摘 要：從污水處理廠提取活性污泥樣品，通過分離、培養(yǎng)和馴化，得到能夠降解氯代苯胺的復(fù)合菌，所得到的復(fù)合菌對氯苯胺的耐受性高于自然水體中的混合細菌。經(jīng)過對氯苯胺選擇性培養(yǎng)基馴化后發(fā)現(xiàn)，通過馴化培養(yǎng)的復(fù)合菌在對氯苯胺的降解實驗中具有很好的降解效果。

關(guān)鍵詞：對氯苯胺；生物降解；復(fù)合菌；降解效率；降解曲線

中圖分類號：X505 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：2095-6835（2014）03-0022-02

1 復(fù)合菌對對氯苯胺的生物降解實驗

1.1 復(fù)合菌的制備

1.1.1 污泥取樣與保存

污泥樣取自江門市污水處理廠，保存于4 ℃的冰箱中。取200 mL污泥放入1 000 mL的燒杯中，加入200 mL蒸餾水，曝氣24 h后靜置。

取90 mL滅菌液體培養(yǎng)基、10 mL污泥上清液于250 mL錐形瓶中，置恒溫搖床上培養(yǎng)48 h，溫度為30 ℃，頻率為150 r/min。

1.1.2 污泥中微生物的馴化

采用添加對氯苯胺的選擇性培養(yǎng)方法（具體方法略）馴化出可降解氯胺的復(fù)合菌群。

1.2 實驗室生物降解實驗

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)樣品的配制和樣品采集與測定

標(biāo)準(zhǔn)樣品的配制和樣品采集與測定過程不再贅述。

1.2.2 實驗樣品的制備

采用好氧搖瓶培養(yǎng)法研究復(fù)合菌群對對氯苯胺的生物降解。樣品制備的具體步驟如下：

第一步：取一系列已滅菌的容積為250 mL的錐形瓶，分別在上面貼上標(biāo)簽，例如①河水+藥+復(fù)合菌，②河水+藥，③河水滅菌+藥+復(fù)合菌，④河水滅菌+藥，⑤蒸餾水+藥+復(fù)合菌，⑥蒸餾水+藥。

第二步：在①和②瓶中加入160 mL取自江門市天沙河的河水，以作備用；在③和④瓶中加入160 mL已滅菌的河水，以作備用；在⑤和⑥瓶中加入160 mL的蒸餾水，以作備用。

第三步：根據(jù)馴化細菌的上限濃度，計算出加入各瓶中藥品的量（具體計算步驟見下一部分）。分別在①③⑤三個瓶中各加入20 mL已被馴化的細菌溶液。之后在所有瓶中分別加入20 mL的藥品，搖勻，然后置于30 ℃的恒溫培養(yǎng)均震器中培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速為150 r/min。

2 監(jiān)測結(jié)果與研究

2.1 對氯苯胺的監(jiān)測

根據(jù)對氯苯胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線以及濃度和吸光度關(guān)系的函數(shù)式：

y=11.285x+0.062 7 （1）

將每日所測得的吸光度帶入（1）式，即可算出每日濃度。

對氯苯胺隨時間變化監(jiān)測的實驗數(shù)據(jù)在此不再詳述，從實驗結(jié)果可以看出，從第七天開始，樣品①③④⑤⑥瓶中已經(jīng)沒有多大變化了，到第九天停止對所有樣品的監(jiān)測。

對氯苯胺的降解效率如表1所示。

2.2 對氯苯胺降解的研究

根據(jù)本次實驗的目的，每個樣品之間都可互為對照實驗，現(xiàn)將各對照實驗的降解曲線做出來（如圖1和圖2所示），由此可直觀地從圖上得知所用復(fù)合菌對對氯苯胺的降解效果。

2.2.1 ①③⑤對照試驗的降解曲線

通過對圖1中三條降解曲線的分析可知：①在這三種情況下，

水中的微生物都能對加入的對氯苯胺有降解作用；②根據(jù)圖1中三條曲線的走向可以發(fā)現(xiàn)，這三種實驗中的對氯苯胺從第三天開始降解，其中，“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”的曲線在第四天最先達到降解的穩(wěn)定狀態(tài)，并且根據(jù)降解過程中三條曲線的變化程度可以發(fā)現(xiàn)，“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”的降解速度比其他兩個實驗要快；③在“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”達到穩(wěn)定后1 d，“河水+藥+復(fù)合菌”和“河水滅菌+藥+復(fù)合菌”也達到穩(wěn)定，但最終穩(wěn)定時的濃度明顯比較高，說明這兩個實驗中的微生物對對氯苯胺的降解效果不如“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”中的復(fù)合菌好；④由②和③兩點中的結(jié)論又可以知道，河水中原有的微生物及河水滅菌后的懸浮物和有機物都對加入的復(fù)合菌有一定的抑制作用，其中，河水滅菌后的懸浮物和有機物對復(fù)合菌的影響更大。

