劉威等

摘要：通過野外及種植基地的調(diào)查，對(duì)牛耳楓上發(fā)生的主要病害進(jìn)行了調(diào)查和初步鑒定，共發(fā)現(xiàn)2種危害較嚴(yán)重的病害，分別鑒定為牛耳楓枯梢病致病菌鐮刀菌屬（Fusarium sp.）、炭疽病病原菌刺盤孢屬（Colletotrichum sp.）。針對(duì)這2種病害做了田間藥劑防治試驗(yàn)，篩選出對(duì)枯梢病防治效果較好的化學(xué)藥劑為1.8%辛菌胺醋酸鹽水劑，對(duì)炭疽病防治效果較好的化學(xué)藥劑為25%丙環(huán)唑乳油、10%苯醚甲環(huán)唑乳油。

關(guān)鍵詞：牛耳楓；病害；化學(xué)藥劑；防治效果

中圖分類號(hào)： S435.671 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）04-0111-03

收稿日期：2013-08-15

基金項(xiàng)目：廣西省科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃（編號(hào)：桂科攻1099063-13）。

作者簡(jiǎn)介：劉威（1982—），女，廣西北流人，助理工程師，從事藥用植物病蟲害研究。E-mail：liuwei98@126.com。

通信作者：黃雪彥，碩士，副研究員。E-mail：xueyan-h@163.com。牛耳楓（Daphniphyllum calycinum Benth.）為虎皮楠科植物，其果實(shí)、枝葉、根均可入藥，具有祛風(fēng)止痛、解毒消腫、止痢等功效，主治外感發(fā)熱、咳嗽、咽喉腫痛、脅下痞塊、風(fēng)濕骨痛、跌打損傷、毒蛇咬傷、瘡瘍腫毒等，在廣西，廣東、海南、云南、福建、江西等地均有分布[1]。牛耳楓是海南的道地藥材[2]，也是黎族常用的中草藥[3]，植物中主要含蕓香苷、槲皮素等黃酮類成分及生物堿類成分，其中蕓香苷在牛耳楓藥材中的含量較高，是治療高血壓、心血管疾病、糖尿病等多種疾病的良藥[4]。牛耳楓的葉及種子中含有的生物堿具有抗腫瘤作用[5]。牛耳楓的種子及種仁含油量較高，含油量達(dá)30%～40%，可作為制作油漆、肥皂、潤(rùn)滑油等的原料[6-7]，牛耳楓也是適用于生物柴油資源開發(fā)利用的油料樹種。隨著牛耳楓市場(chǎng)需求量的增加，牛耳楓的野生資源已經(jīng)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)的要求，需要進(jìn)行人工栽培方能解決資源匱乏的問題。近幾年來，海南、廣西等地相繼推廣人工牛耳楓的種植，2010—2013年，在廣西南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)石埠鄉(xiāng)的牛耳楓種植基地及廣西藥用植物園的種質(zhì)資源苗圃中均發(fā)現(xiàn)了一些重要病害，發(fā)生率達(dá)50%～70%，嚴(yán)重影響了牛耳楓的產(chǎn)量和品質(zhì)。目前國(guó)內(nèi)對(duì)牛耳楓的研究主要集中在化學(xué)成分及藥理活性方面，尚無關(guān)于其病蟲害研究的報(bào)道。本研究通過對(duì)牛耳楓生長(zhǎng)發(fā)育期的觀察，對(duì)其上發(fā)生的主要病害種類進(jìn)行調(diào)查和鑒定，并初步掌握其發(fā)生發(fā)展的規(guī)律，同時(shí)開展了田間藥劑防治對(duì)比試驗(yàn)，以期為牛耳楓病害的有效防治打下基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

染病的牛耳楓植株來源于廣西南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)石埠鄉(xiāng)牛耳楓種植基地；藥劑防治試驗(yàn)也選擇在該種植基地進(jìn)行。

1.2病害癥狀描述

對(duì)不同生長(zhǎng)期的牛耳楓病害進(jìn)行調(diào)查，觀察病害在田間的發(fā)病情況并記錄病害癥狀。采集具有典型癥狀的病株用于室內(nèi)病原菌的分離鑒定。

