国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

?

重金屬汞和鎘對普通小球藻生長的影響

2014-08-06 05:39:38劉劍鋒
關(guān)鍵詞:小球藻葉綠素重金屬

耿 紅,劉劍鋒,王 諾

(中南民族大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,武漢 430074)

隨著重工業(yè)的飛速發(fā)展,我國不少水域被重金屬污染.重金屬污染不僅嚴(yán)重影響淡水生態(tài)系統(tǒng),且易由食物鏈產(chǎn)生生物積累和放大效應(yīng).重金屬經(jīng)各種途徑進(jìn)入水體后,藻類生物是首要受害者.藻類是水生生態(tài)系統(tǒng)的重要成分之一,它對水生生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生重要影響.對重金屬對藻類的致毒效應(yīng),國內(nèi)外已有相關(guān)研究報(bào)道,但存在爭議,且有關(guān)重金屬對藻類的代謝研究較少[1-3].

本文選取普通小球藻(Chlorellavulgaris)為實(shí)驗(yàn)藻種,研究了水體污染中常見的重金屬汞和鎘對該藻種生長及其相關(guān)生理生化特性如葉綠素和蛋白質(zhì)含量等的影響,初步探討了汞和鎘對普通小球藻影響的生理機(jī)制,以為水體重金屬污染監(jiān)測和治理提供一定的理論參考.

1 材料和方法

1.1 藻種和培養(yǎng)條件

普通小球藻(C.vulgaris)購自中國科學(xué)院水生生物研究所淡水藻種庫,使用HB-4培養(yǎng)基置于(25±1)℃ 的GZX - 250 BS - III 型光照培養(yǎng)箱內(nèi)持續(xù)充氣培養(yǎng)備用,光照強(qiáng)度為100 μE/(m2·s),光周期為12 L︰12 D.

1.2 生長曲線的測定

由分析純HgCl2和CdCl2·2H2O配制0, 0.05,0.1,0.5,1.0,2.0 mg/L不同濃度的Hg2+和Cd2+,將0 mg/L作為對照組.實(shí)驗(yàn)前先配制100×母液,抽濾后置于4℃冰箱中備用,用前加入,每個(gè)濃度設(shè)立3個(gè)平行.

實(shí)驗(yàn)時(shí)先將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的藻液接種至80 mL培養(yǎng)基中,起始A680約為0.05.培養(yǎng)24 h后,取少量藻液,在顯微鏡下通過血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行藻細(xì)胞密度計(jì)數(shù),并在波長680 nm下測定藻吸光度A680,建立不同藻細(xì)胞密度與吸光度間的線性關(guān)系.之后每隔24 h,取各濃度少量藻液測定其吸光度A680. 用乙醇抽提葉綠素[4],計(jì)算葉綠素(含葉綠素a 和葉綠素b)總含量:葉綠素濃度(mg/L)=(A625× 1000)/34.5.取培養(yǎng)到第6 d的小球藻液,采用考馬斯亮藍(lán)法測定其可溶性蛋白含量.用SPSS 18.0重復(fù)測量資料的方差分析法分析Hg2+和Cd2+對普通小球藻的生長和葉綠素含量的影響.

2 結(jié)果與分析

2.1 Hg2+、Cd2+對小球藻生長的影響

本實(shí)驗(yàn)在開始前對藻液進(jìn)行了細(xì)胞計(jì)數(shù)和分光光度測定2種方法,以衡量吸光度值與藻細(xì)胞密度間的關(guān)系,結(jié)果顯示吸光度值與藻細(xì)胞密度(cells/mL)有良好的線性關(guān)系(見圖1),線性回歸方程為:y= 0.0666x+ 0.0032,R2= 0.9974,故實(shí)驗(yàn)中采用分光光度法測定普通小球藻數(shù)量.

藻細(xì)胞密度/(106·mL-1) 圖1 藻細(xì)胞密度與吸光度間的關(guān)系 Fig.1 Relationship between algae cell density and its absorbance at 680 nm

不同濃度Hg2+、Cd2+處理下普通小球藻的生長曲線見圖2.由圖2a可見低濃度Hg2+(0.05~0.50 mg/L)處理組的小球藻生長比對照組好;當(dāng)Hg2+濃度增大到1.00 mg/L時(shí),小球藻生長減慢,后期甚至開始死亡,在第5天達(dá)到最大生物量,OD平均值為0.138,僅為對照組的62.44 %;當(dāng)Hg2+濃度繼續(xù)增大為2 mg/L時(shí),小球藻呈現(xiàn)負(fù)增長,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)的生物量較最初時(shí)下降了30.77%.由圖2b可見,Cd2+對小球藻生長的影響也呈現(xiàn)類似的規(guī)律.當(dāng)Cd2+濃度為0~0.50 mg/L時(shí),小球藻生長速率隨著Cd2+濃度的增加而增大;當(dāng)Cd2+濃度增加到1.00 mg/L時(shí),小球藻增長明顯變緩;當(dāng)Cd2+濃度達(dá)到2 mg/L時(shí),小球藻幾乎不生長直至死亡.方差分析結(jié)果顯示:不同濃度的Hg2+和Cd2+對普通小球藻生長有極顯著影響(p<0.01).

