田 蜜 ， 鐘寶珠， 郭 霞

1海南省林業(yè)科學(xué)研究所，海南 ?？?571100; 2中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所，海南 文昌 571339

紅脈穗螟TirathabarufivenaWalker是檳榔上的重要害蟲(chóng)(樊瑛等，1991)，該蟲(chóng)主要以檳榔的佛焰苞(花苞)為食，在花苞未充分展開(kāi)時(shí)即已開(kāi)始取食危害，使花絮受損，嚴(yán)重影響檳榔果實(shí)產(chǎn)量(黃山春等，2008;呂朝軍等，2013a、2013b)。據(jù)調(diào)查，在一個(gè)花苞中有時(shí)會(huì)有多達(dá)200余頭紅脈穗螟各齡幼蟲(chóng)同時(shí)取食。目前對(duì)紅脈穗螟的防治仍以常規(guī)的化學(xué)防治為主，但由于檳榔在南方是一種重要的咀嚼食品和中藥材，長(zhǎng)期化學(xué)藥劑處理必然會(huì)造成藥劑殘留，并對(duì)人體造成傷害。

植物源殺蟲(chóng)劑由于其易分解、對(duì)環(huán)境危害較小等特點(diǎn)，在生產(chǎn)上已經(jīng)受到重視，印楝素與昆蟲(chóng)體內(nèi)的類(lèi)固醇和甾類(lèi)化合物等激素類(lèi)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)非常相似，所以它們既能夠進(jìn)入害蟲(chóng)體內(nèi)干擾害蟲(chóng)的整個(gè)生命過(guò)程從而殺死害蟲(chóng)，又不易引起害蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性，具有很強(qiáng)的殺蟲(chóng)、拒食、抑制生長(zhǎng)發(fā)育、胃毒和忌避等作用，能抑制呼吸、抑制昆蟲(chóng)激素分泌和降低昆蟲(chóng)生育能力等(嵇保中和孫云霄，2002；Schmutterer, 1990)，但目前還鮮見(jiàn)其用于紅脈穗螟防治的報(bào)道。本研究的前期試驗(yàn)已表明，印楝素、魚(yú)藤酮、煙堿和除蟲(chóng)菊素等在一定濃度下對(duì)紅脈穗螟具有較高胃毒和觸殺毒力(呂朝軍等，2013c)，但在較低濃度下，這些植物源殺蟲(chóng)劑是否會(huì)通過(guò)其他方式(如調(diào)節(jié)紅脈穗螟的發(fā)育進(jìn)度、降低后代產(chǎn)卵量和孵化率等)以達(dá)到控制紅脈穗螟的目的，還需進(jìn)一步研究。因此本文以印楝素為供試藥劑，進(jìn)一步研究了不同劑量印楝素處理后，對(duì)紅脈穗螟的發(fā)育歷期影響，以期為植物源殺蟲(chóng)劑在紅脈穗螟防治上的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

紅脈穗螟幼蟲(chóng)，采于海南省文昌椰子研究所試驗(yàn)基地檳榔種植資源圃，選取大小一致、健康活潑3齡幼蟲(chóng)，室內(nèi)用檳榔心葉飼養(yǎng)3代后，取剛羽化成蟲(chóng)供試。

10%印楝素EC，廣州翔博生物科技有限公司提供。預(yù)先以葉片浸漬法測(cè)定印楝素對(duì)紅脈穗螟3齡幼蟲(chóng)的胃毒毒力，計(jì)算LC25、LC50和LC90后，以丙酮稀釋成系列濃度后供試。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 不同劑量印楝素對(duì)紅脈穗螟幼蟲(chóng)及蛹?xì)v期的影響 由于紅脈穗螟以幼蟲(chóng)為危害蟲(chóng)態(tài)，鉆蛀取食檳榔花絮及幼嫩心葉，因此本試驗(yàn)以印楝素對(duì)紅脈穗螟3齡幼蟲(chóng)的LC25(21.22 mg·L-1)、LC50(57.75 mg·L-1)和LC90(386.96 mg·L-1)的胃毒致死濃度為供試濃度，研究不同亞致死濃度對(duì)紅脈穗螟發(fā)育歷期的影響。

取剛羽化的紅脈穗螟成蟲(chóng)12頭，按雌雄比例2∶1置于20 cm×15 cm×30 cm的養(yǎng)蟲(chóng)盒中，盒壁及底部均放置檳榔心葉供雌蟲(chóng)產(chǎn)卵，3 d后移走成蟲(chóng)。待卵孵化后轉(zhuǎn)移至放置新鮮檳榔心葉的新養(yǎng)蟲(chóng)盒中，3 d后初孵幼蟲(chóng)生長(zhǎng)至2齡后更換檳榔心葉，心葉預(yù)先在不同致死劑量的印楝素中浸漬10 s，飼養(yǎng)至羽化，對(duì)照組(CK)檳榔心葉浸漬丙酮，觀察各處理幼蟲(chóng)的轉(zhuǎn)齡時(shí)間、發(fā)育歷期、后期羽化成蟲(chóng)壽命和產(chǎn)卵量。LC25和LC50劑量處理組和CK均選用20頭幼蟲(chóng)，為避免高劑量造成的幼蟲(chóng)死亡，LC90處理組選用30頭幼蟲(chóng)供測(cè)。每處理重復(fù)4次。

