尹志奎，王 東，鄭 斌＊

（1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，河南新鄉(xiāng)453003；2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室，河南新鄉(xiāng)453003）

弓形蟲（Toxoplasma gondii）為世界性分布的專性細(xì)胞內(nèi)寄生原蟲，可主動(dòng)入侵多種哺乳動(dòng)物（豬、牛、羊等）和人的細(xì)胞，導(dǎo)致弓形蟲感染或弓形蟲?。═oxoplasmosis）。豬感染弓形蟲后不僅影響其自身的發(fā)育、繁殖，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展造成一定的經(jīng)濟(jì)損失，若以感染豬來源的肉制品作為食物，還可能威脅到其他動(dòng)物和人的健康。研究發(fā)現(xiàn)豬的弓形蟲感染與某些因素相關(guān)聯(lián)，不同地區(qū)的豬弓形蟲感染的影響因素不同。弓形蟲有3個(gè)主要基因型，即Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型，在全球廣泛分布?；蚍治霭l(fā)現(xiàn)不同地區(qū)的弓形蟲分離株在遺傳上有不同的多樣性，基因型的不同導(dǎo)致蟲體的致病力及對(duì)藥物的敏感性存在差異。對(duì)弓形蟲的基因型進(jìn)行分析，可以為弓形蟲病的診斷和治療提供依據(jù)［1-2］。下面對(duì)國外的豬弓形蟲感染的風(fēng)險(xiǎn)因素及基因型的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期對(duì)后續(xù)動(dòng)物的飼養(yǎng)及弓形蟲病的治療提供參考。

1 豬弓形蟲感染檢測及基因型分析方法

用于檢測豬弓形蟲感染的方法主要有血清學(xué)和分子生物學(xué)方法。血清學(xué)方法包括乳膠凝集試驗(yàn)（LAT）、改良凝集試驗(yàn)（MAT）、直接凝集試驗(yàn)（DAT）、間接血凝試驗(yàn)（IHA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和間接熒光抗體試驗(yàn)（IFAT）等。分子生物學(xué)方法包括聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）和脫氧核糖核酸（DNA）探針技術(shù)等。不同檢測方法的敏感性和特異性不同，采用不同檢測方法得到的結(jié)果不具可比性。弓形蟲基因型分析方法有限制性片段長度多態(tài)性PCR（PCR-RFLP）、多重PCR（multiplex PCR）、套式PCR（nested PCR）和PCR-DNA 測序法等，不同的研究選用的遺傳標(biāo)記可能不同。

