曹青梅 (延安大學附屬醫(yī)院，陜西 延安 716000)

不同實驗室的血清IAA檢測結(jié)果差異較大，原因考慮為檢測方法不同，不同生產(chǎn)廠家的試劑質(zhì)量有差別，實驗設備性能不一樣，實驗人員操作技術熟練程度等待不一樣等存在密切關系［1］。探討化學發(fā)光酶免疫法(CLISA)和蛋白芯片法(PROTEINCHIP)兩種方法的敏感性和特異性，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:所有患者均為延安大學附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科的確診患者，均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)1999年的診斷標準。55例患者其中男27例，女28例，年齡22～48歲，平均35歲。健康對照組50例為延安大學附屬醫(yī)院的體檢者，男27例，女23例，年齡14～55歲，平均34.5歲。所有對照者空腹血糖均在6.1 mmol/L以下，且所有患者均沒有糖尿病家族史和自身免疫病史。

1.2 檢測方法:所有被檢標本均是空腹靜脈采血2 ml，離心分離血清，分裝后置－20℃保存待統(tǒng)一檢測，蛋白芯片法的試劑購置于深圳市塞爾生物技術有限公司?；瘜W發(fā)光免疫試劑購置于深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學工程有限公司。所有操作均嚴格按照儀器及試劑說明書操作。

1.3 統(tǒng)計學處理:用SPSS 8.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析，各組間陽性率比較采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

蛋白芯片法與學發(fā)光法檢測IAA、ICA、GAD陽性率比較差異無統(tǒng)計學意義，詳見表1。蛋白芯片法與學發(fā)光法檢測敏感性和特異性均沒有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，詳見表2。

表1 兩種方法檢測各組血清結(jié)果比較

表2 兩種方法檢測各組血清1AA、1CA、GAD的敏感性、特異性比較(%)

3 討論

本組資料中蛋白芯片法與化學發(fā)光酶免疫法檢測IAA敏感性分別為31.4%、33.2%，特異性分別為100%、99%，檢測結(jié)果與報道基本一致。ICA陽性預示了β細胞的自身免疫損傷，僅僅作為DM的高危指標，其對T1DM的較高預測性體現(xiàn)在兒童陽性或高水平持續(xù)陽性的時候。因此對少年起病的T1DM早期有較高的診斷價值，而非糖尿病群體中僅有0.1%～0.5%存在ICA。1型糖尿病患者一級親屬中5%ICA陽性，這些個體構成了患1型糖尿病的高危人群。ICA屬于針對胰島自身細胞的一種抗體，免疫反應是在當胰島細胞抗體和胰島細胞的表面抗原結(jié)合后引起的，同時補體系統(tǒng)被激活，細胞的溶解和死亡隨之發(fā)生，進而引起DM［2］。因此ICA的血清學檢測是早期診斷1型糖尿病強有力的工具。本次試驗蛋白芯片法與化學發(fā)光酶免法敏感性分別為13.5%、11.2%，特異性分別為100%、100%;結(jié)果差異不大。

抗谷氨酸脫羧酶抗體(GAD)為1型糖尿病患者血中存在又一自身抗體，T1DM患者最早出現(xiàn)的抗體是GAD，該抗體出現(xiàn)在臨床癥狀出現(xiàn)之前的較長一段時間，在初發(fā)T1DM患者血液中其陽性率高達70% ～80%［3］，在單一抗體陽性中，T1DM中的GAD陽性率高于ICA和IAA，說明GAD在糖尿病分型中的價值優(yōu)于ICA和IAA，是1型糖尿病較好的免疫預測和診斷指標。本次試驗蛋白芯片法與化學發(fā)光法敏感性分別37.5%、36%，特異性分別為98%、97%，結(jié)果差異不大。因此，GAD、ICA和IAA三種抗體可以作為預測和診斷T1DM的較好指標，而三種抗體聯(lián)合檢測可以作為T1DM高危人群流行病學的篩選指標。傳統(tǒng)的化學方法每次只能檢測單項指標，若進行多指標檢測不僅用血量大且檢測費用昂貴.用血量大。蛋白芯片技術把多種純化的檢測蛋白高密度排列在固定支持物表面上，使標本中的靶蛋白特異性地與之結(jié)合，通過微加工技術和微電子技術在固體芯片表面構建微型生物化學分析系統(tǒng)，對靶蛋白進行定性、定量檢測［4－5］，一次試驗即可檢測出3種糖尿病患者自身抗體的血清狀況。

從上述兩種檢測方法的原理和各自的優(yōu)缺點并結(jié)合本次的試驗結(jié)果可以看出，蛋白芯片法與學發(fā)光法的敏感性和特異性相近，無統(tǒng)計學差異，而蛋白芯片法具有省時、高效、高通量平行檢測、操作簡單、不需要特殊儀器的優(yōu)點，由此可見，蛋白芯片法優(yōu)于化學發(fā)光法。

［1］吳藝捷.糖尿病患者自身抗體檢測的進展及臨床運用［J］.實習糖尿病雜志，2004，3(12):55.

［2］趙成玉.谷氨酰脫羧酶抗體和胰島細胞抗體測定的臨床意義［J］.青海醫(yī)藥雜志，2005，35(5):62.

［3］朱禧星.現(xiàn)代糖尿病學［M］.上海:上海醫(yī)科大學出版社，2000:1－95.

［4］Gutstein HB，Morr is JS，Annangud i SP，et a.l M icropro teom ics:ana ly sis o f prote in dive rs ity in sm all sam ples［J］.M ass Spectrom Rev，2008，27(4):316.

［5］Von Eggeling F，M e lleC，ErnstG.M icrodissecting thepro teom e［J］.Pro teom ics，2007，7(16):2729.