王建綱

【摘 要】系統(tǒng)壓力是考量液相色譜儀正常運(yùn)行的最重要指標(biāo)，儀器操作人員需要結(jié)合理論和實(shí)踐，掌握壓力故障的表現(xiàn)形式、分析思路和排除方法，快速準(zhǔn)確的解決各種壓力異常問(wèn)題，使日常分析工作更為有效可靠。本文基于儀器硬件故障導(dǎo)致的壓力問(wèn)題的分析，總結(jié)安捷倫液相色譜儀壓力相關(guān)問(wèn)題的診斷方法。

【關(guān)鍵詞】液相色譜儀；系統(tǒng)壓力；異常；診斷

【中圖分類(lèi)號(hào)】o657.7+2 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004-7484（2014）03-01130-02

【Abstract】The system pressure is considered most important index of liquid chromatograph. Instrument operator needs to combine the theory and practice, master pressure fault forms, analysis and elimination methods, to solve all kinds of abnormal pressure problems more quickly and accurately and make the daily analysis work is more effective and reliable. Based on the analysis of pressure problem caused by the hardware of instrument, this article summarize the diagnostic methods of agilents HPLC.

【Keyword】liquid chromatograph; system pressure; abnormal; diagnosis

高效液相色譜是目前應(yīng)用最多的色譜分析方法，幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。作為液相色譜儀的使用人員，不僅要熟練掌握操作技能，也要了解儀器的結(jié)構(gòu)原理，并具備基本的故障診斷能力，這樣才能在儀器發(fā)生故障時(shí)及時(shí)維修，或幫助不在現(xiàn)場(chǎng)的廠家工程師進(jìn)行判斷，縮短維修的周期。

1 壓力問(wèn)題是液相色譜儀最常見(jiàn)的故障表現(xiàn)形式

一個(gè)最基本的液相色譜系統(tǒng)由輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理軟件（或記錄儀）組成，各品牌的液相色譜儀在外觀上或有很大的不同，但只要遵循流動(dòng)相流路這條線索，就能理清各個(gè)模塊的功能和關(guān)系。在對(duì)本公司多臺(tái)安捷倫1100、1200、1260系列液相色譜儀超過(guò)10年的使用、維修實(shí)踐中，通過(guò)對(duì)165次的維修記錄進(jìn)行統(tǒng)計(jì)回顧，發(fā)現(xiàn)壓力問(wèn)題是液相色譜儀最常見(jiàn)的故障表現(xiàn)形式，占到所有故障的68%左右，18%為色譜峰問(wèn)題（其中一部分也和壓力有關(guān)），其余16%為機(jī)械或電氣故障。所以，對(duì)壓力問(wèn)題排查的是液相故障診斷的關(guān)鍵。

2 有關(guān)壓力的故障的診斷思路

在112次有關(guān)壓力的故障中，按發(fā)生的頻率從高到低分為三類(lèi)：壓力波動(dòng)異常62次（55%）、壓力偏高29次（26%）、壓力偏低21次（19%）。

對(duì)于氣、液體流路，“堵”幾乎是壓力偏高的唯一的原因，而一部分壓力偏低的根源也來(lái)自于堵（一些連接件因承受不了壓力而泄露），因此“治堵”是解決壓力問(wèn)題的主要手段。

3 壓力偏高的診斷步驟

液相色譜儀的管路很細(xì)，常規(guī)液相管線（綠色標(biāo)簽）內(nèi)徑為0.17mm，超高壓液相的管線（紅色標(biāo)簽）內(nèi)徑只有0.12mm，如果不注意流動(dòng)相和樣品的過(guò)濾，容易導(dǎo)致流路中各個(gè)部分發(fā)生堵塞導(dǎo)致壓力異常增大，發(fā)生堵塞的部位按頻次由高到低排列依次是Purge Valve過(guò)濾頭、進(jìn)樣閥的轉(zhuǎn)子、進(jìn)樣針和針座、色譜柱、連接毛細(xì)管、色譜柱入口濾網(wǎng)。具體堵塞位置的判斷一般采用分段排除法，通過(guò)簡(jiǎn)單判斷嘗試發(fā)現(xiàn)堵塞位置，可以替換部件予以證實(shí)。

3.1泵模塊的堵塞

壓力傳感器和阻尼器處于同一模塊，對(duì)于壓力傳感器之后的管路堵塞，表現(xiàn)形式為壓力增高，對(duì)于壓力傳感器之前的堵塞，表現(xiàn)為壓力降低，當(dāng)然壓力降低主要還是由泄漏引起的。

