洪徐鵬　段燕君　周佳楠　初夢(mèng)琪　陳紹堅(jiān)　許丹

摘要近年來(lái)微生態(tài)制劑被廣泛用于水產(chǎn)養(yǎng)殖，在改善水質(zhì)、提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫力、促進(jìn)生長(zhǎng)、減少病害發(fā)生等方面均有應(yīng)用。微生態(tài)制劑高效、環(huán)保、無(wú)毒副作用，符合水產(chǎn)養(yǎng)殖可持續(xù)發(fā)展的要求。綜述了近年來(lái)國(guó)內(nèi)外在微生態(tài)制劑中的益生菌、益生元、合生素等在改善水產(chǎn)動(dòng)物免疫力方面的研究與應(yīng)用進(jìn)展，并對(duì)微生態(tài)制劑在應(yīng)用中存在的問(wèn)題進(jìn)行了討論。

關(guān)鍵詞微生態(tài)制劑；應(yīng)用；水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物；免疫力；發(fā)展

中圖分類(lèi)號(hào)S963.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2014）22-07431-04

隨著近年來(lái)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，由于在養(yǎng)殖過(guò)程中養(yǎng)殖水體生態(tài)環(huán)境的惡化從而導(dǎo)致病害頻發(fā)，給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失；同時(shí)，需要一種高效、環(huán)保、無(wú)毒副作用的制劑用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展，因此微生態(tài)制劑應(yīng)運(yùn)而生。

微生態(tài)制劑的概念最早是由Liliy等提出來(lái)的，即由某種微生物分泌的能促進(jìn)另一種生物生長(zhǎng)的物質(zhì)[1]，后來(lái)早期廣泛使用的概念是由Fuler在1987年提出的，即一種可通過(guò)改變腸道菌群平衡而對(duì)動(dòng)物施加有利影響的活微生物飼料添加劑[2]；我國(guó)正式提出“微生態(tài)制劑”一詞是在1990年的《微生態(tài)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議紀(jì)要》中。微生態(tài)制劑是一種綠色、環(huán)保、純生物制劑，無(wú)毒副作用，無(wú)殘留污染，不產(chǎn)生抗性，對(duì)水體不產(chǎn)生二次污染。嚴(yán)格意義上的微生態(tài)制劑包括3個(gè)類(lèi)型：益生菌（Probitics）、益生元（Prebiotics）和合生素（Symbiotics）[3]。益生菌就是活菌制劑，如光合細(xì)菌、芽孢桿菌、蛭弧菌、硝化細(xì)菌等；益生元是一類(lèi)能夠選擇性地促進(jìn)機(jī)體健康的物質(zhì)，如免疫寡糖、多糖；合生素是與益生菌與益生元并存的制劑。

微生態(tài)制劑中可以與正常微生物結(jié)合，顯示出共生、棲生、競(jìng)爭(zhēng)、吞噬等關(guān)系，可以改善水體以及動(dòng)物消化道的微生態(tài)平衡，增強(qiáng)動(dòng)物免疫力，抑制病原菌的生長(zhǎng)。提高動(dòng)物免疫力是微生態(tài)制劑的重要作用之一。筆者對(duì)近年來(lái)微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中改善水產(chǎn)動(dòng)物免疫力方面的應(yīng)用、研究及發(fā)展進(jìn)行了綜述。

1水產(chǎn)用益生菌對(duì)提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫機(jī)能的作用

益生菌不僅可以?xún)艋|(zhì)，還能促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)，提高水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力和抗病力等。目前，應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的益生菌主要有光合細(xì)菌、噬菌蛭弧菌、乳酸桿菌、芽孢桿菌、雙歧桿菌、酵母菌、硝化細(xì)菌和乳桿菌等[4]。

1.1光合細(xì)菌光合細(xì)菌（Photosynthetic bacteria，PSB）是利用光能和CO2維持自養(yǎng)生活的有色細(xì)菌，主要是水生細(xì)菌，革蘭氏陰性，含有菌葉綠素和類(lèi)胡蘿卜素；在厭氧光照或好氧黑暗的條件下進(jìn)行光合作用，但不產(chǎn)生O2；光合細(xì)菌包括3科18屬的細(xì)菌。光合細(xì)菌所含營(yíng)養(yǎng)豐富，還有CoQ、維生素B、葉酸等，可以提高水生動(dòng)物的免疫力，促進(jìn)生長(zhǎng)并且改善水質(zhì)[5]。

