樸維英,陳 路,王成坤

(吉林大學(xué)口腔醫(yī)院牙體牙髓病科,吉林長春 130041)

根管封閉劑生物安全性評價(jià)方法及其應(yīng)用的研究進(jìn)展

Progress research on evaluation methods of biological safety and application of root canal sealer

樸維英,陳 路,王成坤

(吉林大學(xué)口腔醫(yī)院牙體牙髓病科,吉林長春 130041)

根管封閉劑臨床應(yīng)用前應(yīng)進(jìn)行生物安全性評價(jià),客觀檢驗(yàn)和評價(jià)根管封閉劑的生物安全性、選擇生物相容性高的材料應(yīng)用于臨床一直是牙體牙髓病學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。本文對根管封閉劑生物安全評價(jià)的必要性及其常用實(shí)驗(yàn)細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行綜述。

根管封閉劑;生物安全性;細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

研究[1]證明:根管封閉劑的溶解產(chǎn)物能以半抗原的形式對根尖周組織產(chǎn)生影響,最終導(dǎo)致根管治療的失敗。臨床應(yīng)用的根管封閉劑種類繁多,旨在通過改變理化性質(zhì)和充填方式提高根管封閉性能。但是,近年來隨著根充后疼痛的不斷出現(xiàn),根管封閉劑臨床應(yīng)用前的生物安全性評價(jià)受到人們的高度關(guān)注。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)是根管充填材料生物學(xué)評價(jià)的篩選實(shí)驗(yàn)之一[2]。當(dāng)前,有關(guān)細(xì)胞毒性的定義尚無定論,一些學(xué)者將其等同于體外毒理,更多學(xué)者將其定義為外界毒物所致細(xì)胞數(shù)量的改變[3]。本文作者采用后一種觀念,就根管封閉劑生物安全性評價(jià)的必要性及細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)的相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行綜述。

1 生物安全性評價(jià)的必要性

根管充填的目的是通過嚴(yán)密的充填將機(jī)械及化學(xué)預(yù)備未能清除的細(xì)菌隔絕在根管系統(tǒng)內(nèi),同時(shí)阻斷根尖周的細(xì)菌進(jìn)入根管,防止其再感染[4]。因此,近年來出現(xiàn)很多旨在提高根管封閉性能的根管充填材料,如環(huán)氧樹脂類根管封閉劑EZ-Fill,其特殊的雙向螺旋輸送器可將封閉劑甩入側(cè)副根管內(nèi),以求達(dá)到根尖3 mm良好的封閉[5];硅酮類根管封閉劑Roeko Seal利用自身良好的流動性和固化后0.2%體積膨脹達(dá)到根管封閉的效果[6]。

迄今為止,應(yīng)用最廣的充填材料為馬來膠,其具有輕微的抗菌性能和一定程度的組織刺激性。Cardoso等[7]發(fā)現(xiàn):將馬來膠植入Wistar大鼠皮下,8和60 d組大鼠均出現(xiàn)輕微的炎癥反應(yīng),這可能與其高含量的氧化鋅有關(guān)。常用的根管封閉劑有氧化鋅丁香油水門汀類、氫氧化鈣類、玻璃離子類和樹脂類。氧化鋅丁香油糊劑(ZOE)雖然有抑菌、安撫和麻醉的作用,但與牙膠、根管牙本質(zhì)無粘接性,與水反應(yīng)溶解出Zn2＋,根管封閉性能差[8]。此外,已經(jīng)證實(shí)該類根管封閉劑固化后釋放甲醛,細(xì)胞毒性較大[9],且毒性呈劑量依賴性,隨著丁香油量的增加毒性增加,延緩根尖周組織病變愈合甚至再次引發(fā)根尖周組織病變[10]。基于以上不足,ZOE已逐漸退出主流應(yīng)用。氫氧化鈣類根管封閉劑具有良好的生物相容性,可促進(jìn)根尖周骨質(zhì)的愈合。但有實(shí)驗(yàn)[11]表明:大量Ca2＋的釋放可引起細(xì)胞毒性;且由于氫氧化鈣的電離,導(dǎo)致封閉劑溶解,完整性破壞,根尖封閉性降低[12],故不適合用于成人的永久根管充填,主要用于蓋髓術(shù)、根尖誘導(dǎo)成形術(shù)和根管消毒等。玻璃離子類根管封閉劑中的玻璃離子與牙體組織羥基磷灰石中的鈣產(chǎn)生化學(xué)螯合作用,具有一定的化學(xué)粘結(jié)性。Ketac Endo是一款可注射型玻璃離子類封閉劑,表面張力低,流動性好,曾于20世紀(jì)80年代較多應(yīng)用于國外臨床。有實(shí)驗(yàn)[13-14]表明:Ketac Endo具有良好的生物相容性,但與牙膠(0.19 Mpa)和牙本質(zhì)(0.8 Mpa)粘接較弱[15],且持續(xù)釋放氟離子,溶解性大,根尖封閉性差[16]。此外,因?yàn)樯袩o玻璃離子的溶劑,根管再治療時(shí)難以將其去除,使得這類根管封閉劑使用較少。