1.2.2 不同劑量印楝素對(duì)紅脈穗螟成蟲(chóng)壽命的影響 取試驗(yàn)方法1.2.1處理后所得羽化成蟲(chóng)，統(tǒng)計(jì)不同處理中羽化后成蟲(chóng)的壽命。各處理雌、雄成蟲(chóng)均分別統(tǒng)計(jì)20頭，重復(fù)3次。記錄單個(gè)成蟲(chóng)的自羽化至死亡的壽命并取平均值。

1.2.3 不同劑量印楝素對(duì)紅脈穗螟成蟲(chóng)產(chǎn)卵量及孵化率的影響 取試驗(yàn)方法1.2.2所得剛羽化的紅脈穗螟成蟲(chóng)12只，以雌雄比例2∶1置于20 cm×15 cm×30 cm的養(yǎng)蟲(chóng)盒中任其交配產(chǎn)卵，盒壁及底部均放置檳榔心葉并添加15%蜂蜜水棉球作為補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，待雌成蟲(chóng)死亡后，統(tǒng)計(jì)產(chǎn)卵量并計(jì)算單雌產(chǎn)卵量。繼續(xù)觀察卵孵化情況，統(tǒng)計(jì)各處理卵孵化率。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析方法

數(shù)據(jù)均采用各重復(fù)的平均值進(jìn)行分析，以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤(M±SE)表示，采用SAS V8.0數(shù)據(jù)分析軟件對(duì)處理數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，采用鄧肯氏新復(fù)極差檢驗(yàn)法(Duncan′s Multiple Ranger Test， DMRT)進(jìn)行差異顯著性比較，顯著水平設(shè)定為P=0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同劑量印楝素對(duì)紅脈穗螟幼蟲(chóng)及蛹?xì)v期的影響

印楝素不同處理水平對(duì)紅脈穗螟發(fā)育歷期影響結(jié)果如圖1～3。研究結(jié)果表明，經(jīng)印楝素處理后，紅脈穗螟幼蟲(chóng)的發(fā)育歷期延長(zhǎng)，且延長(zhǎng)程度與處理濃度的增加呈正相關(guān)，其中LC90處理組中，幼蟲(chóng)的總發(fā)育歷期達(dá)到了16.25 d，而對(duì)照為14.27 d。經(jīng)藥劑處理后，蛹期也延長(zhǎng)，且蛹期長(zhǎng)度與對(duì)照相比達(dá)到了顯著水平。

2.2 不同劑量印楝素對(duì)紅脈穗螟成蟲(chóng)壽命的影響

印楝素不同亞致死劑量飼喂紅脈穗螟幼蟲(chóng)，對(duì)羽化成蟲(chóng)壽命影響如表1。研究結(jié)果表明，各劑量印楝素處理組對(duì)雌成蟲(chóng)的壽命影響與對(duì)照相比均達(dá)到顯著差異水平，雌蟲(chóng)壽命顯著降低。對(duì)雄成蟲(chóng)壽命影響結(jié)果顯示，LC25劑量處理組成蟲(chóng)壽命與對(duì)照項(xiàng)目無(wú)顯著差異，而LC50和LC90處理組成蟲(chóng)壽命均顯著小于對(duì)照組。

2.3 不同劑量印楝素對(duì)紅脈穗螟成蟲(chóng)產(chǎn)卵量及孵化率的影響

結(jié)果表明，經(jīng)印楝素各亞致死劑量處理后，紅脈穗螟成蟲(chóng)產(chǎn)卵量及卵孵化率與對(duì)照組相比均達(dá)到了顯著差異水平(表2)，其中經(jīng)LC25、LC50和LC90劑量處理后，成蟲(chóng)產(chǎn)卵量分別降低了14.30%、20.38%和19.43%，卵孵化率分別降低了24.24%、26.89%和31.60%。

圖1 印楝素亞致死濃度對(duì)紅脈穗螟各齡幼蟲(chóng)歷期的影響Fig.1 Effects of azadirachtin on different instar larval stages of T.rufivena at sublethal does

圖2 印楝素對(duì)紅脈穗螟幼蟲(chóng)歷期的影響圖3 印楝素對(duì)紅脈穗螟蛹?xì)v期的影響

處理Treatment濃度 Concentration(mg·L-1)成蟲(chóng)壽命 Adult longevity (d)雌 Female雄 Male對(duì)照 Con-trol-11.25±0.33a9.60±0.25a印楝素21.228.65±0.30b9.09±0.25aAzadirachtin57.759.00±0.24b8.55±0.25b386.968.30±0.25b8.36±0.31b

同列數(shù)字后字母相同，表示該列數(shù)據(jù)經(jīng)DMRT檢驗(yàn)在5%水平無(wú)差異。The data in the same column followed by same letters indicate no significant difference at the 0.05 level by Duncan′s multiple range test.