沈錦玉等將光合細(xì)菌添加于飼料并潑灑到養(yǎng)殖水體中，改善了水質(zhì)，并使鯽魚(yú)、羅非魚(yú)血清中溶菌酶活性明顯高于對(duì)照組，大田試驗(yàn)也取得了較好的效果，降低了發(fā)病率，也提高了產(chǎn)量[6]。劉慧玲等向養(yǎng)殖羅非魚(yú)苗的養(yǎng)殖水體中投入密度為4.5×104 cfu/ml的光合細(xì)菌時(shí)，魚(yú)組織中的過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶和抗菌活力均顯著高于對(duì)照組，存活率也提高了6.67%[7]。王有基等[8]發(fā)現(xiàn)光合細(xì)菌制劑可以提高鯉魚(yú)白細(xì)胞的吞噬活性，增強(qiáng)血清溶菌酶活力。

1.2芽孢桿菌芽孢桿菌（Bacillus）是一類(lèi)能形成芽孢（內(nèi)生孢子）的異養(yǎng)型細(xì)菌，革蘭氏陽(yáng)性，具有生長(zhǎng)速率快、溶解氧要求濃度低、能忍受酸性的環(huán)境優(yōu)點(diǎn)；可促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收，提高其消化機(jī)能，減少氨氮、亞硝酸鹽和H2S等有毒有害物質(zhì)，降解水體中的有機(jī)碎屑，優(yōu)化養(yǎng)殖環(huán)境，促進(jìn)水環(huán)境生態(tài)良性循環(huán)等功效，我國(guó)規(guī)定可以添加在飼料中的芽孢桿菌為地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌[9]。

丁麗等[10]發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌對(duì)異育銀鯽免疫器官指數(shù)和溶菌酶的影響最大；謝佳磊等[11]在飼料中添加枯草芽孢桿菌發(fā)現(xiàn)對(duì)克氏原螯蝦的免疫機(jī)能有促進(jìn)作用，其酚氧化酶活力明顯增加；沈文英等[12]發(fā)現(xiàn)在基礎(chǔ)飼料中添加1×105 CFU/g枯草芽孢桿菌后，草魚(yú)血清重點(diǎn)免疫球蛋白M，補(bǔ)體C3含量和堿性磷酸酶（AKP）活性顯著升高，而髓過(guò)氧化物酶（MPO）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）活性顯著降低，可以提高草魚(yú)的免疫力和抗氧化功能。李衛(wèi)芬等[13]報(bào)道在飼料中添加芽孢桿菌可以改善提高草魚(yú)機(jī)體免疫力和抗氧化功能。Aly等[14]發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌可以抑制熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens）的生長(zhǎng)，而此類(lèi)菌會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類(lèi)內(nèi)臟敗血性壞死從而造成死亡。張賽樂(lè)等[15]研究發(fā)現(xiàn)黃姑魚(yú)投喂伴有枯草芽孢桿菌的飼料后能有效提高黃姑魚(yú)白細(xì)胞吞噬活性。Vaseeharan等[16]研究發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌可以提高斑節(jié)對(duì)蝦的免疫力從而對(duì)哈維氏弧菌有較好抗病能力，使其在感染后死亡率減少90%。Bandyopadhyay等[17]報(bào)道從卡特拉鲃腸道中分離出來(lái)的Bacillus circulans PB7，可以提高卡特拉鲃的免疫力及其對(duì)嗜水氣單胞菌的抗病能力。

1.3噬菌蛭弧菌噬菌蛭弧菌（Bdellovibrio bacteriovorus）是一類(lèi)專(zhuān)門(mén)以捕食細(xì)菌為生的寄生性細(xì)菌，具有寄生和裂解細(xì)菌的生物學(xué)特性，可以將致病菌限制在較低水平上，其對(duì)嗜水氣單胞菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、溶藻弧菌、哈維氏弧菌、大腸桿菌、熒光假單胞菌和愛(ài)德華氏菌等革蘭氏陰性菌均有較好的裂解作用；同時(shí)，還可以有效控制養(yǎng)殖水體的化學(xué)需氧量、硫化物和氨氮存留量。

