高雅麗,劉金山,官利蘭,張新明
(1 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源環(huán)境學(xué)院,廣東 廣州 510642; 2 國家林業(yè)局 中南林業(yè)調(diào)查規(guī)劃設(shè)計院,湖南 長沙 410014)
稀鹽溶液-孔雀綠法測定土壤速效磷的條件選擇
高雅麗1?,劉金山1,2?,官利蘭1,張新明1
(1 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源環(huán)境學(xué)院,廣東 廣州 510642; 2 國家林業(yè)局 中南林業(yè)調(diào)查規(guī)劃設(shè)計院,湖南 長沙 410014)
【目的】探討用孔雀綠比色法測定KCl稀鹽溶液浸提磷的適宜條件.【方法】利用標(biāo)準(zhǔn)溶液和不同利用方式的土樣,比較不同浸提和顯色條件對稀鹽溶液-孔雀綠法靈敏度和精密度的影響.【結(jié)果和結(jié)論】浸提適宜條件如下:土水比為1 g土∶20 mL水,震蕩時間為0.5 h,浸提劑(氯化鉀)濃度為0.02 mol·L-1;顯色體系中各溶質(zhì)適宜的最終濃度為:H2SO40.48 mo1·L-1、鉬酸銨0.024 mol·L-1、孔雀綠質(zhì)量濃度為0.06 g·L-1.締合物最大吸收波長為620 nm,ρ(P)在0~0.2 mg·L-1范圍內(nèi)符合比耳定律,線性回歸方程為A=3.894 3C+0.001(R2=0.999**,A為D620 nm,C為磷質(zhì)量濃度),ρ(P)檢出限為0.002 mg·L-1.測定結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度均較高,因此本法適宜于氯化鉀稀鹽溶液浸提液中磷的測定.
土壤; 速效磷; 稀鹽溶液; 孔雀綠比色法
了解土壤中速效磷的供應(yīng)狀況,對于施肥有著直接的指導(dǎo)意義.在土壤速效磷的測定方法中,化學(xué)方法是最普遍的,其中以Bray-I,Mehlich-I和Olsen法以及后來提出的Mehlich-3法最常用[1].在我國土壤養(yǎng)分研究工作中,各地常用0.5 mol·L-1NaHCO3提取中性及石灰性土壤有效磷,用0.25 mo1·L-1的HC1-0.03 mol·L-1的NH4F提取酸性土壤有效磷[2-3].
水或稀鹽溶液(如0.01 mol·L-1CaCl2)提取的磷具有與土壤溶液中的磷大致相當(dāng)?shù)奶攸c(diǎn)[4],而且水或0.01 mol·L-1CaCl2溶液不僅可以提取磷,還可以提取其他元素如氮、鉀、鈉、鎂等.張新明等[5]曾使用0.02 mol·L-1KCl溶液進(jìn)行了磷酸鹽在水稻土中的等溫吸附試驗,并結(jié)合盆栽試驗確立了廣東省玄武巖母質(zhì)發(fā)育水稻土的“磷臨界平衡濃度”.那么能否用KCl稀鹽溶液作為土壤速效磷的通用提取方法值得研究.
溶液中磷的測定,一般都用鉬藍(lán)法.通常由于磷在土壤中具有很強(qiáng)的固定作用,鉬藍(lán)法對水或0.01 mol·L-1CaCl2的土壤提取液并不靈敏.孔雀綠法是一種比較簡便的測定低濃度磷的方法,原理是磷鉬酸鹽在較低pH下與孔雀綠形成綠色的離子締合物,絡(luò)合物的結(jié)構(gòu)為(孔雀綠)3[PO4(Mo3O9)4].比色波長為610或630 nm[6- 8],檢出限為0.002 mg·L-1.它的靈敏度是鉬藍(lán)法的3倍多[9],且測定需樣量小.因此0.01 mol·L-1CaCl2溶液等低提取能力提取劑的土壤提取液的測定適宜用孔雀綠法[7-9].
0.02 mol·L-1KCl溶液也是一種提取能力較弱的提取劑,適用于養(yǎng)分含量較高的土壤或者檢出限較低的分析.本研究采用KCl稀鹽溶液提取、孔雀綠比色法對不同利用方式土樣中的速效磷進(jìn)行測定,并在此基礎(chǔ)上對提取及測定條件進(jìn)行了選擇和優(yōu)化.
