黃艷軍, 鄭 幗, 陳 靜

(南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京兒童醫(yī)院 神經(jīng)科, 江蘇 南京, 210008)

兒童癲癇是患兒大腦神經(jīng)元突發(fā)異常放電所導(dǎo)致的短暫性神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙，其具體發(fā)病機(jī)制尚不明確，目前認(rèn)為其發(fā)生發(fā)展與神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能失常密切相關(guān)，而細(xì)胞因子是神經(jīng)免疫內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)的重要載體。研究[1-2]表明，癲癇患兒腦組織中的癲癇病灶存在明顯的膠質(zhì)細(xì)胞增殖，提示炎性反應(yīng)可能是其發(fā)病過程的重要環(huán)節(jié)。本研究觀察了白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)等炎性細(xì)胞因子及C反應(yīng)蛋白(CRP)在癲癇患兒外周血中的表達(dá)，并探討其臨床意義，現(xiàn)報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2013年5月—2014年5月在南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京兒童醫(yī)院門診治療的癲癇患兒36例設(shè)為癲癇組，所有患兒均有癲癇發(fā)作現(xiàn)象，并經(jīng)腦電圖、頭顱CT或MRI檢查確診，排除癲癇持續(xù)狀態(tài)患兒，其中男17例，女19例；年齡1～12歲，平均(5.36±2.17)歲；病程5～42個月，平均(29.73±4.26)個月；原發(fā)性癲癇24例，繼發(fā)性癲癇12例。另選取同期健康體檢兒童30例設(shè)為對照組，其中男16例，女14例；年齡1～11歲，平均(5.44±2.38)歲。2組兒童性別、年齡等一般資料無顯著差異(P>0.05), 具有可比性。

1.2 方法

2組兒童均于清晨空腹抽取靜脈血3 mL, 以2 000 r/min的速度離心10 min后，取上清液置于-20 ℃冰箱保存待測。以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)檢測IL-2、IL-6、TNF-α水平，以免疫比濁法檢測CRP水平，試劑盒均購自上海信裕生物科技有限公司。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察2組兒童血清IL-2、IL-6、TNF-α及CRP水平的差異，并分析癲癇患兒上述指標(biāo)與臨床特征的關(guān)系及指標(biāo)間的相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.1 2組兒童血清IL-2、IL-6、TNF-α及CRP水平比較

經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，癲癇組患兒血清IL-2、IL-6、TNF-α及CRP水平均顯著高于對照組(P<0.01), 見表1。

表1 2組兒童血清IL-2、IL-6、TNF-α及CRP水平比較

與對照組比較，**P<0.01。

2.2 癲癇患兒各指標(biāo)與臨床特征的關(guān)系

經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，血清IL-2、IL-6、TNF-α及CRP水平在不同性別、年齡及癲癇類型患兒之間均無顯著差異(P>0.05)，而已用抗癲癇藥物治療的患兒其表達(dá)水平則較未用藥患兒顯著降低(P<0.01)，見表2。

表2 癲癇患兒各指標(biāo)與臨床特征的關(guān)系

與未用比較，**P<0.01。

2.3 癲癇患兒各指標(biāo)相關(guān)性分析

經(jīng)pearson相關(guān)性分析，癲癇患兒的IL-2、IL-6均與TNF-α呈顯著正相關(guān)(r=0.440, 0.681,P<0.01), 與CRP無顯著相關(guān)性。

3 討 論

癲癇是兒科常見病，患兒大腦海馬神經(jīng)元異常放電活動是癲癇發(fā)作的關(guān)鍵因素，而神經(jīng)和免疫系統(tǒng)之間的相互作用則在其發(fā)病過程中發(fā)揮了重要作用。機(jī)體神經(jīng)系統(tǒng)可產(chǎn)生多種神經(jīng)調(diào)節(jié)介質(zhì)實(shí)現(xiàn)對免疫功能的調(diào)節(jié)，免疫系統(tǒng)可分泌免疫各種活性物質(zhì)調(diào)節(jié)神經(jīng)功能，如IL-2、IL-6、TNF-α等細(xì)胞因子可通過血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)與其受體結(jié)合，影響腦內(nèi)的多種活動，最終對神經(jīng)細(xì)胞的電活動，導(dǎo)致癲癇的發(fā)生[3-4]。