徐琴等以1%的比例在中國(guó)對(duì)蝦基礎(chǔ)飼料中添加噬菌蛭弧菌，發(fā)現(xiàn)它能促進(jìn)對(duì)蝦生長(zhǎng)，提高免疫因子活性[18]。梁思成等[19]發(fā)現(xiàn)在飼料中添加蛭弧菌具有改善銀鯽腸道菌群和提高免疫相關(guān)酶活性的作用；張梁等發(fā)現(xiàn)用添加蛭弧菌的飼料喂養(yǎng)草魚(yú)，草魚(yú)的脾臟和胸腺的免疫器官指數(shù)逐漸升高，血液中的NBT陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量逐漸增加，血清抗菌活性與溶菌酶活性逐漸升高，用溫和氣單胞菌疫苗免疫后，草魚(yú)的免疫應(yīng)答水平明顯提高[20]。鄧時(shí)銘等[21]發(fā)現(xiàn)飼料中添加蛭弧菌微生態(tài)制劑，能對(duì)機(jī)體的免疫器官和免疫細(xì)胞產(chǎn)生影響，能調(diào)節(jié)機(jī)體的非特異性免疫功能。韓宇翔等[22]研究發(fā)現(xiàn)噬菌蛭弧菌能夠顯著提高鱘魚(yú)的血清溶菌酶、堿性磷酸酶和過(guò)氧化物酶等免疫相關(guān)酶活性。

1.4酵母菌酵母菌是單細(xì)胞真菌，是兼性厭氧菌，在有氧條件下可將糖類(lèi)分解為CO2和水，無(wú)氧條件下產(chǎn)生CO2和乙醇。丁麗等[9]研究表明酵母菌對(duì)異育銀鯽血清SOD水平的影響較大。Andlid等[23]從虹鱒胃腸道分離的漢遜德巴利酵母（HF1）體外可抑制魚(yú)病原菌殺鮭氣單胞菌和鰻弧菌；徐琴等[18]分別以1%的比例在中國(guó)對(duì)蝦基礎(chǔ)飼料中添加粘紅酵母，發(fā)現(xiàn)其能促進(jìn)對(duì)蝦的生長(zhǎng)，提高免疫因子活性。陳秋紅等[24]研究表明酵母菌可中和腸道中毒素，直接與腸道病原體結(jié)合，有效抑制腸道病原體的繁殖，改善腸道微生態(tài)環(huán)境，從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力及抗病能力。

1.5硝化細(xì)菌硝化細(xì)菌是將水中的氨轉(zhuǎn)化為亞硝酸和硝酸的一類(lèi)細(xì)菌，包括亞硝化菌和硝化菌，是好氧自養(yǎng)型細(xì)菌，革蘭氏陰性；氨氮和亞硝氮是影響水質(zhì)的重要指標(biāo)，一旦超標(biāo)將會(huì)引起水產(chǎn)動(dòng)物病害的發(fā)生，而硝化細(xì)菌可以將其轉(zhuǎn)化為硝酸鹽，被機(jī)體吸收與利用。

李長(zhǎng)玲等[25]研究發(fā)現(xiàn)硝化細(xì)菌可顯著改善羅非魚(yú)苗培育環(huán)境的水質(zhì)，增強(qiáng)魚(yú)的抗病能力，當(dāng)硝化細(xì)菌濃度為100 cfu/L時(shí)，幼魚(yú)的堿性磷酸酶活力、溶菌酶活力以及超氧化物歧化酶活力都有明顯提高。

1.6雙歧桿菌雙歧桿菌（Bifidobacterium）是一類(lèi)外觀(guān)變化很多的厭氧型放線(xiàn)菌，革蘭氏陽(yáng)性，能有效發(fā)酵糖類(lèi)產(chǎn)生乳酸和乙酸，存在于腸道中；其中，能用于制備微生態(tài)制劑的雙歧桿菌主要有兩歧雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、短雙歧桿菌和長(zhǎng)雙歧桿菌[26]。桂遠(yuǎn)明等[27]利用雙歧桿菌制劑來(lái)抑制革蘭氏陰性菌，減少腸桿菌細(xì)胞壁內(nèi)毒素進(jìn)入魚(yú)體，從而保護(hù)肝臟對(duì)鯉爆發(fā)性肝炎有一定的治療效果。鄒向陽(yáng)[28]利用雙歧桿菌作為飼料添加劑，可以提高中國(guó)對(duì)蝦幼體的免疫力，促進(jìn)提前變態(tài)，減少死亡率。