目前國內(nèi)臨床常用的樹脂類根管封閉劑是環(huán)氧樹脂類根管封閉劑AH-plus,能與牙本質(zhì)形成良好的粘結(jié)[17],能明顯提高根尖封閉性,但與牙膠尖之間的惰性結(jié)合使其無法避免牙膠尖與封閉劑界面的微滲漏。近年來出現(xiàn)了生物陶瓷類根管封閉劑iRoot-SP,被稱為是生物相容性最好的材料。iRoot-SP以生物玻璃為基質(zhì),含有硅酸鈣、磷酸鈣、氫氧化鈣和氧化鋯等成分?？膳c牙本質(zhì)小管內(nèi)的水分發(fā)生水化反應(yīng)固化[18],固化過程中有2%～3%的體積膨脹而達(dá)到根管系統(tǒng)的3D充填,固化后無體積改變,對牙本質(zhì)小根管不會產(chǎn)生任何壓應(yīng)力。但對其細(xì)胞毒性的研究報(bào)道比較少。

由此可見,目前臨床常用的根管充填材料的性能尚未達(dá)到Grossman理想根管充填材料的標(biāo)準(zhǔn)。在臨床操作過程中,根管充填材料可能通過根尖孔及其他通道與牙周和根尖周組織接觸,也可能釋放一些毒性成分,對牙周和根尖周組織甚至全身健康產(chǎn)生影響。部分材料在混合初期,結(jié)固的幾小時(shí)、幾天或幾周時(shí)有毒性,甚至有些材料滲出有害成分長達(dá)數(shù)年。因此,在臨床應(yīng)用前,對根管充填材料生物安全性評價(jià)的研究十分必要。

2 根管封閉劑生物安全性檢測常用細(xì)胞

2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞種類用于根充材料細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞分2種:一種是原代細(xì)胞系,如牙周成纖維細(xì)胞和成骨細(xì)胞、牙髓細(xì)胞和牙齦成纖維細(xì)胞等;另一種是已建株細(xì)胞系,如小鼠肺成纖維細(xì)胞(L929)、小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(3T3細(xì)胞)及癌細(xì)胞等。原代細(xì)胞系能較好地模擬口腔狀況,但提取和體外培養(yǎng)過程較復(fù)雜,不易培養(yǎng)傳代。有實(shí)驗(yàn)[19]表明:采用消化培養(yǎng)法提取原代細(xì)胞時(shí),胰酶消化會損傷細(xì)胞,消化時(shí)間超過20 min,可消化掉細(xì)胞表面的蛋白質(zhì),使細(xì)胞表面的通透性升高,活力下降。建株細(xì)胞系并非口腔細(xì)胞,與口腔環(huán)境有一定的差異,但容易生長傳代、性質(zhì)穩(wěn)定。根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)化組織的要求,已建株細(xì)胞作為材料毒性測試的靶細(xì)胞,簡單易得、重復(fù)性好,且較原代細(xì)胞稍敏感,更適合于根管充填材料的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn),且二者差異對最終材料的毒性分級并無影響。Franz等[20]報(bào)道:原代牙齦組織纖維細(xì)胞和L929細(xì)胞用于細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn),其結(jié)果并無較大差異。Huang等[21]用牙周成纖維細(xì)胞和V79細(xì)胞比較不同種類根充糊劑細(xì)胞毒性時(shí)發(fā)現(xiàn):總體結(jié)果具有一致性且V79細(xì)胞更敏感。

