劉立鶴，張 恒，聶 偉，陳 進，張志勇，劉 軍，黃 峰，2，范 偉

(1.武漢輕工大學 動物科學與營養(yǎng)工程學院，湖北 武漢430023;2.湖北省淡水水產(chǎn)健康養(yǎng)殖協(xié)同創(chuàng)新中心，湖北武漢430023;3.武漢愛維信生物科技有限公司，湖北武漢430070)

益寧易 SCP(Celmanax Soluble Concentrated Powder)是美國偉克公司采用先進的生產(chǎn)工藝和獨特的發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的純天然酵母水解產(chǎn)物。該產(chǎn)品富含酵素、氨基酸、肽、維生素、礦物質(zhì)、多種有機酸和生長因子;同時含有酵母細胞壁的水解產(chǎn)物如β-葡聚糖、甘露寡糖等功效物質(zhì)。目前在畜禽上已有使用，對有效降低動物的熱應激、促進食欲、增強動物的免疫力有十分明顯的效果［1］。

近年來隨著酵母源生物的推廣，酵母水解物、酵母培養(yǎng)物在水產(chǎn)動物的應用也開始普及和推廣，其中酵母水解物、酵母培養(yǎng)物在對蝦［2］、斑點叉尾鮰［3］、中華鱉［4］等高檔水產(chǎn)動物飼料中的應用相對較多，有研究報道證實酵母水解物對促進水產(chǎn)動物快速生長、促進采食、改善腸道結(jié)構(gòu)有明顯改善［5-6］。酵母核酸在淡水魚類相應研究及應用較少，筆者前期曾在鯽魚［7］和草魚［8］上進行過酵母源生物飼料有零星的研究，但有關(guān)酵母培養(yǎng)物在淡水魚類上的相關(guān)研究尚不多見。

筆者通過在兩種不同飼料配方水平中分別添加益寧易SCP，通過人控水體養(yǎng)殖，研究飼料中添加益寧易SCP對草魚生長性能、飼喂效果、肝功能指標和腸道顯微結(jié)構(gòu)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗魚

供試草魚系同批同源苗種，購自漢川華嚴農(nóng)場，運抵武漢輕工大學水產(chǎn)養(yǎng)殖基地暫養(yǎng)2周后，開始分組試驗。

1.2 飼養(yǎng)時間

試驗于2012年11月18日開始，至2012年12月31日結(jié)束，為期6周。

1.3 試驗飼料

試驗飼料分設(shè)A和B兩個對照組，其中A對照組飼料配方價格跟目前市場上常見飼料配方價格持平，B對照組飼料配方價格略低于A對照組。在每個對照組基礎(chǔ)上分別添加50 g/t和100 g/t的益寧易SCP，共6個處理組(見表1)。

試驗原料制粒前經(jīng)粉碎后過40目篩。飼料微量元素添加時采用逐漸擴大法混合，原料按配方均勻混合后，經(jīng)擠條機擠壓成型，24 h空調(diào)房晾干，置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 試驗飼料配伍及常規(guī)成分分析 /%

1.4 試驗管理

每個處理組設(shè)4個重復，每個重復25尾魚，魚均重20.39±2.19 g。試驗期間，每天分2次飽食投喂(09∶30和16∶30)，并密切觀察和記錄魚的攝食和活動情況，準確記錄投喂的飼料量。每3日換1次水，保持水質(zhì)在以下標準內(nèi):平均水溫為(20±2)℃ ，溶氧 ＞6 mg/L。

1.5 樣品采集

試驗前和試驗結(jié)束后分別將魚禁食24 h后稱重，試驗期間記錄投餌的重量和死亡數(shù)目。試驗結(jié)束后分別在各組隨機抽取若干條草魚尾靜脈抽血，采取血清用于肝功能指標的測定。每缸隨機取魚5尾，測定體長、體重，并解剖后稱取肝重和空腹重，每個試驗組取1—2尾魚取前中腸、后腸和肝臟在布安氏液中固定后，制作成顯微切片進行觀察。

1.6 評價指標

成活率=(總尾數(shù)-死亡數(shù))/總尾數(shù);

增重率(WGR)= ［(Wt-W0)/W0］×100%;

餌料系數(shù)(FCR)=F/(Wt-W0);

肥滿度=體重/(體長)3;

胴體比=空腹重/體重;

