林玲

摘要：目的：超聲波法提取漯河本地桑葚中的白藜蘆醇并測定其抗氧化能力。方法：抗氧化能力是測定提取物對DPPH·，·OH，O2·-三種自由基的清除能力。結(jié)果：桑葚白藜蘆醇對三種自由基都有很好的清除作用，并和濃度有依賴關(guān)系，但并非都是線性相關(guān)。結(jié)論：桑葚白藜蘆醇有很好的清除自由基能力，這為桑葚提取的進(jìn)一步研究提供了一定的理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：桑葚 白藜蘆醇 自由基 抗氧化

中圖分類號：R284 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）06-0017-02

桑葚是桑科桑屬植物，別名桑果。我國桑樹資源非常豐富，而果實桑葚含有人體所需要的多種營養(yǎng)物質(zhì)。在歷代中醫(yī)本草中都被認(rèn)為有黑發(fā)，補(bǔ)肝，延年，祛斑等作用。桑椹中含有人體必需的氨基酸，并含多種微量元素，營養(yǎng)價值很高。王欣研究利用Sephadex LH-20等方法在桑葚乙醇提取物中分離得到15個化合物[1]。對桑葚多糖和黃酮的研究也都證明其有抗氧化活性[2]。還有研究表明，桑葚提取物花色苷對乳腺癌細(xì)胞株有一定抑制作用[3]。白藜蘆醇（resveratrol）是芪類結(jié)構(gòu)非黃酮類多酚化合物，是一種植物抗毒素，經(jīng)過深入動物或細(xì)胞研究，目前認(rèn)為白藜蘆醇具有抗氧化，抗炎，抗癌，心血管保護(hù)，預(yù)防動脈粥樣硬化等各種作用[4]。本研究旨在對漯河本地桑葚進(jìn)行提取，并分析其抗氧化能力，為桑葚的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料及試劑

桑葚（購自漯河市丹尼斯超市）；無水乙醇，乙酸乙酯，甲醇等試劑均為分析純，水為雙蒸水；DPPH（1，1- 二苯-2-苦肼基）、TPTZ（三吡啶三吖嗪）（Sigma公司）；各試劑盒均購自南京建成生物有限公司。

1.2 儀器

752型紫外分光光度計（上海第三分析儀器廠）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申生科技有限公司）；超聲波提取儀（宿州歐倍科學(xué)儀器有限公司）；BT25S型電子天平（德國賽得利斯集團(tuán)）。

1.3 實驗方法

（1）白藜蘆醇超聲波提取方法，具體參照葛亮方法進(jìn)行[5]。提取后將粗體物配置5個相同梯度的濃度，考察白藜蘆醇濃度對自由基清除能力的影響。

（2）清除DPPH·自由基的能力。利用分光光度法測定DPPH·自由基的清除能力。量取5個梯度的桑葚白藜蘆醇提取物稀釋液100ul，加入0.2mmol/L DPPH·自由基乙醇溶液2ml，使其充分混勻并反應(yīng)30min。以磷酸緩沖液作為空白對照，在520nm測定吸光度，以A520表示。

DPPH·自由基清除率=[1-A520樣品/A520空白]×100%

（3）清除羥自由基·OH的能力 具體參照余立梅方法[6]。

（4）清除超氧自由基O2·-能力 具體方法參照Xican Li方法進(jìn)行[7]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

以上數(shù)據(jù)均采用excel進(jìn)行處理分析。

2 結(jié)果

（1）桑椹白藜蘆醇超聲波提取結(jié)果。測得白藜蘆醇含量為68.54ug/g。

（2）桑葚白藜蘆醇對DPPH·自由基，羥自由基·OH，超氧自由基O2·-的清除能力。具體見表1。

從表1可以看出，桑葚白藜蘆醇對DPPH·，·OH，O2·-三種自由基都有一定的清除作用，且隨著濃度的增加，清除能力逐漸增加，但并非都呈線性增加?？梢钥闯?，對·OH的清除能力對白藜蘆醇的濃度有劑量依賴性，而對DPPH·，O2·-兩種自由基的清除能力則隨著濃度增加增加比較緩慢。

3 結(jié)語

超聲波法提取桑葚中的白藜蘆醇其含量為68.54ug/g。而對其抗氧化能力的試驗表明，桑葚中白藜蘆醇對DPPH·，·OH，O2·-三種自由基都有一定的清除能力，這說明桑葚有很好的抗氧化能力。羅妲研究了桑葚提取液對D-半乳糖引起的衰老小鼠生化指標(biāo)表明，桑葚有很好的保護(hù)腎臟和抗氧化功能[8]。引起這種作用的原因可能是多方面的。一般認(rèn)為和桑葚中Vc，黃酮有關(guān)，本研究表明桑葚中的白藜蘆醇也具有一定的抗氧化能力。本研究結(jié)果和相關(guān)桑葚中的白藜蘆醇的研究結(jié)果不是很相同，這和提取方法有一定的關(guān)系，和桑葚的產(chǎn)地也有一定關(guān)系。機(jī)體代謝過程中因為生物氧化作用，不可避免會產(chǎn)生自由基，而其中大多數(shù)為活性氧自由基，當(dāng)機(jī)體自由基增多后會對機(jī)體的正常細(xì)胞和組織產(chǎn)生破壞作用，并會導(dǎo)致衰老，癌癥，死亡。所以自由基的清除非常重要，本研究表明，桑葚白藜蘆醇對自由基有很好的清除作用。而研究表明桑葚黃酮，多糖同樣也有很好的清除自由基的作用。這也為以后的研究提供了一定的方向，應(yīng)該繼續(xù)深入研究三者之間的協(xié)同作用，為桑葚的更好開發(fā)提供理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]王欣，王洪慶，康潔，劉超，陳若蕓.桑葚的化學(xué)成分研究[J].藥學(xué)學(xué)報，2014，49（4）：504-506.

[2]韓偉，張玲玲，黃兮，等.桑葚多糖的絮凝春花及其抗氧化性[J].南京工業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2014，36（1）：97-99.

[3]王湛，付鈺潔，等.桑葚花色苷的提取及對人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-453生長的抑制[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2011，33（10）：988-990.

[4]付元慶，李鐸.白藜蘆醇[J].營養(yǎng)學(xué)報，2014，36（1）：13-15.

[5]葛亮，楊清香，張志強(qiáng).超聲波提取桑葚中白藜蘆醇的工藝[J].食品研究與開發(fā)，2010，31（7）：69-71.

[6]于立梅，趙謀明，崔春，等.山竹殼中原花青素提取分級及抗氧化活性的研究[J].食品與機(jī)械，2007，7（4）：60-63.

[7]Xican Li.Improved Pyrogallol Autoxidation Method：A Reliable and Cheap Superoxide-scavenging Assay Suitable for All Antioxidants.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2012，60：6418-6424.

[8]羅妲，鄧秀婷，李彥斌，等.桑葚提取液對D-半乳糖致衰老小鼠血液生化指標(biāo)影響的實驗研究[J].右江民族學(xué)院學(xué)報，2013，6：789-790.