王連潤等
摘要[目的] 分析藍(lán)莓幼嫩芽葉中的兒茶素類茶多酚成分含量。[方法] 應(yīng)用高效液相色譜(HPLC) 技術(shù),對南高叢藍(lán)莓“夏普藍(lán)”葉片兒茶素類茶多酚含量進(jìn)行了分析。[結(jié)果]試驗(yàn)表明,藍(lán)莓幼嫩芽葉含有5種主要兒茶素類茶多酚,分別為兒茶素(C)、表兒茶素(EC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、沒食子酸(GA),此外還含有咖啡因(CAF)。[結(jié)論]研究可為藍(lán)莓作為一種理想的茶用資源植物提供科學(xué)依據(jù)及植物化學(xué)方面的證據(jù)。
關(guān)鍵詞藍(lán)莓;茶多酚;兒茶素
中圖分類號S663.2文獻(xiàn)標(biāo)識碼
A文章編號0517-6611(2014)28-09918-02
Analysis on the Catechins of Tea Polyphenols in Leaves of Blueberry
WANG Lianrun, LIU Jiaxun*, LIANG Mingtai et al(Institute of Horticultural Crops, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming, Yunnan 650205)
Abstract [Objective] To analyze catechin of tea polyphenols in leaves of blueberry. [Method] The catechins of tea polyphenols in leaves of highbush blueberry “sharplbue” were analyzed with HPLC. [Result] The results showed that, 5 kinds of catechins of tea polyphenols were found in leaves. There are C, EC, ECG, EGCG, GA, in addition, it also contains CAF. [Conclusion] The study can provide scientific basis and phytochemical evidence that bluberry can be as an ideal resources plant used as tea.
Key words Blueberry; Tea polyphenol; Catechin
藍(lán)莓(bluberry),又稱為越桔或藍(lán)漿果,為杜鵑花科(Ericaeae)越桔屬(vaccinium L)植物。由于對藍(lán)莓果實(shí)保健意義的科學(xué)論證, 尤其是色素在保護(hù)視力上的作用, 使藍(lán)莓受到越來越廣泛的重視,聯(lián)合國糧農(nóng)組織將其列為人類五大健康食品之一[1]。
茶多酚(TP)是茶葉中一類主要的化學(xué)成分,也是茶葉的主要活性成分,占茶葉干重的20%~35%,其主要組分為兒茶素,占其總量的80%左右。茶葉中兒茶素主要為表兒茶素(EC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、表沒食子兒茶素(EGC)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)等。近年來,大量研究證實(shí)TP具有消除自由基、抗氧化等生物活性,在抑菌、抗病毒、抑制腫瘤、防治心血管疾病等方面具有良好功效[2]。筆者通過對藍(lán)莓幼嫩芽葉中的兒茶素類茶多酚成分分析,旨在為藍(lán)莓作為一種理想的茶用植物提供科學(xué)依據(jù)及植物化學(xué)方面的證據(jù),對進(jìn)一步挖掘藍(lán)莓樹種的潛在價值具有重要意義。
1材料與方法
1.1材料
測試樣品采集于云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝作物研究所藍(lán)莓試驗(yàn)基地3年生南高叢藍(lán)莓“夏普藍(lán)”植株,采集帶2~3片嫩葉的芽,樣品采集后及時送至檢測中心進(jìn)行檢測前處理。