IL-2是由輔助性T細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，在機(jī)體免疫應(yīng)答和調(diào)節(jié)中起重要作用，并可通過升高神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮興奮性調(diào)節(jié)作用，可誘導(dǎo)驚厥發(fā)生[5]。劉智勝等[6]研究表明，嬰幼兒癲癇患者血清IL-2、TNF-α及干擾素-α表達(dá)水平均顯著升高，提示患兒體內(nèi)免疫功能處于活化狀態(tài)。IL-6是由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的具有廣泛生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子，同樣可參與神經(jīng)系統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)過程。研究[7]表明，全面強(qiáng)直性陣攣發(fā)作患者外周血IL-6表達(dá)水平較部分性發(fā)作患者及正常人群高。實(shí)驗(yàn)研究[8]表明，IL-6基因過量表達(dá)可引發(fā)小鼠海馬區(qū)腦電圖癲癇樣改變。尹清等[9]研究表明，顳葉癲癇患者腦組織中IL-6及其受體mRNA的表達(dá)均顯著高于同期行手術(shù)治療的外傷患者及腦出血患者，提示局部高濃度IL-6可能通過經(jīng)典信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制作用于致癇灶細(xì)胞，參與癲癇發(fā)病過程。TNF-α由淋巴細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的TNF-α主要由膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，慢性癲癇患者腦內(nèi)的星形膠質(zhì)細(xì)胞通常呈現(xiàn)出反復(fù)增生和激活狀態(tài)，且患者腦脊液中TNF-α含量顯著增高，提示其可能是內(nèi)源性致癇物[10-11]。TNF-α對腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響有以下幾個方面: ① 可增強(qiáng)興奮性神經(jīng)介質(zhì)谷氨酸的興奮毒作用; ② 通過影響干擾素-γ誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞從而增強(qiáng)人類白細(xì)胞Ⅱ類抗原表達(dá)，并增強(qiáng)抗原抗體反應(yīng)，對機(jī)體產(chǎn)生免疫性腦損害; ③ 誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞核B淋巴細(xì)胞活化，介導(dǎo)局部炎癥反應(yīng)，并增強(qiáng)白細(xì)胞介素-1等對腦組織內(nèi)皮細(xì)胞的損害，破壞血腦屏障。CRP是一種急性時相反應(yīng)蛋白，正常情況下在外周血中表達(dá)水平極低，袁莉等[12]研究表明，癲癇患兒血清CRP水平顯著高于正常兒童。徐建洋等[13]研究表明，在癲癇發(fā)作第1、3天，患者血清CRP水平均顯著高于假性發(fā)作者和正常人群，提示血清CRP檢測對于評估癲癇病情具有一定意義。

本研究結(jié)果表明，癲癇組患兒血清IL-2、IL-6、TNF-α及CRP水平均顯著高于對照組(P<0.01), 且其表達(dá)水平在抗癲癇藥物作用下可能有所降低，這與彭建霞等[14]研究結(jié)果一致，提示神經(jīng)免疫功能失衡及炎癥反應(yīng)可能是癲癇發(fā)病的重要環(huán)節(jié)，且抗癲癇治療可能有助于糾正其紊亂狀態(tài)；此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，癲癇患兒的IL-2、IL-6均與TNF-α呈顯著正相關(guān)，分析其機(jī)制可能是細(xì)胞因子之間存在復(fù)雜的相互調(diào)節(jié)作用，在癲癇發(fā)病過程中可能產(chǎn)生協(xié)同作用。

[1] Jansen L A, Hevner R F, Roden W H, et al. Glial localization of antiquitin: implications for pyridoxine-dependent epilepsy[J]. Ann Neurol, 2014, 75(1): 22.

[2] Aronica E, Crino P B. Inflammation in epilepsy: clinical observations[J]. Epilepsia, 2011, 52(s3): 26.

[3] Li G, Bauer S, Nowak M, et al. Cytokines and epilepsy[J]. Seizure, 2011, 20(3): 249.

[4] Ye F, Chen X Q, Bao G S, et al. Effect of topiramate on interleukin 6 expression in the hippocampus of amygdala kindled epileptic rats[J]. Experimental and therapeutic medicine, 2014, 7(1): 223.

[5] Takezaki T, Gao C M, Wu J Z, et al. Dietary Protective and Risk Factors for Esophageal and Stomach Cancers in a Low-epidemic Area for Stomach Cancer in Jiangsu Province, China: Comparison with Those in a High-epidemic Area[J]. Cancer Science, 2001, 92(11): 1157.

[6] 劉智勝, 楊立志, 王芳琳, 等. 癲癇患兒的血清細(xì)胞因子水平變化及其意義[J]. 中國神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志, 2002, 9(3): 132.

[7] Alapirtti T, Waris M, Fallah M, et al. C-reactive protein and seizures in focal epilepsy: A video-electroencephalographic study[J]. Epilepsia, 2012, 53(5): 790.

[8] Nelson TE, Olde Engberink A, Hernandez R, et al. Altered synaptic transmission in the hippocampus of transgenic mice with enhanced central nervous systems expression of interleukin-6[J]. Brain, behavior, and immunity, 2012, 26(6): 959.

[9] 尹清, 樹海峰, 劉宏亮, 等. 難治性顳葉癲癇腦組織IL-6、IL-6受體及Sil-6R、sgp130的表達(dá)及意義[J]. 中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 11(6): 605.

[10] Prasad R, Kapoor R, Srivastava R, et al. Cerebrospinal Fluid TNF-α, IL-6, and IL-8 in Children With Bacterial Meningitis[J]. Pediatric neurology, 2014, 50(1): 60.

[11] Chou I, Lin W D, Wang C H, et al. Interleukin (IL)-1β, IL-1 receptor antagonist, IL-6, IL-8, IL-10, and tumor necrosis factor α gene polymorphisms in patients with febrile seizures[J]. Journal of clinical laboratory analysis, 2010, 24(3): 154.

[12] 袁莉, 陳麗麗, 闞鳳杰, 等. 癲癇兒童外周血炎性細(xì)胞因子和C反應(yīng)蛋白水平的臨床觀察[J]. 中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué), 2013, 17(9): 1668.

[13] 徐建洋, 陳剛, 肖成華, 等. 癲癇患者與假性發(fā)作患者血清S100B蛋白、超敏C反應(yīng)蛋白和神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平的改變及其意義[J]. 臨床神經(jīng)病學(xué)雜志, 2012, 25(2): 101.

[14] 彭建霞, 龐保東, 徐應(yīng)軍, 等. 原發(fā)性癲癇患兒治療前后血清細(xì)胞因子水平的變化及意義[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志, 2007, 23(8): 1157.