2.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)MTT實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)多采用單層細(xì)胞培養(yǎng)法。多層細(xì)胞培養(yǎng)方法復(fù)雜和難度大,其準(zhǔn)確性、可重復(fù)性和適用范圍有待于進(jìn)一步核實(shí)。雖然Moharamzadeh 等[22]在檢測樹脂材料細(xì)胞毒性時(shí),證實(shí)多層細(xì)胞培養(yǎng)在評估口腔材料安全性方面較單層細(xì)胞能更好地模擬實(shí)際環(huán)境。但Vajrabhaya等[23]在評估6種根充材料的細(xì)胞毒性時(shí)發(fā)現(xiàn):多層細(xì)胞培養(yǎng)法對于評估根尖周組織無特殊意義。

3 根管封閉劑生物安全性評價(jià)常用細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法

3.1 同位素標(biāo)記法同位素標(biāo)記法包括有鉻釋放法、H3-leucine摻入法、I125-UdR-釋放法和放射性核苷酸前體物摻入法等。該方法能較深入細(xì)致地了解細(xì)胞受材料毒性影響而產(chǎn)生的分子水平變化,但方法復(fù)雜、結(jié)果受較多因素影響,且與其他體外法無明顯相關(guān)性[24]。

3.2 分子濾過法分子濾過法通過評價(jià)材料對單層細(xì)胞琥珀酸脫氫酶活性的影響以檢測細(xì)胞毒性,用于短期內(nèi)評價(jià)有輕度毒性的材料[25]。該方法可同時(shí)觀察材料的原發(fā)性及繼發(fā)性細(xì)胞毒性,快速簡便、敏感可靠,易推廣,但存在強(qiáng)行影響析出產(chǎn)物從材料中擴(kuò)散的缺點(diǎn)。

3.3 流式細(xì)胞術(shù)該方法主要針對單一生物材料,分析材料對體外培養(yǎng)細(xì)胞生物合成方面的影響。利用鞘流原理,使被熒光標(biāo)記的單個(gè)懸浮細(xì)胞排成單列,按重力方向流動。細(xì)胞被激光照射后發(fā)射熒光,檢測器可逐個(gè)對細(xì)胞的熒光強(qiáng)度進(jìn)行測定。根據(jù)熒光粒子發(fā)出的光量子而定量測定細(xì)胞中DNA水平,檢測快捷而方便,便于分析,發(fā)展?jié)摿Υ蟆?/p>

3.4 甲噻唑四唑氮(MTT)比色法MTT是一種黃色可溶性染料。活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚顆粒并沉積在細(xì)胞中。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,通過測定其吸光度(A)值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量及細(xì)胞代謝活性的強(qiáng)弱。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)(200～5×105),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成確定的直線回歸關(guān)系[26]。因此可利用A值降低程度反映材料析出液的細(xì)胞毒性大小。

國際上評價(jià)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)劣的指標(biāo)之一是生物學(xué)終點(diǎn)及可重復(fù)性。MTT法的生物學(xué)終點(diǎn)是線粒體,其病變是細(xì)胞受損最靈敏的指征,能十分靈敏地反映被測材料對細(xì)胞造成的毒性損害程度,且該方法操作簡單,可重復(fù)性好,可用于大批量測試。其不足之處是必須使用材料的浸提液進(jìn)行細(xì)胞毒性的測定。Grossman曾提出理想的根充糊劑應(yīng)不溶于組織液。但大多數(shù)根充糊劑在一定程度上是可溶解的[27-28]。有研究[29]顯示:新型根管封閉劑MTA Fillapex和Endosequence BC也有一定的溶解性。因此, MTT法測定根充糊劑的細(xì)胞毒性切實(shí)可行。

