孫津津

摘要：采用同時(shí)蒸餾萃取法與水蒸氣蒸餾法提取煙草中揮發(fā)性成分并用氣相色譜-質(zhì)譜（GC/MS）法分別確認(rèn)其化學(xué)成分，其中主要成分為尼古丁.用氣相色譜法測(cè)定煙草中尼古丁的含量.尼古丁含量在0.4464～0.8928mg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，回歸方程為：A=61670M-2894.8，相關(guān)系數(shù)為0.9986，回收率為99.83%。

關(guān)鍵詞：煙草 尼古丁 氣相色譜-質(zhì)譜法 同時(shí)蒸餾萃取 水蒸氣蒸餾

中圖分類號(hào)：O657.63 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2014）06-0054-02

吸煙有害健康，已經(jīng)是人所共知的常識(shí)，尼古丁是煙草的重要成分之一，也是衡量煙草和卷煙質(zhì)量的重要指標(biāo)。本文分別采用同時(shí)蒸餾萃取法與水蒸氣蒸餾法對(duì)煙草中揮發(fā)性成分進(jìn)行了提取，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀確定其化學(xué)成分，并利用氣相色譜法測(cè)定煙草中尼古丁的含量。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

6890-5973氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用儀（美國(guó)HewlettPackard）；GC-14B氣相色譜儀，火焰離子化檢測(cè)器（日本島津公司）；氫氣發(fā)生器（大連化學(xué)物理研究所）；同時(shí)蒸餾-萃取裝置（自制）；R2-201型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海中科機(jī)械研究所）；乙醚、乙醇、無水硫酸鈉（分析純）；尼古?。兌却笥?9%，美國(guó)Sig-ma公司，4℃下保存）；煙絲（沈陽(yáng)卷煙廠提供）。

1.2 尼古丁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液

準(zhǔn)確稱取37.20mg尼古丁標(biāo)準(zhǔn)品用乙醇定容至10mL.置于冰箱中4℃下保存，備用。

1.3 煙草揮發(fā)油的提取

同時(shí)蒸餾-萃取法：稱取煙絲樣品50g置于2000mL單頸燒瓶中，加入800mL去離子水浸泡，接在SDE的一端，控制溫度保持沸騰，另取100mL重蒸乙醚于500mL單頸萃取燒瓶中，接在SDE的另一端，以恒溫水浴加熱萃取燒瓶，在40℃以下連續(xù)萃取5h將乙醚萃取液用活化過的硫酸鈉脫水，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去乙醚，得到淡黃色透明液體，收率為1.78%，備用。水蒸氣蒸餾-萃取法：稱取煙絲樣品50g置于1000mL圓底燒瓶中，加入200mL去離子水浸泡，用水蒸汽蒸餾，餾出液用乙醚連續(xù)萃取3次，然后用活化過的無水硫酸鈉脫水，乙醚萃取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去乙醚，得到淡黃色透明液體，測(cè)定揮發(fā)油的含量，收率為1.64%，備用。

1.4 氣相色譜-質(zhì)譜分析

色譜條件：色譜柱，HP-5彈性石英毛細(xì)管柱25m×0.2mm×0.33μm；柱溫：初始溫度60℃，保持2min，以6℃/min升至230℃；汽化室溫度250℃；溶劑延遲3min；傳輸線溫度230℃；進(jìn)樣量0.2μL；載氣He；載流量2mL/min；分流比40∶1.質(zhì)譜條件：離子源EI；離子源溫度220℃；電子能量70ev；發(fā)射電流34.6μA；電子倍增器電壓1246V；質(zhì)量范圍為30～500m/z。

1.5 色譜定量分析

色譜定量分析條件：色譜柱為DB-1彈性石英毛細(xì)管柱（30m×0.5mm×1.5μm，內(nèi)涂聚乙二醇固定液）；氮?dú)庾鬏d氣，流量50mL/min；氫流量50mL/min；柱溫140℃，進(jìn)樣口溫度170℃，檢測(cè)器溫度170℃，不分流進(jìn)樣。

