★ 許潔睿 何燕 沈琳 湯諾

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院 上海 200032)

心律失常是臨床常見病、多發(fā)病，治療心律失常的西藥用藥后可以控制部分心律失常，但是長期或大量服用有一定的毒副作用，且遠(yuǎn)期療效欠佳，不能明顯降低患者的死亡率，尤其是在治療中誘發(fā)新的心律失常或使原有心律失常加重(發(fā)生率約為5%～10%)而引起了醫(yī)藥學(xué)家的特別重視，也使新的抗心律失常藥物的開發(fā)成為迫切問題[1]。

中藥復(fù)方是在中醫(yī)理法方藥理論的指導(dǎo)下形成，有君臣佐使配伍，因人而異，臨床針對性更強(qiáng)，療效更明確。但復(fù)方中藥的有效成分復(fù)雜，其作用機(jī)制的現(xiàn)代化研究難度更大。拆方研究是當(dāng)前研究中藥復(fù)方功效的主要思路和方法，通過拆方研究可尋找中藥抗心律失常的最佳組合和作用靶點(diǎn)，深入觀察各組中藥對心律失常的拮抗作用，以更好的發(fā)揮藥效，具有重要的理論意義和臨床應(yīng)用價值[2]。

本項目旨在通過對復(fù)律寧沖劑按藥性、功效、藥理作用進(jìn)行分組拆方研究，應(yīng)用氯化鋇誘發(fā)大鼠實驗性室性心律失常模型，觀察復(fù)律寧全方及其拆方組對抗心律失常的作用，為臨床應(yīng)用復(fù)律寧沖劑及其各拆方組抗心律失常提供一定的實驗依據(jù)，并從藥效學(xué)方面進(jìn)一步闡明原方的配伍組成原理及可能的作用機(jī)制，為精簡方藥、尋找最佳組方和指導(dǎo)臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)，也為其后開展電生理方面的研究奠定基礎(chǔ)。

1 實驗材料

1.1 實驗動物 Wistar大鼠，60只，雄性，體重200±10g，由上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供，許可證號SCXK(滬)2007-0005，實驗動物質(zhì)量合格證號2007000508172。

1.2 藥物與試劑 鹽水組：0.9%生理鹽水500mL/瓶；陽性對照組：普羅帕酮(心律平)50mg/片；復(fù)律寧組：黨參、麥冬、五味子、菟絲子、枸杞子、丹參、瓜蔞皮、淮小麥、炙甘草、大棗、龍骨、牡蠣、黃芩、苦參、茶樹根；拆方一組(生脈散加味組)：黨參、麥冬、五味子、丹參、瓜蔞皮；拆方二組(甘麥大棗湯加味組)：淮小麥、炙甘草、大棗、龍骨、牡蠣；拆方三組(精簡方組)：丹參、苦參、瓜蔞皮、黃芩、茶樹根(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院藥劑科提供生藥)。

試劑：①氯化鋇分析純(批號：F20100519國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；②水合氯醛分析純(批號：20100111國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

1.3 儀器 MP120-2電子天平：上海精科天平，科技實驗中心提供；Powerlab多導(dǎo)生理記錄儀：美國BIOPAC公司生產(chǎn)，科技實驗中心提供。

1.4 藥物的制備 陽性對照組藥物制備：普羅帕酮溶液按0.16g/kg/d劑量，將4.48g心律平粉碎后溶解到280mL雙蒸水中。復(fù)律寧組、拆方一組、拆方二組、拆方三組藥物制備：均由上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院藥劑科提供生藥，按原方比例，蒸餾水煮沸后再煎30min，重復(fù)3次，合并3次水煎液，過濾，水浴鍋濃縮至100mL，4℃保存?zhèn)溆?。水合氯醛溶液?g分析純配成10%溶液。氯化鋇溶液：1g分析純配成0.4%溶液。

2 實驗方法

適應(yīng)性飼養(yǎng)2～3天后，將60只Wistar大鼠隨機(jī)分成6組。每組10只。各組給藥劑量均為臨床人用量的25倍(按公斤體重折算)。各組每日灌胃1次。連續(xù)給藥7天。末次給藥30min后，用10%水合氯醛(300mg/kg)將大鼠腹腔麻醉，麻醉后仰臥位固定于鼠板上，接體表多導(dǎo)聯(lián)電生理儀，記錄正常Ⅱ?qū)?lián)心電圖。麻醉30分鐘后，從舌下靜脈快速注射0.4%氯化鋇(4mg/kg)，4秒內(nèi)注完。從注射完畢即刻開始，分別記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖，觀察每組大鼠心律失常的出現(xiàn)時間、持續(xù)時間及心律失常類型。