1.7乳桿菌乳桿菌（Lactobacillus）是一種不產(chǎn)生芽孢的革蘭氏陽(yáng)性菌，主要代謝產(chǎn)物是乳酸。王富強(qiáng)等[29]在牙鲆腸道內(nèi)定植和投喂乳桿菌后發(fā)現(xiàn)牙鲆消化道內(nèi)弧菌的數(shù)量明顯下降。許褆森發(fā)現(xiàn)戊糖乳桿菌R1作為益生菌作為飼料添加劑可以取代抗生素應(yīng)用在草魚(yú)養(yǎng)殖中[30]。吳桂玲等研究在飼料中添加乳酸菌、芽孢桿菌和節(jié)桿菌等9株菌，發(fā)現(xiàn)花鱸的巨噬細(xì)胞殺菌力顯著高于對(duì)照組，頭腎巨噬細(xì)胞數(shù)量顯著高于對(duì)照組，且對(duì)鰻弧菌有抗病力[31]。鄺哲師等[32]研究表明乳酸菌可以刺激吞噬細(xì)胞的吞噬功能，促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖，提高細(xì)胞因子水平，增加NK細(xì)胞的活性和免疫球蛋白水平，從而達(dá)到免疫監(jiān)視和提供系統(tǒng)免疫功能。SON等[33]現(xiàn)乳酸菌不僅提高點(diǎn)帶石斑魚(yú)的生產(chǎn)性能，還能夠強(qiáng)化免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)對(duì)鏈球菌和彩虹病毒的耐受能力。Aly等[14]研究表明乳酸菌可以提高尼羅羅非魚(yú)的嗜中性粒白細(xì)胞的粘著性和溶菌酶活性，同時(shí)對(duì)熒光假單胞菌和鏈球菌有較好的抵抗力。

2水產(chǎn)用益生元對(duì)提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫機(jī)能的作用

益生元是指由一些益生菌代謝所產(chǎn)生的并且可引起腸道內(nèi)相關(guān)菌群變化的一類(lèi)不可消化的物質(zhì)，在水產(chǎn)中主要作為免疫增強(qiáng)劑使用。

2.1寡糖寡糖又稱(chēng)為低聚糖，可改善機(jī)體消化道內(nèi)的微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)益生菌的增殖；此類(lèi)寡糖包括半乳糖寡糖、果寡糖、甘露寡糖等。劉愛(ài)君等報(bào)道在飼料中添加0.50%～0.75%的甘露寡糖可以顯著提高羅非魚(yú)的生長(zhǎng)性能，改善腸道結(jié)構(gòu)功能，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和機(jī)體非特異性免疫功能[34]。徐磊等發(fā)現(xiàn)在飼料中添加240和480 mg/kg的甘露寡糖能提高異育銀鯽的免疫能力，增強(qiáng)魚(yú)體抗病原菌（嗜水氣單胞菌）的能力[35]。劉含亮等在飼料中添加殼寡糖對(duì)虹鱒生長(zhǎng)性能、白細(xì)胞吞噬百分率、吞噬指數(shù)、血清殺菌百分率以及血清、肝臟和鰓中溶菌酶活性有顯著影響[36]。徐后國(guó)等報(bào)道在飼料中添加0.3%～0.6%的殼寡糖可以在一定程度上影響大黃魚(yú)幼魚(yú)的非特異性免疫能力[37]。譚崇桂等在飼料中添加0.2%的β葡聚糖、0.4%甘露寡糖、175 mg/kg 蛋白酶PT可提高凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能，改善消化酶活性，葡聚糖和甘露寡糖還具有改善血清非特異性免疫的功能[38]。

2.2多糖微生物非抗生素活性物質(zhì)主要有脂多糖、肽聚糖、葡聚糖和真菌多糖等，是一種具有免疫促進(jìn)效果的高分子聚合碳水化合物，具有促進(jìn)機(jī)體免疫功能、增強(qiáng)機(jī)體抗病能力與應(yīng)激能力等功能；在飼料中添加多糖的水產(chǎn)動(dòng)物，其血漿蛋白和噬菌細(xì)胞活動(dòng)的改變，產(chǎn)生急性期蛋白和激活巨噬細(xì)胞；而巨噬細(xì)胞表面有多糖的受體，巨噬細(xì)胞對(duì)于提高殺菌能力起關(guān)鍵作用，而且能夠產(chǎn)生影響免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞的一系列的血漿移動(dòng)因子[39]。朱斐等[40]研究表明葡聚糖可提高克氏原螯蝦超氧化歧化酶活性，從而降低其感染W(wǎng)SSV，對(duì)克氏原螯蝦有免疫保護(hù)作用。Itami等[41]在飼料中添加肽聚糖后投喂日本囊對(duì)蝦，并對(duì)其進(jìn)行WSSV攻毒，試驗(yàn)組的成活率比對(duì)照組高 60%～70%。張璐等發(fā)現(xiàn)在飼料中添加500 mg/kg肽聚糖顯著提高了鱸魚(yú)的白細(xì)胞吞噬指數(shù)、血清LSZ活力和替代途徑的補(bǔ)體活力，并且對(duì)哈維氏弧菌的抵抗力也顯著增強(qiáng)[42] 。 陳昌福等[43]證實(shí)酵母細(xì)胞壁多糖對(duì)南美白對(duì)蝦的免疫系統(tǒng)和免疫相關(guān)酶有激活作用。Solem[44]認(rèn)為脂多糖可促進(jìn)大西洋鮭（Atlantic salmon）巨噬細(xì)胞的分裂，從而提高機(jī)體的抗感染能力。許第新等[45]報(bào)道酵母細(xì)胞壁中的多糖可以提高克氏原螯蝦肝胰腺中的酸性磷酸酶（ACP）和堿性磷酸酶（ALP），對(duì)血清和肌肉中的ACP和ALP沒(méi)有明顯作用。李桂峰等[46]研究表明添加0.5%和0.8%酵母多糖的飼料能顯著提高赤眼鱒的超氧化歧化酶活性、溶菌酶活性、補(bǔ)體C3水平、白細(xì)胞吞噬活性、紅細(xì)胞的免疫功能。Sung等[47]采用 β葡聚糖溶液浸泡斑節(jié)對(duì)蝦，不僅提高了酚氧化酶活性和溶菌酶活性，而且也增強(qiáng)了對(duì)創(chuàng)傷弧菌的抵抗力。李紅權(quán)等[48]從赤芝液體發(fā)酵菌絲體中提取真菌多糖，在日本沼蝦餌料中添加不同濃度的真菌多糖，可以提高沼蝦血細(xì)胞的溶菌活力、抗菌活力、抗毒和能力。