根據(jù)圖中的降解曲線可以很清楚地得到這樣的結(jié)果：①沒有加入復(fù)合菌的三個實驗中，“蒸餾水+藥”作為完全的對照實驗沒有加入任何物質(zhì)，所以在整個降解過程中濃度沒有發(fā)生變化；“河水+藥”的實驗中，由于河水中原有的微生物對加入的對氯苯胺有降解作用，因而在后期降解曲線開始變化；而“河水滅菌+藥”中沒有任何的微生物，對所加入的對氯苯胺不會產(chǎn)生任何影響，可作為“河水+藥+復(fù)合菌”的對照實驗。②從圖中可以看出，“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”與“河水+藥”的降解曲線在降解過程中都發(fā)生了變化，但在實驗期間，“河水+藥”中的微生物對對氯苯胺的降解速度與“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”中的復(fù)合菌相比比較緩慢，并且降解的效率也很低。

3 結(jié)束語

在通過對實驗降解曲線分析比較之后，可以得出這樣的結(jié)論：①通過馴化培養(yǎng)的復(fù)合菌在對氯苯胺的降解實驗中具有很好的降解效果，幾乎可以將加入的質(zhì)量濃度為20 mg/L的對氯苯胺完全降解，并且復(fù)合菌的降解效果明顯優(yōu)于河水中原有的微生物；②河水中原有微生物及河水中的懸浮物和有機物都會對加入其中的復(fù)合菌產(chǎn)生一定的抑制作用。

參考文獻

[1]夏北成.環(huán)境污染物生物降解[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2002.

[2]任華峰，李淑芹，劉志培.氯代苯胺類化合物微生物降解的研究發(fā)展[J].微生物學(xué)通報，2004（3）.

[3]周霞，鄭先強，佟樹敏，等.苯胺降解菌的特性研究及分子生物學(xué)基礎(chǔ)[J].南開大學(xué)學(xué)報，2004（2）.

[4]王戰(zhàn)勇，蘇婷婷.氯苯降解菌株的選育[J].撫順石油學(xué)院學(xué)報，2002，22（4）：20-22.

作者簡介：張文濤（1982—），男，陜西漢中人，畢業(yè)于河海大學(xué)環(huán)境工程專業(yè)（本科），工程師，現(xiàn)工作于廣東省水文局江門水文分局水質(zhì)科，從事水質(zhì)監(jiān)測與評價工作。

〔編輯：曹月〕

摘 要：從污水處理廠提取活性污泥樣品，通過分離、培養(yǎng)和馴化，得到能夠降解氯代苯胺的復(fù)合菌，所得到的復(fù)合菌對氯苯胺的耐受性高于自然水體中的混合細菌。經(jīng)過對氯苯胺選擇性培養(yǎng)基馴化后發(fā)現(xiàn)，通過馴化培養(yǎng)的復(fù)合菌在對氯苯胺的降解實驗中具有很好的降解效果。

關(guān)鍵詞：對氯苯胺；生物降解；復(fù)合菌；降解效率；降解曲線

中圖分類號：X505 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：2095-6835（2014）03-0022-02

1 復(fù)合菌對對氯苯胺的生物降解實驗

1.1 復(fù)合菌的制備

1.1.1 污泥取樣與保存

污泥樣取自江門市污水處理廠，保存于4 ℃的冰箱中。取200 mL污泥放入1 000 mL的燒杯中，加入200 mL蒸餾水，曝氣24 h后靜置。

取90 mL滅菌液體培養(yǎng)基、10 mL污泥上清液于250 mL錐形瓶中，置恒溫搖床上培養(yǎng)48 h，溫度為30 ℃，頻率為150 r/min。

