李中堯 何英姿 邱雪景
摘要介紹了酢漿草的化學成分研究,并分別綜述了近十年來酢漿草不同極性溶劑提取物的體外抑菌活性研究、抗腫瘤活性研究及其體外抗氧化活性研究,希望以上述的研究工作為基礎,加大力度對珍貴的酢漿草資源進行開發(fā)及合理利用。
關鍵詞酢漿草;抑菌;抗腫瘤;抗氧化;研究進展
中圖分類號S567文獻標識碼A文章編號0517-6611(2014)23-07750-02
基金項目廣西師范學院化學一級博士點建設開放基金項目“苗藥酢漿草有效化學成分分離、結構鑒定及生物活性研究”。
作者簡介李中堯(1990- ),男,重慶人,碩士研究生,研究方向:有機化學。*通訊作者,教授,博士,碩士生導師,從事生物有機化學研究。
收稿日期20140710酢漿草有紅花酢漿草(Oxalis corymbosa DC)[1]、紫葉酢漿草(Oxalis violacea L)[2]和蔓生酢漿草(Oxalis corniculata L)等多個變種,多為多年生宿根草本植物,其特點是植株矮小、長勢整齊,具有很長的花期,能夠對其周圍的雜草生長進行抑制[3]。酢漿草在很多地方均能夠生長,在我國云南、廣西、四川等地分布普遍。酢漿草科植物大多作為藥物使用。其中黃花酢漿草其根、莖、葉均具有很好的藥用價值,能夠清熱解毒、消炎止痛等[4];在民間單、復方中均經(jīng)常用到,如用于治療濕熱泄瀉、痢疾、淋癥、帶下、吐血、硯血、尿血、月經(jīng)不調、跌打損傷、咽喉腫痛、濕疹、疥癬、痔瘡、麻疹、蛇蟲咬傷;在臨床上對于治療炎癥也具有很好的效果[5]。筆者在此通過對酢漿草的生物活性的研究進展進行綜述,以期為酢漿草的藥用成分分析并開發(fā)出多種新型的產(chǎn)品提供一定的參考。
1化學成分研究
目前,酢漿草的確切的有效成分尚不明確,還需要對其進行進一步的研究;近幾年來國內報道了一些利用傳統(tǒng)方法對酢漿草進行化學成分分析研究的報道。如李華勝對黃花酢漿草干燥全草進行了化學成分分析,其利用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜等方法分離提純得到12個均首次從黃花酢漿草中分離出的化合物,其中10個化合物經(jīng)過結構鑒定,分別為胡蘿卜苷、β-谷甾醇、牡荊素、異牡荊素、刺槐素、刺槐苷、β-生育酚、酒石酸、香草酸和木樨草素[6]。楊紅原等也對紅花酢漿草進行了分離,獲得了6個化合物,經(jīng)結構鑒定為β-谷甾醇、胡蘿卜苷、草酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸,其中β-谷甾醇、胡蘿卜苷、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸等5個化合物為首次從紅花酢漿草中獲得[7]。譚萍等對黔產(chǎn)酢漿草中總黃酮含量測定的報道中發(fā)現(xiàn),用70%的甲醇對前產(chǎn)酢漿草提取2 h,其總黃酮的提取率最高,含量達22.258 mg/g[8]。而在眾多對黃酮類化合物的研究中發(fā)現(xiàn),黃酮是一類具有消炎、抗菌作用[9-10]和抗癌抗腫瘤作用[11]的天然多酚類化合物。因此,酢漿草理應具有很強的生理活性。
2酢漿草的抑菌活性
人類在很早的時候就已經(jīng)知道利用植物來防止病原微生物,如大蒜、洋蔥、五風草等植物在較早的時期就應用于病害防治。很多植物在其生長過程中易感染病原菌而生病,它們抵御這些病原菌的方法之一就是通過自身產(chǎn)生某種具有抑菌效果的活性物質。雖然人工合成的滅菌劑的效果要遠遠強于這些天然的活性物質,但這些植物來源的抑菌化學物質對于人體的毒副作用一般也小于人工合成殺菌劑,因此此類天然的抑菌劑仍然是研究的重點。目前,國內外許多研究工作者對酢漿草的抑菌活性進行了較為深入的研究,報道了許多關于酢漿草抑菌活性的文章。