1.3病原鑒定

參考方中達(dá)的方法[8]對(duì)病原物進(jìn)行常規(guī)組織分離培養(yǎng)和致病性測(cè)定。根據(jù)病害癥狀、病原菌的培養(yǎng)性狀及形態(tài)特征，參照相關(guān)文獻(xiàn)資料進(jìn)行病原菌的種類鑒定。

1.3.1病原菌的分離與純化病原菌采用常規(guī)的組織分離法分離。選取初發(fā)病的牛耳楓梢部、葉片病健交界處的病組織，剪成0.5 cm×0.5 cm大小組織塊，先用75%乙醇浸泡30 s、01%氯化汞消毒3min，再用滅菌水漂洗3次后置于PDA培養(yǎng)基（配制方法同普通微生物培養(yǎng)試驗(yàn)）上，于26 ℃條件培養(yǎng)；待長(zhǎng)出菌絲后，挑取菌落邊緣進(jìn)行純化，將純化后的菌落通過單孢分離而獲得純培養(yǎng)分離物。

1.3.2病原菌的致病性測(cè)定選取健康的牛耳楓植株，用滅菌蒸餾水沖洗干凈后晾干表面的水分，采用針刺接種的方法將純培養(yǎng)的病原菌菌絲塊接種到牛耳楓的健康梢部、葉片上，以不接種的病原菌組織為對(duì)照，每處理設(shè)3次重復(fù)。接種后置于25～30 ℃自然條件下培養(yǎng)，定期觀察各組織的發(fā)病情況。適時(shí)對(duì)接種發(fā)病的組織進(jìn)行病原菌再分離，觀察分離得到的病原菌是否與接種菌株相同。

1.3.3病原菌的形態(tài)學(xué)鑒定將有致病性的病原菌菌株接種于PDA培養(yǎng)基平板上，觀察病原菌的培養(yǎng)性狀。在光學(xué)顯微鏡下觀察并描述病原菌的菌絲體、產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)及孢子的形態(tài)，隨機(jī)測(cè)量100個(gè)病原菌分生孢子的大小并拍照，對(duì)病原菌種類進(jìn)行鑒定。

1.4田間防治試驗(yàn)

1.4.1枯梢病防治試驗(yàn)

1.4.1.1供試藥劑1.8%辛菌胺醋酸鹽水劑（西安嘉科農(nóng)化有限公司）；5%利刃水溶劑[主要成分：雙（烷基氫基）氫基乙酸鹽，西安嘉科農(nóng)化有限公司]；45%甲霜·惡霉靈可濕性粉劑（山東化聯(lián)作物有限公司）。

1.4.1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每處理設(shè)3次重復(fù)，每個(gè)小區(qū)處理面積30 m2，田間隨機(jī)排列。以不同的藥劑作為不同的處理，以噴施清水作為空白對(duì)照。共施藥3次，期間間隔7 d，以手動(dòng)背負(fù)式噴霧器對(duì)全株進(jìn)行噴霧。首次施藥前將牛耳楓枯梢病病株數(shù)及相對(duì)應(yīng)的病情基數(shù)做好記錄及標(biāo)記，第2、3次施藥前及第3次施藥后7 d分別調(diào)查1次防效，每個(gè)重復(fù)調(diào)查5點(diǎn)，每點(diǎn)30株，記錄病株率，并按照病情分級(jí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算病情指數(shù)及防治效果。使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行測(cè)量數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。

枯梢病病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[9-10]如下：0級(jí)：全株無?。?級(jí)：梢部1/3以下發(fā)?。?級(jí)：梢部1/3～2/3發(fā)?。?級(jí)：梢部2/3以上發(fā)?。?級(jí)：整個(gè)梢部發(fā)病，梢部以上葉片萎蔫。病情指數(shù)、相對(duì)防效的計(jì)算公式如下。

1.4.2炭疽病防治試驗(yàn)

1.4.2.1供試藥劑10%苯醚甲環(huán)唑乳油（瑞士諾華有限公司）；25%丙環(huán)唑乳油（海南博士威農(nóng)用化學(xué)有限公司）；25%咪鮮胺乳油（浙江興農(nóng)生物化工有限公司）。

