陳 梅（連云港市第一人民醫(yī)院藥學(xué)部，江蘇 連云港 222001）

混合性陰道炎是指陰道受多種病菌（如細(xì)菌、霉菌等）、原蟲（如滴蟲）侵襲造成陰道菌群失調(diào)而引起的炎癥性病變。臨床實(shí)踐證明，由單純某一種病原引起的陰道炎極少，多屬于混合感染，因此臨床表現(xiàn)各異、輕重不同[1]。由于陰道炎患病部位的特殊性，局部給藥可提高藥物作用濃度，并避免全身用藥的不良反應(yīng)，治療效果好。陰道泡騰栓在陰道吸水發(fā)泡后，藥物可迅速分散到陰道的各個(gè)部位，深達(dá)子宮頸，與同等劑量的口服劑型相比療效更佳，成為治療該疾病的常用劑型[2]。氟羅沙星（Fleroxacin）是第三代氟喹諾酮類抗菌藥物，具有抗菌譜廣、抗菌力強(qiáng)、半衰期長等優(yōu)點(diǎn)，是控制呼吸、泌尿、生殖系統(tǒng)感染的有效藥物[3]；替硝唑則對滴蟲和大多數(shù)厭氧菌有抑制或殺滅作用，且有研究證明替硝唑與氟喹諾酮類抗菌藥物配伍非常穩(wěn)定[4]。因此，筆者根據(jù)臨床常用劑量采用上述兩種藥物制成了復(fù)方氟替陰道泡騰栓，并探討了制備工藝和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料

1.1 儀器

1100型高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；電熱恒溫水浴箱（江蘇常熟醫(yī)療器械廠）。

1.2 藥品與試劑

氟羅沙星對照品、替硝唑?qū)φ掌罚ㄖ袊称匪幤窓z定研究院，批號:201209、120801，純度:99.8%、99.5%）；氟羅沙星原料藥（青島制藥股份有限公司，批號:120801，純度:99.3%）；替硝唑原料藥（天津天藥藥業(yè)股份有限公司，批號:121102，純度:99.7%）；半合成脂肪酸甘油三酯（湖北江陵制藥廠，批號:120191，純度:99.0%）；其他輔料均為藥用級，試劑均為分析純。

1.3 動(dòng)物

家兔，♀，體質(zhì)量250～300 g，由江蘇綠葉制藥有限公司提供，許可證號:SCXK（蘇）2011-0011。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方

氟羅沙星200 g，替硝唑500 g，碳酸氫鈉216 g，酒石酸氫鉀380 g，聚山梨酯8020 ml，月桂氮酮3 ml，半合成脂肪酸甘油三酯適量，共制成1000粒。

2.2 制備

取碳酸氫鈉于60℃下干燥2 h、酒石酸氫鉀于105℃下干燥3 h，研細(xì)，過6號篩備用；取半合成脂肪酸甘油三酯適量，置搪瓷桶內(nèi)，經(jīng)水浴加熱融化后加入氟羅沙星和替硝唑（100目細(xì)粉）攪勻，再加入聚山梨酯80、月桂氮酮，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笞⑷胨?nèi)（溫度40℃，栓模內(nèi)均勻涂抹潤滑劑），待栓劑凝結(jié)后鏟去溢出部分，啟模，包裝即可。每粒含氟羅沙星0.2 g、替硝唑0.5 g，共制備3批，批號為20130520、20130525、20130530。

2.3 質(zhì)量控制

2.3.1 外觀性狀。本品為淡黃色圓錐形，長約30 mm，最大直徑約為15 mm，栓殼厚度約為3 mm，表面光滑細(xì)膩、色澤均一。

2.3.2 鑒別。在含量測定項(xiàng)下，樣品溶液主峰的保留時(shí)間分別與氟羅沙星對照品溶液和替硝唑?qū)φ掌啡芤褐鞣宓谋Ａ魰r(shí)間一致。

2.3.3 檢查[5]。（1）質(zhì)量差異:取泡騰栓10粒，精密稱量并計(jì)算出平均粒質(zhì)量，參照2010年版《中國藥典》附錄質(zhì)量差異檢查法，將每粒泡騰栓質(zhì)量與平均粒質(zhì)量進(jìn)行比較，其質(zhì)量差異在±7.5%以內(nèi)。（2）融變時(shí)限:取泡騰栓3粒，參照2010年版《中國藥典》附錄“融變時(shí)限檢查法”檢查，結(jié)果本品在25 min內(nèi)全部融化，符合規(guī)定。（3）發(fā)泡量:按2010年版《中國藥典》附錄ⅠA陰道泡騰片的相關(guān)內(nèi)容檢測發(fā)泡時(shí)間和發(fā)泡量。取直徑約為1.5 cm的20 ml量筒，加入蒸餾水1 ml，置（40±2）℃水浴中5 min后，加入本品1粒，測得本品平均起始發(fā)泡時(shí)間為4.6 min，平均發(fā)泡量為（15±2.5）ml，符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

2.4 含量測定

2.4.1 檢測波長的選擇。精密稱取氟羅沙星、替硝唑、空白輔料（栓劑基質(zhì)）適量，分別用甲醇-二氯甲烷（1∶1）溶解，配制替硝唑溶液（8.0 μg/ml）、氟羅沙星溶液（20.0 μg/ml）及空白輔料溶液，分別在200～600 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。結(jié)果顯示，空白輔料不干擾氟羅沙星和替硝唑的吸收；最大吸收波長氟羅沙星為288 nm，替硝唑?yàn)?12.5 nm。分別以上述波長對本復(fù)方制劑進(jìn)行測定，結(jié)果288 nm波長檢測時(shí)靈敏度較高，故選擇其作為同時(shí)測定兩種主藥含量的檢測波長[6]。