2.1水提物抑菌活性作為強極性溶劑——水,植物藥材中的許多化學成分均能在其中溶解,如無機鹽、有機酸鹽、蛋白質等。因此,以水作為提取劑所得到的浸膏含有大量的活性成分。Satish等分別在2008、2010年報道了40多種植物葉子水提取物的體外抗菌活性研究,在所選的植物中,酢漿草(Oxalis corniculata L)水提取物的抗菌活性良好;尤其對于大腸桿菌,酢漿草在所選擇的植物中,其抑菌活性最好,抑菌圈直徑為17.50±0.38 mm[12];而對于志賀氏菌,酢漿草水提物濃度為50 μl時具有顯著抑制福氏志賀菌的效果[13]。
2.2醇提物抑菌活性甲醇和乙醇均為強極性溶劑且能與水混溶,溶解能力極強,能夠很好地從植物粗粉中提取其中的活性物質。郭金耀等分析指出紅花酢漿草色素可用鹽酸化乙醇進行提取,所得到的色素具有很好地抑制大腸桿菌、枯草芽孢、金黃色葡萄球菌等能夠使食物迅速變質的細菌的生長,且增大色素的濃度對于這些細菌的抑制效果越好[14]。Mukherjee等報道了酢漿草(Oxalis corniculata L)葉子80%甲醇提取物的體外抗菌活性測試,用甲醇對酢漿草葉子進行提取,其提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌等細菌起明顯的抑制作用,其抑菌圈直徑范圍為12~19 mm,其中大腸桿菌的抑菌圈直徑達19 mm,MIC值為0.08 mg/ml,MBC值為0.1 mg/ml,在所測試的細菌中抑制效果最明顯的[15]。劉世旺等也對其醇提物進行了抗菌活性測試,研究表明酢漿草的醇提取物對于不同的細菌其抑制效果也明顯不同;對于搖床培養(yǎng)的大腸桿菌,不論其濃度如何變化均表現(xiàn)為促進其生長的效果,當濃度為0.10 g/ml時促進其生長的效果最明顯;而對于搖床培養(yǎng)的金黃色葡萄球菌,當濃度為0.01 g/ml時表現(xiàn)出強烈的抗菌作用;提取物達到最適的峰值濃度時,具有明顯的抑制或促進細菌生長作用[16]。
2.3多種溶劑提取物的抑菌活性根據(jù)相似相溶原理,不同極性的溶劑對酢漿草進行提取,其提取出來的成分不一致,它們的抑菌活性也有一定的差異。Rahman等用甲醇、乙醇、氯仿等溶劑對酢漿草葉進行提取,所得到的提取物分別進行抗菌試驗,結果發(fā)現(xiàn)甲醇和乙醇所提取的物質的抗菌作用明顯比氯仿所提取的物質的抗菌作用強[17]。Raghavendra報道用索氏提取法提取黃花酢漿草(Oxalis corniculata Linn),得到石油醚、苯、氯仿、甲醇、乙醇提取物并分別測試了這些提取物的抑菌活性,在此選用菌種為3種植物致病菌(Xanthomonas axonopodis pv. Malvacearum、Xanthomonas axonopodis pv. Phaseoli、Xanthomonas campestris pv. vesicatoria)和14種人類致病菌,試驗結果為酢漿草的醇提取物質對植物型病原菌以及人類型病原菌均表現(xiàn)出顯著的抗菌作用;甲醇提取物對于植物致病菌Xanthomonas axonopodis pv. malvacearum和Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli高度敏感;甲醇和乙醇等強極性溶劑提取物具有很強的抗菌作用,而石油醚、苯和氯仿等弱極性溶劑提取物的抗菌作用極弱甚至是無抗菌活性[18]。丁良等研究表明酢漿草的水提取物和其醇提取物在紙片擴散法和改良二倍稀釋法的條件下對乙型溶血性鏈球菌和大腸桿菌的生長抑制不明顯,而對于金黃色葡萄球菌的生長抑制效果非常明顯,且水提取物的效果明顯比醇提取物的效果差[19]。