1.4.2.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)以不同的藥劑作為不同的處理，每處理設(shè)3次重復(fù)，每小區(qū)20 m2；以噴施清水作為空白對(duì)照。共施藥3次，期間間隔7 d，以手動(dòng)背負(fù)式噴霧器對(duì)全株葉片進(jìn)行噴霧。首次施藥前將牛耳楓的炭疽病總?cè)~數(shù)、病葉片數(shù)及相對(duì)應(yīng)的各病情基數(shù)分別做好記錄，第2、3次施藥前及第3次施藥后7 d分別調(diào)查1次防效。每個(gè)重復(fù)調(diào)查5點(diǎn)，每點(diǎn)20株，記錄發(fā)病病葉數(shù)及相對(duì)應(yīng)的病情級(jí)數(shù)，按照病害分級(jí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算病情指數(shù)及防治效果。使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行測(cè)量數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。

牛耳楓炭疽病病葉分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[11]如下：0級(jí)：全葉無病；1級(jí)：病斑面積占葉片面積的6%以下；3級(jí)：病斑面積占葉片面積的6%～15%；5級(jí)：病斑面積占葉片面積的16%～25%；7級(jí)：病斑面積占葉片面積的26%～50%；9級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉片面積的50%以上。病情指數(shù)及相對(duì)防效的計(jì)算公式與枯梢病相同。

2結(jié)果與分析

2.1牛耳楓枯梢病

2.1.1病害癥狀牛耳楓枯梢病是苗期發(fā)生的主要病害之一，該病主要危害枝干嫩梢頸部，也可危害葉片、葉柄。受害莖稈初期產(chǎn)生水浸狀病斑，然后迅速向上、向下擴(kuò)大并環(huán)繞莖稈，病部凹陷，病莖以上的莖葉呈萎蔫狀，而后由凹陷處下折，最后變褐色并干枯而死。受害葉柄呈水漬狀，病斑沒有明顯的界限，可向上蔓延至葉片，受害后葉片似開水燙過，后期整個(gè)梢部易從病部折斷。牛耳楓的枯梢病病害在苗期易發(fā)，發(fā)生率可達(dá)50%～60%，病害的發(fā)生與氣溫和雨量關(guān)系密切。春、秋陰涼天氣及雨季的發(fā)病情況較為嚴(yán)重，苗期種植密度過大也會(huì)成為該病發(fā)生的主要原因。

2.1.2病原菌的致病性測(cè)定對(duì)牛耳楓用針刺法接種枯梢病病原菌6 d后，牛耳楓開始發(fā)病，且發(fā)病植株的癥狀與田間的發(fā)病癥狀基本一致。重新對(duì)接種發(fā)病的病健交界處進(jìn)行分離發(fā)現(xiàn)，病原菌形態(tài)與原分離物一致。

2.1.3病原菌的鑒定結(jié)果將病原菌在PDA平板上培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，菌落為圓形或近圓形，邊緣整齊，有絮狀突起，氣生菌絲白色質(zhì)密。菌落粉白色、淺粉色至肉色，略帶有紫色，由于大量孢子生成而呈粉質(zhì)。菌落高3～5 mm，分生孢子鐮刀形，上端略彎曲，無色，多胞，兩端細(xì)胞稍尖，大?。?4.6～62.4） μm×（5.5～7.9） μm。分生孢子座為紫色小點(diǎn)，直徑100～200 μm，由許多聚集成墊狀的、很短的分生孢子梗形成，頂端著生分生孢子。牛耳楓枯梢病的癥狀及病原形態(tài)見圖1。根據(jù)以上對(duì)病原菌的描述，同時(shí)參照《中國(guó)真菌總匯》[12]和布斯描述的鐮刀菌形態(tài)學(xué)特征[13]，將本病原菌初步鑒定為半知菌亞門鐮刀菌屬（Fusarium sp.）。

