陳書(shū)秀+劉學(xué)遷+王青巖+李曉捷+曲善村

摘要：用微綠球藻新鮮藻液、微綠球藻冷凍濃縮液、微綠球藻干粉+干酵母及干酵母對(duì)刺參浮游階段幼體進(jìn)行了為期15 d的投喂實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明: 以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長(zhǎng)速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢(shì)；單獨(dú)投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需求，但生長(zhǎng)相對(duì)緩慢，成活率及變態(tài)率相對(duì)較低。另外，單獨(dú)投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低。

關(guān)鍵詞：刺參幼體；微綠球藻；日增長(zhǎng)率；成活率；變態(tài)率

刺參（Apostichopus japonicus）屬棘皮動(dòng)物門(mén)（Echinodermata）、海參綱（Holothuroidea）楯手目（Aspidochirota）、刺參科（Stichopodidae）、刺參屬（Stichopus）。在中國(guó)自古被譽(yù)為“海產(chǎn)八珍”之首，具有很高的營(yíng)養(yǎng)保健和藥用價(jià)值［1］。近年來(lái)，隨著人們保健意識(shí)的逐步增強(qiáng)和刺參市場(chǎng)前景的不斷開(kāi)闊，刺參養(yǎng)殖已經(jīng)成為中國(guó)北方尤其是遼寧、山東等地的主要珍貴水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)品種。但是，隨著刺參產(chǎn)業(yè)的不斷壯大，也隨之產(chǎn)生了一系列的問(wèn)題從而在一定程度上制約了刺參產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。刺參養(yǎng)殖分為育苗和養(yǎng)成兩個(gè)階段，刺參育苗過(guò)程中浮游時(shí)期幼體發(fā)育正常與否對(duì)于變態(tài)至稚參的成活率有直接影響，期間投喂充足而適宜的餌料又是浮游幼體正常生長(zhǎng)、發(fā)育、順利變態(tài)的前提。目前研究表明［1-3］，適宜的餌料有鹽藻、湛江叉鞭金藻、牟氏角毛藻、三角褐指藻、小新月菱形藻。采用上述餌料單一或混合投喂均可獲得較好的培育效果，但以2～3種餌料混合投喂效果更佳，餌料混合投喂可使其營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)，滿足幼體的營(yíng)養(yǎng)需求。但是目前所采用的單胞藻都為高溫種類，且不易培養(yǎng)、易污染老化，容易造成育苗期間的餌料短缺，從而導(dǎo)致育苗失敗。

微綠球藻是一種海洋單細(xì)胞微藻，具有繁殖迅速、易培養(yǎng)、營(yíng)養(yǎng)豐富等特點(diǎn)，細(xì)胞球形或橢球形，直徑2～4 μm。該藻含有的PUFA是海水仔魚(yú)、蝦蟹貝等幼體的必需脂肪酸，能夠提高海產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)率和幼體的存活率，加上其細(xì)胞壁極薄，易于消化吸收，在水產(chǎn)養(yǎng)殖及生物活性物質(zhì)提取方面具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值［4］。目前已應(yīng)用于泥蚶、蟹［5］、蝦［6］等育苗及輪蟲(chóng)［7-8］培養(yǎng)中，并取得了良好效果。本文主要以微綠球藻活細(xì)胞、干粉或冷凍濃縮液及干酵母為餌料，通過(guò)對(duì)刺參浮游幼體生長(zhǎng)率、存活率及變態(tài)率的統(tǒng)計(jì)分析，從而對(duì)微綠球藻作為刺參浮游幼體階段的投喂餌料效果做出初步分析。

1材料與方法

1.1刺參幼體及餌料來(lái)源

實(shí)驗(yàn)用刺參幼體來(lái)自于牟平海區(qū)。

所用微綠球藻新鮮藻液、干粉、冷凍濃縮液均由煙臺(tái)海融生物技術(shù)有限公司提供。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

