陳 姣,徐繼林,李 艷,周成旭,嚴(yán)小軍
(寧波大學(xué) 應(yīng)用海洋生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江 寧波 315211)
海洋硅藻是一類(lèi)單細(xì)胞藻類(lèi),種類(lèi)多、數(shù)量大,被稱(chēng)為海洋的“草原”,是海洋有機(jī)物的主要生產(chǎn)者之一,同時(shí)提供了約40%的海洋初級(jí)生產(chǎn)力[1],在其生長(zhǎng)過(guò)程中,揮發(fā)性組分可以通過(guò)海氣交換進(jìn)入大氣,影響著局部甚至整個(gè)海域的氣候[2]。硅藻作為海洋經(jīng)濟(jì)動(dòng)物貝類(lèi)、蝦蟹幼體的直接餌料,其揮發(fā)性組分勢(shì)必直接影響著養(yǎng)殖生物的肉質(zhì)風(fēng)味。研究表明,藻類(lèi)代謝物直接影響著貝類(lèi)對(duì)微藻的濾食速率和攝食選擇性,而這些代謝物相當(dāng)部分為藻類(lèi)揮發(fā)性組分[3]。另有研究表明在藻類(lèi)中產(chǎn)生的某些短鏈醛與其自身防御及誘導(dǎo)撓足類(lèi)的繁殖失敗密切相關(guān)[4],所以有必要對(duì)海洋硅藻的揮發(fā)性組分進(jìn)行詳細(xì)的研究。現(xiàn)有對(duì)硅藻的研究中,人們主要關(guān)注其蛋白質(zhì)、脂類(lèi)等營(yíng)養(yǎng)效價(jià)[5,6],對(duì)于藻類(lèi)的揮發(fā)性成分的研究,目前只局限在大型藻上[7,8],還未見(jiàn)對(duì)海洋微藻特別是海洋硅藻的揮發(fā)性成分的詳細(xì)研究。
本文借助頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HS-SPME-GC/MS),對(duì)9種海洋硅藻進(jìn)行揮發(fā)性成分進(jìn)行了測(cè)定,并利用SIMCA-P分析軟件對(duì)這些硅藻之間揮發(fā)性成分的差異進(jìn)行詳細(xì)研究,可為海洋硅藻的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用及其化學(xué)分類(lèi)學(xué)、餌料營(yíng)養(yǎng)學(xué)等相關(guān)研究提供重要參考依據(jù)。
QP2010氣相色譜-質(zhì)譜分析儀,帶AOC-20自動(dòng)進(jìn)樣器(日本SHIMADZU公司),vocol色譜柱(60 m×0.32 mm×0.18 μm,美國(guó)Supelco公司),冷凍干燥機(jī)(美國(guó)LABCONCO公司),固相微萃取(SPME)系統(tǒng)和75 μm DVB/ CAR/ PDMS萃取頭(美國(guó)Supelco公司),顆粒粒度計(jì)數(shù)分析儀(德國(guó)Casy公司),試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。
9株海洋硅藻藻種由寧波大學(xué)海洋生物實(shí)驗(yàn)室藻種室提供,分別為:角毛藻(Chaetoceroscalcitrons, NMBguh003-4)、冠盤(pán)藻(Stephanodiscusehrenberg,NMBguh017)、小硅藻(Nitzschiaclosterium,NMBguh002)、骨條藻(Skeletonemacostatum,NMBguh004-1)、骨條藻(Skeletonemacostatum,NMBguh004-2)、骨條藻(Skeletonemasp.,NMBguh004-3)、威氏海鏈藻(Thalassiosiraweissflogii,NMBguh021)、擬微型海鏈藻(Thalassiosirapseudonana,NMBguh005)和三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum, NMBguh001),拉丁名后編號(hào)為對(duì)應(yīng)硅藻在藻種室的編號(hào)。