1.1 土樣采集
在3種利用方式的地塊上采集18個土樣.采樣深度0~20 cm,隨機(jī)采樣后將土壤混勻,用四分法取l kg左右,風(fēng)干后研磨并分別過2、1 mm篩,裝袋備用.土樣基礎(chǔ)性質(zhì)見表1.有機(jī)質(zhì)用重鉻酸鉀-硫酸消化法,速效鉀用中性醋酸銨-火焰光度法,堿解氮用堿解擴(kuò)散法,速效磷采用Bray I法, pH采用電位測定法.
數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用Excel 2003及DPS 8.01統(tǒng)計軟件[10].
表1 供試土壤肥力指標(biāo)
1.2 主要儀器和試劑
往復(fù)振蕩機(jī)、UV-754分光光度計.
試劑Ⅰ:4.0 mo1·L-1H2SO4、0.20 mo1·L-1鉬酸銨和0.5 g·L-1酒石酸銻鉀溶液.
濃H2SO4217 mL緩慢地倒入600 mL水中,攪拌,冷卻.17.66 g(NH4)6Mo7O24·4H2O和0.500 0 g KSbC4H4O7·1/2H2O溶解于約60 ℃的300 mL水中,冷卻.然后將H2SO4溶液緩緩倒入另一溶液中,稀釋定容至1 L,貯于聚乙烯試劑瓶中.
試劑Ⅱ:7.5 g·L-1聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA,乳化劑)和,1.0 g·L-1孔雀綠溶液.
7.5 g PVA溶解于約800 mL水中, 緩緩加熱并不停地攪拌,直至全部溶解,冷卻.然后將1.000 0 g孔雀綠溶解于此溶液中,稀釋定容至1 L.
1.3 光密度測定方法
稱取過1 mm篩的風(fēng)干土樣2.500 0 g,置于250 mL振蕩瓶或三角瓶中,準(zhǔn)確加入50 mL 0.02 mo1·L-1KCl溶液,加塞,在(25±1) ℃下振蕩0.5 h后, 用無磷干濾紙過濾.
量取濾液8~40 mL置于50 mL容量瓶中,加入2滴20 g·L-1酒石酸銻鉀,然后加入“試劑Ⅰ”6.00 mL,搖勻,放置約10 min后,再加入“試劑Ⅱ”3.00 mL,搖勻后定容,30 min后測定620 nm處光密度(D620 nm).
2.1 分光光度法相關(guān)條件的探索
2.1.1 締合物吸收光譜 設(shè)置1組磷標(biāo)準(zhǔn)系列濃度,以試劑空白作為對照,在不同波長下比色.
從表2可以看出,波長在615~625 nm范圍內(nèi),工作曲線的斜率較大,即相同質(zhì)量濃度磷溶液的孔雀綠-磷鉬雜多酸離子締合物在此波長范圍內(nèi)光密度較大,且相關(guān)系數(shù)在0.999 2~0.999 4之間,差別很小.低于或高于此波長范圍,工作曲線的相關(guān)系數(shù)均降低.因此,615~625 nm范圍內(nèi)的波長均是適宜的.本文選擇620 nm為孔雀綠比色法的波長.
表2 不同波長下工作曲線的參數(shù)Tab.2 Parameters of working curve with different waves
2.1.2 顯色條件的選擇 1)聚乙烯醇(PVA)用量的影響:在50 mL容量瓶中加入0.5 mL 質(zhì)量濃度為7.5 g·L-1的PVA溶液,顯色液微渾濁,而加入3.0~6.0 mL則吸光度恒定,且穩(wěn)定時間長.從圖1可以看出PVA不同用量對光密度無明顯影響,故本試驗選擇加入的量為4.5 mL,其在顯色液中的最終質(zhì)量濃度為0.45 g·L-1.