t/d t/d a) Hg2+;b) Cd2+ 圖2 Hg2+和Cd2+對普通小球藻生長的影響Fig.2 Effect of Hg2+ and Cd2+ on the growth of Chlorella vulgaris

2.2 Hg2+、Cd2+對小球藻葉綠素含量的影響

Hg2+、Cd2+對普通小球藻葉綠素含量的影響見圖3.由圖3a可見,低濃度Hg2+(0~0.10 mg/L)能促進(jìn)小球藻葉綠素含量的增加,第6天,0.05, 0.10 mg/L Hg2+處理下的小球藻葉綠素含量比對照組分別增加了14.73%,26.74%.當(dāng)Hg2+濃度增大至1 mg/L時(shí),小球藻的葉綠素合成出現(xiàn)明顯抑制,葉綠素含量幾乎無增長;2 mg/L Hg2+處理下的小球藻葉綠素含量下降速度更快,第6天,葉綠素含量比對照組減少了94.57%,與實(shí)驗(yàn)開始相比下降了87.61%.圖3b為Cd2+對普通小球藻葉綠素含量的影響,在0 ~ 0.5 mg/L的Cd2+濃度范圍內(nèi),小球藻的葉綠素含量隨著Cd2+濃度的增加而增加;當(dāng)Cd2+濃度增加到1mg/L時(shí),葉綠素的含量明顯低于對照組,其增長曲線呈現(xiàn)鐘罩型,在實(shí)驗(yàn)第3天達(dá)到葉綠素含量的最大值(1.246 mg/L);2 mg/L Cd2+處理下的小球藻葉綠素含量呈負(fù)增長,第6天較對照組下降了87.14%.方差分析結(jié)果顯示不同濃度的Hg2+和Cd2+對小球藻葉綠素含量有極顯著影響(p<0.01).

t/d t/da) Hg2+;b) Cd2+圖3 Hg2+和Cd2+對普通小球藻葉綠素含量的影響Fig.3 Effect of Hg2+ and Cd2+ on the chlorophyll content of Chlorella vulgaris

2.3 Hg2+、Cd2+對小球藻蛋白質(zhì)含量的影響

Hg2+、Cd2+對小球藻蛋白質(zhì)含量的影響見圖4. 由圖4可見,普通小球藻蛋白質(zhì)含量隨著Hg2+、Cd2+濃度的增加先增加后減少,0.1 mg/L Hg2+處理下的小球藻蛋白質(zhì)含量值最大,為26.89 μg/mL;而Cd2+處理下的小球藻蛋白質(zhì)含量則是在Cd2+濃度為0.5 mg/L時(shí)達(dá)到最大值,為15.84 μg/mL.當(dāng)Hg2+、Cd2+濃度增加到1 mg/L時(shí),小球藻蛋白質(zhì)合成明顯抑制;當(dāng)濃度進(jìn)一步增大到2 mg/L時(shí),則藻液中無蛋白質(zhì)積累.方差分析結(jié)果顯示不同濃度的Hg2+和Cd2對普通小球藻蛋白質(zhì)含量有顯著影響(p<0.01).

ρ/(mg·L-1)圖4 Hg2+和Cd2+對普通小球藻蛋白質(zhì)含量的影響Fig.4 Effect of Hg2+ and Cd2+ on the content of protein of Chlorella vulgaris

3 討論

細(xì)胞計(jì)數(shù)法是計(jì)數(shù)藻細(xì)胞數(shù)量的最基本方法,也是判斷其他測定方法有效性的依據(jù),其操作簡單,但工作量大,重現(xiàn)性不好,易破壞樣品,人為因素影響大,誤差大;分光光度法靈敏度高,操作簡便快速,不易破壞樣品,人為誤差較小.本研究通過對2種方法的比較發(fā)現(xiàn)通過分光光度法測定的吸光度值與細(xì)胞計(jì)數(shù)法得到的藻細(xì)胞密度間有較好的相關(guān)性,故采用分光光度法來描述普通小球藻(C.vulgaris)生長狀態(tài)的變化.此外,研究表明,細(xì)胞生長的前期主要利用培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行分裂繁殖,增加生物量,當(dāng)營養(yǎng)物質(zhì)消耗將盡,生物量積累到一定程度后,細(xì)胞進(jìn)入生長的平衡期,此時(shí)開始積累大分子代謝產(chǎn)物,胞內(nèi)蛋白主要在此期間進(jìn)行[5].故本實(shí)驗(yàn)中選取進(jìn)入平衡期的藻液用于分析細(xì)胞里的蛋白質(zhì)含量.