2.4酢漿草鮮草抑菌活性酢漿草干草是由鮮草干燥脫水得到的,其保存時間較長。在酢漿草干燥處理過程中,可能導致酢漿草的有效化學成分的流失及變化,這些或許導致酢漿草的抑菌活性發(fā)生變化。李光京等分析指出新鮮的酢漿草原液具有很強的抑菌作用,在其所測試的細菌中只有鏈球菌的抑制效果較差而對于其余細菌均有很好的抗菌效果;對金黃色葡萄球菌的抑菌圈達22 mm,MIC值為1∶128,在所有參與測試的細菌中,其抑制效果是最好的[20]。
綜上所述,酢漿草具有一定的抑制細菌生長的作用;對于強極性溶劑提取物(醇提取物和水提取物),其抑菌效果顯著,而對于弱極性溶劑提取物(氯仿提取物),可確定強極性溶劑提取物中的抗菌活性物質較多。
3酢漿草抗腫瘤活性
近幾十年來,由于環(huán)境污染越來越嚴重,生活節(jié)奏加快及精神緊張壓抑等因素,使癌癥的發(fā)病率明顯上升并有向低齡化發(fā)展的趨勢。癌癥是世界上嚴重威脅人類健康的殺手之一,在我國臨床死亡的原因中癌癥死亡率位居第二位。目前,用于控制病情的藥物主要是化學藥品,需長期的服藥才能穩(wěn)定病情,且在服藥過程中常出現(xiàn)反跳、耐藥、毒副作用等嚴重問題,這樣不但不能很好地減輕病人的病情,相反常給病人帶去更大的身體和精神上的痛苦。近年來,對于治療和預防癌癥以及手術后防止腫瘤轉移復發(fā)等情況,中草藥在這方面取得了重大的突破并占有一席之地。
3.1體外抗腫瘤活性河北大學李靜分析表明酢漿草總黃酮提取物對于HepG2215(人肝癌細胞)具有一定的體外抗腫瘤細胞活性,且隨著其濃度的增大,其體外抗肝癌細胞的活性越好[21]。
3.2體內抗腫瘤活性印度學者Kathiriya等針對艾氏腹水癌進行小鼠體內抗腫瘤活性研究,以瑞士小白鼠建立艾氏腹水瘤模式鼠,用酢漿草乙醇(80%)提取物的水飽和溶液對其進行試驗;該試驗分為5個組,每組6只小鼠,第1組為正常小鼠,第2組為艾氏腹水癌(EAC)小鼠并灌喂生理鹽水(5 ml/kg),第3組為EAC小鼠并灌喂酢漿草醇提物(400 mg/kg),第4組為EAC小鼠并灌喂酢漿草醇提物(100 mg/kg),第5組為EAC小鼠并灌喂環(huán)磷酰胺(25 mg/kg);試驗結果表明,灌喂生理鹽水(5 ml/kg)的小鼠中位存活時間為19.83±0.79 d,腫瘤大小為4.12±0.25 ml;灌喂酢漿草醇提取物(100 mg/kg)的EAC小鼠中位存活時間為28.83±0.70 d,壽命延長 45.38%,其腫瘤大小為3.28±0.15 ml;灌喂酢漿草醇提物(400 mg/kg)的小鼠中位存活時間為32.16±0.70 d,壽命延長62.17%,腫瘤大小為1.96±0.16 ml[22]。這表明酢漿草醇提物能夠延長EAC小鼠的壽命,不同劑量均對模式鼠顯示了顯著的抗腫瘤活性,能夠抑制腫瘤的生長。
4酢漿草抗氧化活性
具有未配對電子的原子、基團或分子就是自由基,自由基的氧化能力很強;在生命體活動過程中會產(chǎn)生自由基,在生命活動過程中自由基的濃度必須適量,否則會導致生命體內生理功能紊亂,對機體造成損傷[23-24]。因此,保持生命體內適當?shù)淖杂苫鶟舛?,有利于預防和治療疾病。在我國,長期使用化學合成的抗氧化劑來防止食品變質,然而通過研究發(fā)現(xiàn),這類型的抗氧化劑具有致使人癌變的嚴重后果[25-26]。近些年來使用或食用純天然、無污染的物品是一種趨勢,當然對于食物保鮮的抗氧化劑來說大家也是追求純天然的、無毒無害的。因此,廉價、質優(yōu)、豐富易得的中草藥成分中抗氧化活性成分就成為國內外學者重點研究對象。
4.1水提物抗氧化活性
丁良等研究發(fā)現(xiàn)酢漿草水提取液具有一定的抗氧化活性的能力且在一定范圍內隨著水提取液的濃度的增大,清除DPPH自由基的能力越強,當酢漿草水提取液濃度為2 mg/ml時,67.144%的DPPH自由基被清除[27]。