3 統(tǒng)計方法

數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，其中各組均數(shù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差值表示，室顫發(fā)生率用百分率(%)表示。采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)LSD程序(方差齊性)或Dunnett T3法(方差不齊)分析。室顫發(fā)生率用χ2檢驗分析。

4 實驗結(jié)果

4.1 復(fù)律寧及其各拆方組對氯化鋇致大鼠心室顫動的影響 治療一周后，復(fù)律寧組、拆方三組(精簡方組)及陽性對照組均能降低氯化鋇致大鼠室顫的發(fā)生率，與鹽水組比較有顯著性差異(P<0.01)。陽性對照組、復(fù)律寧組、拆方三組對氯化鋇致大鼠室顫具有明顯的保護(hù)作用，可降低室顫發(fā)生率。見表1。

4.2 復(fù)律寧及其各拆方組對氯化鋇致大鼠心律失常的影響 復(fù)律寧組、拆方一組(生脈散加味組)、拆方二組(甘麥大棗湯加味組)、拆方三組(精簡方組)及陽性對照組均能明顯推遲氯化鋇致大鼠心律失常的出現(xiàn)時間，縮短持續(xù)時間，與鹽水組比較有顯著性差異(P<0.01)。陽性對照組與復(fù)律寧組、拆方一組、拆方二組、拆方三組比較，在推遲氯化鋇致大鼠心律失常的出現(xiàn)時間，縮短持續(xù)時間方面的作用優(yōu)于復(fù)律寧組、拆方一組、拆方二組、拆方三組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

表1 各組藥物對氯化鋇致大鼠心室顫動的影響

表2 各組藥物對氯化鋇致大鼠心律失常的影響±s)

復(fù)律寧組與各拆方組比較，在推遲氯化鋇致大鼠心律失常的出現(xiàn)時間，縮短持續(xù)時間方面復(fù)律寧組的作用優(yōu)于拆方一組、拆方二組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；拆方三組的作用優(yōu)于拆方一組、拆方二組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；而復(fù)律寧組與拆方三組的作用非常接近，兩者比較無顯著性差異(P>0.05)。見表3。

表3 復(fù)律寧及其各拆方組對氯化鋇致大鼠心律失常的影響 ±s)

5 討論

復(fù)律寧沖劑由黨參、麥冬、五味子、淮小麥、炙甘草、大棗、丹參、瓜蔞皮、龍骨、牡蠣、黃芩、苦參、茶樹根、菟絲子、枸杞子等十五味中藥組成。本方選用經(jīng)典處方生脈散和甘麥大棗湯為主加減化裁而成，針對心悸“本虛標(biāo)實”這一基本的病機(jī)而設(shè)，它在益氣養(yǎng)血、清心安神固本的同時，兼顧清熱、解郁、理氣，扶正祛邪，從而恢復(fù)心悸患者“陰平陽秘”的正常生理狀態(tài)。用于治療各種功能性和器質(zhì)性的心律失常，長期服用未見任何毒副作用。經(jīng)以往的臨床和實驗研究，證實其對氣陰兩虛型心律失常有較好的臨床療效[3]，對烏頭堿、氯化鈣致大鼠實驗性心律失常有保護(hù)作用。

復(fù)律寧沖劑從理、法、方、藥等方面體現(xiàn)了中醫(yī)治療心悸的特色，主張氣血并補(bǔ)，燮理陰陽、標(biāo)本兼治，整體調(diào)節(jié)，發(fā)揮多靶點(diǎn)治療心律失常的作用，其在抗心律失常的同時，克服了西藥、中藥單體、單味藥的治標(biāo)不治本的局限性；解決了心悸患者除心律失常外的其他癥狀，如乏力、氣短、失眠等；避免了抗心律失常西藥容易發(fā)生毒副反應(yīng)等缺點(diǎn)，緩解臨床癥狀，提高患者的生活質(zhì)量。

