蔡恒洋
【摘要】微生物臨床檢驗(yàn)是一門(mén)實(shí)踐操作性很強(qiáng)的學(xué)科。為了能夠得到快速而準(zhǔn)確臨床診斷結(jié)果,必須從標(biāo)本采集、標(biāo)本驗(yàn)收、顯微鏡檢查、藥敏試驗(yàn)各個(gè)環(huán)節(jié)嚴(yán)格把關(guān),不斷提高微生物檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用技術(shù)水平。
【關(guān)鍵詞】微生物;檢驗(yàn);細(xì)菌學(xué)
微生物臨床檢驗(yàn)是一門(mén)實(shí)踐操作性很強(qiáng)的學(xué)科。隨著醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的進(jìn)步發(fā)展,微生物檢驗(yàn)人員除了要具備扎實(shí)的醫(yī)學(xué)理論知識(shí),還必須積累豐富的實(shí)踐操作經(jīng)驗(yàn),與臨床密切結(jié)合,確保能夠得到快速而準(zhǔn)確的診斷結(jié)果。本文將結(jié)合多年工作經(jīng)驗(yàn),對(duì)微生物檢驗(yàn)在臨床上的應(yīng)用問(wèn)題進(jìn)行了總結(jié),現(xiàn)匯報(bào)如下。1標(biāo)本采集
標(biāo)本采集是在微生物檢驗(yàn)工作的第一步。如果這項(xiàng)工作沒(méi)有做好,以后所做的一切都是在浪費(fèi)精力,甚至?xí)`導(dǎo)的臨床用藥。在臨床上標(biāo)本提交量最多的有血液、尿液、糞便、痰、膿等。每種標(biāo)本的采集應(yīng)嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)采集程序。
1.1血液標(biāo)本血液標(biāo)本通常在臨床醫(yī)生對(duì)患者使用抗生素前或停藥24h后采集。成人應(yīng)采血量為8-10ml,兒童為1-5ml,并24h內(nèi)于不同部分采集2-3份血樣。對(duì)于一些特定疾病,如間歇寒戰(zhàn)或發(fā)燒患者,在體溫峰值來(lái)前0.5-1h前或寒戰(zhàn)發(fā)熱后1h采血2份以上。對(duì)有疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎的患者,在1-2h內(nèi)采集3份標(biāo)本,24h陰性時(shí)再采集了三個(gè)以上的血液樣本。
1.2尿液標(biāo)本患者睡前少飲水,最好是留取晨尿中段的標(biāo)本。采集前女性用手分開(kāi)大陰唇,男性要翻上包皮,用肥皂仔細(xì)清洗會(huì)陰部,然后再水沖洗尿道周?chē)H?0-20ml的中段尿液到無(wú)菌容器中。
1.3糞便標(biāo)本實(shí)際工作中收集糞便標(biāo)本經(jīng)常使用棉花棒。其實(shí)這是一個(gè)非常不科學(xué)的做法。因?yàn)榭偸菚?huì)吸附有大量的有效成分,包括細(xì)菌、白細(xì)胞、原蟲(chóng)卵等,使細(xì)菌培養(yǎng)的陽(yáng)性率大大降低。因此,應(yīng)告知患者收集顏色和性狀比較獨(dú)特糞便標(biāo)本直接放到無(wú)菌容器中。
1.4痰標(biāo)本在醫(yī)生給予抗生素治療前或停藥24h后采集標(biāo)本?;颊咴缟舷扔盟?-3次,取由深部咳出的第2口痰,用無(wú)菌容器封裝。
1.5膿汁標(biāo)本采集標(biāo)本可分為內(nèi)源性和外源性。內(nèi)源性標(biāo)本可以取病理切片在無(wú)菌操作條件下進(jìn)行;外源性標(biāo)本則一定要取膿腫部位深部的膿液標(biāo)本。
注:各種標(biāo)本的采集量不應(yīng)過(guò)少,而且要具有代表性,同時(shí)有些標(biāo)本還要注意不同時(shí)間采集不同部位標(biāo)本。如腸熱癥患者,發(fā)病的第一周應(yīng)采集血液,第二周應(yīng)采集糞便和尿液,否則影響細(xì)菌檢出率。2標(biāo)本驗(yàn)收
2.1血液標(biāo)本重點(diǎn)關(guān)注血量要符合要求,且未受到污染或有泄漏、破裂等情況。
2.2尿液標(biāo)本特別注意無(wú)菌容器塞是否緊固或被尿液浸泡。
2.3糞便標(biāo)本主要留意其顏色、性質(zhì)。若容器外有糞便可能導(dǎo)致標(biāo)本被污染,應(yīng)要求患者重新采集。
2.4痰標(biāo)本可采用直接涂片或涂片革蘭染色鏡檢查。痰涂片鏡檢的合格標(biāo)準(zhǔn)是:WBC>25個(gè)/低倍鏡視野,鱗狀上皮細(xì)胞<10個(gè)/低倍鏡視野。
2.5膿汁標(biāo)本根據(jù)臨床需要采集,無(wú)菌送檢。3顯微鏡檢查
對(duì)驗(yàn)收后標(biāo)本進(jìn)行革蘭染色,一方面能夠掌握采集標(biāo)本的質(zhì)量,以確定是否要對(duì)其培養(yǎng)或是另外重新留取標(biāo)本;另一方面,通過(guò)鏡檢可初步對(duì)某些細(xì)菌作出分類(lèi)。也就是說(shuō),首先實(shí)施對(duì)原始標(biāo)本染色和非染色涂片的顯微鏡檢查,對(duì)下一步檢驗(yàn)工作做出方向性的判斷。男性尿道和女性尿道分泌物涂片經(jīng)革蘭染色后,若發(fā)現(xiàn)白血細(xì)胞內(nèi)部或外部有革蘭陰性雙球菌,是初步診斷為淋病的重要依據(jù);糞便中的球桿菌比例檢查,對(duì)腸道菌群失調(diào)的診斷具有重要的幫助;痰液,胸腔積液涂片抗酸染色檢驗(yàn)抗酸桿菌,對(duì)肺結(jié)核的診斷具有十分重要的意義。4藥敏試驗(yàn)
在我國(guó)住院患者中約有80%的患者接受抗生素治療,其中根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇抗生素的患者僅占14%,也就是說(shuō)約有86%的患者是根據(jù)醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)給予抗生素治療的。因此,檢驗(yàn)人員必須快速做出藥敏試驗(yàn)結(jié)果以滿(mǎn)足臨床的需要。在進(jìn)行試驗(yàn)時(shí),可直接將臨床標(biāo)本接種于平板,用抗生素紙片作藥物敏感性試驗(yàn),在18-24h內(nèi)可獲得結(jié)果,這樣能提前得到了藥敏結(jié)果報(bào)告,為患者爭(zhēng)取更多的治療時(shí)機(jī)。對(duì)細(xì)菌的分離應(yīng)配套使用培養(yǎng)基,以避免出現(xiàn)漏檢的情況。這樣可以在2h內(nèi)得到直接涂片所見(jiàn),24h初步報(bào)告可能的病原菌和直接藥敏的結(jié)果,細(xì)菌的最后鑒定結(jié)果和藥敏試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)在72h之內(nèi)報(bào)告完畢(血培養(yǎng)除外)。
總之,微生物檢驗(yàn)的結(jié)果為臨床診斷提供了重要的參考依據(jù)。只有通過(guò)廣大檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)人員長(zhǎng)期、大量、細(xì)致的工作,才能不斷提高檢驗(yàn)質(zhì)量,為臨床診斷治療和患者的早日康復(fù)做好服務(wù)。
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