3水產(chǎn)用合生素對(duì)提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫機(jī)能的作用

合生素又稱(chēng)合生元，是益生菌與益生元結(jié)合使用的生物制劑，兼具益生菌和益生元的雙重作用，通過(guò)促進(jìn)外源性活菌在動(dòng)物腸道中的定植，選擇性刺激一種或幾種生長(zhǎng)和繁殖，從而提高宿主的免疫機(jī)能。肖世玖等[49]在團(tuán)頭魴基礎(chǔ)飼料中添加合生素顯著提高了團(tuán)頭魴血清抗氧化能力，降低了腸道中的大腸桿菌數(shù)量，促進(jìn)芽孢桿菌的增殖；溫俊等[50]試驗(yàn)表明飼料中添加合適比例的合生素能起到提高南美白對(duì)蝦免疫機(jī)能和調(diào)節(jié)腸道菌群的功效。

4微生態(tài)制劑在改善水產(chǎn)動(dòng)物免疫力中的作用

微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中用于調(diào)節(jié)改善水質(zhì)，降低水體中NH+4N、NO-2-N、H2S等對(duì)水生生物的毒害作用，穩(wěn)定水體pH；抑制水體中的病原菌的生長(zhǎng)；刺激免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力；提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育，減少病害發(fā)生；提高水產(chǎn)動(dòng)物的飼料利用率等。在增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物免疫力方面的研究大致集中在微生態(tài)制劑刺激水產(chǎn)動(dòng)物非特異性免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致非特異性免疫相關(guān)酶活性的提高，從而能夠抵抗病原體。

因此，微生態(tài)制劑在改善水產(chǎn)動(dòng)物免疫力方面上還應(yīng)從以下方面進(jìn)行研究：①對(duì)試驗(yàn)條件進(jìn)行控制，保證研究結(jié)果的準(zhǔn)確性，并從免疫相關(guān)因子的變化、個(gè)體抗病能力等進(jìn)行系統(tǒng)、深入研究，以為微生態(tài)制劑的使用提供指導(dǎo)；由于微生態(tài)制劑屬于生物制劑，受環(huán)境條件的影響較大；而在實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)中，水質(zhì)條件復(fù)雜，使用哪種微生態(tài)制劑需要依靠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑囼?yàn)基礎(chǔ)。②在菌株的篩選上應(yīng)篩選適應(yīng)性強(qiáng)、效果好、便于保存的菌種，加強(qiáng)水產(chǎn)用微生態(tài)制劑的研究，利用適合水環(huán)境的微生態(tài)制劑；在畜牧業(yè)上篩選出的一些菌株經(jīng)過(guò)多年生產(chǎn)實(shí)踐，取得較好的效果，但水體環(huán)境與陸地環(huán)境差異顯著；對(duì)于在畜牧業(yè)上的菌株，不能直接在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中推廣，應(yīng)當(dāng)篩選出適合水體環(huán)境并能提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫力的優(yōu)質(zhì)菌株。③對(duì)微生態(tài)制劑的研究應(yīng)從其作用機(jī)理方面深入研究，以對(duì)應(yīng)不同情況使用不同制劑，從而達(dá)到高效利用的目的；目前，對(duì)于微生態(tài)制劑作用機(jī)理仍處于宏觀(guān)水平，應(yīng)當(dāng)開(kāi)展更多微觀(guān)水平的作用機(jī)理研究，使微生態(tài)制劑最高效地提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫力。④在微生態(tài)制劑的保存與運(yùn)輸過(guò)程中運(yùn)用充氮、真空冷凍干燥等技術(shù)進(jìn)行處理，以延長(zhǎng)微生態(tài)制劑的保質(zhì)期；微生態(tài)制劑作為生物制劑，在運(yùn)輸和保存方面要求嚴(yán)格，通過(guò)試驗(yàn)研究出微生態(tài)制劑最高效的保存和運(yùn)輸方式。