培養(yǎng)海水(鹽度25)經(jīng)0.45 μm醋酸纖維濾膜過(guò)濾后煮沸冷卻,培養(yǎng)液采用“NML3號(hào)”配方(100 mg/L KNO3, 10 mg/L KH2PO4, 20 mg/L Na2SiO3, 0.25 mg/L MnSO4·H2O, 2.50 mg/L FeSO4·7H2O, 10 mg/L EDTA-Na2, 6 μg/L VB1, 0.05 μg/L VB12)。藻種在5000 mL錐形瓶中于日光燈光照下培養(yǎng),每個(gè)樣品平行培養(yǎng)5瓶,光照強(qiáng)度45~55 μmol/(m·s),光暗周期12∶12(h/h),培養(yǎng)溫度為(20±2)℃,每2 d用顆粒粒度計(jì)數(shù)分析儀[9]測(cè)量硅藻密度,當(dāng)小硅藻、角毛藻、威氏海鏈藻的生長(zhǎng)到達(dá)平臺(tái)后期時(shí)在4℃、4000 r/min下對(duì)這3種硅藻離心收集;其余6種硅藻生長(zhǎng)達(dá)到平臺(tái)后期時(shí),在4℃、4000 r/min下離心收集。分析前,藻粉冷凍干燥后置于-80℃超低溫冰箱收藏。
稱(chēng)取微藻樣品200 mg于15 mL SPME頂空瓶中,頂空瓶放置于30℃恒溫水浴中。75 μm DVB/ CAR/ PDMS萃取頭于氣相進(jìn)樣口(210℃)老化30 min,用SPME裝置的針頭刺穿瓶蓋內(nèi)聚四氟乙烯密封墊,推出萃取頭暴露于頂空中,固定深度3 cm,萃取40 min,20℃室溫下平衡20 min,取出萃取頭立即插入 210℃氣相進(jìn)樣口,脫吸附5 min, 進(jìn)行GC/MS分析。
固相萃取纖維預(yù)先在250℃下活化30 min以上,頂空瓶放置于30℃恒溫水浴電磁攪拌機(jī)中,磁力攪拌下,用SPME裝置的針頭刺穿瓶蓋內(nèi)聚四氟乙烯密封墊,推出萃取頭暴露于頂空中,固定深度3 cm,萃取30 min,停止攪拌,25℃室溫下再平衡吸附15 min,隨即拔出進(jìn)行GC-MS分析。
GC條件:采用不分流進(jìn)樣模式,進(jìn)樣口溫度210℃,載氣為高純氦氣,柱流速1.99 mL/min,柱前壓83.5 kPa,柱起始溫度35℃,保持3.5 min,以3℃/min升至40℃,保持1 min,再以5℃/min,升至100℃后以10℃/min升至210℃,保持25 min。
MS條件:用電子轟擊(electron impact, EI)源分析,電子能量為70 eV,離子源溫度200℃,接口溫度210℃,選取全程離子碎片掃描(SCAN)模式,質(zhì)量掃描范圍為45~1000,溶劑延遲0.6 min。
原始數(shù)據(jù)根據(jù)GC-MS總離子流圖中各組分的離子碎片質(zhì)量圖譜,通過(guò)對(duì)NIST庫(kù)和WILEY庫(kù)檢索結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)[10,11]進(jìn)行化合物定性,用面積歸一法計(jì)算出各揮發(fā)性成分的百分含量。對(duì)5個(gè)平行組的樣品建立一個(gè)包含樣品種類(lèi)名稱(chēng)、每一樣品的峰數(shù)量(基于保留時(shí)間和對(duì)應(yīng)質(zhì)荷比)和歸一化后的峰面積數(shù)據(jù)庫(kù),并將此數(shù)據(jù)庫(kù)導(dǎo)入SIMCA-P+11.5軟件(瑞典Umetrics AB公司)進(jìn)行主成分分析(PCA)。