肝體指數(shù)=肝重/空腹重。

式中:Wt為試驗末魚總體重(g)，W0為試驗初魚總體重(g)，F(xiàn)為攝取的飼料總重量(g)。

待測血清送醫(yī)院檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶等免疫指標。對制作的切片進行顯微觀察，并以小腸皺褶高度作為相關(guān)的評估指標，以此判斷飼料添加益寧易SCP后對草魚腸道結(jié)構(gòu)的影響。

1.7 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析，單因子方差(One-Way ANOVA)分析進行差異顯著性檢驗，并采用鄧肯氏(Duncan’s)法進行多重比較。顯著水平 P ＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 對草魚生長性能及形態(tài)指標的影響

飼料中添加益寧易SCP對草魚生長性能的影響見表2。試驗數(shù)據(jù)顯示，飼料中添加益寧易SCP對改善草魚的生長性能有一定的作用，只是這種作用并無顯著性差異。隨著飼料中益寧易SCP添加量的增加，草魚的增重率總體呈現(xiàn)出增加的趨勢，餌料系數(shù)呈現(xiàn)下降的趨勢。其中，常規(guī)飼料配方中分別添加50 g/t和100 g/t益寧易SCP后，草魚增重率分別提高了13.93%和31.89%，飼料系數(shù)分別降低了27.54%和18.84%;而相對低質(zhì)飼料中添加50 g/t的益寧易 SCP后，草魚增重率由對照組的34.77%減少到 25.03%，降低了 28.01%(估計與死亡魚類個體相對較大有一定相關(guān)性)，益寧易SCP的添加量上升到100 g/t后，草魚增重率上升到42.16%，提高了21.25%，此時其餌料系數(shù)也降低了 12.45%。

飼料中添加益寧易SCP對草魚成活率、肥滿度和胴體比的影響不大，除試驗組2(對照組A+100 g/t益寧易SCP)的成活率為65%，比對照組的77%下降了 15.58%以外，其余各組的成活率都在71%—77%之間，無明顯變化。各組間的肥滿度均在1.30左右，胴體比在87%上下，組間變化率均在5%以內(nèi)，無明顯變化。

表2 飼料中添加益寧易SCP對草魚生長性能及形態(tài)指標的影響

2.2 飼料中添加益寧易SCP對草魚肝功能的影響

由表3可知，飼料中添加益寧易SCP后對草魚的肝功能有明顯的改善效果，其中，在普通飼料中添加50 g/t和100 g/t的益寧易SCP后，草魚的肝體指數(shù)分別降低了17.91%和15.92%，谷丙轉(zhuǎn)氨酶分別降低了20.31%和20.97%，谷草轉(zhuǎn)氨酶在添加量為50 g/t時降低了15.10%，但在添加量增加到100 g/t時，上升了3.44%。在低價飼料中添加50 g/t和100 g/t的益寧易SCP后，草魚的肝體指數(shù)分別降低了10.27%和18.92%，谷丙轉(zhuǎn)氨酶分別降低了37.76%和 16.66%，谷草轉(zhuǎn)氨酶分別降低了26.10%和31.21%。但組間組內(nèi)酶活力波動較大，各組間并無呈現(xiàn)顯著差異(P＞0.05)。

表3 飼料中添加益寧易SCP對草魚肝功能的影響

2.3 飼料中添加益寧易SCP對草魚肝臟、腸道顯微結(jié)構(gòu)的影響

從試驗各組所取草魚肝臟的顯微結(jié)構(gòu)(見圖1—圖6)分析，普通飼料組草魚肝臟的顯微細胞結(jié)構(gòu)基本完整，即便一些細胞出現(xiàn)核區(qū)擴散的現(xiàn)象，但細胞的核區(qū)、界面也基本清晰，并無出現(xiàn)明顯的病變和衰變跡象。低質(zhì)飼料組草魚肝臟的細胞結(jié)構(gòu)仍然相對完整，核區(qū)、界面相對清晰，即便個別圖中(如圖2)個別肝細胞出現(xiàn)類似核區(qū)自溶，核區(qū)界面仍然相對可見，也無明顯病灶特征。相對而言，低質(zhì)飼料組肝臟細胞結(jié)構(gòu)不如普通飼料組結(jié)構(gòu)清晰，細胞中空泡現(xiàn)象相對普通組要普遍。