2 豬弓形蟲感染的風(fēng)險(xiǎn)因素

泰國南部小豬弓形蟲血清陽性率為71.43%（LAT），同時(shí)還檢測到農(nóng)場的一只貓的血清弓形蟲抗體為陽性。推測該農(nóng)場豬弓形蟲感染途徑為經(jīng)胎盤垂直傳播及貓糞中的弓形蟲卵囊污染豬的食物和飲用水等［3］。芬蘭野豬場野豬弓形蟲血清陽性率為33.0%（DAT），雌性、2歲以上及小豬群的豬弓形蟲陽性率較高［4］。2007年檢測荷蘭豬弓形蟲抗體陽性率 為2.6% （ELISA），其中散養(yǎng)豬的陽性率（33%）明顯高于農(nóng)場豬（4%）；2008年報(bào)道荷蘭3個(gè)豬場豬弓形蟲血清陽性率為8% ～17%（ELISA），經(jīng)過為期4個(gè)月的捕鼠運(yùn)動(dòng)后，弓形蟲血清陽性率下降至0～10%，提示控制鼠類可以降低豬的弓形蟲感染；Opsteegh M 等［5］研究發(fā)現(xiàn)荷蘭的野豬弓形蟲抗體陽性率為24.4%（ELISA），隨年齡的增加而增高。拉脫維亞（Latvia）野豬弓形蟲抗體陽性率（33.2%）明顯高于家豬（4.2%，ELISA），散養(yǎng)豬的陽性率（6.2%）明顯高于豬場飼養(yǎng)的豬（0.4%），接觸野生動(dòng)物和外界環(huán)境的豬弓形蟲陽性率明顯高于其他豬［6］。2004年報(bào)道德國Hesse地區(qū)母豬弓形蟲抗體陽性率為19%（ELISA ＆IFAT），陽性率與年齡相關(guān)。法國Corsica島野豬肉汁弓形蟲血清陽性率為0.55%（MAT），與野豬年齡和生長地區(qū)相關(guān)［7］；Beral M 等［8］報(bào)道法國野豬弓形蟲血清陽性率為23%（MAT），與野貓存在及氣溫相關(guān)。瑞士家豬弓形蟲抗體陽性率為23.3%（ELISA），隨年齡增加而增高，且高于10年前的陽性率［9］。意大利西西里島豬弓形蟲抗體陽性率為16.3%（ELISA），與豬年齡、養(yǎng)殖場規(guī)模（＜50頭）、飲用水安全及鼠類的控制等相關(guān)［10］；Veronesi F等［11］報(bào)道意大利豬弓形蟲IgG 陽性率為16.14%（IFAT），與豬飼養(yǎng)條件及環(huán)境衛(wèi)生相關(guān)。葡萄牙北部豬弓形蟲血清陽性率為9.8%（MAT），與年齡相關(guān)［12］。2005年報(bào)道西班牙野豬弓形蟲血清陽性率為38.4%（MAT），南方地區(qū)野豬陽性率較高；西班牙東北部豬弓形蟲血清陽性率為19.0%（MAT），影響因素有豬年齡、斷奶期病死率、貓的出現(xiàn)和豬場的戶外設(shè)施等［13］；García-Bocanegra I等［14］報(bào)道西班牙豬弓形蟲血清陽性率為16.6%（MAT），與豬年齡、鼠類控制及貓的出現(xiàn)等相關(guān)。羅馬尼亞家豬弓形蟲抗體陽性率為23.1%（IFAT），野豬陽性率為16%，與豬飼養(yǎng)環(huán)境相關(guān)［15］。

美國豬弓形蟲抗體陽性率為2.6%（ELISA），與鼠類控制和動(dòng)物尸體的處理方式等相關(guān)［16］；美國北卡羅來納州野豬弓形蟲IgG陽性率為27.7%（MAT），與豬的年齡相關(guān)［17］。墨西哥Durango州豬弓形蟲血清陽性率為12.7%（MAT），本地豬的陽性率（16.0%）高于外地豬（9.1%），雜種豬陽性率（15.7%）高于純種豬（10.3%），陽性率與豬的年齡、豬場管理及豬場所處的地理位置等相關(guān)［18］；美國Oaxaca州家豬弓形蟲血清陽性率為17.2%（MAT），陽性率與豬的年齡、性別、豬場地理位置、氣候和海拔高度等相關(guān)［19］。

巴西Toledo 地區(qū)的豬弓形蟲血清陽性率為13.4%（MAT），與豬的食物及飲用水的衛(wèi)生、鼠類的控制及斷奶小豬的體重等相關(guān)［20］；該國Rio de Janeiro州北部豬弓形蟲抗體陽性率為11.5%（ELISA），散養(yǎng)豬陽性率為20.6%，而室內(nèi)飼養(yǎng)豬無一例陽性，陽性率與豬飼養(yǎng)環(huán)境相關(guān)［21］。2004年報(bào)道阿根廷母豬弓形蟲抗體陽性率為37.8%（MAT），室內(nèi)農(nóng)場豬弓形蟲陽性率為4.5%，而同期檢測室外農(nóng)場的豬陽性率則高達(dá)40.5%，豬弓形蟲感染與飼養(yǎng)環(huán)境相關(guān)。

3 豬弓形蟲感染的基因型

日本Okinawa地區(qū)豬弓形蟲檢出率為56.4%（PCR），分離得到49個(gè)蟲株，RFLP分析（遺傳標(biāo)記：SAG2）揭示其中22株弓形蟲基因型為Ⅰ型，23株為Ⅱ型，4株為Ⅲ型［22］；該地區(qū)另一批豬的弓形蟲DNA 檢出率為36.3%（PCR），分離得到29個(gè)弓形蟲株，套式PCR，RFLP分析（遺傳標(biāo)記：GRA6），其中13株弓形蟲基因型為Ⅰ型，14株為Ⅱ型，其余2株為Ⅲ型［23］。