從硅藻藻粉樣品GC-MS總離子流圖可見(jiàn)(以骨條藻NMBguh004-2為例,圖1),本方法能得到樣品豐富的揮發(fā)性成分信息。從角毛藻、冠盤(pán)藻、小硅藻、骨條藻NMBguh004-1、骨條藻NMBguh004-2、骨條藻NMBguh004-3、威氏海鏈藻、擬微型海鏈藻和三角褐指藻分別分離出96、83、88、90、101、92、81及76個(gè)有效色譜峰,共鑒定出152種揮發(fā)性成分,9種硅藻分別鑒定出76、55、65、58、58、68、62、56和53種物質(zhì),占有效峰面積的82.14%、84.45%、81.23%、88.36%、85.76%、81.38%、80.23%、83.21%及86.56%,各組分相對(duì)百分含量見(jiàn)表1(表中數(shù)值為各樣品5個(gè)平行組已鑒定成分的平均值)。對(duì)不同硅藻不同平行組進(jìn)行峰面積積分,把樣品信息和對(duì)應(yīng)揮發(fā)性物質(zhì)的定性定量信息輸入SIMCA-P軟件進(jìn)行PCA分析,可得到各樣品在第一主成分和第二主成分構(gòu)成的平面上的投影得分圖(圖2) ,每一標(biāo)注點(diǎn)代表每一種硅藻的一個(gè)樣品。這種在二維空間上顯示物質(zhì)聚類(lèi)分布的PCA得分圖可以直觀地表征樣品間的相似或非相似性[12]。由圖2可以清楚的看到:小硅藻、威氏海鏈藻、骨條藻NMBguh004-1和冠盤(pán)藻4種藻揮發(fā)性組成比較接近,擬微型海鏈藻、骨條藻NMBguh004-2和骨條藻NMBguh004-3揮發(fā)性組成比較接近,而三角褐指藻和角毛藻分別跟其它硅藻有較大的距離,說(shuō)明與其它硅藻的揮發(fā)性組分差別較大。
圖1 骨條藻(Skeletonema costatum,NMBguh004-2)揮發(fā)性物質(zhì)GC-MS總離子流圖
1—三角褐指藻; 2—小硅藻; 3—角毛藻; 4—擬微型海鏈藻; 5—骨條藻NMBguh004-3; 6—威氏海鏈藻; 7—骨條藻NMBguh004-1; 8—骨條藻NMBguh004-2; 9—冠盤(pán)藻。
圖2硅藻樣品揮發(fā)性成分的PCA得分圖
Fig 2 PCA score plot of marine diatom for the analysis of volatile components
通過(guò)PCA對(duì)應(yīng)的載荷圖(圖3),可以直觀每一個(gè)物質(zhì)對(duì)于硅藻間差異分類(lèi)的貢獻(xiàn),在載荷圖中間的物質(zhì)都是共有的物質(zhì),而越靠近外緣的物質(zhì),離哪個(gè)樣品近就說(shuō)明該樣品中對(duì)應(yīng)的物質(zhì)含量會(huì)相對(duì)較高。依據(jù)協(xié)方差大小,選取了對(duì)這9株硅藻揮發(fā)性物質(zhì)差異貢獻(xiàn)度前20種物質(zhì)(表1),包括10種醛類(lèi),2種酮類(lèi),3種醇類(lèi),2種烷烴類(lèi),1種苯酚類(lèi)物質(zhì)和2種未鑒定出的標(biāo)志物。
(圖上標(biāo)注物質(zhì)及數(shù)值為表1中對(duì)應(yīng)揮發(fā)性物質(zhì)及其保留時(shí)間)
2.1.1 醛類(lèi)
在對(duì)硅藻的醛類(lèi)物質(zhì)研究中,小硅藻、三角褐指藻、角毛藻、骨條藻NMBguh004-1、骨條藻NMBguh004-2、骨條藻NMBguh004-3、威氏海鏈藻、擬微型海鏈藻和冠盤(pán)藻中醛類(lèi)所占百分比分別為:21.66%、33.78%、27.5%、31.2%、39.55%、33.03%、32.33%、47.24%和43.2%,鑒定出的醛類(lèi)物質(zhì)分別有12種、13種、19種、12種、17種、19種、12種、19種及18種。在這些物質(zhì)中,2-丁烯醛、庚醛、2,4-庚二烯醛、壬醛、2-壬烯醛在9種硅藻中都被鑒定出,從鑒定結(jié)果(表2)可知:在平臺(tái)后期硅藻的揮發(fā)性醛類(lèi)物質(zhì)中壬醛占了絕對(duì)的優(yōu)勢(shì),而從PCA得分圖及其對(duì)應(yīng)載荷圖可見(jiàn),壬醛是造成三角褐指藻和角毛藻明顯分別于其它硅藻的最主要揮發(fā)性成分,其在三角褐指藻中相對(duì)百分含量高達(dá)13.8%,而在角毛藻僅為4.48%(表2)。