孟憲華，陳德道，張櫻山，劉鴻雁，李智勤，拉毛卓瑪

西藏奇正藏藥股份有限公司，甘肅 蘭州 730000

藏醫(yī)大師宇妥·云丹袞波在最早的藏醫(yī)經(jīng)典著作《醫(yī)學(xué)四續(xù)》中將肝病分為紅色增盛肝病、隱性肝病、類中毒肝病、水竄肝病、肝盜癥、肝血下落、肝血外溢、脊椎僵直肝病、黑痹肝病、消瘦肝病、白隔膜病、黑隔膜病、壞血散布肝病、肝風(fēng)病、肝萎病、濕寒肝病、牛屈肝病、寒脹肝病等18種，并對(duì)每種肝病的癥狀、治法均有詳細(xì)論述，其中在隱性肝病、類中毒肝病的治法中應(yīng)用“桑蒂”配伍

組方治療［1］，說明藏醫(yī)先祖在一千多年前就認(rèn)識(shí)到“桑蒂”在肝膽病的治療方面有獨(dú)特療效。隨著醫(yī)藥學(xué)和化學(xué)工業(yè)的發(fā)展，近代醫(yī)藥工作者根據(jù)藏醫(yī)應(yīng)用“桑蒂”治療肝膽病的臨床經(jīng)驗(yàn)，對(duì)“桑蒂”抗肝損傷的作用機(jī)制進(jìn)行了相關(guān)研究，取得了一定進(jìn)展。

1“桑蒂”抗肝損傷作用機(jī)制研究現(xiàn)狀 “桑蒂”是青藏高原藏藥八珍之一，藏文名為，藏譯音中文名有“桑蒂”［2］“甲蒂”［2］“桑滴”［3］“滴達(dá)”［3］“蒂達(dá)”［4］“桑斗”［5］等。據(jù)文獻(xiàn)記載及調(diào)查結(jié)果，商品“桑蒂”主要包括龍膽科獐牙菜屬(Swer tia)的多種植物［6］。目前具有法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，市場(chǎng)上流通的“桑蒂”類藥材主流品種有川西獐牙菜、印度獐牙菜、普蘭獐牙菜、紫紅獐牙菜及其他地方習(xí)用品［7-8］。

“桑蒂”類藥材具有清熱、解毒，清肝利膽的功效。臨床上用于治療消化不良、膽囊炎、各型肝炎、急性骨髓炎、急性菌痢、急性結(jié)膜炎、急性咽喉炎及燙傷，也用于風(fēng)火牙痛、熱淋等癥的治療［9］，藏藥標(biāo)準(zhǔn)中多種治療肝膽疾病的藏成藥制劑都有“桑蒂”作為配方生產(chǎn)原料。衛(wèi)生部藏藥標(biāo)準(zhǔn)［2］共收載藏藥成方制劑200種，其中含有“桑蒂”(統(tǒng)稱獐牙菜)配伍的品種就有33種，占16.5%，如五味獐牙菜湯散［2］、九味獐牙菜丸［2］、二十五味珊瑚丸［2］、二十五味獐牙菜丸［2］、八味主藥散［2］、十味訶子湯散［1］、七味紅花殊勝散［1］、九味牛黃丸［1］、十九味草果散［1］、紫金肝泰膠囊［10］、乙肝寧片［10］等，只要是治療肝膽疾病的藏藥成方制劑，就有“桑蒂”類藥材配伍，足見其在治療肝膽疾病方面具有不可替代的作用。

由于“桑蒂”類藥材在治療肝膽類疾病方面療效顯著，多年來，不少化學(xué)和醫(yī)藥學(xué)研究工作者對(duì)“桑蒂”類藥材的化學(xué)成分和藥理作用進(jìn)行了廣泛深入的研究［8-10］，證明“桑蒂”的主要有效成分有呫噸酮類、環(huán)烯醚萜類、齊墩果烷型三萜類等，現(xiàn)代藥理研究表明其具有抗菌消炎、抗肝損傷、抗病毒等多種作用。

