胡 偉 孫 雪 范美華 高秀秀 徐年軍①

(1. 寧波大學 教育部應用海洋生物技術重點實驗室 寧波 315211; 2. 浙江省海洋生物工程重點實驗室 寧波 315211)

滸苔(Ulva)屬綠藻門、石莼目、石莼科, 是一類廣溫、廣鹽、環(huán)境適應和繁殖能力較強的綠藻, 廣泛分布于世界各地。青島的綠潮滸苔不能食用, 但在浙江沿海, 滸苔是一種有重要營養(yǎng)價值的食品, 深受消費者歡迎。滸苔蛋白含量為13.21%, 脂肪含量為1.04%, 谷氨酸占總氨基酸的13.80%, 亞麻酸占總脂肪酸的15.98%。滸苔多糖還具有降血脂作用, 能增加小鼠SOD活力和LPO含量, 有助于促進細胞介導免疫反應(Tenget al, 2013; Weiet al, 2014)。滸苔多糖對小鼠腫瘤表現(xiàn)出較強的抑制作用, 能刺激淋巴細胞增殖, 促進NO和TNF-分泌, 增加細胞的吞噬作用,從而提高小鼠免疫力(Jiaoet al, 2009)。因此, 滸苔是一種很有開發(fā)前途的海洋食品和海洋藥物原料。

植物激素(Phytohormone)是植物體內(nèi)合成的對植物生長發(fā)育有顯著作用的微量有機物質(zhì)。油菜素內(nèi)酯(BRs)是一類新型植物激素, 其中24-表油菜素內(nèi)酯(EBR)是用得最多、用途最廣泛的一種(Ozdemiret al,2004)。研究發(fā)現(xiàn)其能促進DNA、RNA和蛋白的合成,提高抗氧化酶活性和光合作用, 保護植物免受生物或非生物的傷害(Sasse, 2003), 如低溫脅迫、鹽脅迫和蟲害等(Seetaet al, 2002; Yuet al, 2002; Xiaet al, 2006)。而24-表油菜素內(nèi)酯對藻類相關的研究僅有侯和勝等(1997)對單細胞藻作用的報道, 對其它海藻的研究未見報道。

本實驗研究了不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔內(nèi)源植物激素、葉綠素熒光參數(shù)(Fv/Fm和ETR)、可溶性蛋白和糖含量、抗氧化酶活性和自由基清除率的影響, 旨在討論外源24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的生理影響, 為滸苔的生長發(fā)育調(diào)控提供支持。

1 材料與方法

1.1 材料

滸苔(Ulva prolifera)于2013年10月采于浙江省象山縣黃避岙鄉(xiāng)附近海域(121.7°E, 29.5°N)。實驗前選擇健康藻體, 除去雜藻, 用消毒海水沖洗干凈后,在三角瓶中培養(yǎng), 實驗前在光照培養(yǎng)箱中適應1個月左右, 每3天更換一次培養(yǎng)基。

植物激素標準品吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA)、玉米素(ZR)、反式玉米素核苷(TRZ)、異戊烯腺嘌呤核苷(iPA)、茉莉酸(JA)、異戊烯腺嘌呤(iP)以及24-表油菜素內(nèi)酯(EBR)、色譜純甲醇購自Sigma-Aldrich公司(美國), 其它藥品為國產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 24-表油菜素內(nèi)酯處理和培養(yǎng)條件 在500 mL Provasoli培養(yǎng)基的三角瓶中各加入新鮮滸苔藻株3.0g, 然后分別加入適量的24-表油菜素內(nèi)酯母液,使最終濃度分別為0、0.1、0.2、0.5、1.0 mg/L。光照培養(yǎng)箱培養(yǎng), 溫度20°C, 光強45μmol/(m2s), 鹽度25, 光照周期(L:D)為12h:12h。每天定時搖藻2次。每天固定時間取樣0.5g藻體。實驗持續(xù)5天, 每組3個平行樣。

1.2.2 葉綠素熒光參數(shù)的測定 用Water-PAM水樣葉綠素熒光儀(Walz, Germany)進行測定。測量前先將滸苔樣品暗適應15 min, 再利用葉綠素熒光儀發(fā)出的強飽和光激發(fā), 測量不同24-表油菜素內(nèi)酯處理滸苔的熒光參數(shù): PSII最大光能轉(zhuǎn)化效率(Fv/Fm)和PSII相對電子傳遞速率(ETR)。