1.1.2 污泥中微生物的馴化

采用添加對氯苯胺的選擇性培養(yǎng)方法（具體方法略）馴化出可降解氯胺的復(fù)合菌群。

1.2 實驗室生物降解實驗

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)樣品的配制和樣品采集與測定

標(biāo)準(zhǔn)樣品的配制和樣品采集與測定過程不再贅述。

1.2.2 實驗樣品的制備

采用好氧搖瓶培養(yǎng)法研究復(fù)合菌群對對氯苯胺的生物降解。樣品制備的具體步驟如下：

第一步：取一系列已滅菌的容積為250 mL的錐形瓶，分別在上面貼上標(biāo)簽，例如①河水+藥+復(fù)合菌，②河水+藥，③河水滅菌+藥+復(fù)合菌，④河水滅菌+藥，⑤蒸餾水+藥+復(fù)合菌，⑥蒸餾水+藥。

第二步：在①和②瓶中加入160 mL取自江門市天沙河的河水，以作備用；在③和④瓶中加入160 mL已滅菌的河水，以作備用；在⑤和⑥瓶中加入160 mL的蒸餾水，以作備用。

第三步：根據(jù)馴化細菌的上限濃度，計算出加入各瓶中藥品的量（具體計算步驟見下一部分）。分別在①③⑤三個瓶中各加入20 mL已被馴化的細菌溶液。之后在所有瓶中分別加入20 mL的藥品，搖勻，然后置于30 ℃的恒溫培養(yǎng)均震器中培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速為150 r/min。

2 監(jiān)測結(jié)果與研究

2.1 對氯苯胺的監(jiān)測

根據(jù)對氯苯胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線以及濃度和吸光度關(guān)系的函數(shù)式：

y=11.285x+0.062 7 （1）

將每日所測得的吸光度帶入（1）式，即可算出每日濃度。

對氯苯胺隨時間變化監(jiān)測的實驗數(shù)據(jù)在此不再詳述，從實驗結(jié)果可以看出，從第七天開始，樣品①③④⑤⑥瓶中已經(jīng)沒有多大變化了，到第九天停止對所有樣品的監(jiān)測。

對氯苯胺的降解效率如表1所示。

2.2 對氯苯胺降解的研究

根據(jù)本次實驗的目的，每個樣品之間都可互為對照實驗，現(xiàn)將各對照實驗的降解曲線做出來（如圖1和圖2所示），由此可直觀地從圖上得知所用復(fù)合菌對對氯苯胺的降解效果。

2.2.1 ①③⑤對照試驗的降解曲線

通過對圖1中三條降解曲線的分析可知：①在這三種情況下，

水中的微生物都能對加入的對氯苯胺有降解作用；②根據(jù)圖1中三條曲線的走向可以發(fā)現(xiàn)，這三種實驗中的對氯苯胺從第三天開始降解，其中，“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”的曲線在第四天最先達到降解的穩(wěn)定狀態(tài)，并且根據(jù)降解過程中三條曲線的變化程度可以發(fā)現(xiàn)，“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”的降解速度比其他兩個實驗要快；③在“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”達到穩(wěn)定后1 d，“河水+藥+復(fù)合菌”和“河水滅菌+藥+復(fù)合菌”也達到穩(wěn)定，但最終穩(wěn)定時的濃度明顯比較高，說明這兩個實驗中的微生物對對氯苯胺的降解效果不如“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”中的復(fù)合菌好；④由②和③兩點中的結(jié)論又可以知道，河水中原有的微生物及河水滅菌后的懸浮物和有機物都對加入的復(fù)合菌有一定的抑制作用，其中，河水滅菌后的懸浮物和有機物對復(fù)合菌的影響更大。

根據(jù)圖中的降解曲線可以很清楚地得到這樣的結(jié)果：①沒有加入復(fù)合菌的三個實驗中，“蒸餾水+藥”作為完全的對照實驗沒有加入任何物質(zhì)，所以在整個降解過程中濃度沒有發(fā)生變化；“河水+藥”的實驗中，由于河水中原有的微生物對加入的對氯苯胺有降解作用，因而在后期降解曲線開始變化；而“河水滅菌+藥”中沒有任何的微生物，對所加入的對氯苯胺不會產(chǎn)生任何影響，可作為“河水+藥+復(fù)合菌”的對照實驗。②從圖中可以看出，“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”與“河水+藥”的降解曲線在降解過程中都發(fā)生了變化，但在實驗期間，“河水+藥”中的微生物對對氯苯胺的降解速度與“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”中的復(fù)合菌相比比較緩慢，并且降解的效率也很低。

3 結(jié)束語

在通過對實驗降解曲線分析比較之后，可以得出這樣的結(jié)論：①通過馴化培養(yǎng)的復(fù)合菌在對氯苯胺的降解實驗中具有很好的降解效果，幾乎可以將加入的質(zhì)量濃度為20 mg/L的對氯苯胺完全降解，并且復(fù)合菌的降解效果明顯優(yōu)于河水中原有的微生物；②河水中原有微生物及河水中的懸浮物和有機物都會對加入其中的復(fù)合菌產(chǎn)生一定的抑制作用。

參考文獻

[1]夏北成.環(huán)境污染物生物降解[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2002.