壬醛通常產(chǎn)生辛辣的刺激性氣味[13], 因其在9種硅藻中相對(duì)百分含量較高,它可能對(duì)硅藻的特征風(fēng)味有重要貢獻(xiàn)。2-戊烯醛、庚醛、2,4-庚二烯醛、2,4-辛二烯醛是造成擬微型海鏈藻、骨條藻NMBguh004-2、骨條藻NMBguh004-3區(qū)別于其它硅藻的重要揮發(fā)性組分,其中2-戊烯醛在骨條藻NMBguh004-2中相對(duì)百分含量最高達(dá)到5.55%,擬微型海鏈藻中庚醛百分含量最高達(dá)到5.71%,骨條藻NMBguh004-2 中2,4-庚二烯醛含量達(dá)到3.57%,2,4-辛二烯醛在2種骨條藻中的相對(duì)百分含量明顯高于其它幾種硅藻,分別達(dá)到5.31%和4.78%。
有文獻(xiàn)指出,不飽和醛類(lèi)物質(zhì)對(duì)撓足類(lèi)的繁殖失敗有關(guān)系[14]。從以上分析可知:此時(shí)期的骨條藻NMBguh004-2、骨條藻NMBguh004-3、擬微型海鏈藻因含較高的不飽和醛類(lèi)物質(zhì)而與其它硅藻明顯分類(lèi),因此處于平臺(tái)后期的這3種硅藻可能并不適合作為橈足類(lèi)的餌料藻。而小硅藻、角毛藻、三角褐指藻、骨條藻NMBguh004-1因不飽和醛類(lèi)物質(zhì)相對(duì)含量較其它藻要低,相對(duì)其它幾類(lèi)藻可能比較適合橈足類(lèi)的飼養(yǎng)。
表1 決定9株硅藻樣品差異的前20種揮發(fā)性成分
低級(jí)飽和脂肪醛一般具有強(qiáng)烈的刺鼻氣味,隨著鏈長(zhǎng)的增加其刺激性氣味逐漸減弱[14],但不飽和醛大多有愉快的香氣[15],如2-己烯醛呈現(xiàn)青草氣味[16],而2,4-庚二烯醛被認(rèn)為具有魚(yú)腥味和金屬味[17]。在生物體內(nèi),很多醛類(lèi)物質(zhì)都來(lái)源自脂肪酸,在硅藻中作為重要生物標(biāo)志物的2,4-辛二烯醛已在很多魚(yú)肉中被檢出且與魚(yú)腥味的產(chǎn)生有著密切的關(guān)系[18]。有文獻(xiàn)指出[19]2,4-辛二烯醛的產(chǎn)生量與十六碳三烯酸含量有很大的相關(guān)性,所以這種小分子醛類(lèi)的變化也可以在一定程度上反應(yīng)出硅藻間十六碳三烯酸含量的變化。在小硅藻、威氏海鏈藻、三角褐指藻中還檢測(cè)到苯甲醛,它被認(rèn)為是烤花生中的主要羰基化合物,具有令人愉快的香味,在針對(duì)大眼金槍魚(yú)肉的風(fēng)味研究認(rèn)為對(duì)整體風(fēng)味具有加和作用[20]??梢?jiàn),這些醛類(lèi)物質(zhì)的混合構(gòu)成了對(duì)應(yīng)微藻各自具備特征氣味,它們對(duì)魚(yú)蝦貝蟹的肉質(zhì)風(fēng)味形成和對(duì)餌料藻的攝食選擇可能也起著很重要的作用。
2.1.2 烷烯烴類(lèi)
除醛類(lèi)物質(zhì)外,硅藻中另外一大類(lèi)揮發(fā)性物質(zhì)為烷烯烴類(lèi),總共鑒定出44種,相對(duì)含量在小硅藻、三角褐指藻、角毛藻、骨條藻NMBguh004-1、骨條藻NMBguh004-2、骨條藻NMBguh004-3、威氏海鏈藻、擬微型海鏈藻、冠盤(pán)藻在已鑒定出的組分中烷烯烴類(lèi)所占百分比分別為32.38%、14.23%、38.38%、26.83%、13.19%、26.19%、20.06%、26.83%和25.24%。角毛藻中的烷烯烴類(lèi)物質(zhì)的百分含量明顯高于其它硅藻,由PCA得分圖(圖2)及載荷圖(圖3)可知:8-十七碳烯是造成角毛藻與其它硅藻不同的主要原因。由表2可見(jiàn),這幾類(lèi)硅藻中只在角毛藻中檢測(cè)到8-十七碳烯,相對(duì)百分含量高達(dá)5.83%。在這類(lèi)物質(zhì)中,小硅藻的烷烯烴類(lèi)物質(zhì)的總含量明顯高于其它幾類(lèi)硅藻,其中己烷、十五烷、1-十五烯、十六烷含量明顯高于其它烷烯烴物質(zhì)含量。烷烯烴類(lèi)主要來(lái)源于脂肪酸烷氧自由基的均裂,這些飽和或不飽和脂肪酸感覺(jué)閾值[21]較醛類(lèi)高,一般對(duì)香氣影響不大。有些烷烯烴類(lèi)在一定條件下裂解之后是產(chǎn)生腥味的潛在物質(zhì)[22]。