2.4.2 色譜條件。色譜柱為Zorbax SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為0.05 mol檸檬酸-乙腈（65∶35，用三乙胺調(diào)pH至4.0），流速為1 ml/min；檢測波長為288 nm；進(jìn)樣量為20 μl。取空白輔料、氟羅沙星和替硝唑的對照品溶液、供試品溶液（批號:20130520）進(jìn)樣測定，色譜見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.空白輔料；B.對照品溶液；C.供試品溶液；1.氟羅沙星；2.替硝唑Fig 1 HPLC chromatogramsA.blank excipients；B.reference solution；C.sample solution；1.fleroxacin；2.tinidazole

由圖1可知，空白輔料對樣品測定無干擾，氟羅沙星與替硝唑峰分離完全，峰形良好，氟羅沙星、替硝唑的保留時(shí)間分別為3.80、4.95 min。

2.4.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。精密稱取105℃干燥至恒質(zhì)量后的氟羅沙星50 mg、替硝唑100 mg，分別置于100 ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，再精密量取1、2、3、4、5、6、8 ml，分別置于50 ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻。取20 μl進(jìn)樣測定，以峰面積（A）為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度（c）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得氟羅沙星、替硝唑的回歸方程為:A＝46052.1c+203051.7（r＝0.9986）、A＝30407.1c+75032.5（r＝0.9994），檢測質(zhì)量濃度的線性范圍分別為10.0～80.0、20.0～160.0 μg/ml。

2.4.4 精密度試驗(yàn)。取“2.4.3”項(xiàng)下質(zhì)量濃度為80.0 μg/ml的氟羅沙星對照品溶液和120.0 μg/ml的替硝唑?qū)φ掌啡芤?，按?.4.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測定6次，結(jié)果氟羅沙星和替硝唑峰面積的RSD分別為0.48%和0.63%（n＝6），表明該方法精密度良好。

2.4.5 回收率試驗(yàn)。按處方比例分別精密稱取氟羅沙星、替硝唑和空白輔料，按“2.1”和“2.2”項(xiàng)下方法制備成80%、100%、120%3種水平的復(fù)方氟替陰道泡騰栓；按“2.4.6”項(xiàng)下方法制成供試品溶液，各取樣20 μl進(jìn)樣，測定峰面積，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝3）Tab 1 Results of recovery tests（n＝3）

2.4.6 樣品含量測定。取泡騰栓10粒，水浴加熱熔化，混勻，冷卻，切碎，精密稱取適量（約含氟羅沙星20 mg、替硝唑50 mg），置于50 ml量瓶中，水浴將樣品熔融，加入流動(dòng)相適量使其完全溶解，定容至50 ml；精密吸取1 ml，用流動(dòng)相稀釋并定容至50 ml。取樣20 μl進(jìn)樣，測定峰面積，代入回歸方程計(jì)算含量。結(jié)果3批樣品中氟羅沙星含量分別為標(biāo)示量的97.35%、102.38%、98.52%；替硝唑含量分別為標(biāo)示量的98.55%、101.27%、99.83%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

將制成的復(fù)方氟替陰道泡騰栓分別于5、25、35℃下放置0、30、60、90 d，留樣期間對其外觀性狀、融變時(shí)限、發(fā)泡量、含量等指標(biāo)進(jìn)行觀察、測定。結(jié)果顯示，與0 d比較，該泡騰栓的上述指標(biāo)均無明顯變化，初步表明在觀察期內(nèi)樣品相對穩(wěn)定。

2.6 陰道刺激性試驗(yàn)

取♀家兔6只，均分為2組，一組兔每天陰道給予復(fù)方氟替陰道泡騰栓1枚，每日1次，連續(xù)給藥7 d，末次給藥后24 h內(nèi)處死家兔，觀察所有家兔陰道及子宮黏膜組織的變化；另一組兔給予0.9%氯化鈉注射液作為對照組，同法操作。結(jié)果顯示，與對照組比較，給藥家兔的陰道及子宮黏膜組織均未見紅腫現(xiàn)象，初步認(rèn)為本品局部用藥對陰道無明顯刺激性。

3 討論

復(fù)方氟替陰道泡騰栓是根據(jù)女性生理特點(diǎn)研制的一種陰道泡騰栓劑。氟羅沙星為第三代喹諾酮類藥物，具有廣譜抗菌作用，替硝唑?qū)Φ蜗x和厭氧菌的活性很強(qiáng)，二者聯(lián)合用于陰道炎治療中，可發(fā)揮藥物協(xié)同作用，提高治療效果[7]。本研究結(jié)果顯示，所制復(fù)方氟替陰道泡騰栓留樣觀察90 d，外觀顏色無變化，融變時(shí)限、發(fā)泡量、含量等指標(biāo)穩(wěn)定，提示復(fù)方氟替陰道泡騰栓質(zhì)量穩(wěn)定。

綜上所述，復(fù)方氟替陰道泡騰栓處方合理、制備工藝簡便、質(zhì)量穩(wěn)定可控，是治療混合性陰道炎較好的劑型，其臨床作用值得進(jìn)一步研究。

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