然而，在微生態(tài)制劑的研發(fā)和使用方面也存在以下問(wèn)題：①微生態(tài)制劑的研究?jī)H在個(gè)體水平內(nèi)進(jìn)行，因環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)等對(duì)試驗(yàn)結(jié)果造成的影響不可忽略，因此相關(guān)研究還需具體化與系統(tǒng)化；②目前所使用的微生態(tài)制劑菌株種類(lèi)較少，還需要對(duì)適用于水體環(huán)境及水生生物的菌種進(jìn)行開(kāi)發(fā)；③缺少安全性方面的驗(yàn)證，在水產(chǎn)上使用的微生態(tài)制劑應(yīng)用使用時(shí)間短且效仿陸生動(dòng)物，不一定對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物有效果，另外基因工程菌株應(yīng)用在水產(chǎn)養(yǎng)殖中潛在威脅和安全性問(wèn)題也缺少驗(yàn)證；④微生態(tài)制劑產(chǎn)品加工、保存、運(yùn)輸和使用上不能保證有效活菌數(shù)，因此其使用效果也不能保證；⑤微生態(tài)制劑作為一種新型水質(zhì)條件未納入相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，市場(chǎng)魚(yú)龍混雜，產(chǎn)品質(zhì)量得不到根本保證；⑥對(duì)微生態(tài)制劑的使用最佳條件研究尚不確定，針對(duì)性差，引起養(yǎng)殖戶(hù)在一些情況下盲目使用從而造成浪費(fèi)。

微生態(tài)制劑高效、環(huán)保、無(wú)毒，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中得到廣泛應(yīng)用；微生態(tài)制劑符合可持續(xù)發(fā)展，具有良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。隨著微生物技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用，微生態(tài)制劑必將迎來(lái)前所未有的發(fā)展空間與機(jī)遇。因此，微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中具有廣闊前景。

42卷22期洪徐鵬等微生態(tài)制劑在改善水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物免疫力中的應(yīng)用參考文獻(xiàn)

[1] LILLY D M，STILLWELL R H.Probiotics：growthpromoting factors produced by microorganisms [J].Science，1965，147：747-748.

[2] FULLER R.Probiotics in man and animals[J].J.Appl Bacteriol，1989，66：385-378.

[3] 蒲紅宇，胡兆群，王福強(qiáng).微生態(tài)制劑及其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究現(xiàn)狀[J].海洋水產(chǎn)研究，2003，24（4）：80-84.

[4] 邱寶生，林煒鐵，楊繼國(guó)，等.益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].水產(chǎn)科學(xué)，2004，23（7）：39-41.

[5] 陳謙，張新雄，趙海，等.用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的微生態(tài)制劑的研究和應(yīng)用進(jìn)展[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，2012，18（3）：524-530.

[6] 沈錦玉，尹文林，劉問(wèn)，等.光合細(xì)菌HZPSB對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖水質(zhì)的改良和對(duì)魚(yú)類(lèi)促生長(zhǎng)作用[J].科技通報(bào)，2004，20（6）：481-484.

[7] 劉慧玲，張戰(zhàn)鋒，李長(zhǎng)玲.光合細(xì)菌對(duì)羅非魚(yú)魚(yú)苗養(yǎng)殖水質(zhì)及抗病力的影響[J].漁業(yè)現(xiàn)代化，2009，36（2）：47-51.

[8] 王有基，胡夢(mèng)紅，朱煥清，等.光合細(xì)菌對(duì)鯉魚(yú)非特異性免疫功能的影響[J].水利漁業(yè)，2005，25（6）：38-39.

[9] 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部.飼料添加劑品種目錄.農(nóng)業(yè)部公告第318號(hào)[Z].2003.

[10] 丁麗，章世元，周維仁，等.微生態(tài)制劑第異育銀鯽生長(zhǎng)性能及免疫機(jī)能的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（11）：5689-5691.