2.1.3 酮類(lèi)
共有21種酮類(lèi)物質(zhì)中被鑒定出,冠盤(pán)藻中酮類(lèi)物質(zhì)相對(duì)百分含量最高(19.21%)。3,5-辛二烯-2-酮在這些藻中都被檢測(cè)到,其中擬微型海鏈藻中百分含量相對(duì)最高(3.32%),骨條藻NMBguh004-1中含量相對(duì)較低(0.48%)。
1-戊烯-3-酮是硅藻中被檢出的一種主要的生物標(biāo)志物,這幾類(lèi)硅藻中1-戊烯-3-酮百分含量最高的為冠盤(pán)藻(6.63%),小硅藻相對(duì)較低(0.86%),在角毛藻和三角褐指藻中未被檢測(cè)到。由于低級(jí)不飽和酮通常是具有刺激性氣味[23],所以這種酮類(lèi)物質(zhì)可能會(huì)對(duì)硅藻的風(fēng)味帶來(lái)不良的影響。此外,3,5-辛二烯-2-酮在9種硅藻中都有檢出,這種物質(zhì)對(duì)魚(yú)腥味有加強(qiáng)的作用[24]。
2.1.4 醇類(lèi)
9種硅藻中,總共鑒定出24種醇類(lèi)物質(zhì),醇類(lèi)物質(zhì)總含量相對(duì)最高的是角毛藻(17.45%),擬微型海鏈藻最低(6.55%),其中,1-戊烯-3-醇是9種硅藻中普遍存在的醇類(lèi)物質(zhì),含量最高的是NMBguh004-3(4.24%),小硅藻中最低(1.25%)。從表2可知,1-己烯-3-醇和1-己炔-3-醇是硅藻揮發(fā)性成分分類(lèi)的重要標(biāo)志物,這兩類(lèi)物質(zhì)對(duì)于威氏海鏈藻、骨條藻NMBguh004-2、骨條藻NMBguh004-3的分類(lèi)起著重要作用(圖2,圖3),它們?cè)诠菞l藻NMBguh004-2中百分含量最高(分別為3.73%和4.44%)。
總體而言,揮發(fā)性醇會(huì)形成品質(zhì)較為柔和的氣味[17],在這些微藻中均檢測(cè)到1-己烯基-3-醇,該醇的氣味主要為青草味。1-辛烯-3-醇具有蘑菇風(fēng)味特征[25],已經(jīng)在多種淡水魚(yú)和海藻中被發(fā)現(xiàn)[22],這種醇在角毛藻和三角褐指藻中被檢測(cè)到。在9種硅藻中,角毛藻醇類(lèi)物質(zhì)含量最高且種類(lèi)最多,醇類(lèi)物質(zhì)因氣味柔和對(duì)角毛藻的整體風(fēng)味有著有益影響,可能會(huì)促進(jìn)貝類(lèi)等攝食者對(duì)其的攝食選擇。
2.1.5 其它物質(zhì)
三角褐指藻中苯酚類(lèi)和呋喃類(lèi)物質(zhì)的相對(duì)百分含量都明顯高于其它硅藻,其中,2,6-二甲基苯酚的相對(duì)百分含量高達(dá)11.59%,這類(lèi)物質(zhì)大多具有特殊的芳香氣味, 2,6-二甲基-苯酚也是三角褐指藻區(qū)別于其它硅藻的主要生物標(biāo)志物(表1),由于它在其它硅藻中含量很低,所以對(duì)另外8種硅藻的風(fēng)味影響不大。在骨條藻NMBguh004-3中2-乙基呋喃的相對(duì)百分含量達(dá)到2.22%,呋喃類(lèi)化合物大都具有很強(qiáng)的肉香味,2-乙基呋喃具有強(qiáng)烈的焦香氣味[26]。羧酸類(lèi)在硅藻中檢出種類(lèi)和含量都很少,僅在威氏海鏈藻、小硅藻、冠盤(pán)藻中檢測(cè)到少量壬酸,三角褐指藻中檢測(cè)到癸酸。在這些酸類(lèi)物質(zhì)中,相對(duì)百分含量最高的即為三角褐指藻中的癸酸為2.35%。