圖1 PVA不同用量下的工作曲線Fig.1 Working curve with different doses of PVA
2)孔雀綠用量的影響:試驗發(fā)現(xiàn),隨著孔雀綠用量的增加,試劑空白相對于水的光密度均增加;孔雀綠相同用量條件下,締合物的光密度隨磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度增加呈線性變化(圖2).因孔雀綠是有色試劑,故加入的量應(yīng)適宜,且加入過程中應(yīng)保證操作的規(guī)范性,以減少試驗誤差.在50 mL容量瓶中加1 g·L-1孔雀綠溶液3.00 mL,KCl 稀鹽溶液光密度的大小和穩(wěn)定性較理想.
2.1.3 提取劑用量對比色結(jié)果的影響 分別用0.02 mol·L-1的KCl溶液和蒸餾水配制0.25 mg·L-1的磷溶液,然后分別移取40 mL磷溶液到50 mL容量瓶中,按步驟加入試劑,顯色0.5 h后比色.經(jīng)多次試驗表明,對于質(zhì)量濃度為0.2 mg·L-1的磷鉬酸締合物,加入KCl溶液和水二者的光密度的差值多在±0.01之內(nèi),兩者的結(jié)果基本一致.因此在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時可以用蒸餾水代替0.02 mol·L-1的KCl溶液,在保證試驗精確度的前提下簡化試驗步驟.
圖2 孔雀綠不同用量下的工作曲線Fig.2 Working curve with different doses of malachite green
2.1.4 工作曲線 配制標(biāo)準(zhǔn)曲線,發(fā)現(xiàn)ρ(P)在0~0.2 mg/L范圍內(nèi)符合比耳定律,回歸方程為A=3.8943C+0.001,相關(guān)系數(shù)(r)=0.999**(n=6,A為D620 nm,C為磷的質(zhì)量濃度).摩爾吸光系數(shù)為1.21×105L·mol-1·cm-1.
2.2 提取條件的確定
2.2.1 土水比 為了探討較為適宜的土水比,試驗對比了土水比[m(土)/g∶V(水)/mL]分別為1∶20和1∶10 KCl (0.02 mol/L)溶液時的結(jié)果及二者的相關(guān)性.
對比土水比1∶20與1∶10時的結(jié)果(表3)可以發(fā)現(xiàn),在2種條件下提取的速效磷量之間具有極顯著的相關(guān)性,但1∶20時提取的速效磷量明顯高于1∶10,故土水比1∶20為佳.
國內(nèi)外關(guān)于土壤速效養(yǎng)分測定的常規(guī)分析方法中,土水比一般為1∶5或1∶10,個別為1.0∶2.5或1∶20[2].對于大多數(shù)磷提取劑來說,土水比和土壤酸堿性影響土壤磷提取效果,土壤pH高和較大的土水比均有可能降低磷的提取量[11-12].土水比影響CaCl2的提取效果,土水比減小,提取的P和K的數(shù)量增大,但不同土水比的提取數(shù)量間有較好的相關(guān)性[13-14].本試驗用KCl溶液提取也得到了相似的結(jié)果.
表3 不同土水比條件下測定的速效磷含量
1) 土水比指m(土)/g∶V(水)/mL;表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤,n=4.
2.2.2 提取時間 分別在震蕩提取0.5、1.5、6、24、48、72 h后測定提取液的速效磷量,以尋找最佳振蕩時間.探討液相磷與固相磷處于動態(tài)平衡所需的時間時,如果提取時間過短,少于平衡時間則速效磷不能完全被提取,使得結(jié)果小于實(shí)際情況;如果提取時間過長則影響試驗進(jìn)度,使得工作時間延長.
從表4可以看出,0.5 h后從各土壤中提取的速效磷基本上都達(dá)到了平衡,0.5 h后提取的磷量增加不顯著.有少量增加的原因可能是極少量緩效磷的釋放,而這部分增加值可能不屬于土壤速效磷的組成部分.
對不同振蕩時間測得的速效磷含量進(jìn)行回歸分析,可以看出0.5 h的振蕩時間與其他時間均有著很好的相關(guān)性,故選擇振蕩時間為0.5 h.
