劉振偉 劉文正 刁蓓蓓

（江蘇省徐州市銅山區(qū)禽病門診部 江蘇 徐州 221009）

一段時間以來徐州周邊不少鴨、鵝養(yǎng)殖戶所飼養(yǎng)的鴨、鵝出現(xiàn)了以翻身、癱瘓、頭頸強直和關(guān)節(jié)腫脹等神經(jīng)癥狀明顯且死亡率較高的疾病病例。通過門診解剖可發(fā)現(xiàn)如下病變：硬膜下積液，腦軟化，少數(shù)病例伴隨化膿性腦炎，多數(shù)病例可見腦實質(zhì)呈現(xiàn)針尖或點片狀出血，肝臟腫脹質(zhì)脆易爛，少數(shù)病例有肝周炎、氣囊炎現(xiàn)象，有些病例出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹同時伴隨關(guān)節(jié)腔積液明顯。對此，筆者取病禽的肝臟和腦組織以及關(guān)節(jié)腔積液等，在化驗室進行了細菌純培養(yǎng)和藥敏試驗。通過鏡檢和生化試驗后發(fā)現(xiàn)大多數(shù)病例均為葡萄球菌感染，在藥敏試驗的基礎(chǔ)上經(jīng)過治療多數(shù)病例取得了較好的療效?，F(xiàn)將化驗與處理結(jié)果報道如下。

1 病料采集

在江蘇徐州、山東棗莊及安徽蕭縣等地區(qū)養(yǎng)殖戶送檢病禽中，采取患禽和病死禽的肝臟及腦組織及關(guān)節(jié)腔積液在普通瓊脂培養(yǎng)基和血液培養(yǎng)基中培養(yǎng)并做進一步鑒別。

2 培養(yǎng)基制備

原料包括：蛋白質(zhì)5g、牛肉浸膏10g、氯化鈉15g，磷酸二氫鉀10g、瓊脂 20g，蒸餾水 1000mL、調(diào)節(jié)p H值至7.2～7.4，在120℃條件下維持20分鐘滅菌備用。

3 實驗儀器的準(zhǔn)備

高倍顯微鏡一臺、擦鏡紙一本、玻片數(shù)個、手術(shù)剪刀、無菌鑷子、酒精燈、接種棒、細菌培養(yǎng)箱、革蘭氏染色試劑、染色架和染缸等。

4 選取藥敏試驗藥品

腸舒福友、綠卡、磺天霸、安力素、再林、林可欣、倍能、優(yōu)多邦和力生康。

5 生化試劑的準(zhǔn)備

細菌生化鑒定管及相應(yīng)試劑（批號201200322）為杭州微生物試劑有限公司產(chǎn)品。

6 試驗方法與試驗步驟

6.1 細菌的培養(yǎng)

將已采集的病死禽肝臟、腦組織、心血及關(guān)節(jié)腔積液等分別接種于不同的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或鮮血培養(yǎng)基中，通過培養(yǎng)箱37℃10小時的培養(yǎng)，見有典型菌落長出。

6.2 細菌的鑒定

6.2.1 菌落鑒定

菌落生長形態(tài)在普通營養(yǎng)瓊脂平板上表現(xiàn)為典型的金黃色菌落，厚且有光澤，圓形凸起，直徑在0.5～1mm。采取菌體再次畫線接種于血平板放置37℃培養(yǎng)箱中做進一步鑒別培養(yǎng)，10小時后發(fā)現(xiàn)菌落生長形態(tài)在血平板菌落周圍形成透明的溶血環(huán)。

6.2.2 顯微鏡鑒定

從平板上挑取上述典型可疑菌進行革蘭氏染色，在高倍鏡下觀察呈革蘭氏染色陽性，菌體形態(tài)表現(xiàn)為葡萄狀排列，無芽孢、莢膜特征，符合金黃色葡萄球菌的形態(tài)特性。

6.2.3 生化鑒定

挑取具有典型的金黃色有透明溶血環(huán)菌落的菌體接種于不同的生化反應(yīng)管，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24小時后發(fā)現(xiàn)葡萄糖、麥芽糖、乳糖和蔗糖皆被分解，且顏色均為紫紅色。甲基紅反應(yīng)陽性，V P反應(yīng)弱陽性。多數(shù)菌株可分解精氨酸，水解尿素，還原硝酸鹽，液化明膠等均符合金黃色葡萄球菌特性。

6.3 藥敏試驗

6.3.1 藥敏片的制作

無菌操作量取上述藥敏試驗藥品,然后按照藥品使用說明將藥品稀釋為相應(yīng)濃度，再將藥敏試驗濾紙放于不同稀釋液中充分浸泡，待濾紙充分吸附藥液后放置恒溫箱中50℃烘干備用。

6.3.2 藥敏試驗

在無菌操作下將做好的藥敏試紙貼于涂布細菌的培養(yǎng)皿上，放置培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)10個小時后抑菌圈出現(xiàn)，量取藥敏片抑菌圈直徑大小，判定抑菌作用的強弱。

表1 20個金黃色葡萄球菌分離株藥敏實驗結(jié)果(mm)

7 分析討論

金黃色葡萄球菌的致病性菌株分布范圍廣且有較強的季節(jié)性與危害性，本次試驗從徐州周邊地區(qū)不同養(yǎng)殖場中均分離到了上述菌株。通過對不同病例的分析發(fā)現(xiàn)，門診病例中有神經(jīng)癥狀的鴨、鵝病例多數(shù)為金黃色葡萄球菌引起。經(jīng)過投服藥敏試驗的高敏藥物后發(fā)病禽群均取得了較好的療效。對發(fā)病禽群同時加強飼養(yǎng)管理并喂服充足的維生素制劑能夠更好地控制疫病的蔓延并減少損失。