姜大棟　趙大磊

【摘要】目的對(duì)2013年轄區(qū)一起混合感染食物中毒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。方法按照中華人民共和國衛(wèi)生部頒發(fā)的《食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)方法》GB/T4789-2010，WS/T9-1996進(jìn)行。采集食物中毒旅游者的肛拭子12份、剩余食物10份及砧板、刀涂抹物各6份等樣品進(jìn)行檢測。結(jié)果12份肛拭子檢出副溶血弧菌7份占58.33%、檢出奇異變形桿菌5份占41.67%，其中同時(shí)檢出副溶血弧菌和奇異變形桿菌3份占25%，10份剩余食物有1份檢出副溶血弧菌占10%，1份檢出變形桿菌占10%，環(huán)境樣品未檢出致病菌。結(jié)論該次食物中毒是由副溶血弧菌和變形桿菌混合引起的感染。

【關(guān)鍵詞】混合性食物中毒；副溶血性孤茵；奇異變形桿菌

1流行病學(xué)調(diào)查

患者均在2013年9月7日12時(shí)進(jìn)食了由我轄區(qū)某旅游定點(diǎn)餐廳提供的食品，到18時(shí)30分有人首先出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、水樣便和頭暈頭痛癥狀，到8日5時(shí)共有12人主訴出現(xiàn)同樣的中毒癥狀。本次同餐進(jìn)食人數(shù)54人，發(fā)病人數(shù)12人，潛伏期最短6.5h，最長17h，中毒者臨床表現(xiàn)基本相似，主要表現(xiàn)為：腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐、頭暈、頭痛。經(jīng)過抗菌素、補(bǔ)液等治療，中毒者病情均得以有效控制，無死亡病例。2實(shí)驗(yàn)室檢測準(zhǔn)備

2.1材料和儀器營養(yǎng)肉湯、3%氯化鈉堿性凍水、7.5%氯化鈉肉湯、GN增菌液、SC增菌液，志和菌增菌肉湯等所用干粉培養(yǎng)基由北京路橋技術(shù)有限公司購買，API條由法國梅里埃公司生產(chǎn)。沙門氏等血清由寧波天潤生物藥業(yè)有限公司購買。溫箱為上海新苗GNP-9270B5-II型，生化培養(yǎng)箱為上海一恒BPC-150F生化培養(yǎng)箱。

2.2檢測方法按食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)方法《GB/T4789-2010》和《變形桿菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)和處理原》樣本進(jìn)行致病菌的分離培養(yǎng)。3實(shí)驗(yàn)室檢測過程

3.1檢測項(xiàng)目采集的樣品送檢驗(yàn)室進(jìn)行下列項(xiàng)目檢測：副溶血性弧菌、沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、致瀉大腸埃希氏菌、蠟樣芽孢桿菌。

3.2檢測步驟及結(jié)果

3.2.1增菌與分離培養(yǎng)樣品接種營養(yǎng)肉湯、3%氯化鈉堿性凍水、7.5%氯化鈉肉湯、GN增菌液、SC增菌液，志和菌增菌肉湯，經(jīng)37℃18h-24h增菌，然后轉(zhuǎn)種于TCBS副溶血性弧菌平板、SS瓊脂平板、Baird—parker+兔血漿平板、XLD平板、麥康凱平板、血平板、MYP、HE平板、普通營養(yǎng)瓊脂平板，按照國家標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)，并挑取可疑菌落作革蘭氏染色鏡檢。結(jié)果有6份樣品在SS平板、麥康凱平板、HE平板上可見菌落呈圓形、扁薄、半透明中等大小、菌落中央帶黑色，同時(shí)在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上形成一層波紋薄膜，有遷徙生長現(xiàn)象，且培養(yǎng)物有特殊臭味，在血平板上有溶血現(xiàn)象，疑似變形桿菌；有8份樣品在副溶血性弧菌平板上菌落呈現(xiàn)為隆起，圓形，稍混濁不透明，表面光滑，濕潤，呈淡藍(lán)或藍(lán)綠色菌落，疑似副溶血性弧菌。其他樣品培養(yǎng)，無典型現(xiàn)象。