盡管民族藥已經(jīng)有數(shù)千年的臨床應(yīng)用歷史，但到目前為止，其作用機(jī)制尚未完全闡明。典型民族藥多為復(fù)方制劑，每一味藥中又有多種成分，而民族藥的精妙之處還在于君臣佐使的配伍，多味藥物相互作用后協(xié)同、制約或改性，作用機(jī)制遠(yuǎn)較西藥復(fù)雜得多。由于民族藥化學(xué)成分復(fù)雜，無法像化學(xué)藥那樣闡明其在體內(nèi)發(fā)揮療效的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，嚴(yán)重制約了民族藥走向國(guó)際市場(chǎng)的步伐，成為實(shí)現(xiàn)民族藥現(xiàn)代化的主要瓶頸。在醫(yī)學(xué)科學(xué)飛速發(fā)展的今天，若不能用現(xiàn)代技術(shù)語(yǔ)言闡明民族藥的作用機(jī)制，難以實(shí)現(xiàn)民族藥的現(xiàn)代化，就難以打開國(guó)際市場(chǎng)，故此，不少醫(yī)藥工作者對(duì)傳統(tǒng)藏藥“桑蒂”抗肝損傷方面的作用機(jī)制進(jìn)行了廣泛深入的研究。

2“桑蒂”抗肝損傷作用機(jī)制研究

2.1 治療急性黃疸型肝炎 急性黃疸型肝炎是由肝炎病毒使肝細(xì)胞破壞、肝組織破壞重構(gòu)、膽小管阻塞，導(dǎo)致血中結(jié)合膽紅素與非結(jié)合膽紅素增高所引起的皮膚、黏膜和眼球鞏膜等部分發(fā)黃的癥狀。

發(fā)病原因主要是肝炎病毒侵犯肝臟，并在肝細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，在機(jī)體免疫反應(yīng)作用下，使肝細(xì)胞受到損害，影響了肝臟的膽紅素代謝，使膽紅素隨血液運(yùn)行到身體各個(gè)臟器，其中，含有豐富彈性硬蛋白的鞏膜、皮膚最易顯出黃色，而黃染消退也較其他組織緩慢。

藏區(qū)部分地區(qū)藏醫(yī)作為“桑蒂”使用的花錨［11］具有清熱利濕，平肝利膽的功效，用于急性黃疸型肝炎，膽囊炎等的治療，其對(duì)急性黃疸型肝炎的保護(hù)作用，主要是促進(jìn)肝細(xì)胞再生，使壞死組織修復(fù)，減輕肝脂肪變性，使肝功能恢復(fù)，這是花錨治療肝炎的藥理學(xué)基礎(chǔ)。組織化學(xué)觀察證明，花錨能使實(shí)驗(yàn)性肝損傷的肝細(xì)胞內(nèi)糖元含量增加，呈顆粒狀或塊狀，肝細(xì)胞的核糖核酸含量增多，呈細(xì)粒狀、粗桿狀，甚至塊狀，提示花錨可能有助于肝細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成及組織修復(fù)。

2.2 治療免疫性肝損傷 免疫性肝損傷是患者肝臟本身的免疫耐受性減退，不能識(shí)別自身肝組織(抗原)成分而產(chǎn)生自身免疫反應(yīng)所引起的一種不能自然痊愈的肝損傷。

川西獐牙菜的醇提物［12］能有效防止免疫性肝損傷小鼠模型各臟器的免疫性肝損傷，研究人員認(rèn)為小鼠免疫性肝損傷的病理機(jī)制與人肝炎的免疫功能紊亂相似，川西獐牙菜保肝、降酶的作用可能與其對(duì)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)功能的影響有關(guān)。