1.6 實(shí)驗(yàn)步驟

煙草揮發(fā)性成分的色譜-質(zhì)譜分析取煙草揮發(fā)油0.2μL，用氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用儀進(jìn)行分析鑒定。通過G1701BA化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，檢索Nis98譜圖庫(kù)，并分別與八峰索引及標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行對(duì)照、復(fù)合，再結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行人工譜圖解析，確認(rèn)煙草揮發(fā)油的各個(gè)化學(xué)成分。再通過G1701BA化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按面積歸一化法進(jìn)行定量分析，分別求得各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對(duì)百分含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 煙草揮發(fā)油中化學(xué)成分鑒定結(jié)果

按前述實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，由化學(xué)工作站給出煙草揮發(fā)油的總離子流圖。用方法SDE提取的煙草揮發(fā)油中，鑒定出22種化合物，尼古丁占揮發(fā)油總量的8.06%，用方法WDE提取的煙草揮發(fā)油中，鑒定出21種化合物，尼古丁占揮發(fā)油總量的3.44%.通過上面的比較與分析可知，同時(shí)蒸餾萃取法和水蒸氣蒸餾法雖然都適合分析煙草中揮發(fā)性成分，但同時(shí)蒸餾萃取法比水蒸氣蒸餾法分析煙草中揮發(fā)性成分的提取率高。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確移取1.2尼古丁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.2，1.5，1.8，2.1， 2.4mL用乙醇定容至10mL，分別取1μL進(jìn)樣，根據(jù)進(jìn)樣量與吸收峰面積作標(biāo)準(zhǔn)曲線，尼古丁回歸方程為：A=61670M-2894.8，r=0.9986；尼古丁含量在0.4464～0.8928mg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.3 回收率實(shí)驗(yàn)

根據(jù)1.5色譜定量分析條件，取濃度為0.2mg/mL的樣品，分別加入標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.1，0.2，0.3μg/mL，測(cè)定峰面積，求得平均回收率為99.83%。

2.4 方法精密度

精密量取尼古丁標(biāo)準(zhǔn)溶液1.5mL用乙醇定容至10mL，取1μL重復(fù)進(jìn)樣9次，測(cè)定其峰面積。計(jì)算得到的變異系數(shù)小于1.00%，說明該方法的精密度較好。

2.5 樣品的測(cè)定

按1.5色譜定量分析條件，測(cè)定5種煙草樣品中（每種測(cè)定3次）尼古丁的平均含量分別為：煙草1#：19.5mg/g；煙草2#：12.22mg/g；煙草3#：14.31mg/g；煙草4#： 18.92mg/g；煙草5#：14.90mg/g.由樣品測(cè)定結(jié)果可知，煙草中尼古丁含量隨煙葉質(zhì)量和加工工藝而不盡相同.煙草中含有3000多種對(duì)人體有害的化學(xué)物質(zhì)，而其中毒性最大的物質(zhì)是尼古丁.尼古丁是一種存在于茄科植物中的生物堿，又稱煙堿，是一種中毒性興奮麻醉物質(zhì)，能興奮和麻醉中樞神經(jīng)，可使血管痙攣、血壓升高。它可使腦血管發(fā)生血栓或破裂，引起偏癱或致命。又可使心率加快，誘發(fā)心絞痛。它能損害支氣管粘膜，可引起支氣管炎、肺氣腫等疾病。

參考文獻(xiàn)

[1]李德亮，趙瑾，丁穎，等.煙堿的測(cè)量方法[J].化學(xué)通報(bào)，2002（3）：174-178.

[2]金聞博，戴亞，楊俊編.煙草化學(xué)分析與煙氣分析[M].南昌：江西科技出版社，1993.

[3]劉惠民，穆懷靜，王芳.煙草中煙堿的測(cè)定[J].煙草科技，1995（2）：21-23.