刺參幼體分別放置于0.15 m3的塑料桶中，暗光培育，培育密度為0.5個(gè)/mL，連續(xù)充氣，水溫保持在21 ℃，每天換水2次，每次換水量100%，換水后溫差不超過(guò)±1 ℃。每天換水后投餌，培育用水及投喂餌料均經(jīng)300目篩絹過(guò)濾。每次投餌量為：小耳幼體5 000～10 000個(gè)/mL，中耳幼體10 000～15 000個(gè)/mL，大耳幼體15 000～20 000個(gè)/mL。（干酵母按說(shuō)明濃度換算為細(xì)胞數(shù)投喂）。

實(shí)驗(yàn)設(shè)4個(gè)處理組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)。分別為：A—微綠球藻新鮮藻液；B—微綠球藻冷凍濃縮液；C—微綠球藻干粉50%+酵母粉50%；D—干酵母。

實(shí)驗(yàn)從7月5日開(kāi)始，每天從各桶中隨機(jī)取30個(gè)幼體進(jìn)行測(cè)量，計(jì)算其體長(zhǎng)、密度并觀察其生長(zhǎng)發(fā)育情況。

體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率計(jì)算方法：⊿L（%d-1）=100(㏑L2-㏑L1)/T

L2；表示所測(cè)稚幼參的最終體長(zhǎng)（μm）；L1：表示所測(cè)稚幼參的初始體長(zhǎng)（μm）；T：表示稚幼參的生長(zhǎng)時(shí)間（d）。

大耳幼體成活率計(jì)算方法：大耳幼體成活率=p1/p2×100%

其中：p1為剛開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體時(shí)水中浮游刺參幼體密度；p2為原有刺參幼體密度。

2結(jié)果

2.1各處理組幼體體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率比較

各處理組刺參幼體在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中均表現(xiàn)出了顯著的生長(zhǎng)（圖1）。各處理組經(jīng)8 d的培育，生長(zhǎng)最快的處理組為組C（干酵母+微綠球藻干粉），由430 μm生長(zhǎng)到910 μm，體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率為59.25%。最慢的處理組為組B(冷凍藻濃縮液)，由420 μm生長(zhǎng)到680 μm，體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率為39.50%。

圖1不同餌料條件下刺參幼體體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率

2.2各處理組大耳幼體成活率比較

由于各處理組生長(zhǎng)發(fā)育快慢的差異，大耳幼體成活率分別在不同時(shí)間進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)圖2。由圖2可以看出處理組C（酵母+藻粉）效果最好，成活率高達(dá)96.5%，處理組B（冷凍藻）成活率最低，為45.6%。

圖2不同餌料條件下大耳幼體成活率

2.3各處理組變態(tài)率的比較

實(shí)驗(yàn)的四個(gè)不同處理組不僅生長(zhǎng)速率及成活率存在差異，其樽形幼體變態(tài)率也有顯著差異（見(jiàn)圖3），生長(zhǎng)最快的處理組C（酵母+干藻粉）在培養(yǎng)到第7 d就已經(jīng)開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體，2 d后全部變態(tài)；生長(zhǎng)最慢的處理組B（冷凍藻液）不僅在培育到第10 d才開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體，而且12 d后仍有多數(shù)幼體未變態(tài)，停留在大耳幼體期直至死亡。

圖3不同餌料條件下樽形幼體變態(tài)率

2.4各處理組生長(zhǎng)發(fā)育情況比較

實(shí)驗(yàn)從7月5日開(kāi)始投喂餌料，第1 d投喂餌料之后觀察各處理組幼體攝食情況，從圖4可以看出，各處理組幼體發(fā)育情況無(wú)顯著差異，胃型較飽滿，攝食情況良好。第6天觀察各處理組幼體發(fā)育情況（見(jiàn)圖5），從圖中可以看出處理組C大耳幼體胃型飽滿，個(gè)體較大，并開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體。而處理組B中刺參幼體個(gè)體小，且出現(xiàn)胃縮小及爛胃現(xiàn)象，有一部分停留在小耳幼體階段，未出現(xiàn)樽形幼體。處理組A和處理組D發(fā)育情況良好，與處理組C相比，僅在幼體密度及個(gè)體大小上稍有差異?！糉L)〗〖TP<25.tif>,BP〗

