黃良勤　王剛

摘要：確定千日紅（Gomphrena gliobosa. L）揮發(fā)油的最佳提取工藝，并分析其化學(xué)成分。采用微波輔助萃取法從千日紅中提取揮發(fā)油，以揮發(fā)油提取率為指標(biāo)，考察萃取時(shí)間、液料比、微波功率等影響因素，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)化千日紅揮發(fā)油提取工藝。通過氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)千日紅揮發(fā)油進(jìn)行分析，用歸一化法測定揮發(fā)油成分的百分含量，再用Wiley和Nist05標(biāo)準(zhǔn)譜庫解析揮發(fā)油成分的結(jié)構(gòu)。千日紅揮發(fā)油最佳提取工藝：料液比為1∶14，萃取時(shí)間為5 h，微波功率為700 W，此工藝條件下，揮發(fā)油提取率達(dá)1.34%。共鑒定了33種成分，占揮發(fā)油總成分的98.19%。為進(jìn)一步開發(fā)利用千日紅提供科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：千日紅（Gomphrena gliobosa. L）；揮發(fā)油；氣質(zhì)聯(lián)用儀

中圖分類號(hào)：O657.7+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）05-1156-03

千日紅（Gomphrena gliobosa. L），又名圓仔花、火球花、千年紅，為石竹目莧科千日紅屬一年生草本植物，是熱帶及亞熱帶常見花卉，具有食用、藥用、保健等功能[1-3]，其性平、味甘，具有清肝、散結(jié)、止咳、定喘等功效[4-5]。千日紅揮發(fā)油的化學(xué)成分尚未見報(bào)道[6]。本研究首次采用微波萃取法（MAE）以揮發(fā)油提取率為指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)優(yōu)化千日紅揮發(fā)油提取工藝[7，8]，結(jié)合氣質(zhì)聯(lián)用儀（GC-MS）對(duì)千日紅揮發(fā)性成分進(jìn)行分析[9]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

Agilent 5973型氣質(zhì)聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）； JH-100A型微波萃取器（南京金海豐微波科技有限公司）；LJ9-XZ-970型旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀（中西遠(yuǎn)大科技公司）；千日紅于2009年3月采購自廣西南寧，經(jīng)遵義醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院楊建文鑒定為石竹目莧科千日紅屬千日紅干燥的花蕾；無水硫酸鈉為分析純。

1.2 方法

1.2.1 微波萃取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 以千日紅揮發(fā)油提取率為考察指標(biāo)，設(shè)計(jì)3因素3水平正交試驗(yàn)，以萃取時(shí)間、液料比、微波功率為因素，每個(gè)因素設(shè)3水平，按L9（34）表安排試驗(yàn)。試驗(yàn)方案見表1。

1.2.2 樣品制備 取干燥藥材9份，每份100 g。按試驗(yàn)方案進(jìn)行微波萃取，經(jīng)適量無水硫酸鈉脫水，過濾，稱重，計(jì)算揮發(fā)油提取率。

1.2.3 氣相色譜條件 DB-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）彈性石英毛細(xì)管柱；采用程序升溫，50 ℃保持5 min，以10 ℃/min升至200 ℃，恒溫5 min，又以5 ℃/min升至250 ℃，恒溫10 min；氣化室溫度為260 ℃；載氣為高純氦氣（純度為99.999%）；載氣流量為1.0 mL/min；進(jìn)樣量為1 μL（正己烷溶液）；分流比為20∶1。

1.2.4 質(zhì)譜條件 離子源為EI源，離子源溫度為230 ℃，四極桿溫度為150 ℃，倍增器電壓為1 994 V，接口溫度為280 ℃，電子能量為70 eV，發(fā)射電流為34.6 μA，溶劑延遲為4 min，質(zhì)量范圍為10～550 amu。

2 結(jié)果與分析

根據(jù)微波萃取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，9批千日紅藥材揮發(fā)油提取率結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。

2.1 正交試驗(yàn)結(jié)果

從正交試驗(yàn)及方差分析可知，三個(gè)因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響大小為：C （萃取時(shí)間） > A （微波功率）> B （液料比），由方差分析結(jié)果表明（表3），萃取時(shí)間對(duì)千日紅揮發(fā)油提取具有顯著性影響，微波功率其次，而液料比影響不顯著。微波萃取法提取千日紅揮發(fā)油的最佳工藝組合為A3B3C2，即微波功率700 W、萃取時(shí)間4.0 h、液料比1∶14。