3結(jié)論與討論

本研究對(duì)牛耳楓生長(zhǎng)過程中主要發(fā)生的病害進(jìn)行調(diào)查，通過病害的發(fā)病癥狀、病原菌形態(tài)特征初步鑒定出牛耳楓枯梢病病原菌為鐮刀菌屬（Fusarium sp.），炭疽病病原菌為刺盤孢屬（Colletotrichum sp.），但具體的種名尚未明確，還有待于進(jìn)一步鑒定?？萆也　⑻烤也∵@2種病害在田間的發(fā)生較為嚴(yán)重，且環(huán)境條件適宜時(shí)極易造成流行發(fā)生，因此在防治上應(yīng)抓住最佳時(shí)期用藥，做到早發(fā)現(xiàn)早防治。此外還可以結(jié)合清除病葉、落葉，及時(shí)追肥，選擇適宜的種植密度，雨后及時(shí)排水等農(nóng)業(yè)方法進(jìn)行有效防治。

除對(duì)牛耳楓的主要病害種類進(jìn)行調(diào)查外，本研究還在牛耳楓種植基地的發(fā)病區(qū)對(duì)枯梢病、炭疽病進(jìn)行了田間藥劑對(duì)比試驗(yàn)，篩選出防治枯梢病、炭疽病較好的藥劑，分別為18%辛菌胺醋酸鹽水溶劑、25%丙環(huán)唑乳油和10%苯醚甲環(huán)唑乳油，為牛耳楓生產(chǎn)上發(fā)生這2種病害的化學(xué)防治提供了科學(xué)依據(jù)。

枯梢病及炭疽病是牛耳楓生產(chǎn)過程中極易發(fā)生的病害，且病情逐年加重，為了更有效地對(duì)這2種病害進(jìn)行防治控制，還需要進(jìn)一步對(duì)病害的發(fā)病條件、病原菌的侵染循環(huán)、生物學(xué)特性等方面進(jìn)行更深入的研究，從而促進(jìn)牛耳楓生產(chǎn)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì). 中華本草：第四冊(cè)[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：865-866.

[2]魏娜，賴偉勇，張俊清，等. 牛耳楓等五種藥材重金屬元素含量分析[J]. 中外醫(yī)療，2008，27（23）：85-86.

[3]張小坡，張俊清，裴月湖，等. 黎藥牛耳楓化學(xué)成分研究[J]. 中國(guó)現(xiàn)代中藥，2011，13（10）：26-29.

[4]李海龍，劉明生，張俊清，等. 牛耳楓藥材中總黃酮含量測(cè)定[J]. 海南醫(yī)學(xué)，2012，23（15）：106-108.

[5]曹志然，王永麗，戎瑞雪，等. 牛耳楓生物堿F21對(duì)HepG-2細(xì)胞的抑制作用及機(jī)制[J]. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2012，26（1）：63-67.

[6]廣東省農(nóng)林水科學(xué)技術(shù)服務(wù)站經(jīng)濟(jì)作物隊(duì). 廣東野生油脂植物手冊(cè)[M]. 廣州：廣東省農(nóng)林水科學(xué)技術(shù)服務(wù)站經(jīng)濟(jì)作物隊(duì)，1970：70-71.

[7]李曉林，覃玉榮，黃慶青，等. 廣西生物柴油樹種資源及開發(fā)利用[J]. 中國(guó)林副特產(chǎn)，2008（6）：61-64.

[8]方中達(dá). 植病研究方法[M]. 3版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1998.

[9]汪瑞清，華菊玲，肖運(yùn)萍，等. 不同藥劑處理對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病的防治效果研究[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012（17）：85-88.

[10]沈伯葵，姚景德，張明海，等. 松梢枯病防治技術(shù)的研究[J]. 林業(yè)科學(xué)研究，1993，6（4）：409-413.

[11]姚紅燕，邱宏良，陳若霞，等. 幾種藥劑對(duì)草霉炭疽病的效果[J]. 植物保護(hù)，2010，36（6）：162-164.

[12]戴芳瀾. 中國(guó)真菌總匯[M]. 北京：科學(xué)出版社，1979.

[13]布斯. 鐮刀菌屬[M]//陳其煐，譯. 北京：農(nóng)業(yè)出版社，1988.