泵體內(nèi)的堵塞主要來(lái)自于柱塞密封圈的磨損，密封圈的硬度小于柱塞桿，磨損產(chǎn)生的微粒沉積在purge閥的過(guò)濾芯上，在打開(kāi)purge閥用5ml/min流速?zèng)_洗時(shí)壓力若超過(guò)10bar，需要更換濾芯。由于purge閥的過(guò)濾芯的攔截作用，使得阻尼器堵塞只是理論上的可能。

3.2泵后模塊堵塞

3.2.1發(fā)生在進(jìn)樣器的堵塞

流動(dòng)相進(jìn)入進(jìn)樣器六通閥的2號(hào)口，由于六通閥在發(fā)生進(jìn)樣動(dòng)作時(shí)在進(jìn)樣位置和充樣位置間切換，轉(zhuǎn)子和定子發(fā)生摩擦，造成轉(zhuǎn)子密封墊的磨損，部分脫落物留存在連通各個(gè)端口的孔槽中，產(chǎn)生系統(tǒng)阻力，壓力升高。

長(zhǎng)期用未經(jīng)妥善過(guò)濾的樣品進(jìn)樣，會(huì)堵塞連接針座和六通閥5號(hào)口的毛細(xì)管，在壓力增大的同時(shí)部分樣品從針座中溢出，導(dǎo)致峰面積減小。

3.2.2發(fā)生在柱溫箱內(nèi)的堵塞

色譜柱一般位于柱溫箱內(nèi)，安捷倫柱溫箱的流動(dòng)相從加熱塊內(nèi)部流過(guò)，為減小峰的擴(kuò)展，管路很細(xì)（體積3ul或6ul），從六通閥3號(hào)口流出的轉(zhuǎn)子密封磨損物可能會(huì)積存于此，產(chǎn)生堵塞。

色譜柱的堵塞是造成系統(tǒng)壓力偏大的主要原因，包括柱頭濾網(wǎng)的堵塞和色譜柱柱體的堵塞，一般只能通過(guò)清潔篩板或反沖解決，如果壓力還是超過(guò)可接受范圍，需要更換色譜柱。

3.2.3發(fā)生在檢測(cè)器內(nèi)的堵塞

紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器（G1314A）、FLD檢測(cè)器（G1321A）、DAD（G4212）檢測(cè)器石英窗分別可承受 40bar、20bar、60bar的背壓，如果檢測(cè)器出口管線堵塞，背壓超過(guò)限制，會(huì)使石英窗內(nèi)外壓差過(guò)大開(kāi)裂，實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行。可以連接內(nèi)徑較粗或長(zhǎng)度較短的管子作為檢測(cè)器出口的廢液管。曾發(fā)生過(guò)另一品牌DAD檢測(cè)器石英窗密封膜溶解的事例，溶解物堵塞檢測(cè)器出口，由于發(fā)現(xiàn)及時(shí)，未造成石英窗破損。

3.3分段排除法的運(yùn)用

液相色譜儀的系統(tǒng)壓力是各個(gè)組件對(duì)流經(jīng)的流動(dòng)相所產(chǎn)生的阻力總和。每個(gè)模塊和它們的部件產(chǎn)生的壓力都有正常的數(shù)值范圍，色譜柱是承壓的主要部件，約85～95%的系統(tǒng)壓力來(lái)自于色譜柱，因此用一個(gè)二通代替色譜柱就能很快捷的排除是否是色譜柱的問(wèn)題。色譜柱堵塞可以用100%的甲醇或乙腈反沖柱子，有一定概率使堵塞物沖出。

分段排除采用從后往前的順序，先斷開(kāi)處于系統(tǒng)最末端的檢測(cè)器，如果壓力下降不明顯，就排除其堵塞的可能，然后是柱溫箱（加熱塊的孔道、在線過(guò)濾器），然后是進(jìn)樣器六通閥（注意區(qū)分閥體內(nèi)堵和進(jìn)樣針座堵），還有連接這些模塊的毛細(xì)管。對(duì)于堵塞的部件，處理方法無(wú)外是沖洗或者更換。

4 壓力偏低的診斷步驟

4.1泵前的堵塞

如果溶劑過(guò)濾頭堵塞，泵不能把足夠的流動(dòng)相吸入到泵腔內(nèi)泵出，實(shí)際流速達(dá)不到設(shè)定流速，此時(shí)的壓力自然偏低，并且由于連接溶劑過(guò)濾頭和脫氣機(jī)的管路的真空，使氣泡不能完全被脫氣機(jī)脫除，氣泡一旦進(jìn)入到泵內(nèi)難于排除，因此在壓力降低的同時(shí)還會(huì)伴隨著壓力的波動(dòng)。