“桑蒂”類所含的主要有效成分龍膽苦苷［13］，具有較好的保肝作用，可降低各種肝損傷模型的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)等；龍膽苦苷具有抗氧化作用和細(xì)胞保護(hù)作用，可使CCl4引起的肝損傷轉(zhuǎn)氨酶有下降趨勢(shì)；硫代乙醇胺(TAA)干擾RNA從細(xì)胞核到細(xì)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)過程，影響蛋白質(zhì)的合成，龍膽苦苷能保護(hù)肝細(xì)胞膜，降低TAA對(duì)肝臟的侵害作用，不致于使細(xì)胞的離子環(huán)境破壞，導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死；D-氨基半乳糖(D-Gal)進(jìn)入體內(nèi)后與磷酸尿苷結(jié)合，形成UDP-半乳糖胺，致使磷酸尿苷耗竭，細(xì)胞受損，Ca2+內(nèi)流，同時(shí)龍膽苦苷可降低尿嘧啶核苷酸合成，使D-Gal所致肝損傷的ALT、AST下降，降低肝臟損傷。

2.3 治療急性肝損傷 急性肝損傷是各種肝臟疾病所產(chǎn)生的病變結(jié)果。臨床上造成急性肝損傷的原因主要有病毒感染、服用藥物不當(dāng)、食物添加劑、乙醇攝入過量、誤服有毒食物、放射線損傷等。

肝損傷的機(jī)制主要是脂質(zhì)過氧化，氧自由基引起膜結(jié)構(gòu)和功能完整性的破壞還可抑制細(xì)胞膜和微粒體膜上鈣泵的活性，使Ca2+內(nèi)流增加，造成肝細(xì)胞脂質(zhì)過氧化性損傷，從而引起中毒死亡。肝組織丙二醛(MDA)為脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物之一，MDA含量的增加或減少間接反映了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。

川西獐芽菜醇提物［14］中主要活性成分齊墩果酸、芒果甙、藏茵陳酮可顯著降低急性肝損傷模型小鼠血清ALT、AST活性和肝組織MDA含量，具有明顯的抗肝損傷作用，能誘導(dǎo)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO，使血管擴(kuò)張，改善微循環(huán)，減輕血小板聚集、線粒體損傷，調(diào)節(jié)枯否氏細(xì)胞的代謝，從而對(duì)肝臟的血液動(dòng)力學(xué)及形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能、代謝起到調(diào)節(jié)和保護(hù)作用。

含有川西獐牙菜的藏茵陳膠囊粉末溶液［15］可使小鼠肝及腸系膜微循環(huán)血流加速，保證了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的供給，緩解了血小板聚集、線粒體損傷，通過調(diào)節(jié)血供，對(duì)肝及周圍器官脾臟、腸的機(jī)能、代謝活動(dòng)起保護(hù)作用。另外，藏茵陳膠囊粉末溶液使抗氧化物NO與谷氨酸氧化還原調(diào)節(jié)部位的巰基相結(jié)合，使亞硝酸化形成二硫鍵，調(diào)控離子通道，避免細(xì)胞內(nèi)Ca2+超負(fù)荷所致毒性，從而減輕肝細(xì)胞損害程度，肝臟的功能趨于正常，恢復(fù)凝血與抗凝血之間的動(dòng)態(tài)平衡(肝臟幾乎合成全部的凝血因子)，使凝血時(shí)間縮短，明顯減輕CCl4引起的肝臟、脾、腸的損害作用。因此改善血液循環(huán)、清除自由基，抗氧化是其發(fā)揮保護(hù)作用的主要機(jī)制。

“桑蒂”類水溶性成分中的呫噸酮苷為保肝的主要成分，實(shí)驗(yàn)證實(shí)2，3，5-三甲氧基-1-O-櫻草糖氧基呫噸酮，2，3，4，5-四甲氧基 -1-O-櫻草糖氧基呫噸酮，2，3，4，7-四甲氧基 -1-O-櫻草糖氧基呫噸酮［16］對(duì)CCl4造成小鼠急性肝損傷的肝細(xì)胞組織學(xué)病變均有較好的修復(fù)作用，表明這三種呫噸酮苷促進(jìn)了糖元合成途徑或提高了糖元儲(chǔ)備能力，從而較好地控制肝細(xì)胞壞死和促進(jìn)損傷肝細(xì)胞的修復(fù)，有效保護(hù)肝細(xì)胞，避免有毒物質(zhì)的侵害和自由基大量的產(chǎn)生，從而提高肝細(xì)胞糖元的合成或儲(chǔ)備能力。