3.2.2副溶血弧菌分離到8株副溶血弧菌，顯微鏡檢均為革蘭陰性無芽孢短小桿菌，在TCBS平板有典型性生長，O%含鹽胨水陰性10%含鹽胨水陰性不生長、3%含鹽胨水陽性、7%含鹽胨水陽性胨水中生長良好；在三糖鐵斜面可疑者即底層變黃（葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣）、上層斜面不變（乳糖、蔗糖不分解）、氧化酶反應(yīng)陽性、有動(dòng)力。經(jīng)3%氯化鈉胰蛋白胨純培養(yǎng)進(jìn)行APl20E是生化鑒定結(jié)果，見表1。

4分析

近年來，由多種病原菌混合感染引起的食物中毒事件呈上升趨勢。從流行病學(xué)、臨床表現(xiàn)、現(xiàn)場衛(wèi)生學(xué)調(diào)查來看，這次事件具有共同的進(jìn)餐史，發(fā)病的潛伏期較短，發(fā)病時(shí)間相對(duì)集中，患者臨床表現(xiàn)相似，病人經(jīng)過抗菌素、補(bǔ)液等治療，病情均得以有效控制，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢出奇異變形桿菌及副溶血性弧菌等結(jié)果，可以判斷此次食物中毒是由于變形桿菌及副溶血性弧菌混合污染引起的。奇異變形桿菌常存在于人和動(dòng)物腸道中，同時(shí)也廣泛分布，水、土壤、腐敗有機(jī)物中，變形桿菌只有污染食品大量繁殖被人攝食后，才會(huì)引起食物中毒[1]。主要食品是動(dòng)物性食品，特別是熟肉以及內(nèi)臟的熟制品，熟制品被變形桿菌污染通常無感觀形狀的變化。此次剩余鹵肉食品變形桿菌計(jì)數(shù)含菌量為1.0×107cfu/g，并且與大部分病人檢出的奇異變形菌為同型菌，說明是由于鹵肉食品中變形桿菌的污染和大量繁殖引發(fā)食物中毒。副溶血性弧菌為海洋性細(xì)菌，廣泛分布于海水、魚貝類中，為海產(chǎn)食品中引起急性胃腸炎的重要病原菌之一[2]，環(huán)境樣品沒有檢出，可能是因?yàn)闄z測的環(huán)境樣品經(jīng)餐飲單位過處理緣故。本地區(qū)屬于沿海地區(qū)，此次食物中毒事件中，有7位病人肛拭子及l(fā)份食品樣中檢出了副溶血性弧菌，說明副溶血性弧菌的污染是食物中毒的致病菌，神奈川（kanagawa）試驗(yàn)顯示8株檢出的副溶血性弧菌都有溶血現(xiàn)象，說明這些菌株具有致病性溶血。通過此次事件發(fā)現(xiàn)該餐廳消毒設(shè)施較差，廚師衛(wèi)生意識(shí)淡薄，容易發(fā)生交叉感染。加之7，8，9月份，本地區(qū)氣溫溫暖，海產(chǎn)品中的副溶血性弧菌易污染其他食物，變形桿菌也極易繁殖污染食品。通過此次調(diào)查建議衛(wèi)生監(jiān)督部門應(yīng)加強(qiáng)餐館衛(wèi)生監(jiān)督管理和衛(wèi)生知識(shí)的宣傳教育，加大執(zhí)法力度，為飲食安全提供可靠保障。

參考文獻(xiàn)

[1]張卓然.臨床微生物學(xué)和微生物檢驗(yàn)[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004.

[2]林云萬，鄧桂麗，李孝權(quán)，等.一起由副溶血性弧菌引起的食物中毒的實(shí)驗(yàn)室檢測[J].