2.2.3 KCl溶液的濃度 分別用0.01、0.02和0.03 mol·L-1KCl溶液浸提3種土樣,發(fā)現(xiàn)當(dāng)KCl濃度在0.01~0.03 mol·L-1范圍內(nèi)時,從同一土樣中提取的速效磷量基本相等,故選擇濃度為0.02 mol·L-1的KCl溶液.磷的吸附解吸曲線中多選用0.01 mol·L-1CaCl2溶液,根據(jù)離子數(shù)大概等同原則,用0.02 mol·L-1KCl溶液替代0.01 mol·L-1CaCl2溶液,經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)濃度為0.02 mol·L-1的KCl溶液適宜,這與張新明等[5]試驗條件一致.
2.2.4 土壤粒度 任選幾個不同利用方式的土壤樣品,風(fēng)干磨碎,分別過2和1 mm篩,探討不同顆粒大小對提取結(jié)果的影響.表5中,2組數(shù)據(jù)t檢驗的雙尾顯著性概率(P)= 0.091>0.05, 說明2種粒徑下的速效磷值沒有顯著差異,且二者相關(guān)系數(shù)為1.0**(n=6),說明2組數(shù)據(jù)呈極顯著線性相關(guān),故對于土樣速效磷的提取,土樣過2和1 mm篩均可.
表4 不同提取時間下測定的結(jié)果
1) 與0.5 h 平均值的相關(guān)系數(shù),“**”表示在0.01水平極顯著相關(guān).
表5不同粒徑對速效磷的影響
Tab.5Influencesofdifferentparticlesizesonavailablephosphorusanalysis
粒徑/mm不同樣品編號的速效磷/(mg·kg-1)245618P相關(guān)系數(shù)1)22.7218.840.232.435.630.0911.0**12.9318.780.272.535.79
1)“**”表示在0.01水平顯著極相關(guān).
2.3 試驗的精密度和準(zhǔn)確度及相關(guān)性分析
2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)磷溶液的測定 按照孔雀綠比色方法的步驟,吸取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液至25 mL容量瓶中,并按比例加入各種試劑進(jìn)行締合比色,溶液中最終的磷質(zhì)量濃度分別為0.02、0.06和0.10 mg·L-1,測定并計算6次平行測定的誤差大小,結(jié)果見表6.
表6標(biāo)準(zhǔn)磷溶液中磷的測定結(jié)果
Tab.6Measuredresultsofphosphorusinstandardsolution
樣品編號ρ(磷)/(mg·L-1)標(biāo)準(zhǔn)值測定值相對誤差/%10.020.02053.020.060.06081.730.100.10171.8
2.3.2 精密度 分別隨機(jī)選取各種利用方式的土樣各1個(編號分別為3、11和18),然后對每個土樣進(jìn)行7次平行測定,3個土樣的精密度分別為0.733%、6.690%和1.550%.
2.3.3 速效磷測定的準(zhǔn)確度 向50 mL容量瓶分別加入質(zhì)量為1、3和5 μg磷,用去離子水定容,進(jìn)行回收率試驗結(jié)果見表7.由表7可見,加入不同量的標(biāo)準(zhǔn)磷,都得到較好的回收率,且基本無差異,通過對相對標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)的計算可知,磷含量越低,RSD越大,但都在試驗允許的誤差范圍內(nèi),故該測定方法可靠.
表7不同添加量測定的磷回收率
Tab.7Therecoveryratesofdifferentaddingamountsofphosphorus
重復(fù)不同添加量測得磷量/μg磷回收率/%1μg3μg5μg1μg3μg5μg11.013.044.99101.0101.399.821.033.025.11103.0100.7102.231.043.075.04104.0102.3100.841.012.985.09101.099.3101.850.973.035.0897.0101.0101.6平均值1.013.035.06101.2100.9101.2
2.3.4 土壤提取液的磷回收率 吸取一定體積的土壤提取液(水稻土吸取20 mL,其他土吸取5 mL)于50 mL容量瓶中,然后加入3.00 μg磷,對各樣品的磷回收率測定結(jié)果見表8.表8數(shù)據(jù)表明,加入土壤提取液后,磷的回收率在98%~101%之間,符合要求,說明土壤溶液對速效磷的測定無影響,故該方法適合土壤速效磷的測定.