圖4投餌第一天，不同處理組幼體生長(zhǎng)發(fā)育情況

圖5投餌第六天，不同處理組幼體生長(zhǎng)發(fā)育情況

3討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長(zhǎng)速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢(shì)；單獨(dú)投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需求，但生長(zhǎng)相對(duì)緩慢，成活率及變態(tài)率相對(duì)較低。另外，單獨(dú)投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低，且在培育后期損失過(guò)半，在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)“爛胃”、“胃萎縮”等現(xiàn)象，后期幼體出現(xiàn)“化邊”、“爛邊”等。

由以上結(jié)果可以看出，微綠球藻雖為綠藻，但其細(xì)胞壁薄，且具較好的上浮性，個(gè)體?。?～4 μm），易于攝食，富含多種不飽和脂肪酸等生物活性物質(zhì)，可以作為刺參幼參的餌料之一，較硅藻或金藻等常用餌料，微綠球藻具有易培養(yǎng)、生長(zhǎng)快、抗污染等優(yōu)點(diǎn)，單獨(dú)投喂新鮮藻液基本可以滿足幼體的需求，達(dá)到較好的育苗效果。如果采用微綠球藻干藻粉與干酵母混合投喂，由于酵母可以彌補(bǔ)微藻中氨基酸、消化酶和生長(zhǎng)激素等營(yíng)養(yǎng)缺陷，因此可以更好地滿足幼體的營(yíng)養(yǎng)需求，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證明了這一點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 仇磊，姜國(guó)良.幾種單胞藻餌料對(duì)刺參耳狀幼體爛胃的影響［J］.齊魯漁業(yè)，2006(6):41-42

［2］ 張煜，劉永宏. 國(guó)內(nèi)、外刺參研究的回顧、進(jìn)展極其資源增殖途徑的探討［J］.齊魯漁業(yè)，1984（2）：57-60

［3］ 隋錫林. 海參增養(yǎng)殖［M］. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1990

［4］ 余穎，陳必鏈.微綠球藻的研究進(jìn)展［J］.海洋通報(bào)，2005，6（24）：75-81

［5］ 沈和定，黃旭雄.三種藻類對(duì)中華絨螯蟹Ⅰ期溞狀幼體培育效果的比較［J］.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999,8（3）：202-209

［6］ 成文靖,蔡春芳.微綠球藻在羅氏沼蝦育苗中的應(yīng)用研究［J］.水利漁業(yè), 2002, 22(1): 15-16

［7］ 劉新富，雷霽霖，劉忠強(qiáng)，等.真鯛餌料生物褶皺臂尾輪蟲(chóng)和眼點(diǎn)擬微綠球藻的大量培養(yǎng)［J］.海洋科學(xué)，2002，24（5）：47-51

［8］ Lubzens E, Gibson O, Zmora O et al..Potential advantages of frozen algae (Nannochloropsis sp.) for rotifer (Brachionus plicatilis) culture ［J］.Aquaculture, 1995, 133: 295-309

摘要：用微綠球藻新鮮藻液、微綠球藻冷凍濃縮液、微綠球藻干粉+干酵母及干酵母對(duì)刺參浮游階段幼體進(jìn)行了為期15 d的投喂實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明: 以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長(zhǎng)速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢(shì)；單獨(dú)投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需求，但生長(zhǎng)相對(duì)緩慢，成活率及變態(tài)率相對(duì)較低。另外，單獨(dú)投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低。