根管封閉劑細(xì)胞毒性測定的模塊制作尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),采用不同的標(biāo)準(zhǔn)(質(zhì)量/體積;表面積/體積)將對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。為了更好地模擬口腔實(shí)際情況,將實(shí)驗(yàn)材料分為2組,即新鮮組和固化組;首先按根充糊劑的產(chǎn)品說明制備糊劑,制作樣本,新鮮組將制備后的糊劑立即置于浸提液中,固化組則靜置一段時(shí)間,待材料凝固達(dá)到最終的的化學(xué)結(jié)構(gòu)后再置于浸提液中;每種根管封閉劑有各自的凝固時(shí)間,這樣分組可以測定每種根管封閉不同狀態(tài)下的細(xì)胞毒性。一些研究[30-31]表明:細(xì)胞毒性效應(yīng)取決于有毒性單體的釋放。對于樹脂類根充糊劑進(jìn)行根管充填操作時(shí),材料處于不完全聚合狀態(tài),在其聚合過程中很有可能釋放親水性的單體直接導(dǎo)致根尖周組織的損傷。樹脂類材料的聚合不完全,凝固后材料的細(xì)胞毒性效應(yīng)依賴于局部單體的濃度和洗脫動力學(xué)。Esteban等[32]比較4種甲基丙烯酸酯類樹脂根充糊劑時(shí)發(fā)現(xiàn):新鮮實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞活性較凝固組差,但組內(nèi)各材料細(xì)胞毒性的大小具有一致性?；诓牧媳旧淼睦砘再|(zhì),這種材料處理方式使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更有說服力、更可信。

值得注意的是:采用浸提液的材料處理方法評價(jià)單一實(shí)驗(yàn)材料的細(xì)胞毒性時(shí)存在結(jié)果偏低的不足。Pereda等[33]證實(shí):離子的擴(kuò)散程度和作用時(shí)間呈線性關(guān)系,濃度分布隨徑向距離增大而減少。在一定體積的浸提液中,離子濃度達(dá)到臨界值后,離子擴(kuò)散相對停止。就時(shí)間依賴性而言,在某一時(shí)間點(diǎn)一定體積浸提液中有毒離子濃度是均一穩(wěn)定的,不再隨時(shí)間的變化而改變。而事實(shí)上,根充糊劑中的有毒成分會隨著糊劑的溶解不斷釋放到根尖周組織,導(dǎo)致組織損害。液體均一穩(wěn)定的性質(zhì),也無法體現(xiàn)毒性物質(zhì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷的徑向依賴性,其忽略了距離材料近的地方毒性物質(zhì)離子濃度大、細(xì)胞毒性也大的事實(shí)。但對于多種材料的細(xì)胞毒性比較實(shí)驗(yàn)則不存在這一問題,只要組內(nèi)材料處理方式相同,不會影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的總體趨勢,實(shí)驗(yàn)結(jié)果是可靠而有意義的。一些根充糊劑細(xì)胞毒性比較實(shí)驗(yàn)[10,34-35]均證實(shí):AH-plus細(xì)胞毒性較低,生物相容性較好。

綜上所述,任何根充材料均有一定的細(xì)胞毒性,根充材料的生物安全性評價(jià)十分必要。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以為臨床應(yīng)用提供參考依據(jù),盡量選擇細(xì)胞毒性小的材料以避免根充術(shù)后疼痛的發(fā)生和提高治療成功率。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)的方法種類很多,MTT法操作簡單、可重復(fù)性好,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞毒性測定。在應(yīng)用中應(yīng)合理設(shè)計(jì),避免干擾因素,降低實(shí)驗(yàn)誤差,以得到可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。MTT實(shí)驗(yàn)有其自身的局限性,在評價(jià)單一根充材料的細(xì)胞毒性時(shí),MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果只能作為初步判定依據(jù),應(yīng)結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)以完善對根管充填材料生物安全性的評價(jià)。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)不能完全體現(xiàn)根管充填材料對根尖周組織產(chǎn)生的影響,應(yīng)用時(shí)應(yīng)進(jìn)一步考慮其結(jié)果與臨床應(yīng)用的相關(guān)性。

