李超彥 周媛媛 趙克芳 王福青

(漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校生理教研室，河南 漯河 462002)

順鉑(DDP)是一種非特異性鉑類抗癌藥，在臨床治療中對各類腫瘤均具有較強的抑制和殺傷作用，但其細胞毒作用也是治療過程中亟待解決的問題，其對腎臟的毒性為其主要的不良反應(yīng)〔1，2〕。黃精多糖是黃精的主要有效成分，研究發(fā)現(xiàn)其具有一定的增強免疫力、降脂、降血糖、抗氧化作用〔3，4〕等多種藥理作用；但其對DDP導(dǎo)致的腎功能損害是否具有保護作用卻未見報道。本實驗觀察黃精多糖對DDP致大鼠腎功能損害的保護作用及抗氧化指標的影響。

1 材料與方法

1.1實驗動物 成年健康清潔級SD大鼠48只，雌雄不限，體重160～180 g，由河南醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供(合格證號醫(yī)動字第410109號)。

1.2藥品與試劑 黃精多糖，濃度50%，由陜西楊凌東科麥迪森制藥有限公司提供。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)試劑盒尿素氮(BUN)試劑盒、肌酐(Cr)試劑盒、均購自南京建成生物工程研究所。DDP凍干粉，20 mg，齊魯制藥有限公司生產(chǎn)，臨用前0.9%氯化鈉溶液配制。

1.3儀器 721-分光光度計(上海第三分析儀器廠)，超低溫冰箱(美國ThermoForma702)，AU2700全自動生化分析儀(日本奧林巴斯公司)，MSE-25型高速冷凍離心機(上?？茖W(xué)儀器廠)。

1.4分組與給藥 隨機分為4組，每組12只?？瞻捉M：灌胃生理鹽水3 ml/d，連續(xù)10 d；模型組：灌胃生理鹽水3 ml/d，連續(xù)10 d，于第6天開始腹腔注射順鉑2 mg·kg-1·d-1，連續(xù)5 d；黃精多糖小劑量組：灌胃黃精多糖5 g·kg-1·d-1，連續(xù)10 d，于第6天開始腹腔注射順鉑2 mg·kg-1·d-1，連續(xù)5 d； ④黃精多糖大劑量組：灌胃黃精多糖20 g·kg-1·d-1，連續(xù)10 d，于第6天開始腹腔注射順鉑2 mg·kg-1·d-1，連續(xù)5 d。

1.5血清學(xué)標本制備 各組大鼠麻醉后腹主動脈取血4 ml，放置于預(yù)先加入肝素抗凝的試管內(nèi)，4 ℃，3 000 r/min離心10 min后，采用全自動生化分析儀測定血清BUN及SCr含量。

1.6腎組織勻漿制備 剖腹后迅速取出大鼠腎臟，置于-40℃冰箱速凍，速凍后取出切下腎皮質(zhì)，制成10%腎皮質(zhì)組織勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清液置4 ℃冰箱備用。SOD、GSH-Px、MDA測定均嚴格按試劑盒說明書檢測。

1.7統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1黃精多糖對血清BUN、SCr的影響 與空白組比較，模型組大鼠SCr、BUN含量均明顯升高(P<0.01)；與模型組比較，各治療組大鼠SCr、BUN含量均明顯降低(P<0.05或P<0.01)，且黃精多糖大劑量組治療效果優(yōu)于小劑量組(P<0.05)。見表1。

2.2黃精多糖對腎組織勻漿SOD、GSH-Px、MDA的影響 與空白組比較，模型組大鼠腎組織勻漿中SOD、GSH-Px均明顯下降(P<0.01)，MDA含量明顯升高(P<0.01)；與模型組比較，各治療組大鼠腎組織勻漿中SOD、GSH-Px均明顯升高(P<0.01)，MDA含量明顯下降(P<0.01)，且黃精多糖大劑量組治療效果優(yōu)于小劑量組(P<0.05)。