葡萄牙豬弓形蟲血清陽性率為15.6%（MAT），接種、分離得到15 個(gè)分離株，PCR-RFLP（遺傳標(biāo)記：SAG2）分析揭示其中11株基因型為Ⅱ型，其余4株為Ⅲ型［24］。法國野豬弓形蟲血清陽性率為17.6%（MAT），接種、分離得到21株弓形蟲，PCR-RFLP（遺傳標(biāo)記：SAG1、SAG2 和GRA7）揭示弓形蟲基因型為Ⅱ型［25］。

2008年Dubey等檢測美國馬里蘭豬弓形蟲抗體陽性率分別為25%（ELISA）和71%（MAT），接種、分離得到14 個(gè)弓形蟲株，PCR-RFLP（遺傳標(biāo)記：SAG1、SAG2、SAG3、BTUB、GRA6、c22-8、c29-2、L358、PK1和Apico）分析發(fā)現(xiàn)其中10株基因型為Ⅱ型，3株為Ⅲ型，1株為Ⅳ型；2012年檢測美國北部豬弓形蟲血清陽性率為 91%（ELISA＆MAT），PCR-RFLP分析（遺傳標(biāo)記：SAG1、SAG2、SAG3、BTUB、GRA6、c22-8、c29-2、L358、PK1 和Apico）揭示弓形蟲基因型為Ⅱ、Ⅲ型［26］。2007年報(bào)道巴西Erechim 地區(qū)豬弓形蟲DNA 檢出率分別為34%（豬舌）和66%（膈?。≒CR），RFLP分析（遺傳標(biāo)記：SAG2、BTUB、SAG3和GRA6）揭示弓形蟲基因型大部分為Ⅰ型，少部分為Ⅲ或Ⅱ／Ⅲ重組型；Bezerra R A等［27］報(bào)道巴西東北部地區(qū)豬弓形蟲基因型為TgPgBr 06、08、11、12、14和15等6個(gè)新型（PCR-RFLP，遺傳標(biāo)記：SAG1、SAG2、SAG3、BTUB、C22-8、PK1 和Apico）。

4 結(jié)語

豬是弓形蟲感染和傳播的重要宿主。豬年齡、性別、飼養(yǎng)條件、外界環(huán)境中貓、鼠類的存在等等多種因素都可影響豬的弓形蟲感染。日本、葡萄牙、法國和美國北部豬感染弓形蟲的基因型為全球廣泛分布的典型的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型，巴西東北部豬弓形蟲基因型為6個(gè)新型。各地的豬弓形蟲感染的基因型的研究結(jié)果印證了南美洲動(dòng)物感染的弓形蟲基因型的遺傳多態(tài)性共識(shí)。關(guān)于國內(nèi)動(dòng)物弓形蟲感染的基因型的研究始于2007年，國內(nèi)豬弓形蟲感染的基因型研究揭示多數(shù)分離株的基因型為ToxoDB＃9 型，少數(shù)為ToxoDB＃213 型、ToxoDB＃204 型或ToxoDB＃205型。ToxoDB＃9型為中國動(dòng)物的優(yōu)勢基因型，又稱Chinese Ⅰ型［28-29］。不同地區(qū)豬感染弓形蟲的風(fēng)險(xiǎn)因素、基因型各不相同，不同基因型弓形蟲致病性及藥物敏感性不同。因此，各地區(qū)應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況制定相應(yīng)的養(yǎng)殖及動(dòng)物疾病檢疫措施，做好豬弓形蟲感染檢測及預(yù)防工作，加強(qiáng)對(duì)病豬肉管理和處理，以減少食品公共衛(wèi)生安全隱患，降低動(dòng)物和人弓形蟲感染和弓形蟲病的發(fā)生。

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