[11] 謝佳磊，肖丹，殷蝶，等.枯草芽孢桿菌對(duì)克氏原螯蝦免疫機(jī)能的影響[J].淡水漁業(yè)，2007，37（6）：24-27.

[12] 沈文英，李衛(wèi)芬，梁權(quán)，等.飼料中添加枯草芽孢桿菌對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能、免疫和抗氧化功能的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2011，23（5）：881-886.

[13] 李衛(wèi)芬，張小平，宋文輝，等.養(yǎng)殖水體中添加芽孢桿菌對(duì)草魚(yú)免疫和抗氧化功能的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2012，19（6）：1027-1033.

[14] ALY S M，AHMED Y G，GHAREEB A A，et al.Studies on Bacillussubtilis and Lactobacillus acidophilus，as potential probiotics，on the immune response and resistance of Tilapia nilotica（Oreochromis niloticus）to challenge infection[J].Fish & Shellfish Immunol，2008，25：128-136.

[15] 張賽樂(lè)，閆茂倉(cāng)，陳少波，等.枯草芽孢桿菌對(duì)黃姑魚(yú)免疫機(jī)能的影響[J].科技通報(bào)，2012，28（11）：61-65.

[16] VASEEHARAN B，RAMASAMY P.Control of pathogenic Vibrio spp.by Bacillus subtilis BT23，a possible probiotic treatment for black tiger shrimp（Penaeus monodon）[J].Lett Appl Microbiol，2003，36：83-87.

[17] BANDYOPADHYAY P，DAS MOHAPATRA P K.Effect of a probiotic bacterium Bacillus circulans PB7 in the formulated diets：on growth，nutritional quality and immunity of Catla catla（Ham.）[J].Fish Physiology & Biochemistry，2009，35：467-478.

[18] 徐琴，李健，劉淇，等.噬菌蛭弧菌和粘紅酵母對(duì)中國(guó)對(duì)蝦生長(zhǎng)及非特異性免疫因子的影響[J].海洋水產(chǎn)研究，2007，28（5）：42-47.

[19] 梁思成，房文紅，汪開(kāi)毓，等.蛭弧菌Bdh5221對(duì)銀鯽腸道菌群和非特異性免疫指標(biāo)的影響[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，24（2）：157-161.

[20] 張梁，沈建忠.蛭弧菌對(duì)草魚(yú)免疫功能的影響[J].淡水漁業(yè)，2006，36（3）：41-43.

[21] 鄧時(shí)銘，廖伏初，黃華偉，等.蛭弧菌微生態(tài)制劑對(duì)鯽非特異性免疫的影響[J].科學(xué)養(yǎng)魚(yú)，2009（7）：54-55.

[22] 韓宇翔，鄧璐，李圓圓，等.噬菌蛭弧菌對(duì)鱘魚(yú)免疫相關(guān)酶活性的影響[J].飼料工業(yè)，2008，29（18）：40-42.

[23] ANDLID T，JUAREZ R V，GUSTAFSSON L.Yeast colonizing the intestineof rainbow trout（Salmo gairdneri）and turbot（Scophthalmus maximus）[J].Microbial Ecology，1995，30：321-347.

[24] 陳秋紅，孫梅，匡群，等.微生態(tài)制劑的研究及其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].飼料研究，2012（2）：62-65.

[25] 李長(zhǎng)玲，黃翔鵠，李瑞偉，等.硝化細(xì)菌對(duì)羅非魚(yú)苗培育環(huán)境及抗病力的影響[J].廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，28（6）：41-45.

[26] REQUNA T，BURTON J，MATSUKI T，et al.Identification，detection，and enumeration of human bifidobacterium species by PCR targeting the Transaldolaso gene[J].Appl Environ Microbiol，2002，68（5）：2420-2427.

[27] 桂遠(yuǎn)明，吳垠，祝國(guó)芹，等.復(fù)方回春生對(duì)鯉爆發(fā)性肝炎治療效果的初步研究報(bào)告[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，1992，4（2）：47-50.

[28] 鄒向陽(yáng).雙歧桿菌生態(tài)制劑在中國(guó)對(duì)蝦育苗生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，1995，7（1）：40-41.

[29] 王福強(qiáng)，咼于明，陳營(yíng)，等.兩種乳桿菌在牙鲆消化道的定植[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，10（1）：1-5.

[30] 許禔森.戊糖乳桿菌R1對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)養(yǎng)殖水體和腸道菌群的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（34）：11112-11114.