關(guān)鍵詞：刺參幼體；微綠球藻；日增長(zhǎng)率；成活率；變態(tài)率

刺參（Apostichopus japonicus）屬棘皮動(dòng)物門(mén)（Echinodermata）、海參綱（Holothuroidea）楯手目（Aspidochirota）、刺參科（Stichopodidae）、刺參屬（Stichopus）。在中國(guó)自古被譽(yù)為“海產(chǎn)八珍”之首，具有很高的營(yíng)養(yǎng)保健和藥用價(jià)值［1］。近年來(lái)，隨著人們保健意識(shí)的逐步增強(qiáng)和刺參市場(chǎng)前景的不斷開(kāi)闊，刺參養(yǎng)殖已經(jīng)成為中國(guó)北方尤其是遼寧、山東等地的主要珍貴水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)品種。但是，隨著刺參產(chǎn)業(yè)的不斷壯大，也隨之產(chǎn)生了一系列的問(wèn)題從而在一定程度上制約了刺參產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。刺參養(yǎng)殖分為育苗和養(yǎng)成兩個(gè)階段，刺參育苗過(guò)程中浮游時(shí)期幼體發(fā)育正常與否對(duì)于變態(tài)至稚參的成活率有直接影響，期間投喂充足而適宜的餌料又是浮游幼體正常生長(zhǎng)、發(fā)育、順利變態(tài)的前提。目前研究表明［1-3］，適宜的餌料有鹽藻、湛江叉鞭金藻、牟氏角毛藻、三角褐指藻、小新月菱形藻。采用上述餌料單一或混合投喂均可獲得較好的培育效果，但以2～3種餌料混合投喂效果更佳，餌料混合投喂可使其營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)，滿足幼體的營(yíng)養(yǎng)需求。但是目前所采用的單胞藻都為高溫種類，且不易培養(yǎng)、易污染老化，容易造成育苗期間的餌料短缺，從而導(dǎo)致育苗失敗。

微綠球藻是一種海洋單細(xì)胞微藻，具有繁殖迅速、易培養(yǎng)、營(yíng)養(yǎng)豐富等特點(diǎn)，細(xì)胞球形或橢球形，直徑2～4 μm。該藻含有的PUFA是海水仔魚(yú)、蝦蟹貝等幼體的必需脂肪酸，能夠提高海產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)率和幼體的存活率，加上其細(xì)胞壁極薄，易于消化吸收，在水產(chǎn)養(yǎng)殖及生物活性物質(zhì)提取方面具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值［4］。目前已應(yīng)用于泥蚶、蟹［5］、蝦［6］等育苗及輪蟲(chóng)［7-8］培養(yǎng)中，并取得了良好效果。本文主要以微綠球藻活細(xì)胞、干粉或冷凍濃縮液及干酵母為餌料，通過(guò)對(duì)刺參浮游幼體生長(zhǎng)率、存活率及變態(tài)率的統(tǒng)計(jì)分析，從而對(duì)微綠球藻作為刺參浮游幼體階段的投喂餌料效果做出初步分析。

1材料與方法

1.1刺參幼體及餌料來(lái)源

實(shí)驗(yàn)用刺參幼體來(lái)自于牟平海區(qū)。

所用微綠球藻新鮮藻液、干粉、冷凍濃縮液均由煙臺(tái)海融生物技術(shù)有限公司提供。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

刺參幼體分別放置于0.15 m3的塑料桶中，暗光培育，培育密度為0.5個(gè)/mL，連續(xù)充氣，水溫保持在21 ℃，每天換水2次，每次換水量100%，換水后溫差不超過(guò)±1 ℃。每天換水后投餌，培育用水及投喂餌料均經(jīng)300目篩絹過(guò)濾。每次投餌量為：小耳幼體5 000～10 000個(gè)/mL，中耳幼體10 000～15 000個(gè)/mL，大耳幼體15 000～20 000個(gè)/mL。（干酵母按說(shuō)明濃度換算為細(xì)胞數(shù)投喂）。

實(shí)驗(yàn)設(shè)4個(gè)處理組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)。分別為：A—微綠球藻新鮮藻液；B—微綠球藻冷凍濃縮液；C—微綠球藻干粉50%+酵母粉50%；D—干酵母。

實(shí)驗(yàn)從7月5日開(kāi)始，每天從各桶中隨機(jī)取30個(gè)幼體進(jìn)行測(cè)量，計(jì)算其體長(zhǎng)、密度并觀察其生長(zhǎng)發(fā)育情況。

體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率計(jì)算方法：⊿L（%d-1）=100(㏑L2-㏑L1)/T

L2；表示所測(cè)稚幼參的最終體長(zhǎng)（μm）；L1：表示所測(cè)稚幼參的初始體長(zhǎng)（μm）；T：表示稚幼參的生長(zhǎng)時(shí)間（d）。

大耳幼體成活率計(jì)算方法：大耳幼體成活率=p1/p2×100%

其中：p1為剛開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體時(shí)水中浮游刺參幼體密度；p2為原有刺參幼體密度。