[14]魏景超. 真菌鑒定手冊(cè)[M]. 上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1979：468-475.

1.4.2.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)以不同的藥劑作為不同的處理，每處理設(shè)3次重復(fù)，每小區(qū)20 m2；以噴施清水作為空白對(duì)照。共施藥3次，期間間隔7 d，以手動(dòng)背負(fù)式噴霧器對(duì)全株葉片進(jìn)行噴霧。首次施藥前將牛耳楓的炭疽病總?cè)~數(shù)、病葉片數(shù)及相對(duì)應(yīng)的各病情基數(shù)分別做好記錄，第2、3次施藥前及第3次施藥后7 d分別調(diào)查1次防效。每個(gè)重復(fù)調(diào)查5點(diǎn)，每點(diǎn)20株，記錄發(fā)病病葉數(shù)及相對(duì)應(yīng)的病情級(jí)數(shù)，按照病害分級(jí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算病情指數(shù)及防治效果。使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行測(cè)量數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。

牛耳楓炭疽病病葉分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[11]如下：0級(jí)：全葉無??；1級(jí)：病斑面積占葉片面積的6%以下；3級(jí)：病斑面積占葉片面積的6%～15%；5級(jí)：病斑面積占葉片面積的16%～25%；7級(jí)：病斑面積占葉片面積的26%～50%；9級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉片面積的50%以上。病情指數(shù)及相對(duì)防效的計(jì)算公式與枯梢病相同。

2結(jié)果與分析

2.1牛耳楓枯梢病

2.1.1病害癥狀牛耳楓枯梢病是苗期發(fā)生的主要病害之一，該病主要危害枝干嫩梢頸部，也可危害葉片、葉柄。受害莖稈初期產(chǎn)生水浸狀病斑，然后迅速向上、向下擴(kuò)大并環(huán)繞莖稈，病部凹陷，病莖以上的莖葉呈萎蔫狀，而后由凹陷處下折，最后變褐色并干枯而死。受害葉柄呈水漬狀，病斑沒有明顯的界限，可向上蔓延至葉片，受害后葉片似開水燙過，后期整個(gè)梢部易從病部折斷。牛耳楓的枯梢病病害在苗期易發(fā)，發(fā)生率可達(dá)50%～60%，病害的發(fā)生與氣溫和雨量關(guān)系密切。春、秋陰涼天氣及雨季的發(fā)病情況較為嚴(yán)重，苗期種植密度過大也會(huì)成為該病發(fā)生的主要原因。

2.1.2病原菌的致病性測(cè)定對(duì)牛耳楓用針刺法接種枯梢病病原菌6 d后，牛耳楓開始發(fā)病，且發(fā)病植株的癥狀與田間的發(fā)病癥狀基本一致。重新對(duì)接種發(fā)病的病健交界處進(jìn)行分離發(fā)現(xiàn)，病原菌形態(tài)與原分離物一致。

2.1.3病原菌的鑒定結(jié)果將病原菌在PDA平板上培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，菌落為圓形或近圓形，邊緣整齊，有絮狀突起，氣生菌絲白色質(zhì)密。菌落粉白色、淺粉色至肉色，略帶有紫色，由于大量孢子生成而呈粉質(zhì)。菌落高3～5 mm，分生孢子鐮刀形，上端略彎曲，無色，多胞，兩端細(xì)胞稍尖，大?。?4.6～62.4） μm×（5.5～7.9） μm。分生孢子座為紫色小點(diǎn)，直徑100～200 μm，由許多聚集成墊狀的、很短的分生孢子梗形成，頂端著生分生孢子。牛耳楓枯梢病的癥狀及病原形態(tài)見圖1。根據(jù)以上對(duì)病原菌的描述，同時(shí)參照《中國(guó)真菌總匯》[12]和布斯描述的鐮刀菌形態(tài)學(xué)特征[13]，將本病原菌初步鑒定為半知菌亞門鐮刀菌屬（Fusarium sp.）。