2.2 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

根據(jù)優(yōu)化條件進(jìn)行微波萃取千日紅樣品，制備3批樣品，測定揮發(fā)油提取率。結(jié)果可靠、穩(wěn)定，見表4。

2.3 GC-MS 分析結(jié)果

取MAE法所得揮發(fā)油3 μL，用GC-MS分析鑒定，共分離出32種成分，見圖1，通過化學(xué)工作站檢索Wiley和Nist05標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫解析，鑒定出其中33個(gè)化合物，其相對(duì)峰面積分別占總峰面積的98.19%。按峰面積歸一化法計(jì)算求得各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對(duì)含量（表5）。

3 小結(jié)與討論

從千日紅中分離出43個(gè)色譜峰，鑒定了33個(gè)化合物，占揮發(fā)油總量的（98.19%）。其中相對(duì)含量較高的成分有棕櫚酸（16.39%）、14-甲基三十二烷（5.85%）、二十七烷（5.82%）， 其余成分含量相對(duì)較低。千日紅含有多種具有生物活性的化學(xué)成分，其揮發(fā)油部分主要含有不飽和脂肪酸成分，不飽和脂肪酸具有多種生理功能，能降低血中膽固醇和甘油三酯、調(diào)節(jié)心臟功能、降低血液黏稠度、改善血液微循環(huán)、提高腦細(xì)胞的活性、增強(qiáng)記憶力和思維能力、增強(qiáng)人體防御系統(tǒng)的功能等[10-12]。

參考文獻(xiàn)：

[1] 蔡連捷，張秀省，黃 勇.千日紅的栽培及利用價(jià)值[J].特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)植物，2002，5（5）：43.

[2] 王自軍，廉宜君.千日紅色素的提取工藝[J].食品研究與開發(fā)，2010，31（1）：47-49.

[3] 王自軍，廉宜君.千日紅色素的提取及穩(wěn)定性研究[J].中藥材，2009，20（7）：1696-1698.

[4] 徐 忠，張海華，王 航.千日紅花色苷的微生物法提取及穩(wěn)定性研究[J].食品科學(xué)，2007，28（7）：125-130.

[5] 徐 忠，薄 凱.千日紅花色苷的微生物法提取及穩(wěn)定性研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2006，32（8）：139-141.

[6] 劉存瑞，胡喜蘭，曾憲佳，等.天然千日紅色素的穩(wěn)定性研究[J].廣州食品工業(yè)科技，2003，19（4）：62-63.

[7] 陳叢瑾，黎 躍，李 欣.植物揮發(fā)油的提取技術(shù)研究進(jìn)展[J].食品研究與開發(fā)，2011，32（11）：151-157.

[8] 高 梅，潘久香，賈 茹.揮發(fā)油提取方法的研究進(jìn)展[J].生命科學(xué)儀器，2012，20（5）：3-7.

[9] 嚴(yán)綏平，于 蕾，申靜偉，等.陳皮揮發(fā)油成分的氣-質(zhì)聯(lián)用分析及藥理作用研究進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2007，11（3）：57-58.

[10] 王 萍，張銀波，江木蘭.多不飽和脂肪酸的研究進(jìn)展[J].中國油脂，2008，33（12）：42.

[11] 林 杰.不飽和脂肪酸的生理功能及其應(yīng)用進(jìn)展[J].廣東化工，2013，40（6）：92-93.

[12] 張榮燦，王一兵，柯 珂，等.海藻多不飽和脂肪酸研究進(jìn)展[J].食品研究與開發(fā)，2013，34（3）：111-115.

摘要：確定千日紅（Gomphrena gliobosa. L）揮發(fā)油的最佳提取工藝，并分析其化學(xué)成分。采用微波輔助萃取法從千日紅中提取揮發(fā)油，以揮發(fā)油提取率為指標(biāo)，考察萃取時(shí)間、液料比、微波功率等影響因素，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)化千日紅揮發(fā)油提取工藝。通過氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)千日紅揮發(fā)油進(jìn)行分析，用歸一化法測定揮發(fā)油成分的百分含量，再用Wiley和Nist05標(biāo)準(zhǔn)譜庫解析揮發(fā)油成分的結(jié)構(gòu)。千日紅揮發(fā)油最佳提取工藝：料液比為1∶14，萃取時(shí)間為5 h，微波功率為700 W，此工藝條件下，揮發(fā)油提取率達(dá)1.34%。共鑒定了33種成分，占揮發(fā)油總成分的98.19%。為進(jìn)一步開發(fā)利用千日紅提供科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：千日紅（Gomphrena gliobosa. L）；揮發(fā)油；氣質(zhì)聯(lián)用儀

