俞洪濤, 王 虹, 華 欣, 莊朝榮, 解正高, 馬曉蓉

(江蘇省蘇北人民醫(yī)院 眼科, 江蘇 揚(yáng)州, 225000)

角膜內(nèi)皮細(xì)胞是維持角膜正常生理功能和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的關(guān)鍵細(xì)胞。外源性或者內(nèi)源性因素而導(dǎo)致角膜發(fā)生了炎癥反應(yīng)統(tǒng)稱為角膜炎。角膜炎是眼科非常常見的一類眼部疾病，也是角膜病中致盲率較高的一類疾病。共焦顯微鏡則能夠從細(xì)胞水平上對活體組織進(jìn)行無創(chuàng)傷水平切面檢查,已經(jīng)越來越廣泛地被應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中。本研究對2011年6月—2012年7月門診和住院部30例(30眼)正常人和30例(30眼)角膜炎患者進(jìn)行共焦角膜顯微鏡檢查，對其影像學(xué)特征進(jìn)行總結(jié)分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年6月—2012年7月在蘇北人民醫(yī)院行共焦角膜顯微鏡檢查的30例(30眼)正常人和30例(30眼)角膜炎患者。正常人中男女各半，年齡25～45歲，平均30歲。裂隙燈顯微鏡檢查除外眼科疾病，無外傷史和佩戴角膜接觸鏡史。角膜炎患者中男19例，女11例，年齡20～76歲，平均46.7歲。病程數(shù)日到數(shù)月，病種分別為病毒性角膜炎16眼，兼有細(xì)菌感染的混合性角膜炎10眼，真菌性角膜炎24眼。其中嚴(yán)重象限性膿苔病灶6眼，自行用藥史(具體藥物及劑量不詳)5眼，嚴(yán)重角膜水腫2眼。

1.2 檢查與方法

受檢者分成對照組(無感染癥狀)和角膜炎組(有不同程度感染癥狀)。先行裂隙燈檢查，后于受檢眼結(jié)膜囊內(nèi)滴愛爾卡因表面麻醉，1次/3 min，共2次。雙眼均涂奇勝透明質(zhì)酸鈉。將2組下頜置于頭托。待CCD 攝像頭顯示圖像后使角膜接觸帽對準(zhǔn)患者角膜中心，即在角膜前極點(diǎn)上，在電腦顯示各組所需數(shù)據(jù)。

1.3 觀測指標(biāo)

對2組角膜內(nèi)皮細(xì)胞平均細(xì)胞面積、角膜內(nèi)皮六角形細(xì)胞百分比、角膜內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞面積變異系數(shù)、角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度四項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 12軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,測定結(jié)果數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用t檢驗(yàn),P<0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

角膜內(nèi)皮細(xì)胞平均內(nèi)皮細(xì)胞面積(AVE)=方格面積×106/方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)。對照組平均AVE為(301.15±35.77) μm2, 角膜炎為(489.10±92.53) μm2。角膜內(nèi)皮六角形細(xì)胞百分比(6A%)=視野內(nèi)角膜內(nèi)皮六角形細(xì)胞數(shù)/視野內(nèi)的細(xì)胞數(shù)。對照組平均角膜內(nèi)皮六角形細(xì)胞百分比為(79.4±5.16)%, 角膜炎組為(41.8±6.57)%。角膜內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞面積變異系數(shù)(CV) =平均內(nèi)皮細(xì)胞面積的標(biāo)準(zhǔn)差(SD)/平均內(nèi)皮細(xì)胞面積(AVE)。對照組平均CV為(11±2)%，角膜炎組為(25±4)%。角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度(CD)=方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)(均數(shù))/已知方格面積=細(xì)胞數(shù)/mm2。對照組平均CD為(3 535.90±301.23)個/mm2, 角膜炎組為(2 102.21±342.11)個/mm2。上述差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

3 討 論

本研究中對活體狀態(tài)下人角膜內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行定量分析，可了解角膜感染后內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)改變、大致功能受損程度，進(jìn)一步輔助角膜病的治療。研究顯示，角膜感染后內(nèi)皮細(xì)胞與正常人角膜內(nèi)皮細(xì)胞存在顯著不同。正常人角膜內(nèi)皮細(xì)胞平均細(xì)胞面積為301.15 μm2, 而角膜炎組該項(xiàng)指標(biāo)則顯著增大，細(xì)胞出現(xiàn)明顯水腫，基質(zhì)增厚；正六邊形鑲嵌結(jié)構(gòu)是單層棋格狀細(xì)胞組織最為穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)狀態(tài)[1], 這一結(jié)構(gòu)確保細(xì)胞穩(wěn)定性和正常貯備功能，是細(xì)胞正常存活的生理基礎(chǔ)。對照組角膜內(nèi)皮六角形細(xì)胞百分比為79.4%, 角膜炎組明顯降低，證明角膜受損后細(xì)胞減少，正常生理功能破壞；角膜炎組內(nèi)皮細(xì)胞面積變異系數(shù)較對照組顯著增加；此外，2組角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度比較結(jié)果也提示角膜受到感染后內(nèi)皮細(xì)胞受損，其最小值為1 204個/mm2, 細(xì)胞功能失代償。盡管角膜內(nèi)皮具有最佳生理功能和最大擴(kuò)潛能力、在抵御角膜疾病、修復(fù)角膜損傷方面起著十分重要的作用[2-4], 可是一旦遭到破壞,不僅影響角膜內(nèi)皮的泵功能與屏障功能，其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性也會受到破壞，以至于角膜內(nèi)皮細(xì)胞失代償或再生能力障礙，出現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞水腫、六角形細(xì)胞丟失，細(xì)胞大小不均，細(xì)胞密度減小、周圍正常的內(nèi)皮細(xì)胞代償性擴(kuò)大、移行修復(fù)創(chuàng)面[5]。共焦激光角膜顯微鏡的用途是行角膜活體組織學(xué)檢查，其優(yōu)點(diǎn)是能在無創(chuàng)角膜活體組織學(xué)進(jìn)行檢查；獨(dú)有活體角膜斷層觀察；精確顯示角膜各層結(jié)構(gòu)；最佳的圖像照度；放大倍率達(dá)800倍；具有多種圖像獲取模式；可進(jìn)行角膜厚度測量、自動圖像分析和細(xì)胞計(jì)數(shù)，角膜內(nèi)各種細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化[6-7]。研究中使用共焦激光角膜顯微鏡對人角膜內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時、無創(chuàng)及可重復(fù)觀察，圖像清晰，結(jié)果理想，可獲得裂隙燈顯微鏡和傳統(tǒng)光學(xué)共焦顯微鏡所無法獲取的圖像和效果[8], 在角膜感染的無創(chuàng)快速診斷中有廣闊的應(yīng)用前景。

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