龍膽苦苷［17］可顯著抑制由CCl4和D-Gal所致急性肝損傷小鼠ALT升高，從而對(duì)肝臟起保護(hù)作用。一般認(rèn)為D-Gal肝損傷是由于消耗提供尿苷合成的尿苷二磷酸及核糖核酸材料尿苷，導(dǎo)致糖原及RNA、蛋白質(zhì)合成障礙，引起肝細(xì)胞壞死。鑒于龍膽苦苷明顯增加谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力，該成分的保肝機(jī)制與其對(duì)抗自由基脂質(zhì)過氧化密切相關(guān)。大鼠口服龍膽苦苷后，能明顯增加膽汁分泌量和膽汁中膽紅素濃度，作用時(shí)間可持續(xù)3小時(shí)以上。利膽而促進(jìn)膽紅素的排泄是龍膽苦苷治療濕熱黃疸的主要機(jī)制之一。

“桑蒂”所含的主要藥效成分之一齊墩果酸［18］對(duì)環(huán)磷酰胺(CP)所致大鼠肝細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用，齊墩果酸能抑制酶的滲出，且能顯著升高受損肝細(xì)胞活力，這可能與齊墩果酸通過抑制CP經(jīng)肝藥酶的代謝活化及維持細(xì)胞膜穩(wěn)定性和促進(jìn)肝細(xì)胞再生有關(guān)。

2.4 治療慢性肝損傷 紫紅獐牙菜［19］能降低血清ALT、AST的含量及肝臟指數(shù)，一定程度緩解肝臟纖維化病理改變，同時(shí)對(duì)總蛋白降低有一定升高作用，紫紅獐牙菜對(duì)慢性肝損傷具有明顯保肝降酶作用，可防止肝纖維化的進(jìn)行性發(fā)展，對(duì)延緩和治療慢性肝硬化有重要作用。

2.5 治療肝缺血-再灌注損傷(HIRI) 缺血器官、組織重新獲得血液供應(yīng)，不僅不能使組織、器官功能恢復(fù)，反而加重了功能代謝障礙及結(jié)構(gòu)破壞，這種現(xiàn)象稱之為缺血-再灌注損傷。

NO水平下降和O2水平升高而引發(fā)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)是HIRI的主要發(fā)病機(jī)制，肝臟缺血期，組織含氧量減少，作為電子受體的氧不足，再灌注恢復(fù)氧供應(yīng)提供了大量的電子受體，使氧自由基在短時(shí)間內(nèi)爆發(fā)性增多，導(dǎo)致肝細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化及肝細(xì)胞損傷。

川西獐牙菜［20］治療大鼠HIRI的作用可能為誘導(dǎo)肝細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO，NO可中和O2而拮抗過氧化作用，使血管擴(kuò)張，改善微循環(huán)，保證了再灌注后肝臟的血供和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的供給，減輕血小板的聚集，線粒體損傷，調(diào)節(jié)枯否氏細(xì)胞的代謝，從而對(duì)肝臟的血液動(dòng)力學(xué)及形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能、代謝起到調(diào)節(jié)和保護(hù)作用。