中圖分類號(hào)：O657.7+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）05-1156-03

千日紅（Gomphrena gliobosa. L），又名圓仔花、火球花、千年紅，為石竹目莧科千日紅屬一年生草本植物，是熱帶及亞熱帶常見花卉，具有食用、藥用、保健等功能[1-3]，其性平、味甘，具有清肝、散結(jié)、止咳、定喘等功效[4-5]。千日紅揮發(fā)油的化學(xué)成分尚未見報(bào)道[6]。本研究首次采用微波萃取法（MAE）以揮發(fā)油提取率為指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)優(yōu)化千日紅揮發(fā)油提取工藝[7，8]，結(jié)合氣質(zhì)聯(lián)用儀（GC-MS）對(duì)千日紅揮發(fā)性成分進(jìn)行分析[9]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

Agilent 5973型氣質(zhì)聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）； JH-100A型微波萃取器（南京金海豐微波科技有限公司）；LJ9-XZ-970型旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀（中西遠(yuǎn)大科技公司）；千日紅于2009年3月采購自廣西南寧，經(jīng)遵義醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院楊建文鑒定為石竹目莧科千日紅屬千日紅干燥的花蕾；無水硫酸鈉為分析純。

1.2 方法

1.2.1 微波萃取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 以千日紅揮發(fā)油提取率為考察指標(biāo)，設(shè)計(jì)3因素3水平正交試驗(yàn)，以萃取時(shí)間、液料比、微波功率為因素，每個(gè)因素設(shè)3水平，按L9（34）表安排試驗(yàn)。試驗(yàn)方案見表1。

1.2.2 樣品制備 取干燥藥材9份，每份100 g。按試驗(yàn)方案進(jìn)行微波萃取，經(jīng)適量無水硫酸鈉脫水，過濾，稱重，計(jì)算揮發(fā)油提取率。

1.2.3 氣相色譜條件 DB-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）彈性石英毛細(xì)管柱；采用程序升溫，50 ℃保持5 min，以10 ℃/min升至200 ℃，恒溫5 min，又以5 ℃/min升至250 ℃，恒溫10 min；氣化室溫度為260 ℃；載氣為高純氦氣（純度為99.999%）；載氣流量為1.0 mL/min；進(jìn)樣量為1 μL（正己烷溶液）；分流比為20∶1。

1.2.4 質(zhì)譜條件 離子源為EI源，離子源溫度為230 ℃，四極桿溫度為150 ℃，倍增器電壓為1 994 V，接口溫度為280 ℃，電子能量為70 eV，發(fā)射電流為34.6 μA，溶劑延遲為4 min，質(zhì)量范圍為10～550 amu。

2 結(jié)果與分析

根據(jù)微波萃取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，9批千日紅藥材揮發(fā)油提取率結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。

2.1 正交試驗(yàn)結(jié)果

從正交試驗(yàn)及方差分析可知，三個(gè)因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響大小為：C （萃取時(shí)間） > A （微波功率）> B （液料比），由方差分析結(jié)果表明（表3），萃取時(shí)間對(duì)千日紅揮發(fā)油提取具有顯著性影響，微波功率其次，而液料比影響不顯著。微波萃取法提取千日紅揮發(fā)油的最佳工藝組合為A3B3C2，即微波功率700 W、萃取時(shí)間4.0 h、液料比1∶14。

2.2 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

根據(jù)優(yōu)化條件進(jìn)行微波萃取千日紅樣品，制備3批樣品，測定揮發(fā)油提取率。結(jié)果可靠、穩(wěn)定，見表4。

2.3 GC-MS 分析結(jié)果

取MAE法所得揮發(fā)油3 μL，用GC-MS分析鑒定，共分離出32種成分，見圖1，通過化學(xué)工作站檢索Wiley和Nist05標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫解析，鑒定出其中33個(gè)化合物，其相對(duì)峰面積分別占總峰面積的98.19%。按峰面積歸一化法計(jì)算求得各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對(duì)含量（表5）。

