趙松穎 柳 嘉 劉 鍵
(河北大學附屬醫(yī)院血液科,河北 保定 071000)
尿激酶型纖溶酶原激活物受體CD87屬于特異性的可飽和的受體之一,其作為糖化磷脂酰肌醇(GPI)-錨膜蛋白,可對細胞膜上的纖溶酶進行識別,并與其激活物相結合,組成蛋白水解系統(tǒng),參與白細胞浸潤及組織重建〔1〕。研究證實,急性白血病分型診斷及評估預后判斷中,CD87具有重要的臨床意義〔2〕。本研究擬探索CD87檢測在急性髓細胞白血病預后判斷中的臨床價值。
1.1研究對象 將我院2010年6月至2013年6月收治的42例急性髓細胞白血病患者作為觀察組,將同時間段收治的36例急性淋巴細胞白血病患者作為對照組,20例健康人群作為空白組,均知情同意。
1.2一般資料 觀察組男29例,女13例;年齡61~74歲;分型:依據(jù)法國、美國、英國聯(lián)合(FAB)分型標準,M1 3例,M2 16例,M4 4例,M5 19例;治療方案:依據(jù)誘導緩解方案予以米托蒽醌10 mg/d,阿糖胞苷200~300 mg/d,即MA方案;所有患者在化療期間進行血常規(guī)、肝脾B超、染色體檢查以及涵蓋皮膚出血點、鼻出血、齒齦出血、球結膜出血等在內的出血傾向檢測。對照組男21例,女15例;年齡60~76歲??瞻捉M男14例,女6例;年齡18~52歲。
1.3檢測方法 采集白血病患者1 ml骨髓,而后加入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管,充分混勻后采用流式細胞儀測定CD87含量:將混勻后的液體取50 μl,放入6個流式細胞儀試管中,分別加入不同試劑,再次充分混勻后閉光孵育30 min,而后加入2 ml紅細胞裂解液,再次閉光孵育10 min,直至液體透亮,離心,洗滌,過濾后,加入300 μl磷酸鹽緩沖液(PBS)上流式細胞儀檢測及分析。
同時,對所有白血病患者行染色體的制備:使用0.2%肝素浸潤針筒后抽取2 ml骨髓,注入培養(yǎng)瓶,抽取標本計數(shù)有核細胞,將其接種于1640培養(yǎng)基內,37℃ 24 h。加入秋水仙胺應用液37℃ 1 h。離心,棄上清,加入低滲液,輕輕打勻,再次離心后棄上清,加入固定液打勻,室溫放置30 min,再次重復前述操作,僅將放置時間改為15 min,而后離心棄上清,加固定液,過夜,離心棄上清,加適量固定液配成細胞懸液,制片染色,待水吸干后鏡檢及分析。
1.4統(tǒng)計學方法 應用SPSS17.0統(tǒng)計學分析軟件對數(shù)據(jù)的組間比較進行t、χ2檢驗。
2.1CD87在不同疾病中的陽性率比較 CD87的檢測以其表達≥20%為陽性,觀察組中CD87的陽性率為66.67%(28例),而對照組與空白組均未見陽性表達(P<0.01)。
2.2CD87陽性與陰性者的基線資料比較 CD87陽性與陰性者各基線資料比較均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。見表1。
2.3CD87陽性與陰性者的染色體及預后相關指標比較 陽性者的染色體異常18例(64.29%),出血傾向21例(75.00%),1個療程緩解15例(53.57%),陰性者的染色體異常5例(7.14%),出血傾向6例(8.57%),1個療程緩解10例(14.26%),陽性者的各項指標均高于對照組(均P<0.01)。
表1 CD87陽性與陰性者的基線資料比較±s)
尿激酶作為特異性的絲氨酸蛋白之一,是一種黏附分子,可通過催化血管外間隙的纖溶酶原形成纖溶酶,進而降解細胞外基質蛋白,參與腫瘤細胞的浸潤及轉移過程〔3〕。國外研究報道指出,F(xiàn)AB分型中M4、M5的急性髓細胞白血病患者最容易表達CD87〔4〕。本文結果顯示,在正常骨髓中,多在早幼粒細胞中幼粒細胞、晚幼粒細胞髓系等前體細胞、單核細胞及它的前體細胞出現(xiàn)CD87的表達〔5〕,提示CD87檢測可用于鑒別急性髓細胞及淋巴細胞白血病。既往研究發(fā)現(xiàn):CD87表達同時與急性髓細胞白血病的細胞遺傳學有關〔6〕,由于CD87基因位于19號染色體q13,并提示M5作為急性髓細胞白血病的一個特殊亞型,多出現(xiàn)預后不良。研究結果亦證實,陽性者較陰性者更容易發(fā)生出血傾向,這可能與白血病患者由于CD87的過度表達,導致纖溶酶抑制劑被大量消耗有關??梢?,CD87表達往往預示著疾病進展及預后不良。
綜上所述,在髓細胞白血病的診斷中CD87是具有特異性及敏感性的標志物,可將其用于急性白血病免疫表型的診斷,尤其對于M5更有診斷價值;同時,CD87陽性對于急性髓細胞白血病的出血及緩解率等不良預后亦可提供判斷價值。
4 參考文獻
1余昕航,黨艷輝.白血病干細胞研究進展〔J〕.中國老年學雜志,2013;33(1):242-3.
2朱海波,趙明峰,李玉明,等.白血病干細胞免疫表型與急性白血病療效及預后的關系〔J〕,中華血液學雜志,2012;33(1)58-60.
3Garden CP,Banerji U,Kaye SB,etal.From darkness to light with biomarkers in early clinical trials of cancer drugs〔J〕.Clin Pharmacol Then,2009;85(2):131-3.
4于文征.經(jīng)濟型HAG/CAG方案治療老年急性髓細胞白血病及高危骨髓增生異常綜合征療效比較〔J〕.中國老年學雜志,2012;32(19):4313-4 .
5武玉慧.白血病預后相關因素、移植療效及移植后復發(fā)防治的探討〔D〕.南方醫(yī)科大學,碩士畢業(yè)論文,2012.
6孫楠楠.流式細胞術動態(tài)監(jiān)測急性白血病完全緩解后微小殘留病與預后的關系〔D〕.鄭州大學碩士畢業(yè)論文,2013.