2結(jié)果

2.1各處理組幼體體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率比較

各處理組刺參幼體在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中均表現(xiàn)出了顯著的生長(zhǎng)（圖1）。各處理組經(jīng)8 d的培育，生長(zhǎng)最快的處理組為組C（干酵母+微綠球藻干粉），由430 μm生長(zhǎng)到910 μm，體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率為59.25%。最慢的處理組為組B(冷凍藻濃縮液)，由420 μm生長(zhǎng)到680 μm，體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率為39.50%。

圖1不同餌料條件下刺參幼體體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率

2.2各處理組大耳幼體成活率比較

由于各處理組生長(zhǎng)發(fā)育快慢的差異，大耳幼體成活率分別在不同時(shí)間進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)圖2。由圖2可以看出處理組C（酵母+藻粉）效果最好，成活率高達(dá)96.5%，處理組B（冷凍藻）成活率最低，為45.6%。

圖2不同餌料條件下大耳幼體成活率

2.3各處理組變態(tài)率的比較

實(shí)驗(yàn)的四個(gè)不同處理組不僅生長(zhǎng)速率及成活率存在差異，其樽形幼體變態(tài)率也有顯著差異（見(jiàn)圖3），生長(zhǎng)最快的處理組C（酵母+干藻粉）在培養(yǎng)到第7 d就已經(jīng)開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體，2 d后全部變態(tài)；生長(zhǎng)最慢的處理組B（冷凍藻液）不僅在培育到第10 d才開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體，而且12 d后仍有多數(shù)幼體未變態(tài)，停留在大耳幼體期直至死亡。

圖3不同餌料條件下樽形幼體變態(tài)率

2.4各處理組生長(zhǎng)發(fā)育情況比較

實(shí)驗(yàn)從7月5日開(kāi)始投喂餌料，第1 d投喂餌料之后觀察各處理組幼體攝食情況，從圖4可以看出，各處理組幼體發(fā)育情況無(wú)顯著差異，胃型較飽滿，攝食情況良好。第6天觀察各處理組幼體發(fā)育情況（見(jiàn)圖5），從圖中可以看出處理組C大耳幼體胃型飽滿，個(gè)體較大，并開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體。而處理組B中刺參幼體個(gè)體小，且出現(xiàn)胃縮小及爛胃現(xiàn)象，有一部分停留在小耳幼體階段，未出現(xiàn)樽形幼體。處理組A和處理組D發(fā)育情況良好，與處理組C相比，僅在幼體密度及個(gè)體大小上稍有差異。〖FL)〗〖TP<25.tif>,BP〗

圖4投餌第一天，不同處理組幼體生長(zhǎng)發(fā)育情況

圖5投餌第六天，不同處理組幼體生長(zhǎng)發(fā)育情況

3討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長(zhǎng)速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢(shì)；單獨(dú)投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需求，但生長(zhǎng)相對(duì)緩慢，成活率及變態(tài)率相對(duì)較低。另外，單獨(dú)投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低，且在培育后期損失過(guò)半，在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)“爛胃”、“胃萎縮”等現(xiàn)象，后期幼體出現(xiàn)“化邊”、“爛邊”等。

由以上結(jié)果可以看出，微綠球藻雖為綠藻，但其細(xì)胞壁薄，且具較好的上浮性，個(gè)體?。?～4 μm），易于攝食，富含多種不飽和脂肪酸等生物活性物質(zhì)，可以作為刺參幼參的餌料之一，較硅藻或金藻等常用餌料，微綠球藻具有易培養(yǎng)、生長(zhǎng)快、抗污染等優(yōu)點(diǎn)，單獨(dú)投喂新鮮藻液基本可以滿足幼體的需求，達(dá)到較好的育苗效果。如果采用微綠球藻干藻粉與干酵母混合投喂，由于酵母可以彌補(bǔ)微藻中氨基酸、消化酶和生長(zhǎng)激素等營(yíng)養(yǎng)缺陷，因此可以更好地滿足幼體的營(yíng)養(yǎng)需求，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證明了這一點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 仇磊，姜國(guó)良.幾種單胞藻餌料對(duì)刺參耳狀幼體爛胃的影響［J］.齊魯漁業(yè)，2006(6):41-42

［2］ 張煜，劉永宏. 國(guó)內(nèi)、外刺參研究的回顧、進(jìn)展極其資源增殖途徑的探討［J］.齊魯漁業(yè)，1984（2）：57-60

［3］ 隋錫林. 海參增養(yǎng)殖［M］. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1990