[2]任華峰，李淑芹，劉志培.氯代苯胺類化合物微生物降解的研究發(fā)展[J].微生物學(xué)通報，2004（3）.

[3]周霞，鄭先強，佟樹敏，等.苯胺降解菌的特性研究及分子生物學(xué)基礎(chǔ)[J].南開大學(xué)學(xué)報，2004（2）.

[4]王戰(zhàn)勇，蘇婷婷.氯苯降解菌株的選育[J].撫順石油學(xué)院學(xué)報，2002，22（4）：20-22.

作者簡介：張文濤（1982—），男，陜西漢中人，畢業(yè)于河海大學(xué)環(huán)境工程專業(yè)（本科），工程師，現(xiàn)工作于廣東省水文局江門水文分局水質(zhì)科，從事水質(zhì)監(jiān)測與評價工作。

〔編輯：曹月〕

摘 要：從污水處理廠提取活性污泥樣品，通過分離、培養(yǎng)和馴化，得到能夠降解氯代苯胺的復(fù)合菌，所得到的復(fù)合菌對氯苯胺的耐受性高于自然水體中的混合細菌。經(jīng)過對氯苯胺選擇性培養(yǎng)基馴化后發(fā)現(xiàn)，通過馴化培養(yǎng)的復(fù)合菌在對氯苯胺的降解實驗中具有很好的降解效果。

關(guān)鍵詞：對氯苯胺；生物降解；復(fù)合菌；降解效率；降解曲線

中圖分類號：X505 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：2095-6835（2014）03-0022-02

1 復(fù)合菌對對氯苯胺的生物降解實驗

1.1 復(fù)合菌的制備

1.1.1 污泥取樣與保存

污泥樣取自江門市污水處理廠，保存于4 ℃的冰箱中。取200 mL污泥放入1 000 mL的燒杯中，加入200 mL蒸餾水，曝氣24 h后靜置。

取90 mL滅菌液體培養(yǎng)基、10 mL污泥上清液于250 mL錐形瓶中，置恒溫搖床上培養(yǎng)48 h，溫度為30 ℃，頻率為150 r/min。

1.1.2 污泥中微生物的馴化

采用添加對氯苯胺的選擇性培養(yǎng)方法（具體方法略）馴化出可降解氯胺的復(fù)合菌群。

1.2 實驗室生物降解實驗

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)樣品的配制和樣品采集與測定

標(biāo)準(zhǔn)樣品的配制和樣品采集與測定過程不再贅述。

1.2.2 實驗樣品的制備

采用好氧搖瓶培養(yǎng)法研究復(fù)合菌群對對氯苯胺的生物降解。樣品制備的具體步驟如下：

第一步：取一系列已滅菌的容積為250 mL的錐形瓶，分別在上面貼上標(biāo)簽，例如①河水+藥+復(fù)合菌，②河水+藥，③河水滅菌+藥+復(fù)合菌，④河水滅菌+藥，⑤蒸餾水+藥+復(fù)合菌，⑥蒸餾水+藥。

第二步：在①和②瓶中加入160 mL取自江門市天沙河的河水，以作備用；在③和④瓶中加入160 mL已滅菌的河水，以作備用；在⑤和⑥瓶中加入160 mL的蒸餾水，以作備用。

第三步：根據(jù)馴化細菌的上限濃度，計算出加入各瓶中藥品的量（具體計算步驟見下一部分）。分別在①③⑤三個瓶中各加入20 mL已被馴化的細菌溶液。之后在所有瓶中分別加入20 mL的藥品，搖勻，然后置于30 ℃的恒溫培養(yǎng)均震器中培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速為150 r/min。