表2 不同劑量印楝素對(duì)紅脈穗螟成蟲(chóng)產(chǎn)卵量及孵化率的影響Table 2 Egg production and hatchability of T. rufivena exposed to different doses of azadirachtin

同列數(shù)字后字母相同，表示該列數(shù)據(jù)經(jīng)DMRT檢驗(yàn)在5%水平無(wú)差異。The data in the same column followed by same letters indicate no significant difference at the 0.05 level by Duncan′s multiple range test.

3 討論

印楝素在控制衛(wèi)生害蟲(chóng)、倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)、蔬菜害蟲(chóng)及果樹(shù)害蟲(chóng)等方面已得到了廣泛應(yīng)用(周祥和程立生，2001)。其進(jìn)入昆蟲(chóng)體內(nèi)后，對(duì)蟲(chóng)體自身的激素平衡調(diào)節(jié)起到破壞作用，造成腦和其他腺體功能紊亂，從而干擾昆蟲(chóng)的行為和發(fā)育機(jī)理，導(dǎo)致配后發(fā)育不正常，以致生殖能力降低或喪失，最終是對(duì)昆蟲(chóng)種群的繁衍起到阻礙作用(李曉東等，1995；張業(yè)光等，1992)。

印楝素通過(guò)調(diào)節(jié)蟲(chóng)體的發(fā)育而影響害蟲(chóng)的發(fā)育的研究已經(jīng)開(kāi)展，如文吉輝等(2008)研究表明印楝素亞致死濃度對(duì)煙粉虱實(shí)驗(yàn)種群發(fā)育、存活和繁殖均具有顯著的抑制作用。其中印楝素處理1日齡和5日齡卵分別使幼期(卵至成蟲(chóng)羽化)發(fā)育歷期延長(zhǎng)0.92～2.84 d，幼期存活率降低了56.3%～89.6%，若蟲(chóng)蟲(chóng)體長(zhǎng)寬減小，雌成蟲(chóng)壽命降低29.8%～48.6%，平均單雌產(chǎn)卵量降低49.8%～72.5%。本研究結(jié)果亦表明，通過(guò)不同致死劑量印楝素處理紅脈穗螟幼蟲(chóng)后，紅脈穗螟的幼蟲(chóng)和蛹發(fā)育歷期延長(zhǎng)，這可能是蟲(chóng)體為了減少藥劑對(duì)自身的傷害，而通過(guò)延長(zhǎng)發(fā)育歷期來(lái)增加對(duì)藥劑的代謝時(shí)間，亦或是低劑量的印楝素影響了紅脈穗螟體內(nèi)的蛻皮激素、保幼激素等的代謝水平，從而引起害蟲(chóng)發(fā)育過(guò)程中的一些變化。

另外，研究證明印楝素對(duì)害蟲(chóng)的胚后發(fā)育具有干擾作用(Schmutterer，1990)。本研究發(fā)現(xiàn)紅脈穗螟在幼蟲(chóng)期經(jīng)印楝素處理后，成蟲(chóng)壽命變短，甚至影響到了后期成蟲(chóng)的產(chǎn)卵量和卵孵化率，其原因可能是因?yàn)槔ハx(chóng)吸收有毒物質(zhì)后，身體的一部分能量要用于解毒，造成成蟲(chóng)體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)不足，同時(shí)在幼蟲(chóng)期持續(xù)飼喂經(jīng)印楝素處理的食物，導(dǎo)致蟲(chóng)體內(nèi)部器官受到損害、激素代謝紊亂，甚至對(duì)生殖細(xì)胞等造成了損傷引起了生殖細(xì)胞的凋亡，最終導(dǎo)致其壽命、產(chǎn)卵力等的變化(陶士強(qiáng)和吳福安，2006)，其中印楝素對(duì)昆蟲(chóng)生殖細(xì)胞凋亡的影響已經(jīng)被證實(shí)(鐘國(guó)華等，2008；Huangetal., 2011；Schmutterer，1987)。綜合本研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為，印楝素可通過(guò)干擾紅脈穗螟蟲(chóng)體的生長(zhǎng)發(fā)育和后代產(chǎn)卵力來(lái)達(dá)到對(duì)害蟲(chóng)種群的防控效果。

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