3結(jié)論與討論

本研究對(duì)牛耳楓生長(zhǎng)過程中主要發(fā)生的病害進(jìn)行調(diào)查，通過病害的發(fā)病癥狀、病原菌形態(tài)特征初步鑒定出牛耳楓枯梢病病原菌為鐮刀菌屬（Fusarium sp.），炭疽病病原菌為刺盤孢屬（Colletotrichum sp.），但具體的種名尚未明確，還有待于進(jìn)一步鑒定?？萆也?、炭疽病這2種病害在田間的發(fā)生較為嚴(yán)重，且環(huán)境條件適宜時(shí)極易造成流行發(fā)生，因此在防治上應(yīng)抓住最佳時(shí)期用藥，做到早發(fā)現(xiàn)早防治。此外還可以結(jié)合清除病葉、落葉，及時(shí)追肥，選擇適宜的種植密度，雨后及時(shí)排水等農(nóng)業(yè)方法進(jìn)行有效防治。

除對(duì)牛耳楓的主要病害種類進(jìn)行調(diào)查外，本研究還在牛耳楓種植基地的發(fā)病區(qū)對(duì)枯梢病、炭疽病進(jìn)行了田間藥劑對(duì)比試驗(yàn)，篩選出防治枯梢病、炭疽病較好的藥劑，分別為18%辛菌胺醋酸鹽水溶劑、25%丙環(huán)唑乳油和10%苯醚甲環(huán)唑乳油，為牛耳楓生產(chǎn)上發(fā)生這2種病害的化學(xué)防治提供了科學(xué)依據(jù)。

枯梢病及炭疽病是牛耳楓生產(chǎn)過程中極易發(fā)生的病害，且病情逐年加重，為了更有效地對(duì)這2種病害進(jìn)行防治控制，還需要進(jìn)一步對(duì)病害的發(fā)病條件、病原菌的侵染循環(huán)、生物學(xué)特性等方面進(jìn)行更深入的研究，從而促進(jìn)牛耳楓生產(chǎn)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì). 中華本草：第四冊(cè)[M]. 上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1999：865-866.

[2]魏娜，賴偉勇，張俊清，等. 牛耳楓等五種藥材重金屬元素含量分析[J]. 中外醫(yī)療，2008，27（23）：85-86.

[3]張小坡，張俊清，裴月湖，等. 黎藥牛耳楓化學(xué)成分研究[J]. 中國(guó)現(xiàn)代中藥，2011，13（10）：26-29.

[4]李海龍，劉明生，張俊清，等. 牛耳楓藥材中總黃酮含量測(cè)定[J]. 海南醫(yī)學(xué)，2012，23（15）：106-108.

[5]曹志然，王永麗，戎瑞雪，等. 牛耳楓生物堿F21對(duì)HepG-2細(xì)胞的抑制作用及機(jī)制[J]. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2012，26（1）：63-67.

[6]廣東省農(nóng)林水科學(xué)技術(shù)服務(wù)站經(jīng)濟(jì)作物隊(duì). 廣東野生油脂植物手冊(cè)[M]. 廣州：廣東省農(nóng)林水科學(xué)技術(shù)服務(wù)站經(jīng)濟(jì)作物隊(duì)，1970：70-71.

[7]李曉林，覃玉榮，黃慶青，等. 廣西生物柴油樹種資源及開發(fā)利用[J]. 中國(guó)林副特產(chǎn)，2008（6）：61-64.

[8]方中達(dá). 植病研究方法[M]. 3版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1998.

[9]汪瑞清，華菊玲，肖運(yùn)萍，等. 不同藥劑處理對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病的防治效果研究[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012（17）：85-88.

[10]沈伯葵，姚景德，張明海，等. 松梢枯病防治技術(shù)的研究[J]. 林業(yè)科學(xué)研究，1993，6（4）：409-413.

[11]姚紅燕，邱宏良，陳若霞，等. 幾種藥劑對(duì)草霉炭疽病的效果[J]. 植物保護(hù)，2010，36（6）：162-164.

[12]戴芳瀾. 中國(guó)真菌總匯[M]. 北京：科學(xué)出版社，1979.

[13]布斯. 鐮刀菌屬[M]//陳其煐，譯. 北京：農(nóng)業(yè)出版社，1988.