表8 土壤提取液對添加磷的回收率的影響Tab.8 Influences of soil extract on recovery rates of adding amounts phosphorus
2.3.5 與其他常用化學(xué)提取方法的相關(guān)性分析 由表9可見,各種測定方法之間均達(dá)極顯著相關(guān),表明KCl稀鹽溶液提取易溶性磷的量與其他方法提取磷的量極顯著相關(guān),因此可以使用KCl稀鹽溶液提取態(tài)磷表征土壤速效磷狀況,再根據(jù)土壤速效磷含量、土壤和植株之間的相互反應(yīng)制定磷素豐缺指標(biāo),用于指導(dǎo)平衡施肥.
表9幾種提取方法有效磷之間的相關(guān)性1)
Tab.9Correlationshipbetweenavailablephosphorusconcentrationswithdifferentextractionmethods
提取方法OlsenBray-ⅠMehlich-3KCl稀鹽溶液Olsen1Bray-Ⅰ0.9869**1Mehlich-30.9835**0.9950**1KCl稀鹽溶液0.9433**0.9390**0.9210**1
1) “**”表示在0.01水平極顯著相關(guān).
孔雀綠法與傳統(tǒng)的鉬藍(lán)法相比,測定結(jié)果無明顯差異,但靈敏度明顯提高,檢測限降低.研究結(jié)果表明,磷鉬雜多酸-孔雀綠顯色體系的最大吸收波長為620 nm,測定時選擇在615~630 nm之間均可,摩爾吸光系數(shù)為1.21×105L·mol-1·cm-1,ρ(P)在0~0.2 mg/L范圍內(nèi)符合比耳定律,線性回歸方程為A=3.894 3C+0.001(C為溶液中磷質(zhì)量濃度,A為620 nm處締合物的光密度),相關(guān)性良好(r=0.999**).
聚乙烯醇存在的條件下,孔雀綠-磷鉬雜多酸離子締合物最大吸收峰位于635、645及590 nm處,這可能與比色液不同酸度及試劑的生產(chǎn)廠家不同有關(guān),經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)波長在610~630 nm之間光密度差異不顯著,因此波長在此范圍均可.
本試驗所得摩爾吸光系數(shù)比其他報道(8.5×104L·mol-1·cm-1)[15]偏大,可能是孔雀綠用量的差異所致.在實(shí)際測定中由于個人習(xí)慣的差異,所加試劑也會稍有不同,因此需自行配制標(biāo)準(zhǔn)曲線而不能套用上述回歸方程和摩爾吸光系數(shù).
顯色液中各溶質(zhì)的最終濃度為:0.48 mol·L-1H2SO4、0.024 mol·L-1鉬酸銨,0.06 g·L-1酒石酸銻鉀,乳化劑為0.45 g·L-1PVA,孔雀綠為0.06 g·L-1.由于加入試劑較多,在不影響試驗結(jié)果的前提下為了方便操作,可用4.0 mol·L-1H2SO4、0.20 mol·L-1鉬酸銨,0.05 g·L-1酒石酸銻鉀配制試劑 Ⅰ,用7.5 g·L-1PVA和1.0 g·L-1孔雀綠配制試劑Ⅱ.KCl溶液和水溶液比色結(jié)果基本一致.因此在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時可以用蒸餾水代替0.02 mol·L-1KCl溶液,在保證試驗精確度的前提下簡化試驗步驟.
聚乙烯醇用量對顯色反應(yīng)的影響:聚乙烯醇保護(hù)膠存在下,堿性染料孔雀綠與磷鉬酸形成穩(wěn)定的締合物.聚乙烯醇對光密度無顯著影響,但是由于締合物具有疏水性,易凝聚沉淀致使光密度不穩(wěn)定,故加入適量聚乙烯醇從而起到促溶增穩(wěn)作用. 聚乙烯醇可使處于高黏度溶劑中的締合物上苯環(huán)的弛豫過程受阻,從而使溶液顏色不容易褪去[16].