1.2.3 可溶性蛋白的檢測 考馬斯亮藍法測定。取0.1g新鮮滸苔, 吸干水分, 在具塞試管中加入樣品及5mL考馬斯亮藍G250溶液, 混合后放置2min, 記錄OD595值, 并通過標準曲線計算出蛋白質(zhì)含量?？扇苄缘鞍椎臉藴是€:Y= 0.0137X－0.0145,R2=0.9990(含量范圍0—100μg)。

1.2.4 可溶性糖的檢測 蒽酮硫酸比色法測定。取0.1g新鮮滸苔, 用純水定容至10 mL, 沸水浴1h, 過濾, 殘渣再沸水浴2次, 每次30min, 合并濾液定容。取1mL待測液緩慢加入3mL蒽酮試劑(2.0g/L), 立即沸水浴10min, 然后冷卻至室溫, 測OD620值, 通過標準曲線計算可溶性糖含量。葡萄糖標準曲線:Y=0.0359X–0.0058,R2=0.9976 (含量范圍0—80μg)。

1.2.5 抗氧化酶活性測定 超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(A001); 植物過氧化物酶(POD)測定試劑盒(A084)均購自南京建成生物工程研究所(南京, 中國)。實驗過程按照試劑盒說明書操作。

1.2.6 體外抗氧化活性 采用DPPH法測量。取0.1 g新鮮滸苔, 用10 mL無水乙醇浸提30 min, 過濾,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干燥, 配制成濃度為10 g/L的提取液。取100μL加入等量的0.1 mol/L的DPPH溶液, 用乙醇定容至4 mL, 在515nm處進行比色測定。通過公式: 清除率% = [1－(A1－A0)/Aj]×100。A1為樣品與DPPH試劑的混合液的吸光度值,A0為乙醇與DPPH試劑的混合液吸光度值,Aj為空白樣與DPPH試劑的混合液吸光度值。

1.2.7 內(nèi)源植物激素的提取 準確稱取0.1 g新鮮滸苔。分別用1mL甲醇︰水︰甲酸 (體積比15︰4︰1)提取液提取, 渦旋振蕩均勻并超聲波處理20 min, 然后在–20°C冰箱內(nèi)提取16h。以10000 r/min、4°C離心10 min, 將上清液移至4 mL樣品瓶中。分別再用0.5 mL提取液提取殘渣2次, 合并, 低溫減壓蒸干并用500μL甲醇︰水︰乙酸(90︰10︰0.05,V/V/V)溶解,轉(zhuǎn)移至1.5 mL棕色樣品瓶。每組樣品3個平行。

1.2.8 內(nèi)源植物激素的檢測條件 檢測條件采用Thermo Fisher HPLC-QqQ-MS進行, 檢測參數(shù)參照劉雪梅等(2012)。色譜條件: 采用Hypersil Gold C18 HPLC色譜柱(100mm×2.1mm, 1.7μm), 流速0.3 mL/min, 流動相: 10 mmol/L甲酸銨(A)-甲醇(B), 洗脫梯度(0—20min流動相B從15%上升到100%, 保持5min, 然后在1min內(nèi)降到10%, 保持14 min; 柱溫30°C, 進樣量10μL。質(zhì)譜條件: 分別采用電噴霧電離源正、負離子模式, 噴霧電壓分別為3kV和2.5kV, 鞘氣壓力30 L/min, 輔助氣流量2 L/min, 離子傳輸毛細管溫度300°C, Q2碰撞室碰撞誘導解離電壓1.5V, 采用選擇反應監(jiān)測(SRM)掃描模式, 碰撞氣采用氬氣, 碰撞氣壓力0.1995Pa, Q1和Q3分辨率均設定為半峰寬0.7Da。