1.2兒茶素類茶多酚含量測定
1.2.1儀器及分析條件。樣品檢測在中國科學(xué)院昆明植物研究所檢測中心進(jìn)行。分析儀器采用Agilent1100 高效液相色譜儀,色譜柱為ZORBAX SBC18 (250×4.6 mm,5 μm,Agilent公司生產(chǎn)),柱溫為40 ℃。
1.2.2洗脫條件。用乙腈-甲酸緩沖液梯度洗脫,0→5 min為8%乙腈∶92%水(含5%甲酸);從5~23 min 洗脫液濃度過渡到25%乙腈∶75%水(含5%甲酸);23~25 min 洗脫液為8%乙腈∶92%水(含5%甲酸);流速為1 ml/min,檢測波長為280 nm。
1.2.3分析樣品溶液的制備。樣品于60 ℃烘箱干燥,粉碎,從粉碎樣品中準(zhǔn)確稱取2.291 g于15 ml容量瓶中,加入甲醇10 ml,搖勻,室溫浸提2 h,超聲提取30 min,加入甲醇定容至15 ml,搖勻,靜置,取上清液經(jīng)0.45 μm 微孔濾膜過濾,4 ℃條件下保存待測。
2結(jié)果與分析
采用高效液相色譜法對南高叢藍(lán)莓“夏普藍(lán)”的幼嫩芽葉中兒茶素類茶多酚含量進(jìn)行定量分析,結(jié)果表明(圖1),除表沒食子兒茶素(EGC)未能檢測出外,其余5種兒茶素類茶多酚能清晰地相互分開并能準(zhǔn)確定量,表明高效液相色譜法用于藍(lán)莓幼嫩芽葉中兒茶素類茶多酚含量的定量分析檢測可行、可靠、靈敏。
從表1可以看出,表沒食子兒茶素沒食子酸(EGCG)的含量最高,達(dá)1.28%;其次為表兒茶素沒食子酸酯(ECG),含量為0.37%;兒茶素(C)含量較低,僅為0.11%;表兒茶素(EC)、咖啡因(CAF)和沒食子酸(GA)三者的含量均非常低,表沒食子兒茶素(EGC)可能由于含量太低在藍(lán)莓幼嫩鮮芽葉中未能檢測出。
3討論
從檢測結(jié)果來看,藍(lán)莓幼嫩鮮葉中的表兒茶(EC)、沒食子酸(GA)和咖啡因(CAF)3種成分含量較低,這可能與檢測樣品的性狀有關(guān)。茶多酚受內(nèi)外因素的影響變化大 [3],而茶葉在加工制作過程中要經(jīng)過高溫殺青(以綠茶為例)、揉捻、烘干等工序而發(fā)生復(fù)雜的生理生化變化,從而導(dǎo)致兒茶素類茶多酚含量發(fā)生變化,兒茶素類茶多酚含量檢測一般采用經(jīng)過加工制作的成品茶葉[4-6],故該研究中選用鮮葉進(jìn)行檢測可能是分析結(jié)果含量偏低的原因之一。
茶葉作為一種天然健康的飲料日益受到人們的青睞,咖啡堿是茶葉中一種含量很高的生物堿,一般含量為2%~5%,咖啡堿具有興奮神經(jīng)、祛除疲勞、增強(qiáng)心血管系統(tǒng)活動等多種保健功效,然而,高劑量攝入咖啡堿會刺激中樞神經(jīng),引起人體焦躁不安、心悸失眠、頭痛等癥狀。因此,目前國內(nèi)外市場對茶葉新的消費(fèi)需求趨向于飲用不含或少含咖啡堿的茶飲料[5]。該研究結(jié)果表明,藍(lán)莓幼嫩芽葉中咖啡堿的含量極低,遠(yuǎn)低于唐一春等低咖啡堿茶樹種質(zhì)資源中咖啡堿的含量研究結(jié)果[5]。對藍(lán)莓莖葉進(jìn)行化學(xué)成分提取、分離及結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果表明,藍(lán)莓莖葉中含有槲皮素、胡蘿卜苷等大量對人體有益的成分[7]。此外,筆者通過多年的研究發(fā)現(xiàn),在半促成栽培中,南高叢藍(lán)莓具有很強(qiáng)的新梢萌芽力,完全可以作為茶用植物進(jìn)行開發(fā)利用。因此,結(jié)合該研究對藍(lán)莓幼嫩芽葉中的兒茶素類茶多酚成分含量進(jìn)行定量分析結(jié)果,為藍(lán)莓作物一種理想的茶用植物資源加以開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)及植物化學(xué)方面的證據(jù),為藍(lán)莓樹種提值增效以及進(jìn)一步挖掘潛在的利用價值奠定了基礎(chǔ)。
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