[1]Jenifer MG,Lizett CC,Francisco J,et al.Effect of the methacrylate-based endodontic sealer Epiphany on rat peritoneal macrophages viability[J].J Clin Exp Dent,2011, 3(3):e216-221.

[2]Rees KR.Cells in culture of toxicity testing:a review[J].J R Soc Med,1980,73(4):261-264.

[3]黃雪蓮,范國書,李繼遙.常用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)在口腔局部用藥安全性評價(jià)中的應(yīng)用[J].國際口腔醫(yī)學(xué)雜志,2009, 36(4):413-415.

[4]Sundqvist G,Figdor D,Persson S,et al.Microbiologic analysis of teeth with failed endodontic treatment and the outcome of conservative re-treatment[J].Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod,1998,85(1):86-93.

[5]Musikant Bl,Cohen BI,Deutsch AS.A tow-and-a-half year perspective on simplified endodontic techniques[J].Compend Contin Educ Dent,2003,24(1):46-48.

[6]Tanomaru-Fiho M,Tanomaru JM,Leonardo MR,et al.Periapical repair after root canal filling with different root canal sealers[J].Braz Dent J,2009,20(5):389-395.

[7]Cardoso M,Marques RF,Lopes MF,et al.In vivo biocompatibility of Resilon compared with gutta-percha in a pre-clinical model[J].Dent Res J,2013,10(5):652-658.

[8]Kumar RV,Shruthi C.Evaluation of the sealing ability of resin cement used as a root canal sealer:An in vitro study[J].J Endod,2012,15(3):274-277.

[9]Huang FM,Chou LS,Chou MY,et al.Protective effect of NACOn formaldehyde-containing-ZOE-based root-canalsealers-induced cyclooxygenase-2 expression and cytotoxicity in human osteoblastic cells[J].J Biomed Mater Res Part B: Appl Biomater,2005,74(2):768-773.

[10]Huang TH,Ding SJ,Hsu TZ,et al.Root canal sealers induce cytotoxicity and necrosis[J].J Mater Sci Mater Med, 2004,15(7):767-771.

[11]Eldeniz AU,Mustafa K,rstavik D,et al.Cytotoxicity of new resin-,calcium hydroxide-and silicone-based root canal sealers on fibroblasts derived from human gingiva and L929 cell lines [J].Int Endod J,2007,40(5):329-337.

[12]Hauman CH,Love RM.Biocompatibility of dental materials used in contemporary endodontic therapy:a review.Part 2.Root-canal-filling materials[J].Int Endod J,2003,36(3): 147-160.

[13]Beltes P,Koulaouzidou E,Kolokuris I,et al.In vitro evaluation of the cytotoxicity of two glass-ionomer root canal sealers[J].J Endod,1997,23(9):572-574.

[14]Kolokuris I,Beltes P,Economides N,et al.Experimental study of the biocompatibility of a new glass-ionomer root canal sealer(Ketac-Endo)[J].J Endod,1996,22(8):395-398.

[15]Nagas E,Altundasar E,Serper A.The effect of master point taper on bond strength and apical sealing ability of different root canal sealers[J].Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod,2009,107(1):61-64.

[16]Lacey S,Pitt Ford TR,Watson TF,et al.A study of the rheological properties of endodontic sealers[J].Int Endod J, 2005,38(8):499-504.

[17]PaquéF,Sirtes G.Apical sealing ability of Resilon/Epiphany versus gutta-percha/AH Plus:immediate and 16-months leakage[J].Int Endod J,2007,40(9):722-729.