1.2.9 植物激素的標準曲線 稱取10.0 mg的吲哚乙酸、赤霉素和茉莉酸標準品, 用1/1甲醇水溶解配制成10 mg/mL儲備液; 先用少量1.0 mol/L的稀鹽酸溶解, 再用純甲醇配制10 mg/mL異戊烯腺嘌呤核苷、異戊烯腺嘌呤、玉米素和反式玉米素核苷標準品儲備液。4°C冰箱中保存。最終吲哚乙酸標準曲線:Y= 2×106X+ 8700.6,R2=0.9991; 赤霉素標準曲線:Y=934227X+ 2119.7,R2=0.9980; 玉米素標準曲線Y=2×107X+ 157225,R2=0.9898; 反式玉米素核苷標準曲線:Y= 3×107X+ 151561,R2=0.9931; 異戊烯腺嘌呤核苷標準曲線:Y= 6×106X+ 42823,R2=0.9990。茉莉酸標準曲線:Y= 637984X–5149.8,R2=0.9956; 異戊烯腺嘌呤標準曲線:Y= 7×107X+ 560070,R2= 0.9999。其中,X代表相對峰面積,Y表示檢測樣品濃度, 單位μg/L。各種植物激素檢測的濃度范圍均為0.5—200μg/L。

1.2.10 統(tǒng)計方法 所有實驗均采用3個平行樣。數(shù)據(jù)處理采用Excel 2007和SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析。設顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔內(nèi)源植物激素的影響

圖1是滸苔中不同時間樣品的植物激素檢測結(jié)果, 在建立標準檢測方法的植物激素中, 共檢測到吲哚乙酸、赤霉素、玉米素、反式玉米素、異戊烯腺嘌呤核苷和茉莉酸6種植物激素, 始終未檢測到異戊烯腺嘌呤(iP)的存在。由圖1a可知, 滸苔中吲哚乙酸(IAA)含量呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢。低濃度24-表油菜素內(nèi)酯處理時, 隨著濃度的增大, 滸苔內(nèi)源IAA含量增大, 0.2 mg/L處理組IAA含量最大; 繼續(xù)增大24-表油菜素內(nèi)酯的處理濃度, IAA含量反而下降。實驗第3天滸苔的IAA含量達到最大值21.01 μg/g(0.2 mg/L), 是對照組的1.46倍。從第2天到第3天,滸苔體內(nèi)的IAA含量增大較快。

圖1b表示不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔中赤霉素(GA)含量的影響。在整個實驗周期內(nèi), 滸苔中的GA含量先升高后降低。在第1天, 各組滸苔的GA相差不大, 但第2天開始, GA含量發(fā)生變化。隨著24-表油菜素內(nèi)酯濃度的增大, 滸苔的GA含量開始增大, 當濃度為0.2 mg/L時, 滸苔的GA達到最大值24.37 μg/g(第3天), 約為對照組的3.19倍; 隨著濃度的繼續(xù)增大, 滸苔的GA反而減小, 到第5天時減少到12.53 μg/g。

圖1 不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔植物激素的影響Fig.1 Effects of different concentrations of EBR on endogenous phytohormone content of U. prolifera

圖1c顯示滸苔的玉米素(ZR)含量與油菜素內(nèi)酯處理濃度有密切的關系。隨著24-表油菜素內(nèi)酯濃度的增大, ZR含量相應的增大, 其最適宜濃度為0.2 mg/L;高濃度24-表油菜素內(nèi)酯(0.5 mg/L和1.0 mg/L)對滸苔的ZR有抑制作用, 與對照組差異顯著(P＜0.05)。整個實驗周期中, 滸苔ZR的最大值為5.31 μg/g (0.2 mg/L, 第3天); 在第2天到第3天, ZR的增加幅度最大, 最大增幅達到了3.31 μg/g (0.1 mg/L)。在實驗的最后一天,0.5 mg/L和1.0 mg/L處理組未檢測出ZR。

從圖1d可以看出, 實驗過程中滸苔中反式玉米素核苷(TRZ)先升高后降低。隨著24-表油菜素內(nèi)酯濃度的升高, TRZ含量增大, 當24-表油菜素內(nèi)酯濃度為0.2 mg/L時, 滸苔的TRZ到達同期的最大值; 繼續(xù)增加24-表油菜素內(nèi)酯的濃度, 滸苔的TRZ減小, 并且表現(xiàn)出抑制作用。在實驗周期內(nèi), 滸苔的TRZ最大值為34.08 μg/g (0.2 mg/L, 第3天), 約為對照組的5.06倍。同比于對照組, 當24-表油菜素內(nèi)酯濃度為0.1—0.2 mg/L時, 滸苔的TRZ變化顯著(P＜0.05)。