醫(yī)藥工作者從印度獐牙菜中分離得到的有效成分 1-羥基 -2，3，4，6-四甲氧基 -呫噸酮［21］對(duì)HIRI有明顯治療作用。研究表明，黃酮類抗氧化劑主要通過酚羥基與氧自由基反應(yīng)，形成共振穩(wěn)定的半醌式自由基而阻斷自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，從而抑制了脂質(zhì)過氧化，清除了H2O2，減少了引起脂質(zhì)過氧化的危險(xiǎn)，從而保護(hù)了生物膜。給予呫噸酮后，缺血再灌注大鼠血清的抗氧化酶活性明顯增加，MDA含量降低，說明該呫噸酮可以抑制自由基的產(chǎn)生，提高抗氧化酶活性，這是缺血腦組織保護(hù)作用的機(jī)理之一。

“桑蒂”所含的另一有效成分齊墩果酸［22］具有減輕CCl4、對(duì)乙酰氨基酚及鎘中毒所致肝損傷的作用。齊墩果酸能增加肝細(xì)胞糖原儲(chǔ)備，減少自由基釋放，從而有效減輕HIRI。缺血-再灌注主要通過激活經(jīng)典的NF-κB通路，進(jìn)而激活促炎信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路造成細(xì)胞損害。NF-κB是缺血組織中調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、炎癥趨化因子和黏附分子的一個(gè)重要因素，其活化可加速促炎癥反應(yīng)因子的釋放，抑制NF-κB活化進(jìn)入核內(nèi)可以負(fù)向調(diào)節(jié)促炎癥細(xì)胞因子(如 TNF-α、IL-1等)、黏附分子(如 ICAM-1)和誘生型NO合成酶的生成，減輕肝臟炎癥反應(yīng)程度，從而減輕HIRI；齊墩果酸可抑制缺血再灌注過程中IKK/I-κB/NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活，抑制NF-κB活化入核而發(fā)揮介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的作用，從而減輕HIRI的程度。許仄平等［23］認(rèn)為，HIRI過程中，體內(nèi)氧化系統(tǒng)被激活，抗氧化系統(tǒng)被過度消耗，從而使活性氧大量生成，齊墩果酸能抑制HIRI過程中活性氧的生成和釋放，而活性氧的減少可進(jìn)一步減少NF-κB的激活，抑制 NF-κB/I-κB/IKK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，干預(yù)NF-κB的激活，從而發(fā)揮抗HIRI作用。

3結(jié)論

肝損傷是臨床常見疾病，“桑蒂”作為治療肝膽疾病的傳統(tǒng)民族藥物，被醫(yī)藥工作者高度重視，對(duì)“桑蒂”及其化學(xué)成分龍膽苦苷、齊墩果酸、芒果苷及多種呫噸酮等治療免疫性肝損傷、急性黃疸型肝炎、急性肝損傷、慢性肝損傷，肝缺血-再灌注損傷等都進(jìn)行了臨床研究，并探討了作用機(jī)理。

隨著藏藥制劑的現(xiàn)代化研究和藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提升，對(duì)藥材基源和治療性成分的研究日益重視，但對(duì)“桑蒂”中不同藥材抗肝損傷作用的差異性的研究尚未見報(bào)道。而對(duì)“桑蒂”抗肝損傷作用的研究主要停留在提取物水平，對(duì)所含化合物的研究較少，今后應(yīng)加強(qiáng)化合物發(fā)揮抗肝損傷作用的內(nèi)源性分子靶點(diǎn)的研究，只有在分子水平上研究抗肝損傷作用機(jī)制，才能找到問題的本質(zhì)，成為“桑蒂”抗肝損傷作用機(jī)制研究的發(fā)展方向。

據(jù)估計(jì)［13］目前世界上用于治療肝炎的藥物有500種之多，但至今尚無一種藥物能真正根治肝炎。因此，開發(fā)和篩選對(duì)肝臟有確切保護(hù)作用的新藥，仍是一項(xiàng)十分艱巨的工作，對(duì)藥物抗肝損傷的作用機(jī)制進(jìn)行深入研究，對(duì)新藥開發(fā)將產(chǎn)生重要意義，將會(huì)使含有該藥材的中成藥的現(xiàn)代化研究發(fā)展到新的水平。

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