[18]Ersahan S,Aydin C.Solubility and apical sealing characteristics of a new calcium silicate-based root canal sealer in comparison tocalcium hydroxide-,methacrylate resin-and epoxy resin-based sealers[J].Acta Odontol Scand,2013, 71(3/4):857-862.

[19]丁桂聰,毛天球,楊維爾,等.人口腔粘膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)及生物學(xué)特性的研究[J].牙體牙髓牙周病學(xué)雜志,2000, 16(4B):288-290.

[20]Franz A,K?nig F,Skolka A,et al.Cytotoxicity of resin composites as a function of interface area[J].Dent Mater, 2007,23(11):1438-1446.

[21]Huang FM,Tai KW,Chou MY,et al.Cytotoxicity of resin-,zinc oxide-eugenol-,and calcium hydroxide-based root canal sealers on human periodontal ligament cells and permanent V79 cells[J].Int Endod J,2002,35(2):153-158.

[22]Moharamzadeh K,Brook IM,Scutt AM,et al.Mucotoxicity of dental composite resins on a tissue-engineered human oral mucosal model[J].J Dent,2008,36(5):331-336.

[23]Vajrabhaya L,Sithisarn P.Multilayer and monolayer cell cultures in a cytotoxicity assay of root canal sealers[J].Int Endod J,1997,30(2):141-144.

[24]袁艷波,張文云.牙科生物材料細(xì)胞毒性試驗(yàn)方法的研究進(jìn)展[J].生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志,2009,26(3):688-691.

[25]孫 皎,薛 淼,張彩霞,等.用分子濾過法對13種醫(yī)用高分子材料的細(xì)胞毒性檢測[J].中國生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào), 1989,8(1):60-63.

[26]Mosmann T.Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival:application to proliferation and cytotoxicity assays[J].J Immunol Methods,1983,65(1/2):55-63.

[27]Peters DP.Two-year in vitro solubility evaluation of four gutta-percha sealer obstruction techniques[J].JOE,1986, 12(4):139-145.

[28]Poggio C,Arciola CR,Dagna A,et al.Solubility of root canal sealers:a comparative study[J].Int J Artif Organs, 2010,33(9):676-681.

[29]Zhou HM,Shen Y,Zheng W,et al.Physical properties of 5 root canal sealers[J].J Endod,2013,39(10):1281-1286.

[30]Gerzina TM,Hume WR.Effect of hydrostatic pressure on the diffusion of monomers through dentin in vitro[J].J Dent Res, 1995,74(1):369-373.

[31]Gerzina TM,Hume WR.Diffusion of monomers from bonding resin-resin composite combinations through dentine in vitro[J].J Dent,1996,24(1/2):125-128.

[32]Garza EG,Wadajkar A,Ahn C,et al.Cytotoxicity evaluation of methacrylate-based resins for clinical endodontics in vitro[J].J Oral Sci,2012,54(3):213-217.

[33]Pereda MD,Reigosa M,Fernández Lorenzo de Mele M.Relationship between radial diffusion of copper ions released froma metal disk and cytotoxic effects.Comparison with results obtained using extracts[J].Bioelectrochemistry, 2008,72(1):94-101.

[34]Al-Hiyasat AS,Tayyar M,Darmani H.Cytotoxicity evaluation of various resin based root canal sealers[J].Int Endod J,2010,43(2):148-153,

[35]Eldeniz AU,Mustafa K,?rstavik D,et al.Cytotoxicity of new resin-,calcium hydroxide-and silicone-based root canal sealers on fibroblasts derived from human gingiva and L929 cell lines[J].Int Endod J,2007,40(5):329-337.

R781.33

A

2014-01-08

吉林省科技廳科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目資助課題(20140414010GH)

樸維英(1987－),女,吉林省磐石縣人,在讀醫(yī)學(xué)碩士,主要從事牙體牙髓病基礎(chǔ)和臨床方面的研究。

王成坤(Tel:0431-88975348,E-mail:wck1964＠163.com)

1671-587Ⅹ(2014)05-1123-04

10.13481/j.1671-587x.20140542