圖1 A組肝胰臟的顯微結(jié)構(gòu)圖×400倍

圖2 B組肝胰臟的顯微結(jié)構(gòu)圖×400倍

圖3 試驗組1肝胰臟的顯微結(jié)構(gòu)圖×400倍

圖4 試驗組2肝胰臟的顯微結(jié)構(gòu)圖×400倍

圖5 試驗組3肝胰臟的顯微結(jié)構(gòu)圖×400倍

圖6 試驗組4肝胰臟的顯微結(jié)構(gòu)圖×400倍

從前中后腸的顯微結(jié)構(gòu)(圖7—圖12)分析，前中腸的微絨毛相對高大粗狀，而后腸的微絨毛則顯得相對短小。在飼料中添加益寧易SCP后，無論是前腸、中腸還是后腸微絨毛高度都呈現(xiàn)出增加的趨勢(見表4)，尤其是在普通飼料中添加50 g/t和100 g/t的益寧易SCP后，草魚前腸微絨毛高度分別達到44.44μm 和47.07μm，比對照組分別增加了8.8%和13.19%;中腸微絨毛分別達到 43.98 μm和52.31μm，明顯高于對照組的37.99μm。而在低價飼料中，添加100g/t的益寧易SCP能夠使草魚的前、中和后腸絨毛高度較低價未添加組分別增加5.01%，28.64%和12.07%，這都反映出益寧易 SCP對能夠改善腸道結(jié)構(gòu)，增強消化吸收能力。

表4 飼喂不同飼料對草魚腸道微絨毛高度的影響 (n=10) /μm

圖7 A組顯微結(jié)構(gòu)圖×100倍

圖8 試驗組1顯微結(jié)構(gòu)圖×100倍

圖9 試驗組2顯微結(jié)構(gòu)圖×100倍

圖10 B組顯微結(jié)構(gòu)圖×100倍

圖11 試驗組3顯微結(jié)構(gòu)圖×100倍

圖12 試驗組4顯微結(jié)構(gòu)圖×100倍

3 討論與小結(jié)

3.1 對草魚生長性能及形態(tài)指標的影響

益寧易SCP主要成分為酵母發(fā)酵物和酵母細胞壁的水解產(chǎn)物，能夠提供B族維生素、有機酸、氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)，對加強動物自身免疫，促進消化吸收，改善動物飼料利用率有很大的幫助。本試驗結(jié)果亦表明草魚飼料中添加益寧易SCP對提高草魚的生長性能有一定的幫助。

3.2 飼料中添加益寧易SCP對草魚肝功能、腸道的影響

在飼料中添加益寧易SCP后，反應草魚肝功能受損情況的相應指標包括肝體指數(shù)、谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶都呈現(xiàn)出下降的趨勢，表明益寧易SCP對改善草魚肝功能，增強草魚體質(zhì)有明顯的效果。近年來，由于水產(chǎn)養(yǎng)殖的密度逐漸增大導致的水體環(huán)境不斷惡化，以及飼料營養(yǎng)等多方面的原因，造成魚類肝臟負擔不斷增加，引起草魚肝臟部位發(fā)生病變，導致肝臟腫大，色澤失常，使肝臟失去正常的生理機能，導致魚體疾病［9-10］。而要想防治肝膽疾病，改善草魚消化吸收能力，提高草魚自身免疫力是關(guān)鍵。益寧易SCP含有的各種改善腸道和增強免疫成分，可以改善草魚腸道的微生物菌群結(jié)構(gòu)，促進腸絨毛的生長，提高草魚消化能力，并通過免疫多糖類物質(zhì)加強草魚自身免疫力，增加草魚肝臟的排毒解毒性能，保護草魚肝臟不受損傷，對防治草魚肝膽綜合癥有明顯的作用。

研究顯示，甘露寡糖可以促進腸道益生菌的生長，影響有害菌在腸道內(nèi)的定植，對調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)有顯著地效果。而良好的腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)，是保持腸道健康的重要保證。本試驗中，在飼料中添加富含甘露寡糖的益寧易SCP后，草魚腸絨毛長度增加，再次證明了甘露寡糖對改善腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)的良好效果。

3.3 小結(jié)

綜合來看，在普通飼料中添加50 mg/kg的益寧易SCP可以促進草魚的生長，保護草魚的肝臟不受損害，并能夠顯著促進草魚腸道的發(fā)育，增加其絨毛高度;而在低價飼料中，添加量要增加到100 mg/kg的時此類效果才會更明顯。

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