孔雀綠用量對顯色反應(yīng)的影響:在磷鉬二元雜多酸中引入具有強(qiáng)共軛效應(yīng)的堿性染料大分子形成離子締合物,可使經(jīng)典的“鉬黃”或“鉬藍(lán)”光度法靈敏度大為改觀[17].加入孔雀綠后光密度明顯增加,該方法的靈敏度是鉬藍(lán)法的3倍多[8].但是由于孔雀綠本身是有色溶劑,加入孔雀綠過多會導(dǎo)致空白光密度陡增,故加入的量應(yīng)適宜.
提取劑用量對顯色反應(yīng)的影響:一般而言,配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時也應(yīng)加入相應(yīng)的提取劑以與土壤提取液保持一致,消除由于提取劑影響產(chǎn)生的誤差.但經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)KCl溶液和水溶液比色結(jié)果基本一致,因此在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時可以用蒸餾水代替0.02 mol/L的KCl溶液,在保證試驗精確度的前提下簡化試驗步驟.
在土水比1∶20、振蕩時間為0.5 h、 提取劑KCl的濃度為0.02 mol/L的提取條件下,KCl溶液提取土壤速效磷的準(zhǔn)確度和精密度都較高.提取結(jié)果與常規(guī)方法相關(guān)性顯著.本方法相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.0%~2.0%(n=6),磷的回收率在97.0%~104%之間,土壤提取液的磷回收率在97.0%~102.3%之間,磷檢出限為0.002 mg/L.其準(zhǔn)確度和精密度均較高,因此是一種方便易行、準(zhǔn)確可靠的分析方法,適合KCl溶液提取磷的測定,即適合稀鹽溶液或水樣中微量磷的分析[6].且在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時可以用蒸餾水代替0.02 mol/L的KCl溶液.
需要注意的是孔雀綠具有高毒、高殘留、致癌、致畸、致突變等副作用,在人體殘留時間長,對人體的危害是積蓄式的,應(yīng)用時應(yīng)加以防護(hù),即使用該方法需戴上橡膠手套,妥善回收廢液并交有毒廢液回收站處理.
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【責(zé)任編輯周志紅】
Selectionofconditionsfordeterminingsoilavailablephosphorubydilutesaltsolution-malachitegreenmethod
GAO Yali1?, LIU Jinshan1,2?, GUAN Lilan1, ZHANG Xinming1
(1 College of Natural Resources and Environment, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;2 Central South Forest Inventory and Planning Institute of State Forestry Administration; Changsha 410014, China)
【Objective】The method of available phosphorus characterized by phosphorus extracted in KCl dilute-salt solution was studied. 【Method】 By using standard solution and soil samples from different land use patterns, influences of different conditions during extracting and color-developing stages on the precision and accurancy of dilute-salt solution-malachite green method were studied. 【Result and conclusion】 The optimum conditions for extraction were as follows:1 g soil∶20 mL water for soil-water ratio, 0.5 h for oscillation, and 0.02 mol·L-1for concertration of KCl extracting solution; The optimum final concentrations of reagents for the color-developing system were as follows: H2SO40.48 mol·L-1,(NH4)6Mo7O24·4H2O 0.024 mol·L-1, malachite green 0.06 g·L-1. The association complex had a maximum absorption wavelength at 620 nm,and Beer’s law was obeyed in the P range of 0~0.2 mg·L-1with the linear regression equation beingA=3.894 3C+0.001(R2=0.999**)and P detection limit being 0.002 mg·L-1,and the method had high accurancy and precision as well. Thus the method is appropriate to determine phosphorus amount in KCl extracting solution.
soil; available phosphoru; dilute salt solution; malachite green spectrophotometry
2013- 02- 21優(yōu)先出版時間2014- 01- 06
優(yōu)先出版網(wǎng)址:http:∥www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.S.20140106.1550.002.html
高雅麗(1984—),女,碩士, E-mail: gaoyali2008@163.com;劉金山(1986—),男,碩士, E-mail: xiaoshanzi00@126.com;?:對本文貢獻(xiàn)相同;通信作者:張新明(1965—),男,副教授,博士,E-mail:xmzhang@scau.edu.cn
廣東省科技計劃項目(2012A020100004,2010B020310006)
高雅麗,劉金山,官利蘭,等.稀鹽溶液-孔雀綠法測定土壤速效磷的條件選擇[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2014,35(2):40- 46.
S151.9
A
1001- 411X(2014)02- 0040- 07