周偉紅 顧亞紅

(復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院普外科，上海 201700)

胃低分化腺癌患者常伴有多年的潰瘍性病變。當(dāng)細(xì)胞惡變后，進(jìn)展快，患者預(yù)后差。由于腫瘤的分化程度低，異型性明顯，基因的變化類型多，調(diào)節(jié)機(jī)制復(fù)雜〔1〕。Bmi-1是多梳基因家族的成員，可以調(diào)控細(xì)胞增殖和凋亡〔2，3〕。激活蛋白(AP)-2γ是一種轉(zhuǎn)錄因子，可以調(diào)節(jié)相關(guān)細(xì)胞的增殖、黏附和侵襲過程〔4，5〕。白細(xì)胞分化抗原(CD)147是免疫球蛋白家族的成員之一，在細(xì)胞表面發(fā)揮作用時具有多項生物學(xué)功能〔6，7〕。本文關(guān)注胃低分化腺癌患者術(shù)后組織中Bmi-1、AP-2γ和CD147的表達(dá)及其相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1臨床資料 2011年1月至2013年12月我院行胃癌根治手術(shù)、同時經(jīng)病理醫(yī)師確診為低分化腺癌患者123例作為研究組。納入均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男70例，女53例，年齡53～81〔平均(64.5±5.7)〕歲。術(shù)前均未進(jìn)行放、化療。同時選取距腫瘤邊緣大于5 cm的胃切緣，并經(jīng)病理醫(yī)師證實為正常的胃黏膜組織87例作為對照組，其中男50例，女37例，年齡54～79〔平均(63.2±4.1)〕歲。兩組常規(guī)資料無顯著差別。

1.2免疫組化檢測Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白的表達(dá) Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白的濃縮液均購自Santa Cruz Biotechnology，SP試劑盒、DAB顯色劑等均購自武漢博士德生物工程有限公司。濃縮液均依不同比例進(jìn)行稀釋，采用免疫組化SP法進(jìn)行預(yù)實驗，選擇最佳配比濃度進(jìn)行正式實驗。Bmi-1、AP-2γ和CD147的檢測應(yīng)用免疫組化SP法，均由同一病理技師操作，嚴(yán)格按說明書操作，嚴(yán)格質(zhì)量控制，減少人為誤差。

1.3Bmi-1、AP-2γ和CD147結(jié)果判定 Bmi-1以細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng)，AP-2γ以細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng)細(xì)胞，CD147以細(xì)胞膜和(或)細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng)細(xì)胞。每張切片中選擇染色較集中的上皮細(xì)胞區(qū)域，計數(shù)5個400倍的視野，取其平均值，以陽性細(xì)胞≥5%為陽性，陽性細(xì)胞的25%定為陰性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗和線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白表達(dá)陽性率比較 兩組Bmi-1、AP-2γ和CD147表達(dá)陽性率差別均顯著(P<0.000 1)。見表1。

表1 Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白在二組中表達(dá)陽性率的比較〔n(%)〕

2.2研究組不同臨床特征患者Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白表達(dá)陽性率的比較 研究組Bmi-1、AP-2γ和CD147表達(dá)陽性率與腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤、增殖指數(shù)均密切相關(guān)。見表2。

表2 研究組不同臨床特征患者Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白表達(dá)陽性率的比較〔n(%)〕

2.3研究組Bmi-1、AP-2γ和CD147表達(dá)相關(guān)性 研究組Bmi-1和AP-2γ(r=0.45，P=0.023 5)的表達(dá)呈正相關(guān)，其他指標(biāo)間未見相關(guān)性。