本研究以復(fù)律寧組方藥物的藥性、功效為依據(jù)，以益氣養(yǎng)血、清心安神為切入點(diǎn)，將其主要藥物分為兩組：一組為生脈散加味組(拆方一組)，由黨參、麥冬、五味子、丹參、瓜蔞皮五藥組成。此組方針對心悸本虛標(biāo)實病機(jī)，以益氣養(yǎng)血為主，其中黨參、麥冬、五味子三藥，一補(bǔ)一清一斂，具有益氣養(yǎng)陰之效，加入君藥丹參養(yǎng)血活血、佐藥瓜蔞皮理氣，使益氣養(yǎng)血的同時，不致氣血呆滯，五藥合用，共奏益氣養(yǎng)血之效。另一組為甘麥大棗湯加味組(拆方二組)，由淮小麥、炙甘草、大棗、龍骨、牡蠣組成。此組方針對心悸心神失調(diào)病機(jī)，取寧心安神之意，且淮小麥、炙甘草、大棗、龍骨、牡蠣經(jīng)藥理研究具有鎮(zhèn)靜、抗驚厥作用。兩組藥物根據(jù)中醫(yī)傳統(tǒng)理論均有治療心悸作用，但藥性、功效又各有側(cè)重，可進(jìn)一步比較對大鼠實驗性心律失常方面的保護(hù)作用。復(fù)律寧組方中丹參、苦參、瓜蔞皮、黃芩四藥經(jīng)現(xiàn)代藥理研究證實，對心肌細(xì)胞膜的離子通道具有影響作用，故具有抗心律失常作用。且復(fù)律寧組方中的黃芩、苦參、茶樹根三藥合用，一君一臣一佐，清心安神，化濕解毒，使心火降、痰飲化，有清心祛邪的功效，加入君藥丹參養(yǎng)血活血、佐藥瓜蔞皮理氣，五藥合用，具有理氣清心活血之效，故選取丹參、苦參、茶樹根、瓜蔞皮、黃芩組成精簡方組(拆方三組)。

現(xiàn)代藥理研究證實，復(fù)律寧組成藥物中的黨參[4]、麥冬[5]、丹參[6]、瓜蔞皮[7]、黃芩[8]等多味藥物具有抗氧化、抗自由基、改善心肌供血供氧的作用，故復(fù)律寧及其各拆方組抗心律失常的作用機(jī)理也包括改善心肌缺血缺氧，打破氧自由基介導(dǎo)的細(xì)胞損傷的惡性循環(huán)，抑制脂質(zhì)過氧化物質(zhì)形成，抑制大量Ca2+內(nèi)流，因而抑制了氧自由基介導(dǎo)的細(xì)胞損傷作用，保護(hù)了心肌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能的完整性，減少膜的通透性改變、從而使藥物造成的心律失常得以緩解。

本實驗證實，復(fù)律寧沖劑及其各拆方組可不同程度地延緩氯化鋇致大鼠心律失常的出現(xiàn)時間，縮短心律失常的持續(xù)時間，有抗實驗性心律失常的作用。各拆方組對氯化鋇致大鼠心律失常有較好的保護(hù)作用，其中拆方三組(精簡方組)對心律失常的保護(hù)作用與復(fù)律寧組無顯著差異，其藥效作用與全方最為接近。

結(jié)合前期研究結(jié)果，可推斷復(fù)律寧沖劑及其各拆方組對抗心律失常的作用機(jī)制可能是多方面的，既影響心肌細(xì)胞膜對Na+、Ca2+和K+的轉(zhuǎn)運(yùn)，即時抑制內(nèi)向電流，加速外向電流，改變了心肌細(xì)胞異常的電活動；又因復(fù)律寧組成藥物中多味單藥具有抗氧化、改善心肌缺血缺氧作用，可抑制氧自由基介導(dǎo)的細(xì)胞損傷作用，保護(hù)了心肌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能的完整性，故也可能通過減少膜的通透性改變，從而使藥物造成的心律失常得以緩解。

但是，由于心律失常類型較多，且產(chǎn)生的機(jī)制也相當(dāng)復(fù)雜，故復(fù)律寧沖劑及其各拆方組抗心律失常作用機(jī)制的原理還有待進(jìn)一步研究探討。

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