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,低濃度(0 ~ 0.50 mg/L)Hg2+和Cd2+能促進(jìn)普通小球藻的生長、葉綠素和蛋白質(zhì)合成,是由于Hg2+和Cd2+對普通小球藻的“毒性興奮效應(yīng)”[2].Calabrese歸納了1998年以前的8500多個(gè)研究,發(fā)現(xiàn)共有350個(gè)研究,計(jì)593次實(shí)驗(yàn)報(bào)告了低劑量刺激效應(yīng)[6].當(dāng)Hg2+和Cd2+濃度增加到1 mg/L時(shí),藻細(xì)胞生長明顯抑制,葉綠素含量減少,蛋白質(zhì)合成量陡降;當(dāng)重金屬濃度增大至2 mg/L時(shí),蛋白質(zhì)含量幾乎為零,小球藻開始大量死亡.這是因?yàn)楦邼舛鹊腍g2+和Cd2+超出了細(xì)胞所需和細(xì)胞正常調(diào)節(jié)所耐受的濃度范圍,使光合作用系統(tǒng)受到不可修復(fù)的破壞,令葉綠素酶活性失調(diào),葉綠素分解加快,抑制了葉綠素的合成[2].趙瑾等[3]研究表明重金屬可通過破壞藻細(xì)胞的捕光天線系統(tǒng),阻斷藻膽蛋白對光電子的捕獲和傳遞,從而抑制光合作用,最終抑制藍(lán)藻的生長和繁殖,導(dǎo)致藻類生物量的不斷降低.大量的Cd2+進(jìn)入藻細(xì)胞后干擾了離子間原有的平衡系統(tǒng),造成離子的吸收、運(yùn)輸、滲透和調(diào)節(jié)等方面的障礙,使葉綠素含量下降、蛋白質(zhì)合成受到抑制[2].

本實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)Hg2+和Cd2+濃度均增至2 mg/L時(shí),小球藻第6天的生物量較對照組分別下降了81.85 %和91.67 %,葉綠素含量則分別下降了94.57%和87.19 %,由此可見,Hg2+和Cd2+對普通小球藻的毒性差異隨所測定指標(biāo)的不同而有所不同.吳振斌等[7]研究結(jié)果顯示Hg2+對伊樂藻(Elodea nuttallii)的毒性約為Cd2+的4倍,但不同植物對金屬離子的毒性反應(yīng)順序可能有變化,劉益浩[8]研究也表明藻在重金屬離子下的暴露時(shí)間對毒性的高低也有影響.

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 閻 海,潘 綱,霍潤蘭. 銅、鋅和錳抑制月形藻生長的毒性效應(yīng)[J]. 環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2001,21(3): 328-332.

[2] 閻春蘭,丁華堆. 鎘對集胞藻PCC6803生長的影響[J].中南民族大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2008, 27(4): 34-36.

[3] 趙 瑾,常學(xué)秀,吳 程,等. Ni2+脅迫對銅綠微囊藻(Microcystisaeruginosa)和集胞藻(Synechocystissp.)的生長和光合色素的影響 [J].生態(tài)毒理學(xué)報(bào),2010, 5(5): 679-684.

[4] 岳霞麗,張新萍,胡先文,等.芐嘧磺隆對蛋白核小球藻的生長效應(yīng)研究[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,39(9): 1823-1827.

[5] 楊海波,于 媛,劉 艷,等. 營養(yǎng)元素對小球藻生長及胞內(nèi)蛋白質(zhì)和多糖含量的影響[J].水產(chǎn)科學(xué),2004, 23(1): 6-9.

[6] Calabrese E J. Hormesis: principles and applications for pharmacology and toxicology [J].Am J Pharmacol Toxicol, 2008, 3(1): 59-71.

[7] 吳振斌,馬劍敏,趙 強(qiáng),等. Hg2+、Cd2+及其復(fù)合脅迫對伊樂藻的毒害[J].中國環(huán)境科學(xué),2005,25(3): 262-266.

[8] 劉益浩. 斜生柵藻與重金屬的相互作用研究[D] .南京:河海大學(xué), 2007.

猜你喜歡
小球藻葉綠素重金屬
提取葉綠素
重金屬對膨潤土膨脹性的影響
桃樹葉綠素含量與SPAD值呈極顯著正相關(guān)
測定不同產(chǎn)地寬筋藤中5種重金屬
中成藥(2018年8期)2018-08-29 01:28:16
葉綠素家族概述
ICP-AES、ICP-MS測定水中重金屬的對比研究
正負(fù)極互換式小球藻光合微生物燃料電池性能
再生水回灌中DOM對重金屬遷移與保留問題研究
不同溶劑萃取小球藻油脂結(jié)構(gòu)及組分差異
由松針制取三種葉綠素鈉鹽及其穩(wěn)定性的研究
404 Not Found

404 Not Found


nginx
砚山县| 精河县| 云霄县| 石家庄市| 比如县| 瑞昌市| 吴江市| 乐东| 鄂伦春自治旗| 潞城市| 界首市| 壤塘县| 永宁县| 思南县| 喜德县| 油尖旺区| 山东| 营口市| 淮南市| 交口县| 丹凤县| 远安县| 镶黄旗| 尼玛县| 临沭县| 通辽市| 弥渡县| 东台市| 萨嘎县| 阿鲁科尔沁旗| 禄劝| 龙海市| 达州市| 黔南| 荆州市| 龙泉市| 江永县| 万州区| 兴文县| 石城县| 闵行区|