圖1e表示不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔異戊烯腺苷(iPA)的影響。從濃度0.1 mg/L到0.2 mg/L, 滸苔的iPA含量增大, 在實驗第3天, 滸苔的iPA達到最大值7.18 μg/g (0.2 mg/L), 約是對照組的3.97倍。當24-表油菜素內(nèi)酯濃度從0.5 mg/L到1.0 mg/L時, 滸苔的iPA含量呈下降趨勢, 且低于同期對照組。在整個實驗周期中, 0.2 mg/L 24-表油菜素內(nèi)酯組的iPA與對照組、0.5 mg/L組和1.0 mg/L組相比差異顯著(P＜0.05)。

由圖1f可知, 24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔茉莉酸(JA)含量的影響具有濃度效應, 隨著24-表油菜素內(nèi)酯濃度的增大, 滸苔的JA含量增加, 當濃度為0.2 mg/L時, 滸苔的JA達到最大值62.54 μg/g(第3天), 約是對照組的1.72倍。繼續(xù)增加24-表油菜素內(nèi)酯的濃度,滸苔的JA含量降低。整個實驗周期中, 滸苔的JA含量呈現(xiàn)先增大后減小的動態(tài)變化趨勢。

2.2 24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔光合作用及其產(chǎn)物的影響

2.2.1 24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔葉綠素熒光參數(shù)的影響 由圖2可以看出, 不同濃度的24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔PSII最大光能轉(zhuǎn)化效率(Fv/Fm)和PSII相對電子傳遞速率(ETR)有一定的影響。在低濃度時, 隨著濃度的升高, 滸苔的Fv/Fm和ETR增大, 在24-表油菜素內(nèi)酯濃度為0.2 mg/L時, 分別達到最大值。繼續(xù)增大24-表油菜素內(nèi)酯濃度,Fv/Fm和ETR反而減小。在實驗第3天, 處理組和對照組滸苔的Fv/Fm和ETR達到最大值。

在整個實驗過程中, 低濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的Fv/Fm促進作用不顯著(P＞0.05), 而高濃度的24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的Fv/Fm有抑制作用。在第3天, 1.0 mg/L 24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的Fv/Fm的最大抑制率約為19.40%。低濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的ETR有一定的促進作用, 最大促進效率為24.51%(0.2 mg/L EBR, 第2天); 高濃度對滸苔的ETR的最大抑制率為34.17% (1.0 mg/L EBR, 第3天)。

2.2.2 24-表油菜素內(nèi)酯對可溶性蛋白和可溶性糖含量的影響 從圖3a可知, 在低濃度時, 隨著24-表油菜素內(nèi)酯濃度的增大, 可溶性蛋白含量增大, 當濃度為0.2 mg/L時, 滸苔的可溶性蛋白含量達到最大值;繼續(xù)增大24-表油菜素內(nèi)酯的濃度, 滸苔的可溶蛋白含量下降, 高濃度24-表油菜素內(nèi)酯抑制了滸苔的蛋白積累。24-表油菜素內(nèi)酯在濃度為0.2 mg/L時, 具有最大促進效果25.74%(第4天); 在最大濃度1.0 mg/L時具有最大抑制率為14.08%(第3天)。

圖2 不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的Fv/Fm (a)和ETR (b)的影響Fig.2 Effects of different concentrations of EBR on the Fv/Fm (a) and ETR (b) of U. prolifera

圖3 不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔可溶性蛋白(a)和可溶性糖(b)的影響Fig.3 Effects of different concentrations of EBR on soluble protein (a) and carbohydrate (b) content of U. prolifera

由圖3b可知, 滸苔可溶性糖含量呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。在低濃度處理時, 24-表油菜素內(nèi)酯表現(xiàn)出促進作用, 且0.2 mg/L 24-表油菜素內(nèi)酯的促進作用最明顯, 最大促進作用約是對照組的1.57倍(第2天)。高濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的可溶性糖有抑制作用, 隨濃度的增大, 抑制作用越明顯。