2 監(jiān)測結(jié)果與研究

2.1 對氯苯胺的監(jiān)測

根據(jù)對氯苯胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線以及濃度和吸光度關(guān)系的函數(shù)式：

y=11.285x+0.062 7 （1）

將每日所測得的吸光度帶入（1）式，即可算出每日濃度。

對氯苯胺隨時間變化監(jiān)測的實驗數(shù)據(jù)在此不再詳述，從實驗結(jié)果可以看出，從第七天開始，樣品①③④⑤⑥瓶中已經(jīng)沒有多大變化了，到第九天停止對所有樣品的監(jiān)測。

對氯苯胺的降解效率如表1所示。

2.2 對氯苯胺降解的研究

根據(jù)本次實驗的目的，每個樣品之間都可互為對照實驗，現(xiàn)將各對照實驗的降解曲線做出來（如圖1和圖2所示），由此可直觀地從圖上得知所用復(fù)合菌對對氯苯胺的降解效果。

2.2.1 ①③⑤對照試驗的降解曲線

通過對圖1中三條降解曲線的分析可知：①在這三種情況下，

水中的微生物都能對加入的對氯苯胺有降解作用；②根據(jù)圖1中三條曲線的走向可以發(fā)現(xiàn)，這三種實驗中的對氯苯胺從第三天開始降解，其中，“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”的曲線在第四天最先達到降解的穩(wěn)定狀態(tài)，并且根據(jù)降解過程中三條曲線的變化程度可以發(fā)現(xiàn)，“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”的降解速度比其他兩個實驗要快；③在“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”達到穩(wěn)定后1 d，“河水+藥+復(fù)合菌”和“河水滅菌+藥+復(fù)合菌”也達到穩(wěn)定，但最終穩(wěn)定時的濃度明顯比較高，說明這兩個實驗中的微生物對對氯苯胺的降解效果不如“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”中的復(fù)合菌好；④由②和③兩點中的結(jié)論又可以知道，河水中原有的微生物及河水滅菌后的懸浮物和有機物都對加入的復(fù)合菌有一定的抑制作用，其中，河水滅菌后的懸浮物和有機物對復(fù)合菌的影響更大。

根據(jù)圖中的降解曲線可以很清楚地得到這樣的結(jié)果：①沒有加入復(fù)合菌的三個實驗中，“蒸餾水+藥”作為完全的對照實驗沒有加入任何物質(zhì)，所以在整個降解過程中濃度沒有發(fā)生變化；“河水+藥”的實驗中，由于河水中原有的微生物對加入的對氯苯胺有降解作用，因而在后期降解曲線開始變化；而“河水滅菌+藥”中沒有任何的微生物，對所加入的對氯苯胺不會產(chǎn)生任何影響，可作為“河水+藥+復(fù)合菌”的對照實驗。②從圖中可以看出，“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”與“河水+藥”的降解曲線在降解過程中都發(fā)生了變化，但在實驗期間，“河水+藥”中的微生物對對氯苯胺的降解速度與“蒸餾水+藥+復(fù)合菌”中的復(fù)合菌相比比較緩慢，并且降解的效率也很低。

3 結(jié)束語

在通過對實驗降解曲線分析比較之后，可以得出這樣的結(jié)論：①通過馴化培養(yǎng)的復(fù)合菌在對氯苯胺的降解實驗中具有很好的降解效果，幾乎可以將加入的質(zhì)量濃度為20 mg/L的對氯苯胺完全降解，并且復(fù)合菌的降解效果明顯優(yōu)于河水中原有的微生物；②河水中原有微生物及河水中的懸浮物和有機物都會對加入其中的復(fù)合菌產(chǎn)生一定的抑制作用。

參考文獻

[1]夏北成.環(huán)境污染物生物降解[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2002.

[2]任華峰，李淑芹，劉志培.氯代苯胺類化合物微生物降解的研究發(fā)展[J].微生物學(xué)通報，2004（3）.

[3]周霞，鄭先強，佟樹敏，等.苯胺降解菌的特性研究及分子生物學(xué)基礎(chǔ)[J].南開大學(xué)學(xué)報，2004（2）.

[4]王戰(zhàn)勇，蘇婷婷.氯苯降解菌株的選育[J].撫順石油學(xué)院學(xué)報，2002，22（4）：20-22.

作者簡介：張文濤（1982—），男，陜西漢中人，畢業(yè)于河海大學(xué)環(huán)境工程專業(yè)（本科），工程師，現(xiàn)工作于廣東省水文局江門水文分局水質(zhì)科，從事水質(zhì)監(jiān)測與評價工作。

〔編輯：曹月〕