［4］ 余穎，陳必鏈.微綠球藻的研究進(jìn)展［J］.海洋通報(bào)，2005，6（24）：75-81

［5］ 沈和定，黃旭雄.三種藻類對(duì)中華絨螯蟹Ⅰ期溞狀幼體培育效果的比較［J］.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999,8（3）：202-209

［6］ 成文靖,蔡春芳.微綠球藻在羅氏沼蝦育苗中的應(yīng)用研究［J］.水利漁業(yè), 2002, 22(1): 15-16

［7］ 劉新富，雷霽霖，劉忠強(qiáng)，等.真鯛餌料生物褶皺臂尾輪蟲(chóng)和眼點(diǎn)擬微綠球藻的大量培養(yǎng)［J］.海洋科學(xué)，2002，24（5）：47-51

［8］ Lubzens E, Gibson O, Zmora O et al..Potential advantages of frozen algae (Nannochloropsis sp.) for rotifer (Brachionus plicatilis) culture ［J］.Aquaculture, 1995, 133: 295-309

摘要：用微綠球藻新鮮藻液、微綠球藻冷凍濃縮液、微綠球藻干粉+干酵母及干酵母對(duì)刺參浮游階段幼體進(jìn)行了為期15 d的投喂實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明: 以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長(zhǎng)速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢(shì)；單獨(dú)投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需求，但生長(zhǎng)相對(duì)緩慢，成活率及變態(tài)率相對(duì)較低。另外，單獨(dú)投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低。

關(guān)鍵詞：刺參幼體；微綠球藻；日增長(zhǎng)率；成活率；變態(tài)率

刺參（Apostichopus japonicus）屬棘皮動(dòng)物門(mén)（Echinodermata）、海參綱（Holothuroidea）楯手目（Aspidochirota）、刺參科（Stichopodidae）、刺參屬（Stichopus）。在中國(guó)自古被譽(yù)為“海產(chǎn)八珍”之首，具有很高的營(yíng)養(yǎng)保健和藥用價(jià)值［1］。近年來(lái)，隨著人們保健意識(shí)的逐步增強(qiáng)和刺參市場(chǎng)前景的不斷開(kāi)闊，刺參養(yǎng)殖已經(jīng)成為中國(guó)北方尤其是遼寧、山東等地的主要珍貴水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)品種。但是，隨著刺參產(chǎn)業(yè)的不斷壯大，也隨之產(chǎn)生了一系列的問(wèn)題從而在一定程度上制約了刺參產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。刺參養(yǎng)殖分為育苗和養(yǎng)成兩個(gè)階段，刺參育苗過(guò)程中浮游時(shí)期幼體發(fā)育正常與否對(duì)于變態(tài)至稚參的成活率有直接影響，期間投喂充足而適宜的餌料又是浮游幼體正常生長(zhǎng)、發(fā)育、順利變態(tài)的前提。目前研究表明［1-3］，適宜的餌料有鹽藻、湛江叉鞭金藻、牟氏角毛藻、三角褐指藻、小新月菱形藻。采用上述餌料單一或混合投喂均可獲得較好的培育效果，但以2～3種餌料混合投喂效果更佳，餌料混合投喂可使其營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)，滿足幼體的營(yíng)養(yǎng)需求。但是目前所采用的單胞藻都為高溫種類，且不易培養(yǎng)、易污染老化，容易造成育苗期間的餌料短缺，從而導(dǎo)致育苗失敗。

微綠球藻是一種海洋單細(xì)胞微藻，具有繁殖迅速、易培養(yǎng)、營(yíng)養(yǎng)豐富等特點(diǎn)，細(xì)胞球形或橢球形，直徑2～4 μm。該藻含有的PUFA是海水仔魚(yú)、蝦蟹貝等幼體的必需脂肪酸，能夠提高海產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)率和幼體的存活率，加上其細(xì)胞壁極薄，易于消化吸收，在水產(chǎn)養(yǎng)殖及生物活性物質(zhì)提取方面具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值［4］。目前已應(yīng)用于泥蚶、蟹［5］、蝦［6］等育苗及輪蟲(chóng)［7-8］培養(yǎng)中，并取得了良好效果。本文主要以微綠球藻活細(xì)胞、干粉或冷凍濃縮液及干酵母為餌料，通過(guò)對(duì)刺參浮游幼體生長(zhǎng)率、存活率及變態(tài)率的統(tǒng)計(jì)分析，從而對(duì)微綠球藻作為刺參浮游幼體階段的投喂餌料效果做出初步分析。