組別BUN (mmol/L)SCr (μmol/L)空白組8.30± 1.5179.81±13.37模型組14.62±0.811)127.02±13.301)黃精多糖小劑量組12.14±1.502)116.74±10.612)黃精多糖大劑量組10.91±3.043)4)93.56±12.633)4)

組別SOD(U/mg)MDA(nmol/mg)GSH-Px(U/mg)空白組301.30± 21.514.81±0.37291.38± 61.90模型組187.62±28.551)6.02±0.391)201.30± 41.581)黃精多糖小劑量組212.14±31.502)5.24±0.412)240.23± 30.562)黃精多糖大劑量組285.91±15.843)4)4.56±0.663)4)287.45± 55.343)4)

3 討 論

DDP是臨床上常用的抗腫瘤藥物，對多種惡性腫瘤包括泌尿系統(tǒng)腫瘤、生殖系統(tǒng)及胃腸道腫瘤均有明顯的殺傷作用〔2〕，但由于其劑量依賴性的細胞毒作用，尤其是急性腎臟毒性作用〔2〕，限制了其大劑量及更廣泛的臨床應(yīng)用。DDP致腎臟毒性作用機制目前尚不明確，研究發(fā)現(xiàn)可能與其所致脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強有關(guān)，導(dǎo)致氧化代謝產(chǎn)物MDA的升高，細胞內(nèi)代謝廢物堆積，引發(fā)腎小管及腎小球細胞損傷、壞死、凋亡、導(dǎo)致急性腎功能障礙等一系列腎臟毒性反應(yīng)〔5，6〕。因此抑制氧自由基生成，提供抗氧化功能及增加SOD等抗氧化酶類含量可能是降低DDP致腎臟毒性作用的研究方向之一。

黃精多糖是黃精主要生物學(xué)活性成分之一，近年來研究發(fā)現(xiàn)黃精多糖具有一定的抗氧化作用，可降低大鼠心、腦及肝臟組織中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的含量〔7〕；但其對DDP所致腎損害是否具有保護作用尚未見報道。本實驗結(jié)果表明黃精多糖可保護腎功能；黃精多糖對DDP致大鼠腎功能的保護存在劑量依賴性，具體的劑量依賴關(guān)系有待于進一步實驗證實。

黃精多糖能改善DDP所致大鼠腎功能損害，考慮機制可能與其抗氧化作用有關(guān)，通過降低DDP所致的細胞脂質(zhì)過氧化增強能力，減輕了其對腎小球及腎小管細胞的毒性作用。黃精多糖作為外源性抗氧化物質(zhì)，其增強機體內(nèi)源性抗氧化能力增強的機制尚不明確；但提高腎臟組織中SOD、GSH-Px活性，降低MDA含量，可能是其保護腎臟功能的機制之一。

4 參考文獻

1Gonzalez VM,Fuertes MA,Alonso C.Is cisplatin cell death always produced by apoptosis〔J〕.Mol Pharacol,2001;59(4):657-63.

2Stewart JD,Bolt HM.Cisplatin-induced nephrotoxicity〔J〕.Arch Toxicol,2012;86(8):1155-6.

3張 濤，金 英，魏曉東，等.黃精多糖對衰老小鼠肝線粒體呼吸鏈酶及DNA聚合酶γ表達的影響〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2009；29(16)：2076-7.

4劉 萍.黃精多糖對老齡大鼠老化相關(guān)酶的影響〔J〕.華西醫(yī)學(xué)，2010；25(7)：1259-61.

5冉志華.順鉑對表達Hsp 27基因細胞株的細胞毒影響的實驗觀察〔J〕.腫瘤學(xué)雜志，2001；7(2)：76-8.

6曾 健，勞 山.順鉑腎毒性機制及其防護的研究進展〔J〕.中國實用醫(yī)藥，2008；3(10)：194-5.

7張庭廷，夏曉凱，陳傳平，等.黃精多糖的生物活性研究〔J〕.中國實驗方劑學(xué)雜志，2006；2(7)：42-4.