此外,在這些硅藻中都檢出了一種噻唑類(lèi)物質(zhì)和一些含氯化合物,這些物質(zhì)含量雖低但在這幾種硅藻中普遍存在。對(duì)于硅藻中檢測(cè)出這類(lèi)含量不高但普遍存在的噻唑類(lèi)物質(zhì),其氣味極強(qiáng),廣泛存在于多種食品之中,多具有鮮菜、烤肉或堅(jiān)果的香氣[27],此物質(zhì)的存在可能對(duì)硅藻的整體風(fēng)味有著一定的影響。已有研究指出,海藻是揮發(fā)性鹵素化合物的重要資源,多種紅藻中都存在鹵化物[38],而在本次實(shí)驗(yàn)中,在9種硅藻中均檢測(cè)到一些揮發(fā)性鹵化物,說(shuō)明硅藻也是揮發(fā)性鹵化物的重要資源。另外,在一些硅藻中,檢測(cè)到乙基苯和對(duì)二甲苯,這類(lèi)物質(zhì)對(duì)硅藻的整體風(fēng)味有著不利的影響[29]。值得我們注意的是,二甲基硫這種含硫化合物在9種硅藻樣品中都被鑒定出,這幾類(lèi)硅藻中骨條藻(NMBguh004-1)二甲基硫含量最高,其相對(duì)含量達(dá)到9.16%,其次是小硅藻達(dá)到6.7%,在角毛藻、威氏海鏈藻、擬微型海鏈藻、骨條藻NMBguh004-2二甲基硫含量很低,相對(duì)含量都低于2%。在低濃度時(shí),DMS會(huì)產(chǎn)生一種令人愉快的類(lèi)蟹香,在較高濃度時(shí)卻呈一種異常的氣味,所以二甲基硫的含量決定了其對(duì)整體風(fēng)味是有利還是有害[30]。有研究指出,二甲基硫是海洋中最豐富的揮發(fā)性硫化物[31],可以通過(guò)海氣交換進(jìn)入大氣,從而影響局部甚至整個(gè)海域的氣候以及形成酸雨、酸霧等[32]。從以上硅藻揮發(fā)性成分?jǐn)?shù)據(jù)結(jié)果可知,骨條藻(NMBguh004-1)和小硅藻中二甲基硫相對(duì)于其它硅藻來(lái)說(shuō),對(duì)其周?chē)h(huán)境甚至大氣環(huán)境影響相對(duì)較大。
表2 9種海洋硅藻后期揮發(fā)性成分鑒定結(jié)果
續(xù)表2 (Table 2 Continued)化合物名稱(chēng)分子式1234567893-甲基-戊醛 C6H12O----1.873.563.071.594.743-甲基-戊醛C6H12O---1.92-----2-己烯醛C6H10O1.490.891.49 3.621.772.171.255.961.622,4-戊二烯醛C5H6O3.561.792.10 ------2,6-己二烯醛 C6H8O---0.880.22--0.44-庚醛C7H14O3.11.431.53 3.982.451.343.152.375.714-庚烯醛C7H12O0.56-0.42 1.780.530.77--0.432-庚烯醛C7H12O-------0.951.392,4-庚二烯醛C7H10O2.521.922.38 3.173.762.431.513.574.12辛醛C8H16O3.561.23--3.84----2-辛烯醛C8H14O--2.30 2.5721.60.92-2.352,4-辛二烯醛C8H12O--2.09 5.310.672.26-4.78-壬醛C9H18O13.88.015.48 4.936.689.017.95.966.862-壬烯醛C9H16O0.781.340.72 2.540.930.892.320.621.62,6-壬二烯醛C9H14O---1.35-----癸醛C10H12O-0.86 0.761.151.231.040.67E-2-癸烯醛C10H18O--0.27 1.560.7---0.332,4-癸二烯醛C10H16O -------0.710.26正十一醛C11H22O1.12--------2,6,6-三甲基-1-環(huán)己烯-1-甲醛C10H16O 0.152.311.05 0.751.20.461.062.920.65苯甲醛C7H6O2.471.173.7------己烷C6H140.967.650.48 0.89-8.870.830.274.57環(huán)己烷C6H12----0.220.38---2,4,4-三甲基-2-戊烯C8H16---1.95---0.18-2-甲基-2,3-己二烯 C7H12----0.26----2,3-二甲基-1-戊烯C7H14--0.02 1.850.4--0.56-2,6-辛二烯C8H16----1.14----1,3,5-辛三烯 