1材料與方法

1.1刺參幼體及餌料來(lái)源

實(shí)驗(yàn)用刺參幼體來(lái)自于牟平海區(qū)。

所用微綠球藻新鮮藻液、干粉、冷凍濃縮液均由煙臺(tái)海融生物技術(shù)有限公司提供。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

刺參幼體分別放置于0.15 m3的塑料桶中，暗光培育，培育密度為0.5個(gè)/mL，連續(xù)充氣，水溫保持在21 ℃，每天換水2次，每次換水量100%，換水后溫差不超過(guò)±1 ℃。每天換水后投餌，培育用水及投喂餌料均經(jīng)300目篩絹過(guò)濾。每次投餌量為：小耳幼體5 000～10 000個(gè)/mL，中耳幼體10 000～15 000個(gè)/mL，大耳幼體15 000～20 000個(gè)/mL。（干酵母按說(shuō)明濃度換算為細(xì)胞數(shù)投喂）。

實(shí)驗(yàn)設(shè)4個(gè)處理組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)。分別為：A—微綠球藻新鮮藻液；B—微綠球藻冷凍濃縮液；C—微綠球藻干粉50%+酵母粉50%；D—干酵母。

實(shí)驗(yàn)從7月5日開(kāi)始，每天從各桶中隨機(jī)取30個(gè)幼體進(jìn)行測(cè)量，計(jì)算其體長(zhǎng)、密度并觀察其生長(zhǎng)發(fā)育情況。

體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率計(jì)算方法：⊿L（%d-1）=100(㏑L2-㏑L1)/T

L2；表示所測(cè)稚幼參的最終體長(zhǎng)（μm）；L1：表示所測(cè)稚幼參的初始體長(zhǎng)（μm）；T：表示稚幼參的生長(zhǎng)時(shí)間（d）。

大耳幼體成活率計(jì)算方法：大耳幼體成活率=p1/p2×100%

其中：p1為剛開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體時(shí)水中浮游刺參幼體密度；p2為原有刺參幼體密度。

2結(jié)果

2.1各處理組幼體體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率比較

各處理組刺參幼體在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中均表現(xiàn)出了顯著的生長(zhǎng)（圖1）。各處理組經(jīng)8 d的培育，生長(zhǎng)最快的處理組為組C（干酵母+微綠球藻干粉），由430 μm生長(zhǎng)到910 μm，體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率為59.25%。最慢的處理組為組B(冷凍藻濃縮液)，由420 μm生長(zhǎng)到680 μm，體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率為39.50%。

圖1不同餌料條件下刺參幼體體長(zhǎng)日增長(zhǎng)率

2.2各處理組大耳幼體成活率比較

由于各處理組生長(zhǎng)發(fā)育快慢的差異，大耳幼體成活率分別在不同時(shí)間進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)圖2。由圖2可以看出處理組C（酵母+藻粉）效果最好，成活率高達(dá)96.5%，處理組B（冷凍藻）成活率最低，為45.6%。

圖2不同餌料條件下大耳幼體成活率

2.3各處理組變態(tài)率的比較

實(shí)驗(yàn)的四個(gè)不同處理組不僅生長(zhǎng)速率及成活率存在差異，其樽形幼體變態(tài)率也有顯著差異（見(jiàn)圖3），生長(zhǎng)最快的處理組C（酵母+干藻粉）在培養(yǎng)到第7 d就已經(jīng)開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體，2 d后全部變態(tài)；生長(zhǎng)最慢的處理組B（冷凍藻液）不僅在培育到第10 d才開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體，而且12 d后仍有多數(shù)幼體未變態(tài)，停留在大耳幼體期直至死亡。