3 小結(jié)與討論

從千日紅中分離出43個(gè)色譜峰，鑒定了33個(gè)化合物，占揮發(fā)油總量的（98.19%）。其中相對(duì)含量較高的成分有棕櫚酸（16.39%）、14-甲基三十二烷（5.85%）、二十七烷（5.82%）， 其余成分含量相對(duì)較低。千日紅含有多種具有生物活性的化學(xué)成分，其揮發(fā)油部分主要含有不飽和脂肪酸成分，不飽和脂肪酸具有多種生理功能，能降低血中膽固醇和甘油三酯、調(diào)節(jié)心臟功能、降低血液黏稠度、改善血液微循環(huán)、提高腦細(xì)胞的活性、增強(qiáng)記憶力和思維能力、增強(qiáng)人體防御系統(tǒng)的功能等[10-12]。

參考文獻(xiàn)：

[1] 蔡連捷，張秀省，黃 勇.千日紅的栽培及利用價(jià)值[J].特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)植物，2002，5（5）：43.

[2] 王自軍，廉宜君.千日紅色素的提取工藝[J].食品研究與開發(fā)，2010，31（1）：47-49.

[3] 王自軍，廉宜君.千日紅色素的提取及穩(wěn)定性研究[J].中藥材，2009，20（7）：1696-1698.

[4] 徐 忠，張海華，王 航.千日紅花色苷的微生物法提取及穩(wěn)定性研究[J].食品科學(xué)，2007，28（7）：125-130.

[5] 徐 忠，薄 凱.千日紅花色苷的微生物法提取及穩(wěn)定性研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2006，32（8）：139-141.

[6] 劉存瑞，胡喜蘭，曾憲佳，等.天然千日紅色素的穩(wěn)定性研究[J].廣州食品工業(yè)科技，2003，19（4）：62-63.

[7] 陳叢瑾，黎 躍，李 欣.植物揮發(fā)油的提取技術(shù)研究進(jìn)展[J].食品研究與開發(fā)，2011，32（11）：151-157.

[8] 高 梅，潘久香，賈 茹.揮發(fā)油提取方法的研究進(jìn)展[J].生命科學(xué)儀器，2012，20（5）：3-7.

[9] 嚴(yán)綏平，于 蕾，申靜偉，等.陳皮揮發(fā)油成分的氣-質(zhì)聯(lián)用分析及藥理作用研究進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2007，11（3）：57-58.

[10] 王 萍，張銀波，江木蘭.多不飽和脂肪酸的研究進(jìn)展[J].中國油脂，2008，33（12）：42.

[11] 林 杰.不飽和脂肪酸的生理功能及其應(yīng)用進(jìn)展[J].廣東化工，2013，40（6）：92-93.

[12] 張榮燦，王一兵，柯 珂，等.海藻多不飽和脂肪酸研究進(jìn)展[J].食品研究與開發(fā)，2013，34（3）：111-115.

摘要：確定千日紅（Gomphrena gliobosa. L）揮發(fā)油的最佳提取工藝，并分析其化學(xué)成分。采用微波輔助萃取法從千日紅中提取揮發(fā)油，以揮發(fā)油提取率為指標(biāo)，考察萃取時(shí)間、液料比、微波功率等影響因素，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)化千日紅揮發(fā)油提取工藝。通過氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)千日紅揮發(fā)油進(jìn)行分析，用歸一化法測定揮發(fā)油成分的百分含量，再用Wiley和Nist05標(biāo)準(zhǔn)譜庫解析揮發(fā)油成分的結(jié)構(gòu)。千日紅揮發(fā)油最佳提取工藝：料液比為1∶14，萃取時(shí)間為5 h，微波功率為700 W，此工藝條件下，揮發(fā)油提取率達(dá)1.34%。共鑒定了33種成分，占揮發(fā)油總成分的98.19%。為進(jìn)一步開發(fā)利用千日紅提供科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：千日紅（Gomphrena gliobosa. L）；揮發(fā)油；氣質(zhì)聯(lián)用儀

中圖分類號(hào)：O657.7+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）05-1156-03

千日紅（Gomphrena gliobosa. L），又名圓仔花、火球花、千年紅，為石竹目莧科千日紅屬一年生草本植物，是熱帶及亞熱帶常見花卉，具有食用、藥用、保健等功能[1-3]，其性平、味甘，具有清肝、散結(jié)、止咳、定喘等功效[4-5]。千日紅揮發(fā)油的化學(xué)成分尚未見報(bào)道[6]。本研究首次采用微波萃取法（MAE）以揮發(fā)油提取率為指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)優(yōu)化千日紅揮發(fā)油提取工藝[7，8]，結(jié)合氣質(zhì)聯(lián)用儀（GC-MS）對(duì)千日紅揮發(fā)性成分進(jìn)行分析[9]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