2.3 24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔抗逆性的影響

2.3.1 24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔SOD和POD活性的影響 圖4a表示不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔SOD活性的影響。在整個實驗周期內(nèi), 滸苔SOD呈現(xiàn)較小范圍的先升高后降低趨勢。在同一時間點滸苔SOD活性大小依次是0.2 mg/L處理組＞0.1 mg/L處理組＞對照組＞0.5 mg/L處理組＞1.0 mg/L處理組。處理組滸苔在第2天具有最大的SOD活性318.8U/g (0.2 mg/L)。

圖4b表示不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔POD活性的影響。滸苔的POD活性變化比較大, 且在不同的時間段動態(tài)趨勢發(fā)生著變化。在實驗第1天,0.5 mg/L處理組和1.0 mg/L處理組POD活性分別達到最大值1013.2U/g和1494.0U/g, 然后開始顯著下降。在實驗第4天, 0.1 mg/L和0.2 mg/L處理組POD活性達到最大值, 然后開始下降, 最大的下降速率分別為47.97%和56.35%。

圖4 不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔SOD(a)和POD(b)的影響Fig.4 Effects of different concentrations of EBR on the SOD (a) and POD (b) activity of U. prolifera

2.3.2 24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔體外抗氧化能力的影響 圖5是利用滸苔提取物對DPPH的自由基清除率來表示滸苔的體外抗氧化能力。從圖5可見, 在整個實驗過程中, 滸苔清除自由基能力有所下降。在實驗第1天, 各組滸苔的抗氧化能力隨著24-表油菜素內(nèi)酯濃度的增高而減弱。在低濃度時, 24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的抗氧化能力有一定的促進作用(0.1 mg/L和0.2 mg/L)。在高濃度時即顯示出抑制作用(0.5 mg/L和1.0 mg/L)。在整個實驗周期, 低濃度組(0.1 mg/L)的抗氧化能力與對照組差異顯著(P＜0.05)。

圖5 不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔體外抗氧化能力的影響Fig.5 Effects of different concentrations of EBR on in vitro antioxidant capacity of U. prolifera

3 討論

24-表油菜素內(nèi)酯能夠影響植物體內(nèi)生長性相關植物激素的水平, 進而調(diào)節(jié)其生長和抗逆等生理作用。如外源ABA和EBR促進了葡萄果實乙烯的釋放和果實著色, 提高玉米幼苗根系的IAA和GA含量,而降低ZRs含量。外源24-表油菜素內(nèi)酯能使弱光脅迫下番茄葉片內(nèi)源激素吲哚-3-乙酸、玉米核苷和赤霉素含量提高22.8%、3.2%和16.6% (李寧等, 2014)。BR明顯影響青花菜莖尖內(nèi)源植物激素的平衡, 顯著抑制IAA的合成, 降低花芽分化期和現(xiàn)蕾期莖尖IAA含量, 提高花芽分化期莖尖內(nèi)源GA3和iPAs的含量,但是現(xiàn)蕾期莖尖內(nèi)源GA和iPAs含量卻降低(王廷芹等, 2008)。24-表油菜素內(nèi)酯可提高蘿卜的IAA含量,降低ABA含量(Choudharyet al, 2011)。生長素和油菜素內(nèi)酯都能促進植物生長, 其協(xié)同調(diào)控很多生理過程, 目前對二者的作用機制和信號轉(zhuǎn)導的相互作用研究成為植物激素研究的熱點, 其相互作用過程涉及下游基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號組分互作, 以及合成代謝等多個層面的調(diào)控(周曉藝等, 2013)。本研究發(fā)現(xiàn),低濃度的24-表油菜素內(nèi)酯可以提高滸苔的內(nèi)源IAA、GA、ZR、TRZ、iPA和JA含量, 最適濃度為0.2 mg/L; 而高濃度24-表油菜素內(nèi)酯抑制滸苔的內(nèi)源植物激素的積累, 0.5—1.0 mg/L的24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的內(nèi)源TRZ、iPA的影響不明顯或者有抑制作用; 在整個實驗過程中, 滸苔的內(nèi)源植物激素的變化呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢。