圖3不同餌料條件下樽形幼體變態(tài)率

2.4各處理組生長(zhǎng)發(fā)育情況比較

實(shí)驗(yàn)從7月5日開(kāi)始投喂餌料，第1 d投喂餌料之后觀察各處理組幼體攝食情況，從圖4可以看出，各處理組幼體發(fā)育情況無(wú)顯著差異，胃型較飽滿，攝食情況良好。第6天觀察各處理組幼體發(fā)育情況（見(jiàn)圖5），從圖中可以看出處理組C大耳幼體胃型飽滿，個(gè)體較大，并開(kāi)始出現(xiàn)樽形幼體。而處理組B中刺參幼體個(gè)體小，且出現(xiàn)胃縮小及爛胃現(xiàn)象，有一部分停留在小耳幼體階段，未出現(xiàn)樽形幼體。處理組A和處理組D發(fā)育情況良好，與處理組C相比，僅在幼體密度及個(gè)體大小上稍有差異?！糉L)〗〖TP<25.tif>,BP〗

圖4投餌第一天，不同處理組幼體生長(zhǎng)發(fā)育情況

圖5投餌第六天，不同處理組幼體生長(zhǎng)發(fā)育情況

3討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以微綠球藻干粉50%+干酵母50%搭配投喂的刺參幼體在生長(zhǎng)速率、大耳幼體成活率及樽形幼體變態(tài)率方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢(shì)；單獨(dú)投喂微綠球藻或干酵母也基本可滿足刺參幼體生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需求，但生長(zhǎng)相對(duì)緩慢，成活率及變態(tài)率相對(duì)較低。另外，單獨(dú)投喂冷凍濃縮藻液的處理組成活率及變態(tài)率都較低，且在培育后期損失過(guò)半，在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)“爛胃”、“胃萎縮”等現(xiàn)象，后期幼體出現(xiàn)“化邊”、“爛邊”等。

由以上結(jié)果可以看出，微綠球藻雖為綠藻，但其細(xì)胞壁薄，且具較好的上浮性，個(gè)體?。?～4 μm），易于攝食，富含多種不飽和脂肪酸等生物活性物質(zhì)，可以作為刺參幼參的餌料之一，較硅藻或金藻等常用餌料，微綠球藻具有易培養(yǎng)、生長(zhǎng)快、抗污染等優(yōu)點(diǎn)，單獨(dú)投喂新鮮藻液基本可以滿足幼體的需求，達(dá)到較好的育苗效果。如果采用微綠球藻干藻粉與干酵母混合投喂，由于酵母可以彌補(bǔ)微藻中氨基酸、消化酶和生長(zhǎng)激素等營(yíng)養(yǎng)缺陷，因此可以更好地滿足幼體的營(yíng)養(yǎng)需求，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證明了這一點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 仇磊，姜國(guó)良.幾種單胞藻餌料對(duì)刺參耳狀幼體爛胃的影響［J］.齊魯漁業(yè)，2006(6):41-42

［2］ 張煜，劉永宏. 國(guó)內(nèi)、外刺參研究的回顧、進(jìn)展極其資源增殖途徑的探討［J］.齊魯漁業(yè)，1984（2）：57-60

［3］ 隋錫林. 海參增養(yǎng)殖［M］. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1990

［4］ 余穎，陳必鏈.微綠球藻的研究進(jìn)展［J］.海洋通報(bào)，2005，6（24）：75-81

［5］ 沈和定，黃旭雄.三種藻類對(duì)中華絨螯蟹Ⅰ期溞狀幼體培育效果的比較［J］.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999,8（3）：202-209

［6］ 成文靖,蔡春芳.微綠球藻在羅氏沼蝦育苗中的應(yīng)用研究［J］.水利漁業(yè), 2002, 22(1): 15-16

［7］ 劉新富，雷霽霖，劉忠強(qiáng)，等.真鯛餌料生物褶皺臂尾輪蟲(chóng)和眼點(diǎn)擬微綠球藻的大量培養(yǎng)［J］.海洋科學(xué)，2002，24（5）：47-51

［8］ Lubzens E, Gibson O, Zmora O et al..Potential advantages of frozen algae (Nannochloropsis sp.) for rotifer (Brachionus plicatilis) culture ［J］.Aquaculture, 1995, 133: 295-309