[14]魏景超. 真菌鑒定手冊(cè)[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1979：468-475.

1.4.2.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)以不同的藥劑作為不同的處理，每處理設(shè)3次重復(fù)，每小區(qū)20 m2；以噴施清水作為空白對(duì)照。共施藥3次，期間間隔7 d，以手動(dòng)背負(fù)式噴霧器對(duì)全株葉片進(jìn)行噴霧。首次施藥前將牛耳楓的炭疽病總?cè)~數(shù)、病葉片數(shù)及相對(duì)應(yīng)的各病情基數(shù)分別做好記錄，第2、3次施藥前及第3次施藥后7 d分別調(diào)查1次防效。每個(gè)重復(fù)調(diào)查5點(diǎn)，每點(diǎn)20株，記錄發(fā)病病葉數(shù)及相對(duì)應(yīng)的病情級(jí)數(shù)，按照病害分級(jí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算病情指數(shù)及防治效果。使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行測(cè)量數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。

牛耳楓炭疽病病葉分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[11]如下：0級(jí)：全葉無?。?級(jí)：病斑面積占葉片面積的6%以下；3級(jí)：病斑面積占葉片面積的6%～15%；5級(jí)：病斑面積占葉片面積的16%～25%；7級(jí)：病斑面積占葉片面積的26%～50%；9級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉片面積的50%以上。病情指數(shù)及相對(duì)防效的計(jì)算公式與枯梢病相同。

2結(jié)果與分析

2.1牛耳楓枯梢病

2.1.1病害癥狀牛耳楓枯梢病是苗期發(fā)生的主要病害之一，該病主要危害枝干嫩梢頸部，也可危害葉片、葉柄。受害莖稈初期產(chǎn)生水浸狀病斑，然后迅速向上、向下擴(kuò)大并環(huán)繞莖稈，病部凹陷，病莖以上的莖葉呈萎蔫狀，而后由凹陷處下折，最后變褐色并干枯而死。受害葉柄呈水漬狀，病斑沒有明顯的界限，可向上蔓延至葉片，受害后葉片似開水燙過，后期整個(gè)梢部易從病部折斷。牛耳楓的枯梢病病害在苗期易發(fā)，發(fā)生率可達(dá)50%～60%，病害的發(fā)生與氣溫和雨量關(guān)系密切。春、秋陰涼天氣及雨季的發(fā)病情況較為嚴(yán)重，苗期種植密度過大也會(huì)成為該病發(fā)生的主要原因。

2.1.2病原菌的致病性測(cè)定對(duì)牛耳楓用針刺法接種枯梢病病原菌6 d后，牛耳楓開始發(fā)病，且發(fā)病植株的癥狀與田間的發(fā)病癥狀基本一致。重新對(duì)接種發(fā)病的病健交界處進(jìn)行分離發(fā)現(xiàn)，病原菌形態(tài)與原分離物一致。

2.1.3病原菌的鑒定結(jié)果將病原菌在PDA平板上培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，菌落為圓形或近圓形，邊緣整齊，有絮狀突起，氣生菌絲白色質(zhì)密。菌落粉白色、淺粉色至肉色，略帶有紫色，由于大量孢子生成而呈粉質(zhì)。菌落高3～5 mm，分生孢子鐮刀形，上端略彎曲，無色，多胞，兩端細(xì)胞稍尖，大?。?4.6～62.4） μm×（5.5～7.9） μm。分生孢子座為紫色小點(diǎn)，直徑100～200 μm，由許多聚集成墊狀的、很短的分生孢子梗形成，頂端著生分生孢子。牛耳楓枯梢病的癥狀及病原形態(tài)見圖1。根據(jù)以上對(duì)病原菌的描述，同時(shí)參照《中國(guó)真菌總匯》[12]和布斯描述的鐮刀菌形態(tài)學(xué)特征[13]，將本病原菌初步鑒定為半知菌亞門鐮刀菌屬（Fusarium sp.）。