3 討 論

胃低分化腺癌發(fā)生的機(jī)制目前尚不清楚。多種蛋白異常表達(dá)對病變起促進(jìn)作用〔8〕。Bmi-1作為一種位于表面的核蛋白，可以引起細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)變〔9，10〕。研究顯示Bmi-1可以直接與在P16基因啟動子中的Bmi-1反應(yīng)元件結(jié)合，調(diào)控P16表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤進(jìn)展〔11〕。研究顯示Bmi-1可以調(diào)節(jié)同源盒基因及包含氧化酶的WW域基因的表達(dá)，進(jìn)而對上皮和間質(zhì)轉(zhuǎn)化起重要作用〔12，13〕。Song等〔14〕研究顯示Bmi-1可以下調(diào)磷酸酯酶與張力蛋白同源物(PTEN)的表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)上皮和間質(zhì)的轉(zhuǎn)化，增加鼻咽上皮細(xì)胞的遷移能力和侵襲性，加速腫瘤細(xì)胞的進(jìn)展。AP-2γ的作用是控制基因的轉(zhuǎn)錄作用，對腫瘤的生物學(xué)進(jìn)展有促進(jìn)作用〔15，16〕。研究顯示AP-2γ在乳腺癌中表達(dá)升高，不僅可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，還可調(diào)節(jié)CDKN1A基因表達(dá)，同時可能對乳腺癌的激素治療有一定指導(dǎo)價值〔17，18〕。CD147最初是作為腫瘤細(xì)胞激活鄰近的成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的一種膠原酶而發(fā)現(xiàn)的，其基因定位于人染色體19p13.3，編碼269個氨基酸，其在N端存在著一個信號肽〔19〕。學(xué)者〔20〕發(fā)現(xiàn)CD147的跨膜區(qū)域具有亮氨酸拉鏈的結(jié)構(gòu)特點，在正常情況下，CD147不表達(dá)或低表達(dá)，也有學(xué)者〔21〕發(fā)現(xiàn)CD147不僅在腫瘤中表達(dá)，在腫瘤周邊組織中也有少量表達(dá)，認(rèn)為其對腫瘤上皮和間質(zhì)轉(zhuǎn)化、侵襲性生長及轉(zhuǎn)移有重要作用。

本文結(jié)果提示Bmi-1、AP-2γ和CD147可以促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，由于胃低分化腺癌是上皮惡性轉(zhuǎn)化過程中的發(fā)生，其具有分化的特征(區(qū)別于未分化癌)，但是分化程度極低，也提示三者可以促進(jìn)腫瘤的分化過程，但是促進(jìn)分化的能力差。Bmi-1、AP-2γ和CD147可以促進(jìn)腫瘤的生長及周邊組織的浸潤，這與相關(guān)學(xué)者在腫瘤細(xì)胞周邊組織中看到少數(shù)間質(zhì)表達(dá)AP-2γ和CD147的結(jié)論相似〔15，22〕。Bmi-1、AP-2γ和CD147可以有效促進(jìn)腫瘤的脈管播散過程，由于脈管生長和轉(zhuǎn)移過程中受多種血管生成因子和淋巴管生成因子的影響，因此三者可能是激活脈管生成的因子，可以促進(jìn)腫瘤的生長和繁殖，促進(jìn)腫瘤的作用可能與對腫瘤細(xì)胞增殖的調(diào)節(jié)相關(guān)〔23〕。失控性增生和異常增殖是低分化癌的顯著特征，三種蛋白高表達(dá)，提示腫瘤處于增殖期，此時對機(jī)體蛋白的消耗增多，細(xì)胞分化差，惡性潛能高，預(yù)后差。Bmi-1、AP-2γ和CD147高表達(dá)可能提示不良預(yù)后，此結(jié)論有待后續(xù)實驗中關(guān)注患者的生存情況加以確認(rèn)。Bmi-1和AP-2γ可能具有協(xié)同正向作用，由于Bmi-1和AP-2γ均為不同調(diào)節(jié)的通路，而二者均可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，可能是通過對Ki67表達(dá)的增殖調(diào)節(jié)實現(xiàn)的。但是其具體調(diào)節(jié)通路需要更多實驗證實。

4 參考文獻(xiàn)

1王 玄，張 翔，倪 斌，等.AP-2γ在胃癌中表達(dá)的臨床病理意義〔J〕.中國醫(yī)藥指南，2013；11(9):1-2.

2Zhang X，Sun J，Wang H，etal.IGF-1R and Bmi-1 expressions in lung adenocarcinoma and their clinicopathologic and prognostic significance〔J〕.Tumour Biol，2014；35(1):739-45.

3Li X，Yang Z，Song W，etal.Overexpression of Bmi-1 contributes to the invasion and metastasis of hepatocellular carcinoma by increasing the expression of matrix metalloproteinase (MMP)-2，MMP-9 and vascular endothelial growth factor via the PTEN/PI3K/Akt pathway〔J〕.Int J Oncol，2013；43(3):793-802.