Agilent 5973型氣質(zhì)聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）； JH-100A型微波萃取器（南京金海豐微波科技有限公司）；LJ9-XZ-970型旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀（中西遠(yuǎn)大科技公司）；千日紅于2009年3月采購自廣西南寧，經(jīng)遵義醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院楊建文鑒定為石竹目莧科千日紅屬千日紅干燥的花蕾；無水硫酸鈉為分析純。

1.2 方法

1.2.1 微波萃取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 以千日紅揮發(fā)油提取率為考察指標(biāo)，設(shè)計(jì)3因素3水平正交試驗(yàn)，以萃取時(shí)間、液料比、微波功率為因素，每個(gè)因素設(shè)3水平，按L9（34）表安排試驗(yàn)。試驗(yàn)方案見表1。

1.2.2 樣品制備 取干燥藥材9份，每份100 g。按試驗(yàn)方案進(jìn)行微波萃取，經(jīng)適量無水硫酸鈉脫水，過濾，稱重，計(jì)算揮發(fā)油提取率。

1.2.3 氣相色譜條件 DB-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）彈性石英毛細(xì)管柱；采用程序升溫，50 ℃保持5 min，以10 ℃/min升至200 ℃，恒溫5 min，又以5 ℃/min升至250 ℃，恒溫10 min；氣化室溫度為260 ℃；載氣為高純氦氣（純度為99.999%）；載氣流量為1.0 mL/min；進(jìn)樣量為1 μL（正己烷溶液）；分流比為20∶1。

1.2.4 質(zhì)譜條件 離子源為EI源，離子源溫度為230 ℃，四極桿溫度為150 ℃，倍增器電壓為1 994 V，接口溫度為280 ℃，電子能量為70 eV，發(fā)射電流為34.6 μA，溶劑延遲為4 min，質(zhì)量范圍為10～550 amu。

2 結(jié)果與分析

根據(jù)微波萃取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，9批千日紅藥材揮發(fā)油提取率結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。

2.1 正交試驗(yàn)結(jié)果

從正交試驗(yàn)及方差分析可知，三個(gè)因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響大小為：C （萃取時(shí)間） > A （微波功率）> B （液料比），由方差分析結(jié)果表明（表3），萃取時(shí)間對(duì)千日紅揮發(fā)油提取具有顯著性影響，微波功率其次，而液料比影響不顯著。微波萃取法提取千日紅揮發(fā)油的最佳工藝組合為A3B3C2，即微波功率700 W、萃取時(shí)間4.0 h、液料比1∶14。

2.2 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

根據(jù)優(yōu)化條件進(jìn)行微波萃取千日紅樣品，制備3批樣品，測定揮發(fā)油提取率。結(jié)果可靠、穩(wěn)定，見表4。

2.3 GC-MS 分析結(jié)果

取MAE法所得揮發(fā)油3 μL，用GC-MS分析鑒定，共分離出32種成分，見圖1，通過化學(xué)工作站檢索Wiley和Nist05標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫解析，鑒定出其中33個(gè)化合物，其相對(duì)峰面積分別占總峰面積的98.19%。按峰面積歸一化法計(jì)算求得各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對(duì)含量（表5）。

3 小結(jié)與討論

從千日紅中分離出43個(gè)色譜峰，鑒定了33個(gè)化合物，占揮發(fā)油總量的（98.19%）。其中相對(duì)含量較高的成分有棕櫚酸（16.39%）、14-甲基三十二烷（5.85%）、二十七烷（5.82%）， 其余成分含量相對(duì)較低。千日紅含有多種具有生物活性的化學(xué)成分，其揮發(fā)油部分主要含有不飽和脂肪酸成分，不飽和脂肪酸具有多種生理功能，能降低血中膽固醇和甘油三酯、調(diào)節(jié)心臟功能、降低血液黏稠度、改善血液微循環(huán)、提高腦細(xì)胞的活性、增強(qiáng)記憶力和思維能力、增強(qiáng)人體防御系統(tǒng)的功能等[10-12]。

參考文獻(xiàn)：

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