流動(dòng)相首先進(jìn)入到真空脫氣機(jī)，其半透膜內(nèi)徑很細(xì)，在溶劑過(guò)濾頭失效（孔徑變大）的情況在存在被微粒堵塞的可能。四元比例閥（以G1311A為例）內(nèi)析出的鹽和乙腈螯合物會(huì)也會(huì)“堵”住流動(dòng)相的必經(jīng)之路，導(dǎo)致電磁閥某個(gè)通道關(guān)閉不緊，一般不表現(xiàn)為明顯的壓力下降，但會(huì)使色譜峰保留時(shí)間不穩(wěn)定。

泵的一對(duì)單向閥隨著柱塞桿的往返運(yùn)動(dòng)間歇性開(kāi)關(guān)的，其中出口閥的開(kāi)啟和關(guān)閉是被動(dòng)的，入口閥有主動(dòng)和被動(dòng)兩種形式，被動(dòng)閥通過(guò)閥球兩端的壓力差自動(dòng)開(kāi)關(guān)。若入口閥采取被動(dòng)的形式，在流速較小的情況下，由于污物使閥球和其所在殼體發(fā)生粘連，導(dǎo)致不能正常打開(kāi)，使泵抽取的流動(dòng)相偏少，或者在泵出液體的階段關(guān)閉不嚴(yán)，都會(huì)造成壓力偏低并波動(dòng)。另一種極少發(fā)生的情況是主動(dòng)閥的閥體的電路控制發(fā)生故障，不能關(guān)緊，導(dǎo)致壓力下降。

泵前堵塞的幾率不大，基本上和儀器的使用習(xí)慣有關(guān)，只要按照SOP操作并做好泵的維護(hù)，一般不會(huì)發(fā)生。

4.2局部堵塞或管路連接處密封不嚴(yán)引起泄漏導(dǎo)致壓力下降

部件（如流動(dòng)池）、管路接頭可以承受的壓力是有范圍的，超過(guò)耐壓限度，有可能引起接它們的泄漏。如果和色譜柱連接的是PEEK接頭，耐壓在200bar左右，若色譜柱或流通池入口管路堵塞使柱前壓超過(guò)這個(gè)壓力，則接頭可能會(huì)彈開(kāi)，壓力從偏高的數(shù)值直接下降到十幾bar的大?。ㄏ喈?dāng)于不接色譜柱的系統(tǒng)壓力）。如果是比較耐壓的不銹鋼接頭，由于多次跟換色譜柱反復(fù)擰緊螺紋，導(dǎo)致接頭外螺紋形變，不能和色譜柱的內(nèi)螺紋完全密封，流動(dòng)相從螺紋空隙漏出，壓力下降。

各種密封墊的磨損是泄漏的另一種表現(xiàn)形式，只是發(fā)生在部件內(nèi)部，不能像接頭漏泄一樣直接觀察到，在排除其他壓力下降的原因后，需要把它們拆出更換，這是解決泄漏的最后措施。

發(fā)生在接頭的泄漏，如十分微量，會(huì)因?yàn)閾]發(fā)不會(huì)引起泄漏傳感器報(bào)警，否則都會(huì)被檢測(cè)到，可以根據(jù)工作站日志中的錯(cuò)誤信息進(jìn)行模塊的定位。

4.3其他導(dǎo)致壓力偏低的原因

溶劑比例閥（MCGV）比例不正確、色譜柱的固定性損壞也是壓力下降的原因，可以通過(guò)氣泡試驗(yàn)和更換同型號(hào)色譜柱的方法予以排除。

5 壓力波動(dòng)的診斷

引起壓力波動(dòng)的主要原因有溶劑入口過(guò)濾頭堵、泵柱塞密封老化、出口閥失效、入口閥失效、溶劑比例閥比例不正確、溶劑未脫氣等，前五種情況和壓力偏低具有很大的共性，溶劑脫氣效果差是壓力波動(dòng)的特殊原因。四元泵屬于低壓混合，必須在線脫氣，脫氣機(jī)的正常工作能夠保證多種溶劑混合時(shí)產(chǎn)生的氣泡降到最低程度。否則，氣泡進(jìn)入到泵體內(nèi)、六通閥、在線過(guò)濾器、檢測(cè)池這些具有微小腔體的部件內(nèi)，難于排出，排除進(jìn)入系統(tǒng)氣泡的常用方法是泄背壓沖洗法，即斷開(kāi)懷疑進(jìn)氣泡的部件后面的所有流路，使背壓相當(dāng)于大氣壓，用較大流速的流動(dòng)相沖洗，或者同時(shí)在出口接上注射器抽取，可以使氣泡排出腔體。

6 結(jié)論

液相色譜儀的各種壓力問(wèn)題都是有因可循的，儀器使用人員通過(guò)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的積累，能夠快速準(zhǔn)確的找出原因，排除故障，使儀器恢復(fù)正常運(yùn)行。

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