C8H12-----0.88---3,5,5-三甲基-2-己烯C9H183.891.541.19 0.882.40.841.54-1.417-甲基-3,4-辛二烯 C9H161.12-------0.62-壬炔C9H162.45-0.62 0.88-0.84-0.51.572,4-壬二烯C9H16-------3.563.072,3,6-三甲基-1,6-庚二烯C10H18--1.11 --0.79---2,3,6-三甲基-1,6-庚二烯 C10H18--------1.868-甲基-癸烷C11H22-0.89-------十二烷 C12H26-0.37-------正十三烷C13H280.7-0.51 ------3,8-二甲基癸烷C12H26--0.65 ------正十四烷C14H30-1.915.04 2.334.571.783.141.03十四碳烯C14H281.31--------2-甲基癸烷C11H24--0.46 --0.47---壬基環(huán)戊烷 C14H28------0.43--癸基環(huán)戊烷C15H30-1.8--2.01----2-甲基正十四烷C15H32-0.50.45 ----1.99-2,6,10-三甲基十二烷C15H32-0.13--1.23-1.15-0.26正十五烷C15H32-2.516.10 1.781.961.343.581.20.931-十五烯C15H321.713.5-------3-甲基十四烷C15H32--1.35 ----1.4-3-甲基-十五烷 C16H34----3.05---0.672-甲基十五烷C16H34-2.462.84 -0.670.741.851.950.74十一烷基環(huán)戊烷C16H32 ------1.740.49-正十六烷C16H341.695.855.53 2.555.243.946.98-3.882,6,10-三甲基-十五烷C18H38--1.55 -----1.924-甲基十六烷C17H36-0.560.38 ------2-甲基十六烷C17H36-0.950.56 -----0.64
“-”表示在樣品中未檢測(cè)到該物質(zhì)。
參考文獻(xiàn):
[1]Guillard R R L, Ryther J H. Studies of marine planktonic diatoms[J]. J Microbiol, 1962, 8:229-239.
[2]周成旭, 徐繼林, 嚴(yán)小軍, 等.海洋微藻培養(yǎng)液中二甲基硫與二甲基硫丙酸的同步分析[J].分析化學(xué)研究報(bào)告,2009,9(32):1308-1312.
[3]Ward J E, Targett N M. Influence of marine microalgal metabolites on the feeding behavior of the blue musselMytilusedulis[J]. Marine Biology, 1989, 101:313-321.
[4]Ianora A, Poulet S A, Miralto A, et al. The diatomThalassiosirarotula affects reproductive success in the copepodAcartiaclause[J]. Mar Biol, 1996, 125:279-286.
[5]徐繼林, 嚴(yán)小軍, 朱藝鋒, 等. 一種餌料微藻的脂肪酸甾醇分析及化學(xué)分類(lèi)的探討[J].海洋學(xué)報(bào), 2005,27(4): 121-126.
[6]曹淑莉, 向葆卿.8種海洋餌料微藻蛋白質(zhì)含量及氨基酸組成比例的比較研究.海洋學(xué)報(bào),1993,15(4):98-103.
[7]伊紀(jì)峰, 朱建一, 韓曉磊, 等. HS-SPME-GC /MS 聯(lián)用檢測(cè)紅毛菜中的揮發(fā)性成分[J].南京師范大學(xué)學(xué)報(bào),2009, 32(2): 103-107.
