛覺傳導(dǎo)速度，痛覺傳導(dǎo)時(shí)間明顯延長(zhǎng)。經(jīng)藥物治療后，除舒糖康膠囊小劑量組外，其他各組的痛覺傳導(dǎo)速度均有一定程度的恢復(fù)，痛覺的傳導(dǎo)時(shí)間比模型組明顯縮短(P＜0.001)，但仍明顯高于正常對(duì)照組。表明經(jīng)舒糖康治療后，糖尿病性周圍神經(jīng)病變有明顯的恢復(fù)作用。見表1。

表1 舒糖康膠囊對(duì)糖尿病模型大鼠的神經(jīng)傳導(dǎo)速度及痛覺傳導(dǎo)時(shí)間的影響(±s，n=10)

表1 舒糖康膠囊對(duì)糖尿病模型大鼠的神經(jīng)傳導(dǎo)速度及痛覺傳導(dǎo)時(shí)間的影響(±s，n=10)

注:與模型組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01，###P ＜0.001

/s正常對(duì)照組 — 4.69±1.20### 7.81±2.31組 別 劑量/(g/kg)神經(jīng)傳導(dǎo)速度/(m/s)痛覺傳導(dǎo)時(shí)間###模型對(duì)照組 — 2.10±0.24 25.41±5.98彌可保組 0.275 mg/kg 2.45±0.59 13.59±5.02###二甲雙胍組 2.75 mg/kg 2.82±0.58## 15.03±6.14###大劑量加二甲雙胍組 8.0+2.75 mg/kg 3.14±0.48### 14.59±4.02###小劑量加二甲雙胍組 2.0+2.75 mg/kg 2.91±0.28### 14.01±4.79###大劑量組 8.0 3.01±0.81## 12.14±4.79###小劑量組 2.0 2.66±0.50# 20.81±8.61###

4 討論

中醫(yī)認(rèn)為，糖尿病病機(jī)為陰虛燥熱，氣虛血瘀，瘀血停于血脈，四肢不及則經(jīng)絡(luò)受損。瘀血不祛，新血不生，故四肢麻木疼痛［5-7］。舒糖康膠囊方中凌霄花能破血通絡(luò)、活血散瘀，改善微循環(huán)、降脂，生地黃益氣養(yǎng)陰，黃連清熱燥濕解毒，葛根生津止渴降脂。諸藥合用益氣養(yǎng)陰，解毒化瘀，通經(jīng)活絡(luò)，可降糖，并能擴(kuò)張微血管，增加血流量。本實(shí)驗(yàn)采用的STZ糖尿病模型，該方法操作簡(jiǎn)單，模型可靠穩(wěn)定［8］。陽性對(duì)照藥彌可保為維生素B12的衍生物，能修復(fù)受損神經(jīng)細(xì)胞的功能，改善神經(jīng)細(xì)胞傳導(dǎo)速度［9］。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，舒糖康膠囊口服給藥4周對(duì)DPN模型大鼠因糖尿病引起的周圍神經(jīng)病變具有明顯的恢復(fù)作用，對(duì)痛覺的傳導(dǎo)速度也有一定程度的恢復(fù)作用。

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Effect ofShutangkang Capsuleon sciatic nerve tissue conduction velocity in DPN mice

YE Youqing1，LUO Yuhui2，SHEN Mingqin2，PENG Yunru2，DING Yongfang2
(1.Dept.of Pharmacy，The Second Affiliated Hospital of Nanjing University of Traditional Chinese Medicine，Nanjing 210017，China;2.Jiangsu Provincial Institute of Traditional Chinese Medicine，Nanjing 210028，China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the effect ofShutangkang Capsuleon sciatic nerve tissue conduction velocity and pain conduction time in STZ-induced diabetic peripheral neuropathy rats.MethodsThe model of DPN rats was induced by injection of STZ.Shutangkang Capsule8.0，2.0g crude drug/kg were chronically administered to diabetic peripheral neuropath rats for 25 days.The electrophysiological effect ofShutangkang Capsuleon sciatic nerve tissue and on coccygeal nerve in STZ-induced diabetic peripheral neuropathy(DPN)rats were observed.ResultsDiabetic peripheral neuropathy rats had significant recovery by oral administration of theShutangkang CapsuleCapsule for 4 weeks.To some extent，it has effect for the recovery of pain conduction velocity.ConclusionShutangkang CapsuleCapsule has certain effective treatment on DPN rats.

Key words:Shutangkang Capsule;diabetes;diabetic peripheral neuropathy;rats

R285.5

A

2095－6258(2014)04－0585－03

10.13463/j.cnki.cczyy.2014.04.008

葉又青(1984－)，女，大學(xué)本科，主管藥師。研究方向:中藥藥理。

(

2014－03－10)