葉綠素熒光分析技術作為快速、無損傷探針應用于光合作用、植物抗逆生理機理等方面。植物體內(nèi)的葉綠素熒光與光合作用中各種生理反應密切相關,可以通過對體內(nèi)葉綠素熒光參數(shù)的測定反映逆境對光合作用過程的影響。24-表油菜素內(nèi)酯能顯著增加甜瓜幼苗葉片的Fv/Fm和電子傳遞速率, 以1.0 mg/L的24-表油菜素內(nèi)酯處理效果最優(yōu)(張永平等, 2012)。本研究發(fā)現(xiàn)低濃度的24-表油菜素內(nèi)酯促進了滸苔Fv/Fm和ETR, 且0.2 mg/L效果最明顯, 高濃度的24-表油菜素內(nèi)酯對Fv/Fm和ETR有一定的抑制作用。24-表油菜素內(nèi)酯在0.2 mg/L濃度下對ETR最大促進效率為24.51%。

研究發(fā)現(xiàn)適宜濃度油菜素內(nèi)酯處理可使不同抗低氧能力的黃瓜品種的抗氧化活性增加, 同時, 根系可溶性蛋白和熱穩(wěn)定蛋白含量現(xiàn)抓提高, 抗低氧活性強品系效果更顯著。油菜素內(nèi)酯可以促進小球藻(Chlorella vulgaris)的蛋白質(zhì)積累(Andrzej, 2000)。本研究表明低濃度的24-表油菜素內(nèi)酯能夠提高滸苔可溶性蛋白和可溶性糖的含量, 且0.2 mg/L效果最好,高濃度的24-表油菜素內(nèi)酯有一定的抑制作用。整個實驗周期內(nèi)滸苔可溶性蛋白和可溶性糖含量先升高后降低。

SOD和POD是植物抗氧化系統(tǒng)中的重要的功能酶, 對植物逆境脅迫過程中產(chǎn)生的活性自由基和過氧化物起消除作用。SOD主要功能是清除生物體內(nèi)的O2-, POD可清除過多的H2O2和其他過氧化物。外源油菜素內(nèi)酯能提高抗氧化防護酶SOD和CAT活性,而這種誘導機制被H2O2產(chǎn)生抑制劑二苯基碘(DPI)和MEK1/2抑制劑PD98059阻斷(丁海東等, 2011)。24-表油菜素內(nèi)酯顯著促進高溫脅迫下茄子幼苗生長,提高了SOD、POD、CAT和APX活性, 降低了MDA、O2-和H2O2含量(吳雪霞等, 2013)。Choudhary等(2011)研究顯示24-表油菜素內(nèi)酯能夠提高蘿卜幼苗的SOD活性。Wang等(2012)發(fā)現(xiàn)油菜素內(nèi)酯對存儲中的青椒的POD活性有一定的影響, 先升高后降低。本研究發(fā)現(xiàn)0.2mg/L 24-表油菜素內(nèi)酯處理的滸苔SOD活性最大, 但整個實驗過程中SOD活性變化不明顯;而不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯處理的滸苔POD變化明顯, 高濃度的24-表油菜素內(nèi)酯(0.5mg/L和1.0mg/L)處理, 滸苔POD活性在第1天達到最大值。

高等植物中含有種類各異的抗氧化物(Shonet al,2003)。許多海藻中也含有豐富的抗氧化物質(zhì)(Duanet al, 2006; Ganesanet al, 2008; Matanjunet al, 2008)。本實驗發(fā)現(xiàn)不同濃度24-表油菜素內(nèi)酯處理的滸苔DPPH抗氧化活性不同, 低濃度(0.1—0.2 mg/L)24-表油菜素內(nèi)酯對滸苔的抗氧化活性有一定的促進作用,而高濃度(0.5—1.0 mg/L)的24-表油菜素內(nèi)酯則有抑制作用。

本文在前期研究基礎上, 初步確定了滸苔中24-表油菜素內(nèi)酯作用的有效范圍為0.1—1.0 mg/L。結(jié)果0.2 mg/L 24-表油菜素內(nèi)酯效果最佳, 能顯著提高滸苔中IAA、GA、ZR、TRZ、iPA和JA等植物激素的含量, 促進滸苔葉綠素熒光參數(shù)Fv/Fm和ETR和光合作用效率, 促進可溶性蛋白和可溶性糖的積累, 提高SOD和POD酶和抗氧化活性。

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