[8]王秀娟, 徐繼林, 嚴(yán)小軍. 2種海藻中半揮發(fā)性物質(zhì)的成分分析[J].海洋科學(xué), 2010, 34(1): 25-28.
[9]茅 華, 許 海, 劉兆普.溫度、光照、鹽度及pH對(duì)旋鏈角毛藻生長(zhǎng)的影響[J].生態(tài)科學(xué), 2007,26(5):432-436.
[10]謝惜媚, 陸慧寧.新鮮葉下珠揮發(fā)性成分的GC-MS分析[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào),2009,45(5):142-144.
[11]江 健, 王錫昌, 陳西瑤.頂空固相微萃取與GC-MS聯(lián)用法分析淡水魚(yú)肉氣味組分[J].現(xiàn)代食品科技,2006, 22(2): 219-222.
[12]Vliet E V, Morath S, Eskes C, et al. A novel in vitro metabolomics approach for neurotoxicity testing, proof of principle for methyl mercury chloride and caffeine[J]. NeuroToxicology, 2008, 29(1): 1-12.
[13]章超樺, 平野敏行, 鈴木健, 等.鯽的揮發(fā)性成分[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào), 2000, 4: 354-358.
[14]Howe G A, Schilmiller A L. Oxylipin metabolism in response to stress[J]. Curr Opin Plant Biol, 2002, 5: 230-236.
[15]闞建全. 食品化學(xué)[M].北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2002: 309-360.
[16]趙慶喜, 薛長(zhǎng)湖, 徐 杰. 微波蒸餾-固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜-嗅覺(jué)檢測(cè)器聯(lián)用分析鳙魚(yú)魚(yú)肉中的揮發(fā)性成分[J]. 色譜, 2007, 25(2):267-271.
[17]陳婉珠, 芮漢明, 張 玲. 海帶腥味物質(zhì)的HS-SPME-GC-MS 分析[J]. 食品工業(yè)科技, 2006,27(12): 71-73.
[18]Frank D, Poole S, Kirchhoff S, et al. Investigation of sensory and volatile characteristics of farmed and wildBarramundi(Latescalcarifer) using gas chromatography-olfactometry mass spectrometry and descriptive sensory analysis[J]. J Agric Food Chem, 2009, 57(21): 10302-10312.
[19]Laturnus F, Wiencke C, Kloser H. Antarctic macroalgae-sources of volatile halogenated organic components[J]. Marine Environment Research, 1996, 41(2):169-181.
[20]孫 靜, 黃 健, 侯云丹,等.頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用分析大眼金槍魚(yú)肉的揮發(fā)性成分.食品科學(xué)[J].2011,32(22):230-233.
[21]宋煥祿. 食品風(fēng)味化學(xué)[M]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社, 2008:211-232.
[22]汪秋安. 海藻等水產(chǎn)品的香氣成分分析[J].海洋科學(xué), 1997, 2: 26-29.
[23]陳 峰, 姜 悅. 微藻生物技術(shù)[M]. 北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社,1999:59-63.
[24]吳 薇, 陶寧萍, 顧賽麒.魚(yú)肉特征性氣味物質(zhì)研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué).2013,34(11):381-385.
[25]張曉鳴.食品風(fēng)味化學(xué)[M]. 北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社, 2009:325.
[26]丁耐克.食品風(fēng)味化學(xué)[M]. 北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社.1999:101-123.
[27]黃梅麗, 王俊卿.食品色香味化學(xué)[M]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社, 2008:250-262.
[28]Kajiwara T, Kodama K, Matsui K. Volatile compounds from Japanese marine brown algae[J]. American Chemistry Society, 1993, 525: 103-120.
[29]胡傳明, 徐繼林, 朱建一,等.紫菜特征揮發(fā)性物質(zhì)分析[J]. 海洋科學(xué),2011,35(5):106-111.
[30]夏延斌.食品風(fēng)味化學(xué)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2008: 110-113.
[31]Norici A, Hell R, Giordano M. Sulfur and primary production in aquatic environments: an ecological perspective[J]. Photosynth Res, 2005, 86:409-417.
[32]Charlson R J, Lovelock J E, Andreae M O. Oceanic phytoplankton, atmospheric sulphur, cloud albedo and climate[J]. Warren S G Nature, 1987, 326:655-661.