[31 ]吳桂玲，梁萌青，周麗，等.復(fù)合微生態(tài)制劑對(duì)花鱸非特異性免疫力及抗病力的影響[J].海洋水產(chǎn)研究，2007，28（5）：12-17.

[32 ]鄺哲師，趙祥杰，葉明強(qiáng)，等.乳酸菌對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物抗氧化應(yīng)激與免疫力影響研究進(jìn)展[J].畜牧與飼料科學(xué)，2011，32（8）：39-41.

[33] SON V M，CHANG C C，WU M C，et al. Dietaryadministration of the probiotic，Lactobacillus plantarum，enhanced the growth，innate immune responses，and disease resistance of the grouper Epinephelus coioides[J].Fish and Shellfish Immunology，2009，26（5）：691 -698.

[34] 劉愛(ài)君，冷向軍，李小勤，等.甘露寡糖對(duì)奧尼羅非魚(yú)（Oreochromis nilot icus×O.aureus）生長(zhǎng)、腸道結(jié)構(gòu)和非特異性免疫的影響[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)：農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版，2009，35（3）：329-336.

[35] 徐磊，劉波，謝駿，等.甘露寡糖對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)性能、免疫及HSP70基因表達(dá)的影響[J].水生生物學(xué)報(bào)，2012，36（4）：656-664.

[36] 劉含亮，孫敏敏，王紅衛(wèi)，等.殼寡糖對(duì)虹鱒生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)及非特異性免疫功能的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2012，24（3）：479-486.

[37] 徐后國(guó)，艾慶輝，麥康森，等.飼料中添加枯草芽孢桿菌和殼寡糖對(duì)大黃魚(yú)幼魚(yú)血清免疫指標(biāo)的影響[J].中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，41（Z2）：42-47.

[38] 譚崇桂，冷向軍，李小勤，等.多糖、寡糖、蛋白酶對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、消化酶活性及血清非特異性免疫的影響[J].上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，22（1）：93-99.

[39] 趙紅霞，詹勇，許梓榮.微健物多糖對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物兔疫作用的研究進(jìn)展[J].中國(guó)飼料，2002（12）：27-29.

[40] 朱斐.對(duì)蝦白斑綜合征病毒滅活制劑及多糖對(duì)克氏原螯蝦抗WSSV作用的研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2009.

[41] TAKAHASHI Y，KONDO M，ITAMI T，et al.Enhancement of disease resistance against penaeid acute viraemia andinduction of virus-inactivating activities in haemolymph of kuruama shrimp，Penaeus japonicus，by oral administration of Pantoea agglpmerans lipopolysaccharides（LPS）[J].Fish Shellf Immunol，2000，10：555-558.

[42] 張璐，艾慶輝，麥康森，等.肽聚糖對(duì)鱸魚(yú)生長(zhǎng)和非特異性免疫力的影響[J].中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，38（4）：551-556.

[43] 陳昌福，姚娟，陳萱，等.免疫多糖對(duì)南美白對(duì)蝦免疫相關(guān)酶的激活作用[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，23（5）：551-554.

[44] SOLEM S T，JRGENSEN J B，ROBERTSEN B.Stimulation of respiratory burst and phagocytic activity in Atlantic salmon（Salmo salar L.）macrophages by lipopolysaccharide[J].Fish & Shellfish Immunol，1995，5（7）：475-491.

[45] 許第新，姚娟，陳昌福.注射免疫多糖（酵母細(xì)胞壁）對(duì)克氏原螯蝦幾種免疫相關(guān)酶活性的影響[J].淡水漁業(yè)，2004，34（5）：56-58.

[46] 李桂峰，康裕財(cái)，孫際佳，等.酵母多糖對(duì)赤眼鱒非特異性免疫機(jī)能的影響[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2003，42（4）：55-58.

[47] SUNG H H，KOUM G H，SONG Y L.Vibriosis resistance induced by glucan treatment in tiger shrimp（Penaeus monodon）[J].Fish Pathology，1994，29：11-17.

[48] 李紅權(quán)，劉燕，王安利.赤芝多糖對(duì)日本沼蝦免疫功能的影響[J].中國(guó)獸藥雜志，2006，40（8）：16-18.

[49] 肖世玖，陳雁南，孫亞楠，等.合生素對(duì)團(tuán)頭魴生產(chǎn)性能、腸道菌群及腸道形態(tài)的影響[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào)，2010，2012（5）：73-76.

[50] 溫俊，孫鳴，孫冬巖，等.合生素對(duì)南美白對(duì)蝦腸道菌群和免疫機(jī)能的影響[J].飼料研究，2008（10）：53-55.