4Williams CM，Scibetta AG，F(xiàn)riedrich JK，etal.AP-2gamma promotes proliferation in breast tumour cells by direct repression of the CDKN1A gene〔J〕.EMBO J，2009；28(22):3591-601.

5Li H，Goswami PC，Domann FE.AP-2gamma induces p21 expression，arrests cell cycle，and inhibits the tumor growth of human carcinoma cells〔J〕.Neoplasia，2006；8(7):568-77.

6Huang Z，Wang L，Wang Y，etal.Overexpression of CD147 contributes to the chemoresistance of head and neck squamous cell carcinoma cells〔J〕.J Oral Pathol Med，2013；42(7):541-6.

7Yang H，Chen B.CD147 in ovarian and other cancers〔J〕.Int J Gynecol Cancer，2013；23(1):2-8.

8劉愛東，劉士生，許志萍，等.E-Cadherin在胃癌中的表達(dá)及意義〔J〕.廣東醫(yī)學(xué)，2007；28(11):1806-7.

9孟秀香，劉丹丹，聶慧玲，等.BMI-1與MMP-2在肺腺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.中國實驗診斷學(xué)，2013；17(9):1587-8.

10鄒艷芳，田 永，徐 峰.BMI-1和MEL-18基因在大腸癌組織中的表達(dá)及意義〔J〕.世界華人消化雜志，2013；21(5):397-402.

11Meng S，Luo M，Sun H，etal.Identification and characterization of Bmi-1-responding element within the human P16 promoter〔J〕.J Biol Chem，2010；285(43): 33219-29.

12Xu YW，Peng YH，Chen B，etal.Autoantibodies as potential biomarkers for the early detection of esophageal squamous cell carcinoma〔J〕.Am J Gastroenterol，2014；109(1):36-45.

13Tong YQ，Liu B，Zheng HY，etal.Overexpression of BMI-1 is associated with poor prognosis in cervical cancer〔J〕.Asia Pac J Clin Oncol，2012；8(4):e55-62.

14Song L，Li J，Liao W，etal.The polycomb group protein Bmi-1 represses the tumor suppressor PTEN and induces epithelial-mesenchymal transition in human nasopharyngeal epithelial cells〔J〕.J Clin Invest，2009；119(12):3626-36.

15童 英，成元華，文安智.精原細(xì)胞瘤中M2A、AP-2γ、OCT3/4、PLAP和CD117的表達(dá)及其意義〔J〕.實用醫(yī)學(xué)雜志，2011；27(8):1338-9.

16Li H，Watts GS，Oshiro MM，etal.AP-2alpha and AP-2gamma are transcriptional targets of p53 in human breast carcinoma cells〔J〕.Oncogene，2006；25(39):5405-15.

17Odegaard E，Staff AC，Kaern J，etal.The AP-2gamma transcription factor is upregulated in advanced-stage ovarian carcinoma〔J〕.Gynecol Oncol，2006；100(3):462-8.

18Jager R，F(xiàn)riedrichs N，Heim I，etal.Dual role of AP-2gamma in ErbB-2-induced mammary tumorigenesis〔J〕.Breast Cancer Res Treat，2005；90(3):273-80.

19Gao J，Hu Z，Liu J，etal.Expression of CD147 and Lewis y antigen in ovarian cancer and their relationship to drug resistance〔J〕.Med Oncol，2014；31(5):920.

20Yang Q，Liu Y，Huang Y，etal.Expression of COX-2，CD44v6 and CD147 and relationship with invasion and lymph node metastasis in hypopharyngeal squamous cell carcinoma〔J〕.PLoS One，2013；8(9):e71048.

21Dalley AJ，Pitty LP，Major AG，etal.Expression of ABCG2 and Bmi-1 in oral potentially malignant lesions and oral squamous cellcarcinoma〔J〕.Cancer Med，2014；3(2):273-83.

22Adhikary G，Grun D，Kerr C，etal.Identification of a population of epidermal squamous cell carcinoma cells with enhanced potential for tumor formation〔J〕.PLoS One，2013；8(12):e84324.

23高玉寶，李常恩.應(yīng)用組織芯片檢測BMI-1及P16在膽管細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義〔J〕.吉林醫(yī)學(xué)，2014；35(8):1595-6.