葉利培(1.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院,北京 100091;2.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所,江蘇 南京 210042)
研究了物理預(yù)處理分離竹材薄壁組織和維管束組織分級(jí)利用的方法與效果,探討了分離效果的表征方法,優(yōu)化了分離后薄壁細(xì)胞組分的堿性過(guò)氧化氫化學(xué)預(yù)處理?xiàng)l件及酶水解制備低聚木糖化學(xué)品的條件,并分析了酶水解液成分。
1.采用顯微鏡觀測(cè)與鮑爾篩篩分結(jié)合的方法測(cè)定薄壁細(xì)胞含量的測(cè)定。鮑爾篩各篩分的顯微鏡觀測(cè)結(jié)果表明,通過(guò)鮑爾篩200目的篩分為薄壁細(xì)胞,未通過(guò)篩分則全部為纖維細(xì)胞,即鮑爾篩能夠有效分離薄壁細(xì)胞與纖維細(xì)胞,可作為薄壁細(xì)胞含量的評(píng)價(jià)手段。同時(shí)采用了纖維質(zhì)量分析儀(FQA)的方法測(cè)定了竹材的薄壁細(xì)胞含量。當(dāng)FQA的薄壁細(xì)胞尺寸范圍設(shè)定為0.03~0.2 mm時(shí),所測(cè)薄壁細(xì)胞含量與鮑爾篩篩分的方法相差較大;當(dāng)薄壁細(xì)胞尺寸范圍設(shè)定為0.03~0.1 mm時(shí),薄壁細(xì)胞含量測(cè)定結(jié)果與鮑爾篩篩分結(jié)果幾乎一致,因此,采用FQA來(lái)測(cè)定竹材薄壁細(xì)胞含量時(shí),薄壁細(xì)胞尺寸范圍應(yīng)設(shè)定為0.03~0.1 mm。
2.基于竹材結(jié)構(gòu)研究了螺旋擠壓分離竹材維管束與薄壁組織的方法。實(shí)驗(yàn)以擠壓道數(shù)作為影響因素,以分離后不同篩分中薄壁細(xì)胞含量為主要考察指標(biāo)。探索了螺旋擠壓程度對(duì)竹材物理形態(tài)的影響及維管束與薄壁細(xì)胞的分離效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn),使用螺旋擠壓結(jié)合振動(dòng)篩選篩分,可以實(shí)現(xiàn)薄壁組織與維管束的有效分離,且采用一道螺旋擠壓并結(jié)合使用1/32英寸的篩孔分離效果較好。
3.采用離子色譜測(cè)定分離出的薄壁細(xì)胞及纖維細(xì)胞中的單糖含量,發(fā)現(xiàn)薄壁細(xì)胞中單糖主要是葡萄糖、木糖與阿拉伯糖,薄壁細(xì)胞及纖維細(xì)胞中的單糖種類相同,但含量存在差異。螺旋擠壓分離的竹材各組分的化學(xué)成分分析表明,竹材薄壁組織比維管束組織的戊聚糖含量高,更適合用于生產(chǎn)戊糖基生物化學(xué)品。
4.優(yōu)化了堿性過(guò)氧化氫機(jī)械預(yù)處理竹材薄壁組織的工藝條件。竹材薄壁組織組分進(jìn)行酶水解制低聚木糖之前,需要進(jìn)行預(yù)處理才能提高戊糖的酶解效率。在預(yù)處理過(guò)程中,單糖溶出應(yīng)當(dāng)盡量少且使pH值接近中性,以利于酶水解。綜合考慮以上因素,本研究堿性過(guò)氧化氫機(jī)械預(yù)處理竹材薄壁組織最佳化學(xué)預(yù)處理工藝條件為:NaOH用量1%,H2O2用量1%,溫度80℃。
5.以分離出的竹材薄壁組織為底物,進(jìn)行了木聚糖酶酶水解制低聚木糖產(chǎn)品研究。探討了木聚糖酶的酶學(xué)特性;對(duì)經(jīng)堿性過(guò)氧化氫機(jī)械預(yù)處理的竹材薄壁組織進(jìn)行了木聚糖酶水解研究,在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)酶水解工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明:在溫度為50℃,最適宜pH值5的條件下,采用木聚糖酶用量41.5 IU/g、固液比1∶20、水解時(shí)間8 h,酶水解得率取得最大值為11.38%。水解液中主要成分為木糖、木二糖、木三糖、木四糖,幾乎沒(méi)有木五糖和木六糖。
竹材;螺旋擠壓撕裂;薄壁組織;木聚糖酶;低聚木糖