3結(jié)論與討論

本研究對(duì)牛耳楓生長(zhǎng)過程中主要發(fā)生的病害進(jìn)行調(diào)查，通過病害的發(fā)病癥狀、病原菌形態(tài)特征初步鑒定出牛耳楓枯梢病病原菌為鐮刀菌屬（Fusarium sp.），炭疽病病原菌為刺盤孢屬（Colletotrichum sp.），但具體的種名尚未明確，還有待于進(jìn)一步鑒定?？萆也　⑻烤也∵@2種病害在田間的發(fā)生較為嚴(yán)重，且環(huán)境條件適宜時(shí)極易造成流行發(fā)生，因此在防治上應(yīng)抓住最佳時(shí)期用藥，做到早發(fā)現(xiàn)早防治。此外還可以結(jié)合清除病葉、落葉，及時(shí)追肥，選擇適宜的種植密度，雨后及時(shí)排水等農(nóng)業(yè)方法進(jìn)行有效防治。

除對(duì)牛耳楓的主要病害種類進(jìn)行調(diào)查外，本研究還在牛耳楓種植基地的發(fā)病區(qū)對(duì)枯梢病、炭疽病進(jìn)行了田間藥劑對(duì)比試驗(yàn)，篩選出防治枯梢病、炭疽病較好的藥劑，分別為18%辛菌胺醋酸鹽水溶劑、25%丙環(huán)唑乳油和10%苯醚甲環(huán)唑乳油，為牛耳楓生產(chǎn)上發(fā)生這2種病害的化學(xué)防治提供了科學(xué)依據(jù)。

枯梢病及炭疽病是牛耳楓生產(chǎn)過程中極易發(fā)生的病害，且病情逐年加重，為了更有效地對(duì)這2種病害進(jìn)行防治控制，還需要進(jìn)一步對(duì)病害的發(fā)病條件、病原菌的侵染循環(huán)、生物學(xué)特性等方面進(jìn)行更深入的研究，從而促進(jìn)牛耳楓生產(chǎn)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì). 中華本草：第四冊(cè)[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：865-866.

[2]魏娜，賴偉勇，張俊清，等. 牛耳楓等五種藥材重金屬元素含量分析[J]. 中外醫(yī)療，2008，27（23）：85-86.

[3]張小坡，張俊清，裴月湖，等. 黎藥牛耳楓化學(xué)成分研究[J]. 中國(guó)現(xiàn)代中藥，2011，13（10）：26-29.

[4]李海龍，劉明生，張俊清，等. 牛耳楓藥材中總黃酮含量測(cè)定[J]. 海南醫(yī)學(xué)，2012，23（15）：106-108.

[5]曹志然，王永麗，戎瑞雪，等. 牛耳楓生物堿F21對(duì)HepG-2細(xì)胞的抑制作用及機(jī)制[J]. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2012，26（1）：63-67.

[6]廣東省農(nóng)林水科學(xué)技術(shù)服務(wù)站經(jīng)濟(jì)作物隊(duì). 廣東野生油脂植物手冊(cè)[M]. 廣州：廣東省農(nóng)林水科學(xué)技術(shù)服務(wù)站經(jīng)濟(jì)作物隊(duì)，1970：70-71.

[7]李曉林，覃玉榮，黃慶青，等. 廣西生物柴油樹種資源及開發(fā)利用[J]. 中國(guó)林副特產(chǎn)，2008（6）：61-64.

[8]方中達(dá). 植病研究方法[M]. 3版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1998.

[9]汪瑞清，華菊玲，肖運(yùn)萍，等. 不同藥劑處理對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病的防治效果研究[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012（17）：85-88.

[10]沈伯葵，姚景德，張明海，等. 松梢枯病防治技術(shù)的研究[J]. 林業(yè)科學(xué)研究，1993，6（4）：409-413.

[11]姚紅燕，邱宏良，陳若霞，等. 幾種藥劑對(duì)草霉炭疽病的效果[J]. 植物保護(hù)，2010，36（6）：162-164.

[12]戴芳瀾. 中國(guó)真菌總匯[M]. 北京：科學(xué)出版社，1979.

[13]布斯. 鐮刀菌屬[M]//陳其煐，譯. 北京：農(nóng)業(yè)出版社，1988.

[14]魏景超. 真菌鑒定手冊(cè)[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1979：468-475.